上海浦东新区宠物猫汉氏巴尔通体血清学调查

采用间接免疫荧光试验对上海浦东新区20只临床健康的宠物猫血清样本进行汉氏巴尔通体抗体检测。结果表明,上海浦东地区宠物猫存在汉氏巴尔通体感染,抗体阳性率达20%(4/20)。     

VirB4缺失型特利波契巴尔通体入侵淋巴循环的研究

巴尔通体通过抑制宿主淋巴结内免疫反应,利用淋巴循环侵入血液导致持续性菌血症。4型分泌系统是巴尔通体建立持续性感染的关键因素,但尚不清楚4型分泌系统在巴尔通体侵入淋巴循环中所起的作用。VirB4基因是4型分泌系统重要的组成部分,本实验以敲除VirB4基因的特利波契巴尔通体菌株与野生型特利波契巴尔通体菌株分别侵染大鼠淋巴循环系统来评价4型分泌系统对菌株侵入淋巴循环能力的影响。通过大鼠胸导管引流模型,用qPCR方法检测淋巴液中的菌载量。结果表明在不同的时间点,野生型与VirB4缺失型菌株均能够进入淋巴循环,但在感染6 h后,淋巴循环中的VirB4缺失菌数量大于野生型菌。提示4型分泌系统并不决定特利波契巴尔通体侵入淋巴循环的能力。     

上海市犬类巴尔通体感染情况调查

为了解上海市犬类巴尔通体感染情况,根据已发表的巴尔通体保守基因序列合成1对PCR引物,对上海市6个区县采集149份犬全血样品进行检测。25份样品扩增出特异性条带,阳性率为16.78%,对阳性样品进行测序,证实为B.vinsoniiberkhoffii菌株。结果表明,上海市犬的中存在不同程度的巴尔通体感染情况。     

四川石渠县牦牛源蜱感染巴尔通体的分子流行病学调查

为了解四川省石渠县牦牛体表寄生蜱的种类及其巴尔通体的感染情况。采集牦牛体表的蜱,经形态学初步鉴定后,提取蜱总DNA,PCR扩增蜱细胞色素氧化酶Ⅰ(COⅠ)基因和巴尔通体gltA基因,对阳性产物测序、比对,并构建系统进化树,从而确定蜱及其携带巴尔通体的种类。结果表明:在石渠县4个乡共采集到蜱818只,其中西藏革蜱占78.97%(646/818)、青海血蜱占21.03%(172/818);蜱巴尔通体的总感染率为30.07%,其中阿日扎乡、麻甲乡、德荣玛乡、长须干玛乡蜱巴尔通体的感染率分别为4.76%、76.79%、12.50%、17.95%,麻甲乡西藏革蜱巴尔通体感染率显著高于其他地点(P<0.01),麻甲乡青海血蜱巴尔通体感染率(79.07%)高于西藏革蜱(69.23%),但无显著差异(P>0.05)。经比对分析,总共得到3条序列(uncultured Bartonella sp. shiqu 1,uncultured Bartonella sp. shiqu 2和uncultured Bartonella sp. shiqu 3)。遗传进化分析显示,uncultured Bartonella sp. shiqu 1和uncultured Bartonella sp. shiqu 2与未定种的Bartonella spp. RF124HAIN (FJ464240)亲缘关系最近;uncultured Bartonella sp. Shiqu 3与对人有致病性的Bartonella melophagi亲缘关系最近。综上,石渠县存在西藏革蜱和青海血蜱,蜱巴尔通体感染率较高,并且具有感染人的风险。     

猫血巴尔通体病综合分析

血巴尔通体病是以血巴尔通体寄生于猫或犬血液中红细胞表面损伤红细胞,引起机体严重贫血、甚至死亡为特征的疾病。人感染血巴尔通体一般称为"猫抓病",猫血巴尔通体病也有人称之为"猫附红细胞体病,是引起猫传染性贫血原因之一。为此对此病的流行病学、发病机理临床症状等几方面做出分析,仅供参考。     

特利波契巴尔通体基因敲除体系的建立

本研究旨在建立基于同源重组技术的特利波契巴尔通体基因敲除方法。研究通过扩增并融合Ⅳ型分泌系统VirB4基因的上下游同源片段,将同源片段与pJM05质粒进行体外拼接,并将pJM05-ΔVirB4质粒转化进入S17-1大肠杆菌中;通过双亲接合转移将大肠杆菌S17-1中的pJM05-ΔVirB4质粒转移到特利波契巴尔通体中进行同源臂交换,产生单交换菌株;随后利用质粒中sacB基因表达产物分解蔗糖对自身产生毒性作用,在蔗糖平板中筛选出22个双交换菌株,通过菌落PCR及测序验证,共确定出6个VirB4基因框内缺失菌株;并且测序结果表明这6个菌株在VirB4基因框内缺失了2 136 bp。     

动物饲料中玉米赤霉烯酮ELISA检测方法的建立

为检测动物饲料中玉米赤霉烯酮的含量,建立酯联免疫检测法(ELISA).结果显示:该方法检测回收率范围为67%～99%,其最低检出限为0.1 μg/kg;以建立的ELISA法对随机添加的35个普通动物饲料样本进行分析,并以HPLC法对同一批样品进行检测,两种方法回收率相关系数为0.956 1.证明建立的ELISA检测方法适合动物饲料中玉米赤霉烯酮的检测.     

