杏鲍菇多糖提取工艺条件优化研究

以杏鲍菇为原材料,以杏鲍菇多糖提取率为考察指标,采用超声波辅助酶法从杏鲍菇中提取多糖。通过单因素试验讨论了酶添加量、酶解时间、酶解温度、料液比4个因素对杏鲍菇多糖提取率的影响,然后通过正交试验确定超声波辅助酶法提取杏鲍菇多糖的最佳工艺条件。结果得出,最佳工艺条件为酶添加量0.4%、酶解温度55℃、酶解时间2 h、酶解的料液比1∶30。在此条件下,杏鲍菇多糖提取率为23.4%。     

黄粉虫胰蛋白酶酶解工艺的研究

以黄粉虫为原料,以水解度(DH)和水解多肽液的还原能力为指标,研究胰蛋白酶法制备黄粉虫多肽的工艺条件。通过单因素试验,初步确定pH、温度、酶用量、固液比的正交试验水平;在单因素试验基础上设计正交试验,分析各因素对酶解反应的影响及确定酶解反应的最佳工艺条件。结果表明:pH对酶解反应的影响最大,其次是温度和酶用量,固液比对酶解反应的影响最小;酶解的最佳工艺条件为:pH为8.5,温度为46℃,酶用量为1.8%,固液比为1∶10,酶解时间为4h,DH为13.223%。     

碱性蛋白酶酶解缢蛏制备多肽工艺

采用碱性蛋白酶酶解缢蛏,以多肽含量为指标,在酶解p H值、料液比、温度、酶添加量、时间的单因素试验基础上,通过正交试验优化缢蛏蛋白酶解工艺。结果表明,利用碱性蛋白酶对蛋白质进行水解,多肽含量高。碱性蛋白酶酶解缢蛏制备多肽最优工艺参数为:p H值9.5、酶添加量1.5%、料液比为1∶3.0、温度45℃、时间2.5 h,在此最优工艺参数条件下每克鲜缢蛏可提取多肽(81.3±0.4)mg。     

菠萝蛋白酶提取葡萄籽仁蛋白质工艺优化

以酿酒葡萄籽仁为原料,通过单因素法和正交设计法对葡萄籽仁蛋白质的菠萝蛋白酶提取工艺条件进行研究。结果表明:在料液比1∶30条件下,各因素对蛋白质提取率的影响次序为:pH酶解温度酶用量提取时间,最佳工艺参数:菠萝蛋白酶量为0.20g·mL-1、酶解温度45℃、酶解pH7.5、提取时间70min。在此最佳工艺下,蛋白提取率达93.6%。     

斑点叉尾鮰下脚料蛋白酶水解工艺优化

以蛋白质水解度为考察指标,从木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶中筛选水解斑点叉尾鮰下脚料的适宜蛋白酶,并通过单因素试验和正交试验优化工艺条件。结果表明：5种蛋白酶中复合蛋白酶的水解度最高;复合蛋白酶酶解斑点叉尾鮰下脚料的最佳酶解条件为温度55 ℃,时间4 h,pH 9.0,酶质量浓度2 500 U/g,料液比1∶3,在该条件下,蛋白质的水解度为53.26%。     

双酶水解黄粉虫蛋白制备生物活性肽的工艺优化

【目的】对胰蛋白酶与碱性蛋白酶Alcalase双酶组合水解黄粉虫蛋白制备生物活性肽的工艺进行优化,为获得高活性黄粉虫蛋白多肽及有效利用黄粉虫蛋白提供科学依据。【方法】以水解度和酸溶性肽得率为指标,研究了酶解时间、酶活比、料液比、加酶量、pH和酶解温度6种因素对酶解反应的影响。在此基础上设计了3因素(加酶量、pH和酶解温度)3水平的响应面试验。【结果】胰蛋白酶与碱性蛋白酶Alcalase双酶水解黄粉虫蛋白的最佳酶解条件为:酶解时间120 min,酶活比1∶1,料液比1∶3,加酶量23.41 mg/g,pH 8.77,酶解温度53.41℃。【结论】利用优化双酶水解条件制得的低分子多肽的水解度高达21.61%,酸溶性肽得率为92.09%。     

