高粱黑粉菌黑色素的理化性质和与Cu~(2+)和Fe~(3+)的络合作用

为明确高粱黑粉菌中黑色素的开发价值,采用盐酸水解和氢氧化钠碱溶液提取的方法制备高粱黑粉菌黑色素,研究其理化性质以及稳定性。采用紫外分光光度计和红外光谱仪对高粱黑粉菌黑色素进行检测,并且应用红外光谱仪考察不同pH值的条件下高粱黑粉菌黑色素同Cu~(2+)和Fe~(3+)的相互作用的情况。结果表明:高粱黑粉菌黑色素的最大吸收波长在215nm;在pH值2.0～5.0的范围内呈现浅棕色;pH值7.0为时为棕红色;当pH值大于8.0时,高粱黑粉菌黑色素的颜色变为深棕色;除还原剂以外,热、光、微波、氧化剂及常用食品添加剂对其无影响,金属离子Cu~(2+)、Mg~(2+)、Ca~(2+)、Zn~(2+)、A1~(3+)和Fe~(3+)对高粱黑粉菌黑色素的稳定性都没有不良影响。红外光谱表明高粱黑粉菌黑色素含有OH、N-H、C=O、C=C、羧基、吡喃环、醇羟基和酚羟基。另外,还揭示Cu~(2+)和Fe~(3+)主要与高粱黑粉菌黑色素中的羧基和酚羟基发生了络合作用。这些结果说明,高粱黑粉菌黑色素具有良好的稳定性,是一种非常具有开发应用前景的天然色素,为其作为功能食品的进一步加工利用开发提供理论依据和方法。     

长清茶抗氧化活性研究

在测定多酚的基础上,利用5种体外抗氧化模型(脂质过氧化抑制作用、DPPH自由基清除作用、羟基自由基清除作用、Fe~(2+)络合能力及Fe3+还原力)对长清灵岩茶与南方茶抗氧化活性进行了比较研究。结果表明:茶汤中多酚含量为长清绿茶[(0.3106±0.0054)mg/m L]南方绿茶[(0.2888±0.0039)mg/m L]、长清红茶[(0.1691±0.0029)mg/m L]南方红茶[(0.1560±0.0015)mg/m L]。长清茶的脂质过氧化抑制作用、DPPH自由基清除作用、Fe~(2+)络合能力及Fe~(3+)的还原力均好于南方茶,且高于对照BHT、没食子酸;长清茶的羟基自由基清除作用好于南方茶与没食子酸,但低于BHT。因此,长清茶具有良好的抗氧化活性。     

铁凉伞黄酮提取液稳定性研究

铁凉伞(Ardisia crenata Sims)属于紫金牛科紫金牛属,具有清热解毒,散疲止痛,清咽利喉,祛痰止咳等药理活性。实验研究了光照、温度、pH值、氧化剂、金属离子等因素对铁凉伞黄酮提取物稳定性的影响。结果表明铁凉伞总黄酮提取液对光、温度、酸、Fe~(3+)、Cu~(2+)等因素不稳定,Al~(3+)对其稳定性影响不大,加入不同浓度的过氧化氢,发现该提取物液可能具有一定的抗氧化活性。     

白背三七黄酮类化合物的提取及抗氧化性评价

采用乙醇提取法从白背三七叶中提取具有生物活性的黄酮类化合物,并对其抗氧化活性进行综合评价。通过正交试验,确定了白背三七黄酮类化合物提取的最优工艺条件:乙醇体积分数80%,料液比1∶25(质量体积比),提取温度65℃,提取时间120 min。在此条件下,黄酮类化合物平均得率3.81%;抗氧化试验结果表明白背三七黄酮类化合物具有较强的抗氧化能力,且呈明显的剂量效应。对Fe~(3+)的还原能力与V_C接近(P0.05),而远高于BHT;对DPPH自由基和ABTS自由基均具有很好的清除效果,其IC_(50)值分别为0.039 mg/ml和0.062 mg/ml。白背三七黄酮类化合物对DPPH自由基的清除能力极显著高于对照组BHT和V_C(P0.01),对ABTS自由基清除能力显著强于V_C,但不如BHT。     