规模猪场种猪伪狂犬病血清抗体和病原检测与分析

采集武汉市两个规模猪场的370头份种猪血液和鼻拭子样本,运用ELISA方法对血清样本进行猪伪狂犬病抗体检测,结果两个猪场种猪的伪狂犬病gB抗体平均阳性率分别为77.1%和77.9%,猪伪狂犬病gE抗体平均阳性率分别为2.4%和3.9%;运用PCR方法对种猪鼻拭子样本进行猪伪狂犬病病原检测,结果显示,猪伪狂犬病病毒的阳性率分别为1.2%和5.4%.检测结果对猪场伪狂犬病的控制和净化具有指导意义.     

近年海北州羊布鲁氏杆菌检测与分析

为了分析2016～2018年海北州地区羊布鲁氏杆菌流行与分布情况,本试验2016～2018年采集海北州地区规模化羊场、散养场血液样本共计1824份,采用布鲁氏杆菌标准抗原及ELISA试剂盒对采集的海北州地区规模化羊场、散养场血液样本进行布鲁氏杆菌病监测与分析,确定其布鲁氏杆菌流行情况,为该病的防控提供研究基础。监测结果显示, 2016年海北州地区规模化羊场检测出78个阳性,占检测样品的13.9%; 2017年海北州地区规模化羊场检测出91个阳性。占检测样品的14.9%; 2018年海北州地区规模化羊场检测出103个阳性样品,占检测样品的15.7%,呈现逐年上升。该地区规模化羊场、散养场布鲁氏杆菌感染严重,正在流行与扩散应引起重视该病的防控与净化。     

猫抓病及其他与巴尔通氏体感染有关的人畜共患病的研究进展

猫抓病是一种由巴尔通体属细菌引起的人畜共患病,在世界范围内广泛流行。猫是巴尔通体的主要宿主,通过猫蚤在猫之间传播。猫抓伤或咬伤是该病从猫传播到人的主要途径。文章就该病的病原学、流行病学、临床表现、实验室检查、病变特点、诊断及治疗方法等作一综述。     

海南省冬季蔬菜病毒病发生情况调查

病毒病是海南冬季蔬菜生产上的一类重要病害,发生为害日趋严重。通过对海南17个市县88个乡镇冬季蔬菜病毒病发生情况调查,同时采用ELISA或PCR方法对田间采集的1 385份样本进行病毒检测,结果表明:病毒病发生严重程度依次为黄瓜辣椒小白菜南瓜樱桃番茄菜豆豇豆。150份黄瓜样本中,CMV、CGMMV和TMV检出率分别为63.3%、22.67%和21.33%;180份南瓜样本中,CMV、TMV和CGMMV检出率分别为53.89%、5%和1.12%;220份辣椒样本中,CMV、TMV和TSWV检出率分别为49.1%、41.4%和1.53%;170份樱桃番茄样本中,TMV、CMV、BBWV和粉虱传双生病毒检出率分别为40%、34.7%、1.18%和3.53%;350份小白菜样本中,Tu MV和CMV检出率分别为49.1%和20.9%;130份菜豆样本中,CMV和BBWV检出率分别为30%和12.3%;195份豇豆样本中,CMV和BBWV检出率分别为9.2%和2.6%。CMV可以侵染已检测的4个科的所有蔬菜种类,检出率在9.23%~63.33%。已检测的所有蔬菜种类中,均存在2种或2种以上病毒的混合侵染,混合侵染率在0.56%~26.36%。     

猪伪狂犬病gpI抗体鉴别ELISA方法在猪伪狂犬病控制与净化中的效果分析

利用猪伪狂犬病gpI 抗体ELISA试剂盒对广西10个种猪场2004～2007年的3253份血清进行猪伪狂犬病gpI抗体检测,并对阳性猪进行淘汰.结果10 个种猪场猪伪狂犬病感染率从2004年的17.06%下降到2007年的0 64%.证实在广西种猪场用猪伪狂犬病 gpI抗体ELISA试剂盒定期监测猪伪狂犬病,淘汰带毒种猪,能有效控制与净化猪伪狂犬病.     