酶解法提取杏鲍菇有效成分工艺的优化

采用酶法提取杏鲍菇有效成分,以氨基态氮含量和多糖得率为主要评价指标,通过单因素试验确定酶解过程中的料液比和复合酶组成比例,采用三因素二次回归正交旋转组合设计,研究酶解温度、酶解pH以及酶的添加量对酶解杏鲍菇的影响.研究结果显示:最佳料液比为1∶20;第一步纤维素酶酶解杏鲍菇的最佳工艺参数为酶解温度48.5℃,酶解pH 5.50,酶的添加量0.102×103U.g-1;第二步复合酶酶解杏鲍菇的复合酶的质量组成比例为中性蛋白酶∶木瓜蛋白酶=3∶2,最佳工艺参数为酶解温度57.5℃,酶解pH 6.75,酶的添加量4.08×103U.g-1.二步酶解最优条件下,酶解液中氨基酸总含量为5.82 g.L-1,多糖得率3.792%.     

姬松茸蛋白制备及分析研究

以姬松茸子实体为原料,对姬松茸蛋白的制备工艺进行研究。用碱提酸沉法和酶法,采用4因素3水平L9(34)正交试验确定最佳提取方法和提取工艺;用SDS-PAGE测定蛋白质亚基分子质量分布。结果表明,碱提酸沉法提取的最佳条件为:提取温度30℃,pH值9.5,料液比1∶20,时间1.5 h,提取率达26.80%;酶法提取蛋白质的最佳条件为:提取温度40℃,1%的酶液0.6 mL,料液比1∶20,时间2.0 h,提取率达32.74%。酶法优于碱提酸沉法。姬松茸蛋白质等电点为3.25,主要蛋白质亚基的分子量为81.7 kD。     

外源蛋白酶水解白鲢内脏的工艺条件

为充分利用白鲢废弃物,利用碱性蛋白酶水解白鲢内脏,考察了温度、pH值、加酶量、料液比对白鲢内脏水解效果的影响。通过正交试验优化水解条件,结果表明:白鲢内脏水解的最佳条件是,酶解温度50℃,pH9.0,加酶量2000U/g,料液比1:3。在最佳酶解条件下水解7.5h,内脏蛋白质的水解度为41.73%,氮收率为64.76%。     

木瓜蛋白酶水解罗非鱼蛋白质的工艺研究

[目的]探讨采用木瓜蛋白酶水解罗非鱼蛋白质制备多肽水解液的方法。[方法]通过单因素试验研究了不同因素对木瓜蛋白酶水解罗非鱼蛋白质的影响,并以水解度为指标通过正交试验确定了木瓜蛋白酶水解罗非鱼的最佳水解工艺。[结果]单因素试验表明,在酶解时间约5h、底物浓度为4%、加酶量约5500U/g、pH值为7.0～7.5范围内,温度为50℃时,木瓜蛋白酶水解罗非鱼效果较好。正交试验表明,3因素的影响顺序为:加酶量>底物浓度>水解时间;最佳水解工艺为:水解液pH值7.5,加酶量为5500U/g,底物浓度为4%,温度50℃,水解6h,在此条件下水解度可达到37.89%。[结论]采用木瓜蛋白酶进行水解可获得较高水解度的酶解液,且鱼香浓郁,颜色正常,可用于制作调味品、口服液等。     

板栗蛋白质的提取及多肽的制备

以板栗为原料,提取蛋白质并水解制备多肽。通过SDS-PAGE测定板栗蛋白质的分子量,以植物蛋白水解专用酶采用三因素三水平的正交试验筛选制备板栗多肽的最佳水解条件,旨在为板栗的开发,利用提供理论依据。板栗蛋白质的等电点为4.5;分子量约为25 000 Da;植物蛋白水解专用酶最佳的水解条件:底物浓度2.5 g.L-1,酶添加量0.3%,pH 8.5,水解度是20.13%。得到板栗蛋白并制备出板栗多肽。     

