珍稀树种花榈木组培不同外植体的无菌繁殖体系构建

为构建花榈木组织培养的无菌繁殖体系,采用随机区组试验方法研究不同药剂组合对其籽苗茎段、幼苗茎段和叶片、成年植株茎段和嫩叶等外植体的消毒效果。结果表明:籽苗茎段以70%乙醇消毒30 s+0.1%升汞灭菌8 min+培养基中添加PPM 0.5 m L/L的消毒效果最好;幼苗外植体最佳采集时间为4月,茎段用70%乙醇浸泡30 s+(50 mg/L利福平+50 mg/L氯霉素)混合液浸泡30 min+0.1%升汞浸泡8 min消毒效果最好,叶片用70%乙醇浸泡30 s+(50 mg/L利福平+50 mg/L氯霉素)混合液浸泡30 min+0.1%升汞浸泡6 min消毒效果最好;成年植株叶片以4月采集较好,最佳消毒方法为70%乙醇浸泡30 s+(50 mg/L利福平+50 mg/L氯霉素)混合液浸泡30 min+0.1%升汞浸泡12 min,成年植株茎段尚未取得理想消毒效果。     

产ACC脱氨酶人参内生细菌的分离和促生特性分析

将乙醇、次氯酸钠、Tween20 3种消毒剂按不同时间和浓度组合,根据处理后的内生菌种类和浓度,探讨人参(Panax ginseng C.A. Mey)最佳表面消毒方法;分离具有1-氨基环丙烷1-羧酸脱氨酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase,ACCD)活性的内生菌株,并测定其产吲哚乙酸、溶磷、产氨、产铁载体和对人参黑斑病和灰霉病有拮抗作用等促生效应相关指标。得出人参根、茎、叶表面消毒效果最好且对内生菌伤害程度最小的组合:根75%乙醇(2 min)+0. 1%Tween20 (2 min)+4%次氯酸钠(5 min),茎0. 1%Tween20(1. 5 min)+4%次氯酸钠(3 min);叶0. 1%Tween20 (1 min)+4%次氯酸钠(2 min)。从人参根、茎和叶中分离筛选到7株ACC脱氨酶(ACCD)活性的菌株G63、G66、G115、G150、G209、GT1和GT11,分别属于芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、欧文氏菌属(Erwinia)、鞘氨醇杆菌属(Sphingobacterium)、赖氨酸芽孢杆菌属(Lysinibacillus)、泛菌属(Pantoea)和肠杆菌属(Enterobacter),其ACCD活性范围0. 215～9. 728 U/mg;上述具备所有促生效应相关特性的菌株为GT1和GT11,这2种菌株有望成为进一步研究人参生物菌肥的备选菌种资源。     

墨西哥菊叶薯蓣茎段再生繁殖技术

【目的】建立高效稳定的菊叶薯蓣组织培养快繁体系,以保持品种的遗传稳定性。【方法】分别以室内和田间培育的墨西哥菊叶薯蓣藤茎茎段为外植体起始材料,比较依次用0.55%次氯酸钠、体积分数70%酒精和1.0g/L HgCl2消毒不同时间对外植体的消毒效果,并通过不同植物生长调节剂及其浓度组合筛选适合菊叶薯蓣组培快繁的茎段不顶芽诱导培养基、继代培养基和生根培养基。【结果】以室内培养的墨西哥菊叶薯蓣藤茎为起始材料,依次用0.55%次氯酸钠消毒5 min,体积分数70%酒精消毒1 min,1.0 g/L HgCl2消毒8 min,最后用无菌水清洗3次,获得材料的污染率可控制在5%;筛选出茎段不定芽诱导培养基为MS+3.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA,不定芽诱导数可达4.3个,诱导率达95%,且不定芽质量较好;将分化的不定芽转至MS+1.0 mg/L BA+0.2 mg/L IBA继代培养基,单茎芽增殖率可达到3.5;茎芽在1/2 MS+1.0 mg/L IBA生根培养基上可以诱导出良好的根系。【结论】按上述方法培育的菊叶薯蓣生根试管苗炼苗后,移栽至珍珠岩+粗沙+田园土按体积比2∶1∶1配置的介质中,移栽成活率可以达到85%以上,表明所建立的墨西哥菊叶薯蓣组培快繁体系是可行的。     