不同培养条件对烟草青枯病菌生长的影响

比较了9种阳离子、碳源、氮源和pH值对烟草青枯菌生长的影响,结果表明,不同阳离子对烟草青枯菌生长的影响具有差异,在1 mmol/L浓度条件下,Ca~(2+)、K~+、Mg~(2+)、Mn~(2+)、Fe~(2+)、Fe~(3+)等离子间对青枯菌生长影响差异较小,而与Cu~(2+)、Al~(3+)差异较大;在10 mmol/L浓度条件下,Mn~(2+)、Fe~(2+)、Fe~(3+)、Cu~(2+)、Al~(3+)等离子显著抑制青枯菌生长;在30 mmol/L浓度条件下,Ca~(2+)、K~+明显抑制青枯菌生长,而Mg~(2+)在60mmol/L浓度下,仍青枯菌生长良好。此外,研究结果还表明,青枯菌生长最适宜的pH值为7,最适宜的碳源为蔗糖,最适宜的氮源为蛋白胨,硝态氮氮源不利于青枯菌生长。     

水蜡树果中黄酮类化合物抗氧化活性的研究

通过正交试验得出水蜡树果黄酮类化合物的最佳提取条件:料液比为1:30(g/mL)、提取剂为60%乙醇(体积分数)、提取时间为16 h。用DPPH法研究不同温度、光照、pH值、金属离子、食品添加剂对水蜡树果黄酮类化合物化合物抗氧化活性的影响。结果表明:水蜡树果黄酮类化合物化合物抗氧化活性在一定温度和光照条件下具有良好的稳定性。在pH=3～6的条件下,有较好的抗氧化活性。Mg~(2+)、Fe~(2+)、Cu~(2+)、Zn~(2+)、山梨酸及柠檬酸可使水蜡树果黄酮类化合物的抗氧化活性提高。     

紫拟青霉色素的稳定性

为紫拟青霉色素的开发利用及深入研究提供参考,采用单因素试验研究其色素在水溶液中的稳定性。结果表明:紫拟青霉色素在试验温度(20~97℃)和pH(pH 3~12)范围内稳定性良好,20~97℃时随着温度升高其增色效果明显,pH 3~12时OD值变化不大;其对氧化剂和还原剂有较好的耐受性,麦芽糖、乳糖、葡萄糖及蔗糖对其无影响;Cu~(2+)、Zn~(2+)和Fe~(2+)对色素稳定性影响明显,而K~+、Mg~(2+)及Fe~(3+)对色素稳定性影响相对不大;在空气中长时间放置对色素稳定性无影响。     

柿叶茶、杜仲雄花茶、绿茶和红茶体外抗氧化活性比较研究

为了解柿叶茶、杜仲雄花茶、绿茶和红茶抗氧化活性的差异性,采用AlCl_3-(HAc-NaAc)、Folin-Ciocalteu和HPLC法对黄酮、总酚和维生素C含量进行分析,通过DPPH·,ABTS+·,还原能力(Fe~(3+)和Cu~(2+)),金属络合能力(Fe~(2+)和Cu~(2+))6种方法对其体外抗氧化作用进行了比较研究。结果表明,柿叶茶富含维生素C,杜仲雄花茶黄酮含量最高,绿茶和红茶中活性成分主要是茶多酚;4种茶具有显著的体外抗氧化能力,除络合能力外,绿茶、红茶均强于柿叶茶和杜仲雄花茶,抗氧化能力与总酚含量呈极显著的正相关关系,与黄酮含量无显著的相关性。因此,4种茶富含黄酮、多酚、维生素C等天然抗氧化成分,且具有显著的抗氧化活性。     