鱼皮胶原多肽口服液的研制

以草鱼皮为原料,用胃蛋白酶提取胶原多肽,探讨了影响鱼皮胶原多肽水解度的主要影响因素,优化了酶解工艺条件,发现鱼皮胶原多肽最佳酶解条件为料液比6%、酶用量30 mg/g蛋白、酶解温度40℃、pH值2.0;然后以提取的鱼皮胶原多肽为原料配制胶原多肽口服液,得出了胶原多肽口服液的最佳配方为鱼皮胶原多肽液20 mL、蜂蜜5 g、葡萄糖1 g。     

紫贻贝酶解多肽体外抗肿瘤活性研究

确定了紫贻贝胰蛋白酶水解时的最佳条件,研究了紫贻贝酶解多肽的体外抗肿瘤活性。采用正交实验方法,以料液比、pH、加酶量、酶解温度和酶解时间为因素,以酶解液的氨基氮含量和肿瘤细胞增殖抑制率为指标进行L16（45）正交实验,MTT法检测酶解多肽对DU-145、PC-3、H1299和MGC80-3等肿瘤细胞的抑制活性;HE染色法观察酶解多肽对肿瘤细胞形态的影响;免疫组化法检测酶解多肽对细胞中Bcl-2表达的影响。结果表明：当料液比为1：4、pH为8.5、加酶量为1 000 U/g、温度为45℃、酶解时间为5 h时酶解多肽的水解度最大;当料液比为1：4、pH为8.0、加酶量为1 500 U/g、温度为40℃、酶解时间为2 h时酶解多肽的抗肿瘤活性最强,该肽可以下调肿瘤细胞中Bcl-2的表达。紫贻贝酶解多肽具有抗肿瘤活性,可能是通过诱导细胞凋亡来实现的。     

酶法水解鲢鱼蛋白及活性碳脱腥苦的工艺研究

以鲢鱼为原料,水解度和感官评价为指标,通过单因素和正交试验筛选酶法水解鲢鱼蛋白质的最佳工艺条件,并以活性炭为脱腥苦试剂,确定活性炭对鲢鱼蛋白水解液脱腥苦的最适条件。结果表明:采用微波解冻比自然解冻的水解度要高;双酶(复合蛋白酶和风味蛋白酶)水解的最佳工艺条件为:复合蛋白酶和风味蛋白酶按1∶3(W/W)混合同时水解,酶用量0.4%(W/W)、料液比1∶4(W/V)、55℃、pH6.0、水解4 h,水解度达12.55%;活性炭脱腥苦的最佳工艺条件为:添加量1.5%(W/W)、pH4.5、作用0.5 h,水解度为9.30%。在此酶解和脱腥苦条件下,制得的水解液清亮透明,气味较好,基本没有腥味和苦味。     

单-双酶法制备苏麻饼粕多肽工艺的优化

为脱脂苏麻饼粕的开发利用提供参考,以可溶性氮含量及多肽提取指数为指标,考察原料处理方式、酶种类、酶底比、酶解方法等因素对苏麻多肽提取的影响,优化单-双酶法直接酶解苏麻饼粕制备苏麻多肽工艺。结果表明:碱性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶单独酶解的最佳工艺是酶底比分别为5%、7%和5%,料液比均为3%,50℃酶解6h,该条件下,碱性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶单独酶解的多肽提取指数分别为(49.05±0.91)%、(47.98±0.36)%和(44.22±0.87)%。双酶法酶解的最佳工艺为料液比5%,55℃条件下,先加3.5%的胰蛋白酶在pH8.0条件下酶解3h,调节pH为9.5后再利用3.5%的碱性蛋白酶酶解3h,该条件下,酶解液中可溶性氮含量较单酶酶解显著提高,苏麻多肽提取指数达(52.88±0.39)%。     