金艳猕猴桃组织培养适宜条件筛选

以金艳猕猴桃嫩叶、茎段作为外植体材料,研究不同消毒体系灭菌效果及不同激素组合对愈伤组织、不定芽、生根等诱导的影响。结果表明,叶片消毒相对最优方法为70%乙醇30 s+0.1%HgCl_2 3 min,茎段消毒相对最优方法为70%乙醇30 s+0.1%HgCl_2 4 min;茎段比叶片更容易染菌,而叶片比茎段更容易褐化;愈伤组织诱导时,叶片最优激素组合为6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,茎段为6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L;不定芽诱导最优激素组合为6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,在此条件下不定芽长势较快,含单芽或多芽,有少量愈伤组织;最适生根培养基为1/2MS+IBA 0.8 mg/L,生根率达到87.78%,植株生长健壮,根密、多。     

马铃薯品种辽薯6号茎尖脱毒及快繁技术研究

以马铃薯品种辽薯6号为试材,研究不同消毒方法、不同浓度激素配比的诱导培养基、不同茎尖大小、不同培养条件对茎尖脱毒和成苗效果的影响。结果表明:自来水冲洗1~2 min,0.05%次氯酸钠溶液浸泡10min后用无菌水冲洗3~5次,可达到理想的消毒效果;茎尖分生组织0.3~0.4 mm(带2个叶原基)、诱导培养基:"MS+1.0 mg/L BA+0.05 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂"、光照时长14 h/d、光照强度2 000 lx条件下培养温度28℃时成苗效果最好。     

蛇足石杉茎尖灭菌方法与组织培养的研究

[目的]研究蛇足石杉组织培养的灭菌方法和培养条件。[方法]以野生孢子体茎尖为外植体,先用不同灭菌液单独或配合使用对外植体进行表面灭菌,将表面无菌外植体转到添加多种抗生素和孔雀石绿的培养基上杀灭内生菌,然后将外植体分别接种到不同的培养基上,筛选茎尖培养的最佳灭菌方法和培养条件。[结果]最佳表面灭菌方法为70%乙醇灭菌40 s,0.1%升汞溶液灭菌8 min,70%双氧水溶液灭菌10 min,培养2周,表面无菌率为63%。适宜的杀灭内生菌方法为表面无菌的外植体在附加0.5 mg/L孔雀石绿和100 mg/L抗生素AAS的培养基上培养4~6周,无菌率达52%。适宜的培养基为1/4MS矿质元素+1/2MS有机元素+2%蔗糖+4.5 g/L琼脂,pH5.8。在此培养基上茎尖外植体可生长出新枝,并可再生根。[结论]建立了蛇足石杉茎尖组织培养的灭菌方法且筛选出适合其生长的适宜培养基,为蛇足石杉组织培养的深入研究提供实验基础。     

辣木外植体消毒试验研究

[目的]探讨辣木茎段的最佳消毒方法。[方法]以辣木茎段为外植体,用不同消毒剂(升汞、次氯酸钠),选用不同浓度,在不同消毒时间下对辣木茎段进行消毒处理。[结果]次氯酸钠最佳消毒组合为浓度15 g/L消毒20 min,污染率为26%,成活率为34%。升汞最佳消毒组合为0.20 g/L消毒液消毒5 min,污染率为2%,成活率达84%。[结论]辣木茎段最佳消毒方法为:在75%酒精中浸泡30s后,用0.20 g/L升汞处理5 min,污染率为2%,成活率达84%。     

青薯10号茎尖脱毒及快繁技术研究

以马铃薯品种青薯10号为试材,研究不同消毒方法、不同浓度激素配比的诱导培养基、不同茎尖大小、不同培养条件对茎尖脱毒和成苗效果的影响。结果表明:自来水冲洗1~2min,0.05%次氯酸钠溶液浸泡10min后用无菌水冲洗3~5次,可达到理想的消毒效果;茎尖分生组织0.3~0.4 mm(带2个叶原基)、诱导培养基:MS+1.0 mg/l BA+0.05 mg/l NAA+30g/l蔗糖+7g/l琼脂、光照时长14 h/d、光照强度2000lx条件下培养温度28℃时成苗效果最好。     

美洲矾根品种紫宫殿组织培养与离体快繁研究

对美洲矾根品种紫宫殿进行组织培养与离体快繁研究,探讨了以紫宫殿品种新芽作为外植体的较为适合的消毒方式,以及丛芽诱导、增殖、生根的最佳培养基和培养方法.结果表明:以75％乙醇45s、0.1％氯化汞8min、50％山农一号(内生菌型)溶液中浸泡10 min的消毒效果较好,在MS培养基中添加琼脂粉6 g/L、蔗糖3％、2.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA对芽的诱导效果最好,丛芽继代增殖的最佳培养基为MS+脂粉6 g/L+蔗糖3％ +6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.04 mg/L,生根的最佳培养基为1/2MS+活性炭0.6 g/L+蔗糖2％+ NAA 0.8 mg/L+ IBA0.5mg/L.     