枯草芽孢杆菌86315α-淀粉酶的研究 Ⅱ.分离提纯、性质及动力学

采用壳聚糖絮凝、淀粉吸附、乙醇沉淀等步骤,从枯草芽孢杆菌86315发酵液中提取了α-淀粉酶,然后用Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE-纤维素柱层析进一步提纯,得到DISC-电泳一条带的α-淀粉酶制剂。用SDS-PAGE测出其分子量为54000。用等电聚焦测出其p~1为5.2。动力学实验表明:最适温度60℃;最适pH5.6;对可溶性淀粉的Km值是3.0mg/ml;Ca~(2+)、Mg~(2+)、Ba~(2+)对α-淀粉酶活性稍有激活作用;Mn~(2+)不影响酶活性;Fe~(2+)、Fe~(3+)、Cu~(2+)、Ag~(1+)、甲醛、EDTA以及戊二醛都明显抑制酶活性。该酶在50℃以下是稳定的,pH稳定范围是5.6～8.8,对60％乙醇有高度的稳定性,易被尿素变性。     

米曲霉葡聚糖酶基因(AoEGLAI)在毕赤酵母中的表达研究及其酶学特性分析

采用PTDS方法人工合成米曲霉葡聚糖酶基因(AoEGLAI),通过电击将其转化到毕赤酵母中表达,并采用DNS法对重组酶的酶学性质进行分析。结果表明:该酶耐酸但不耐热,最适反应温度为50℃,最适pH为3.0,在30—45℃和pH4—8时内切葡聚糖酶可保持90%以上酶活力,在底物CMC存在时其热稳定性有一定的提高。10 mmol/L的金属离子Cu~(2+)、Ca~(2+)、Zn~+、Gr~(3+)、Fe~(2+)和Fe~(3+)对酶有激活作用,Mn~(2+)对酶则起抑制作用。该酶对胰蛋白酶有一定的抗性,对胃蛋白酶抗性相对较差。     

含铁含钙食品环境中胭脂虫红酸呈色的改善研究

胭脂虫红酸是从仙人掌上的胭脂虫体内提取的一种天然色素,但在含铁含钙环境中呈色易受影响,限制了其在食品中的应用。研究了Al~(3+)、Zn~(2+)、氨基酸、肽、乳清分离蛋白(WPI)和乙二胺四乙酸(EDTA)对含铁含钙胭脂虫红酸溶液呈色的影响,以期改善其应用效果。结果表明,在Fe~(3+)和Ca~(2+)浓度分别为0.001～0.010 mol/L、0.01～0.10 mol/L时,添加0.1 mol/L Al~(3+)后,在pH 6.0和pH 8.0缓冲液中胭脂虫红酸呈红色;0.1 mol/L Zn~(2+)对胭脂虫红酸呈色无改善。谷氨酸、甘氨酸、谷胱甘肽、酪蛋白磷酸肽和WPI对含0.001～0.010 mol/L Fe~(3+)的胭脂虫红酸溶液颜色无明显影响。谷氨酸和谷胱甘肽使含0.1 mol/L Ca~(2+)的胭脂虫红酸水溶液均呈橘黄色,不再生成棕色絮状物。甘氨酸、酪蛋白磷酸肽和WPI使含0.01～0.10 mol/L Ca~(2+)的胭脂虫红酸水溶液呈灰绿色。EDTA的螯合作用使胭脂虫红酸呈色稳定,其在水溶液及pH 6.0缓冲液中呈橘黄色,在pH 8.0缓冲液中呈绛紫色,不受0.01 mol/L Fe~(3+)及0.01～0.10 mol/L Ca~(2+)的影响。该研究为改善胭脂虫红酸在含铁含钙食品体系中的呈色效果提供了一定的参考依据。     

山杏种皮黑色素与Cu2+和Zn2+络合性质的研究

【目的】研究山杏种皮黑色素与Cu2+和Zn2+络合的相关性质,为山杏种皮黑色素以及其他植物黑色素的开发利用提供依据。【方法】采用电位滴定、紫外-可见光差示吸收光谱和红外光谱对山杏种皮黑色素与Cu2+和Zn2+的络合物进行分析。【结果】Cu2+和Zn2+与山杏种皮黑色素络合后,均能促进山杏种皮黑色素酸性位点的去质子化作用,但Cu2+的促进作用更强,结合更为牢固;随pH值升高,山杏种皮黑色素中解离出的络合位点增多,络合Cu2+能力增强。【结论】Cu2+和Zn2+主要与山杏种皮黑色素中羰基发生络合作用,氨基和羟基参与了络合。     

