对棕色固氮菌OP固氮酶钼铁蛋白功能的初步研究

在固氮酶所催化的N_2、C_2H_2等底物还原反应以及ATP水解反应中,固氮酶的钼铁蛋白和铁蛋白各起什么作用,研究这一问题对于阐明固氮酶催化机理有重要的意义。近年来,国内外的研究表明,铁蛋白分子能络合二个MgATP,在Na_2S_2O_4与钼铁蛋白分子之间起传递电子的作用。Mortenson等及Tso等分别用EPR法及凝胶平衡法揭示:钼铁蛋白分子不能络合MgATP。但是,最近Kimber     

酵母乙醇脱氢酶的快速纯化

在生物化学,临床医学和法医学等研究领域广泛地使用乙醇脱氢酶测定乙醇含量、NAD~+的直接测定和NAD~+的再生测定。乙醇脱氢酶通常是从动物的肝脏和酵母中分离提取,由于从动物肝脏中制备该酶在方法上存在着一些问题,因此,常规使用的该酶制剂来源于酵母。酵母乙酵脱氢酶的提取方法很多,但均有如下缺点:(1)所需时间长,(2)步骤复杂,(3)产品中含有蛋白水解酶。我们所建立的方法克服了这些缺点,且操作简便、快速,得到的酶结晶活性高,适于长期保存。     

枯草芽孢杆菌86315α-淀粉酶的研究(Ⅰ)热稳定性

研究了温度对枯草芽孢杆菌86315α—淀粉酶的活性和荧光光谱的影响,发现该酶在50℃以下是稳定的;70℃加热10min,酶活性全部丧失,荧光光谱发生了较大的变化;在0.02mol/L CaCl~2和0.02mol/L NaCl同时存在下,70℃加热     

枯草芽孢杆菌86315α-淀粉酶的研究 Ⅱ.分离提纯、性质及动力学

采用壳聚糖絮凝、淀粉吸附、乙醇沉淀等步骤,从枯草芽孢杆菌86315发酵液中提取了α-淀粉酶,然后用Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE-纤维素柱层析进一步提纯,得到DISC-电泳一条带的α-淀粉酶制剂。用SDS-PAGE测出其分子量为54000。用等电聚焦测出其p~1为5.2。动力学实验表明:最适温度60℃;最适pH5.6;对可溶性淀粉的Km值是3.0mg/ml;Ca~(2+)、Mg~(2+)、Ba~(2+)对α-淀粉酶活性稍有激活作用;Mn~(2+)不影响酶活性;Fe~(2+)、Fe~(3+)、Cu~(2+)、Ag~(1+)、甲醛、EDTA以及戊二醛都明显抑制酶活性。该酶在50℃以下是稳定的,pH稳定范围是5.6～8.8,对60％乙醇有高度的稳定性,易被尿素变性。     

胰蛋白酶的固定化及其性质研究

以自制的脱乙酰壳多糖作载体,戊二醛为交联剂,对胰蛋白酶的固定化条件及其固定化酶的性质进行了研究。考查了交联剂的用量、pH值、以及载体与酶的比例等因素对胰蛋白酶固定化的影响。在所选择的固定化条件下,固定化酶的活性回收可达50％以上,同时研究了固定化胰蛋白酶的一些性     

浓缩生物高分子稀溶液的新材料——浓缩剂的合成及其性能鉴定

以丙烯酸为材料,研制成功了一种浓缩生物高分子稀溶液的新型材料——浓缩剂。在制备的干燥浓缩剂中,含有7％的丙烯酸时,可吸水130—150毫升/克干胶。含有5％的丙烯酸时,吸水量可达160毫升/克干胶。因此,吸水量与浓缩剂的用量成正比。稀溶液经浓缩后生物高分子的回收率达80—93％。具有简单、快速、效率高之优点。     

α-淀粉酶发酵液絮凝分离的初步研究

生产固态或液态食品级α-淀粉酶的关键是发酵液的絮凝分离。国外早在60年代就开始研究微生物絮凝和机理,我国近年来也有这方面研究的零星报道。本文就BF-7658枯草杆菌α-淀粉酶发酵液絮凝分离方法进行了初步探索。发酵液由无锡酶制剂厂提供,用正交法研究明矾、氯化钙、氯化钠和pH四因素在三     

胃蛋白酶的固定化及其催化性质研究

胃蛋白酶是一种动物来源的蛋白水解酶,广泛地应用于方便食晶、奶酪、消化药和口香糖加工制造。近年来,该酶在啤酒、果酒等澄清方而显示了一定的应用潜力。但是,由于可溶性的胃蛋白酶自身降解作用,使该酶的应用受到一定的限制。本文以淡水虾壳为原料,制备了脱乙酰壳聚糖,以它作载体,用戊二醛作交联剂,制备了性能稳定的固定化胃蛋白酶。     

AS1.398中性蛋白酶的固定化研究

对枯草杆菌AS1.398中性蛋白酶的固定化进行了研究。考查了温度、pH值、交联剂用量,以及载体与酶的比例等因素对AS1.398中性蛋白酶固定化的影响;确定了固定化AS1.398中性蛋白酶的一些催     

SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)染色的新方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)以及由此发展起来的聚丙烯酰胺等电聚焦和SDS—PAGE是测定蛋白质纯度、等电点和分子量的有力工具,在生物化学、分子生物学及有关学科的基础和应用研究中都获得了越来越广泛的应用。目前,在为类PAGE中,蛋白质的染色均采用考马斯亮兰R或G染色液,国内外文献报告的种类繁多的染色方法,均有如下缺点:(1)染料扩散进入凝胶的速度慢,从而使染料与蛋白质化学计量结合所需的时