三倍体漆树组织培养无菌体系建立技术探究

为建立三倍体漆树组织培养无菌体系，以当年生三倍体漆树幼嫩茎段为外植体，通过植物组织培养方法，找出三倍体漆树幼嫩茎段最适宜消毒时间、方法以及最佳腋芽诱导培养基，为三倍体漆树无性繁殖及应用提供理论依据。结果表明：三倍体漆树幼嫩茎段消毒最佳时间和方法为：75%乙醇消毒1 min，0. 1%升汞消毒4 min。三倍体漆树腋芽诱导最佳培养基为： MS + 0. 3 mg / L 6-BA + 0. 2 mg / L ZT + 0. 3g / L活性炭。     

长白落叶松愈伤组织诱导与不定芽分化

以长白落叶松成熟胚作为外植体进行消毒和不定芽诱导。研究结果表明:将去皮种子用流水冲洗3d,用70%酒精消毒1min,转入1%的次氯酸钠消毒50min后,再将剥出的胚放入0.5%的次氯酸钠中浸泡2s为最佳消毒方法;在光照条件下(约1600lx),BM培养基中填加1.0mg/LBA,愈伤组织与不定芽的诱导效果最好,愈伤组织诱导率达到100%,不定芽分化率为73.8%;在BM培养基中加入1%活性碳对不定芽有伸长作用。     

中国柽柳组培快繁技术研究

为了更好的对中国柽柳种质进行保存,以中国柽柳茎段为外植体进行组培快繁研究。结果表明：采取75%酒精浸泡30秒、2%次氯酸钠浸泡3-5分钟和升汞浸泡5分钟为最适宜的灭菌方案。MS+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L为中国柽柳最适初代培养基,MS+蔗糖30g/L+琼脂7g/L+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L为其最适增殖培养基,1/2MS培养基为最适生根培养基。     

大叶藻组织培养中外植体消毒方法的研究

为探寻大叶藻组织培养中外植体的最佳消毒方法,采用75%乙醇、1.5%碘化钾、4%次氯酸钠和10%双氧水这4种消毒剂以及不同的处理时间组合,对大叶藻种子和幼苗进行消毒试验。试验结果,最有效的外植体消毒方法为：对大叶藻幼苗,先用无菌水冲洗3~4次,再以75%乙醇处理20 s,然后再用无菌水冲洗3~4次,可以达到较好的消毒效果。对大叶藻种子,先以75%乙醇处理10 min,再以1.5%碘化钾处理10 min,然后用无菌海水冲洗3~4次,这样消毒效果最佳,且不影响种子的发芽率。     

贺州香芋组织培养离体再生体系的建立

以贺州香芋幼嫩叶片为外植体,研究了消毒时间、外源激素等因素对贺州香芋成活率、愈伤组织诱导、增殖和分化、生根形成的影响.结果表明,用5%的次氯酸钙处理6 min的污染率和褐变率低,成活率为81%.对愈伤组织诱导的主导因子依次是KT、IBA和BA,最佳诱导培养基为MS+IBA 0.1mg/L+KT 1.0mg/L+BA 1...     

不同药剂处理种子对番茄细菌性溃疡病菌的除害效果

利用不同剂量的磷酸三钠、次氯酸钙、苏纳米、甲醛、高锰酸钾、盐酸和二氯异氰尿酸钠溶液对带番茄细菌性溃疡病菌的番茄种子进行不同时间的处理,旨在筛选出各药剂除菌的最适处理剂量和最宜处理时间。借助传统PCR方法检测药剂处理对人工接菌种子的除害效果,同时采用活菌培养法测定各药剂对番茄细菌性溃疡病菌的抑制作用。结果显示,各药剂最适宜的除害处理条件为:8%磷酸三钠处理30 min,1%次氯酸钙处理20 min,0.4%苏纳米处理20 min,甲醛100倍液处理20 min,p H值1.5的盐酸处理10 min,1%高锰酸钾处理30 min,二氯异氰尿酸钠700倍液处理40 min。应用纸床法进行发芽试验,检测各药剂处理对番茄种子发芽的影响,结果表明,各药剂处理对番茄种子的发芽率没有明显不利影响。综合7种药剂的特点、最适除害处理条件和对发芽率的影响,二氯异氰尿酸钠为最理想的种子除害处理药剂。     