产低温纤维素酶菌株的分离鉴定及产酶特征研究

自东帕米尔高原布伦口湖群湿地10 cm草甸中分离到一株高酶活低温纤维素酶产生菌BLKC2,经16S rDNA序列鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。BLKC2在10℃低温条件下保持繁殖能力,在20℃,pH 7.0条件下发酵72 h,酶活力达到最大值28.7 U/mL。酶学特性显示,BLKC2分泌的粗酶最适催化温度为30℃,对热敏感,最适反应pH8.0左右,在pH 7.0～9.0的偏碱性环境中酶活力较稳定,Mn~(2+)、Zn~(2+)、Mg~(2+)对酶反应有明显激活作用,而Fe~(3+)、Cu~(2+)则抑制了酶反应。     

弱酸性含铁油田污水处理技术研究

依照油田注采水要求,对含有较高浓度Fe~(2+)和游离CO_2的3种油田酸性污水采用空气与污水快速定量气液平衡方法,实现快速提高污水的pH值,降低酸性污水腐蚀性。同时消除污水中的Fe~(2+)、S2-等不稳定物质,降低悬浮物含量,促使具有结垢趋势的余量Ca~(2+)、Mg~(2+)等沉淀,保障外输水质稳定性。对3个污水站的污水处理结果表明,在气液体积比为2∶1时,污水的pH值均由弱酸性提高到7以上,(Fe)浓度由4.50~12.2mg/L均降低到0.5mg/L及以下,验证了快速定量气液平衡方法在处理含铁含游离CO_2油田酸性污水中的可行性。     

甘蓝型黄籽油菜种皮色素与抗氧化酶的关系

以3个甘蓝型黄籽油菜自交系L 2、L 4、L 6为材料,研究了甘蓝型黄籽油菜种子发育过程中种皮抗氧化酶活性和色素含量的动态变化及其相互关系。结果表明,3种抗氧化酶SOD、POD、CAT活性和2种色素黑色素、花色素含量都是前期低、后期高,其中SOD、POD和CAT于花后41~48d达峰值,黑色素于开花41d后突然升高,花色素于花后27d逐渐升高。统计分析结果表明,黑色素与SOD、POD达极显著负相关,与CAT达显著负相关;花色素与SOD、POD、CAT均呈显著负相关。在收获前7d用1 g/L V c处理大田植株,发现甘蓝型油菜种皮SOD、POD、CAT活性增强,而黑色素、花色素含量下降。由此表明,甘蓝型黄籽油菜种皮抗氧化酶活性可能影响种皮色素含量。     

酶制备牡蛎蛋白水解物的抗氧化活性和功能特性分析

为比较分析木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶3种不同酶水解牡蛎获得的蛋白产物抗氧化活性和功能特性,本文采用木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶3种不同酶水解牡蛎蛋白获得水解物,并分别测定它们在不同pH值下的溶解度、乳化性以及不同浓度水解物的还原能力、DPPH自由基清除率和Fe~(2+)螯合能力。结果表明,3种酶水解物都有较高的溶解度(P0.01),胰蛋白酶产生的水解物溶解度最高,94.8%(P0.05);水解物溶解度和乳化活性指数在pH值为4时显著降低(P0.05)。牡蛎蛋白质水解产物的还原能力、DPPH自由基清除能力和金属螯合活性随浓度的增加而增强,其中胰蛋白酶和胃蛋白酶的水解物抗氧化能力较强(P0.01)。3种蛋白酶水解牡蛎蛋白可获得抗氧化活性强、溶解度高的水解物,并受浓度和pH值的影响,它们的水解物可作为一种潜在的抗氧化功能多肽利用。     