单-双酶法制备苏麻饼粕多肽工艺的优化

为脱脂苏麻饼粕的开发利用提供参考，以可溶性氮含量及多肽提取指数为指标，考察原料处理方式、酶种类、酶底比、酶解方法等因素对苏麻多肽提取的影响；并优化单-双酶法直接酶解苏麻饼粕制备苏麻多肽工艺。结果表明：碱性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶单独酶解的最佳工艺是酶底比分别为5%、7%和5%，料液比均为3%，50℃酶解6 h，该条件下，碱性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶单独酶解的多肽提取指数分别为（49.05±0.91）%、（47.98±0.36）%和（44.22±0.87）%。双酶法酶解的最佳工艺为料液比5%，55℃条件下，先加3.5%的胰蛋白酶在pH8.0条件下酶解3 h，调节pH为9.5后再利用3.5%的碱性蛋白酶酶解3 h，该条件下，酶解液中可溶性氮含量较单酶酶解显著提高，苏麻多肽提取指数达（52.88±0.39）%。     

酶法提取稻谷加工副产物碎米中蛋白成分工艺的研究

通过单因素实验和正交实验,用中性蛋白酶水解法对稻谷加工副产物碎米进行了蛋白质的提取研究,得到如下最佳提取条件:酶解时间2.5 h、酶解温度55℃、酶的添加量1.0%(w/w)、液固比10∶1。在此条件下蛋白质的提取率可达74.8%。     

扇贝加工废弃物蛋白酶解及其酶解产物分子量分布的研究

对用复合酶酶解扇贝加工废弃物制备水解蛋白的工艺进行了研究,通过正交试验方法确定了用两种复合酶酶解的最适水解条件。结果表明,用枯草杆菌中性蛋白酶和风味酶复合酶酶解的最佳酶解参数为:加酶量比为2∶1,温度为65℃,pH为7.0,时间为5 h,水解液氨基酸态氮含量为50.3%,蛋白质水解度为95.5%。用木瓜蛋白酶和风味酶复合酶酶解的最佳酶解参数为:加酶量比为2∶1,温度为65℃,pH为7.0,时间为5 h,水解液氨基酸态氮含量为43.2%,蛋白质水解度为85.0%。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析法对水解产物的分析结果表明,两种混合酶的酶解产物为蛋白肽和游离氨基酸,其相对分子质量均集中分布在585和150左右。     

酶法水解非洲鲫鱼蛋白的优化工艺研究

以水解度和感官评价为指标,通过单因素和正交试验筛选酶法水解非洲鲫鱼的最佳工艺.结果表明:鲫鱼蛋白的较优水解酶为木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶,其中,木瓜蛋白酶对鲫鱼蛋白的较优水解条件是:60℃、pH6.0、料液比1∶5(w/v)、酶用量5%(w/w)、水解4.0 h;碱性蛋白酶的较优水解条件是:酶用量5%、料液比1∶3、65℃p、H 8.0、水解4.5 h;而双酶水解的优化工艺是碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶按1∶3(w/w)混合同时水解,酶用量为5%、料液比1∶5、55℃p、H 8.0、水解4.0 h,水解度最高达30.94%,制得的水解液清亮透明,气味较好,基本没有腥味和苦味.     

木瓜蛋白酶水解林蛙皮制备活性肽的工艺研究

[目的]以林蛙皮为原料,利用木瓜蛋白酶水解法制备活性肽。[方法]选取固液比、酶用量、pH、水解时间和水解温度为影响因素,以活性肽的水解度为考察指标,通过单因素试验和正交试验优选木瓜蛋白酶酶解林蛙皮制备活性肽的最佳工艺条件。[结果]最优工艺条件为固液比1∶4,酶用量14 000 U/g,pH 7.0,水解温度55℃,水解时间4 h。[结论]该研究为林蛙资源的综合利用提供了新的途径。