薄荷组织培养条件的选择

考察了消毒方式、外植体部位、培养基配方等因素对薄荷(Mentha haplocalyx Brip.)组织培养的影响.结果表明,外植体先用体积分数70％的乙醇处理30 s后,再用1 mg/L HgCl2+2滴吐温80浸泡一定时间,消毒效果好于40 mg/L的漂白粉处理,适宜的HgCl2消毒时间分别为茎段、叶片、叶柄和已萌发的芽12 min;末萌发的芽10 min.茎段的不定芽诱导率和不定芽生长情况好于其他外植体.在薄荷旺盛生长期采集半木质化的茎段作为外植体进行诱导培养,不定芽萌芽早而且生长速度快.MS+0.50 mg/LBA+0.10 mg/L NAA是适合外植体不定芽诱导的培养基配方.     

大晶帽石斛再生体系建立研究

本文以成熟度70%原生大晶帽石斛荚果内种子为外植体,探究采用不同消毒时间、培养基成分构成及浓度配比对大晶帽石斛无菌萌发的影响。结果表明,大晶帽石斛荚果用5%次氯酸钠消毒15 min,可有效降低污染率;将消毒后荚果种子接入MS+蛋白胨2 g/L+NAA 0.5 mg/L+花宝1号2 g/L+0.1%活性炭+0.58%琼脂+2%蔗糖培养基中,种子萌发率达88%,是适宜大晶帽石斛无菌萌发的培养基配方。     

南方红豆衫细胞体系建立的优化

[目的]优化南方红豆杉愈伤组织诱导及训化条件。[方法]以南方红豆杉幼芽、幼茎以及幼叶为外植体,比较不同外植体诱导愈伤组织的效率,并对愈伤组织的增殖条件及悬浮细胞培养条件进行了研究。[结果]以幼芽作为外植体的诱导效果最佳;南方红豆杉外植体消毒的最佳方法为链霉素浸泡2 h＋洗洁精浸泡3 h＋75%酒精消毒30 s＋10%次氯酸钠浸泡25 min＋1‰氯化汞10 min;愈伤继代的最佳配方为B5＋4.0 mg/LNAA＋0.5 mg/L2.4-D＋0.2 mg/LGA＋0.5 mg/L6-BA＋2 g/L活性碳。[结论]该研究建立了南方红豆杉的高效再生体系。     

喷施不同叶面肥对棉花前期生长发育和养分吸收的影响

为探索棉生长前期合理施用叶面肥的方法,研究了喷施不同质量浓度及配比尿素、硝酸铵和磷酸二氢钾对棉花前期生长发育和养分吸收的影响。结果表明,相比于对照(喷施清水),喷施叶面肥可加快植株生长速率,提高生物量积累量,增大叶面积。苗期喷施10 g/L尿素处理的棉株生长状况优于喷施等氮含量硝酸铵处理的棉株,但蕾期两处理差异不显著。根据喷施尿素质量浓度与棉株总干质量的函数关系,获得苗期最佳喷施尿素质量浓度为11.1 g/L,蕾期理论最佳喷施尿素质量浓度为49.1 g/L;虽然单一喷施5 g/L磷酸二氢钾效果逊于喷施10 g/L尿素,但是二者配合喷施效果最佳。综上,棉花前期配合喷施10 g/L尿素+5 g/L磷酸二氢钾的叶面肥能够为棉株生长提供更多的养分,增大光合面积,提高光能利用率,促进生长,为后期开花结铃奠定良好的物质基础。     

大蒜花序轴离体培养产生鳞茎方法的研究

为了筛选出高效培养基,确定适宜的培养方法,以大蒜花序轴为外植体,对大蒜花序轴离体培养诱导鳞茎培养方法进行研究。结果表明,大蒜花序轴离体培养诱导鳞茎最佳培养基为1/2MS+90 g.L-1蔗糖,pH值为5.8~6.0,鳞茎的形成率为96.8%,鳞茎总诱导率为800%。蒜薹总苞表面消毒的最佳方法为75%酒精2 min+0.1%升汞5 min+0.5%次氯酸钠8 min。不添加任何植物激素及添加较高浓度的蔗糖有利于试管鳞茎的形成。