黑果小檗果皮色素稳定性研究

以黑果小檗果皮为试验材料提取色素,并就光照、温度、还原剂、氧化剂、食品添加剂、pH值和不同金属对色素稳定性的影响进行了初步研究。结果表明:黑果小檗色素为花色素苷类物质。对光具有一定的耐性;有良好的热稳定性(T≤60℃);氧化剂和还原剂对色素稳定性的影响较大,应避免与氧化剂和还原剂接触;食品添加剂食盐、葡萄糖、柠檬酸对色素稳定性的影响不大,且食盐和柠檬酸对色素有增色作用;pH值对色素的影响较大,在酸性条件下黑果小檗色素较稳定,在碱性条件下色素结构可能被破坏,呈现墨绿色;色素对Mg~(2+)、Ca~(2+)相对稳定,Fe~(3+)、Fe~(2+)、Cu~(2+)使色素吸光度产生较大波动,对色素稳定性的影响较明显。     

山杏种皮黑色素提取工艺研究

研究了提取溶剂及其浓度、提取温度和有无氮气保护及提取时间对山杏种皮黑色素提取效果的影响,并对提取的山杏种皮黑色素与人工合成的多巴黑色素的理化性质进行了比较。结果表明,该黑色素适宜于用0.5mol/L NaOH在60℃下提取2次,每次12 h,提取宜在氮气下进行,以防止黑色素的过度氧化。在该工艺条件下,经过酸水解和进一步有机溶剂洗涤及反复沉淀纯化以后,可从5 g山杏种皮中得到黑色素237 mg,得率为4.73%;山杏种皮黑色素中总多酚含量较高,约为262 mg/g。山杏种皮黑色素与合成多巴黑色素的理化性质非常相似,不溶于水和常见的有机溶剂,在1 mol/L KOH溶液中完全溶解,pH小于3时发生沉淀,可被KMnO4、K2Cr2O7、NaClO和H2O2氧化漂白,多酚定性反应呈阳性;在紫外-可见光区没有吸收峰,红外光谱中在3 400 cm-1附近和1 650~1 620cm-1各有一个强的吸收带。     

鱿鱼墨黑色素吸附Ca2+的活性研究

[目的]为鱿鱼墨在饲料、保健品等领域的应用提供理论依据。采用高速离心法精制的鱿鱼墨黑色素与Ca~(2+)作用,探究酸度、温度、时间、黑色素添加量、Ca~(2+)浓度及盐度等因素对鱿鱼墨黑色素吸附Ca~(2+)的影响。[结果]当pH为4、温度为40℃、黑色素添加量为0.02g、吸附时间为10h时,鱿鱼墨黑色素对钙的吸附量最大,达到65%。不同浓度的氯化钠和氯化镁对黑色素吸附Ca~(2+)的影响较小,氯化铁对黑色素吸附钙的影响很大,随着氯化铁浓度的增大,吸附量急剧增加。[结论]鱿鱼墨黑色素对Ca~(2+)的吸附能力并不理想,吸附量也不多。     

海参组织蛋白酶K的部分酶学性质及其对海参自溶的影响

采用特异性荧光底物法检测海参体壁组织蛋白酶K(CTSK)的酶学性质并初步探讨其对海参自溶的影响。结果表明:CTSK的最适pH为5.0,最适温度为50℃,在20~40℃之间酶活力稳定性较好;Zn~(2+)、Fe~(2+)、Fe~(3+)、Cu~(2+)均对CTSK产生一定抑制作用,抑制率均超过60%;而Ca~(2+)和Mn~(2+)对其活性影响不大,Mg2+可增强该酶活性、CA-074、Z-Leu-Leu-Leu-H(ZLLL)、碘乙酸、E-64、抗痛素、PMSF对CTSK的抑制率均在85%以上,EDTA和1,10-菲啰啉对该酶的抑制率分别为39.7%和16%,而DTT和L-Cys可将该酶活力分别提高至127.46%和238.3%。在海参匀浆物中分别加入特异性抑制剂CA-074和ZLLL,25℃水浴加热使其发生自溶,并通过SDSPAGE检测CTSK对海参蛋白降解的影响。结果显示ZLLL能够在一定程度上抑制海参蛋白的降解。CTSK是一种巯基氨基酸含量较高的半胱氨酸蛋白酶,具有一定的金属离子依赖性,但又易被多种金属离子抑制;CTSK有可能直接参与海参自溶过程中蛋白质的降解。