自制间接法猪瘟抗体ELISA检测试剂盒性能研究

为了评价实验室自行研发的间接法猪瘟抗体ELISA检测试剂盒的性能,我们用调试后的ELISA试剂盒和两个进口试剂盒(法国LSI公司及美国IDEXX公司产品),分别对184份临床样品进行了检测。结果显示:实验室初步建立的检测体系与LSI公司试剂盒符合率为83.6%、特异性100%、敏感性80.6%,与IDEXX公司试剂盒符合率为76.7%、特异性62%、敏感性93%。     

猪囊尾蚴头节蛋白双抗体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用

采用抗猪囊尾蚴头节蛋白单克隆抗体包被ELISA板,以兔抗猪囊尾蚴头节蛋白多抗作为捕获抗体,建立了猪囊尾蚴头节双抗体夹心ELISA检测方法,用该方法分别检测猪囊尾蚴、棘球蚴和猪蛔虫具有良好的特异性。用ELISA和RT-PCR同时检测120份样品,ELISA的特异性和敏感性分别为98.1％和80.0％,2种方法的符合率为95.8％。        

基于免疫层析试纸的猪O型FMDV抗体水平监测

为了应用免疫层析试纸评价猪口蹄疫O型合成肽疫苗的免疫效果,对50头试验仔猪进行免疫注射,并在首次免疫后28 d及2次免疫后20 d采血,通过试纸定量测定结果来监测试验猪抗体水平变化,同时对比猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒的检测结果.结果表明,猪口蹄疫O型合成肽疫苗能快速诱导产生高水平的抗体,首次免疫抗体阳性率达88%,2次免疫抗体阳性率高达100%.试纸定量测定结果表明,2次免疫后猪群免疫抗体水平整体显著提升,并保持在较高水平.与ELISA试剂盒比较二者具有相同的敏感性和特异性,符合率为100%.     

免疫鸡群新城疫病毒强毒株感染的实验研究

ＳＰＦ试验鸡在８、２５日龄时接受了２次新城疫（ＮＤ）基础免疫，６０日龄时分别以标准新城疫病毒（ＮＤＶ）强毒株、中等毒力和弱毒疫苗株人工感染攻毒。应用单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒，对所有试验鸡泄殖腔棉拭样品进行了３０ｄ的连续检测。结果表明：从攻毒后第３ｄ起强毒株试验组检测出多例阳性，检出高峰分别在攻毒后第４～６ｄ和１１～１５ｄ，与鸡群症状表现的时间相一致；中等毒力和弱毒疫苗株对照组均呈检测阴性。本研究证明单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒可以检测免疫鸡群中ＮＤＶ强毒感染，为ＮＤ的监测提供了新手段。     

ELISA方法检测动物源性食品中卡那霉素研究

为评价卡那霉素检测试剂盒的现场应用效果,结合仪器检测方法,对现场采集的样品同时进行HPLC-MS检测和ELISA检测,然后进行统计分析。结果表明,卡那霉素HPLC-MS检测和ELISA检测动物组织和肝脏样品816份,ELISA检测试剂盒检出率较高,与仪器的符合率达98.99%,卡那霉素ELISA检测试剂盒敏感性好、时间短,不存在假阴性。卡那霉素ELISA检测试剂盒可以用于动物源性食品的检测工作,适用于现场、大范围的快速筛选。     

攀枝花烟草病毒病检测与防治对策

采用酶联免疫反应检测技术(ELISA)对攀枝花烟区烟草病毒病发生情况进行检测,分析了该次病毒病发生原因,并有针对性地提出了综合防治措施。结果表明,从74份采集样品中检出烟草普通花叶病毒病(TMV)53份,检出率71.62%;黄瓜花叶病毒病(CMV)41份,检出率55.41%;马铃薯Y病毒病(PVY)37份,检出率50.00%;番茄花叶病毒病(ToMV)8份,检出率10.81%。74份检测样品中受2种或2种以上病毒复合侵染的样片有68份,检出比91.89%。该次病毒病发生原因主要包括气候因素、品种因素、病原因素和栽培管理因素;综合防治措施包括控制传染源、切断传播途径、选种抗性品种、加强田间管理和药剂防治。     

云南省昆明地区种鸡J亚群禽白血病血清学调查

[目的]了解云南省昆明地区种鸡场J亚群禽白血病的感染状况。[方法]从云南省昆明市疑似感染禽白血病的某种鸡场采集644份泄殖腔(公鸡)拭子和460份蛋清(母鸡)样品,采用ELISA法对种鸡J亚群禽白血病进行抗原检测。[结果]在检测的460份蛋清样品中,172份抗原呈阳性,阳性率为37.39%;在检测的644份泄殖腔拭子中,520份抗原呈阳性,阳性率为80.75%。A养殖场共检测644份样品,总阳性率为63.66%,其中蛋清样品的阳性率为39.13%,泄殖腔样品的阳性率为82.07%。B养殖场共检测460份样品,总阳性率为61.30%,其中蛋清样品的阳性率为34.78%,泄殖腔样品的阳性率为78.99%。此次检测结果表明云南省昆明地区种鸡群已严重感染J亚群禽白血病。[结论]该研究可为种鸡J亚群禽白血病的防治提供理论依据。     

伊宁市犬猫弓形虫病流行病学调查

[目的]探明刚地弓形虫在伊宁市宠物犬猫、流浪犬、散养猫中的感染情况及流行特点。[方法]分别采用动物弓形虫Ig G抗体检测试剂盒(酶联免疫吸附试验)及弓形虫抗体快速诊断试纸(免疫色谱分析法)对不同生活状态、不同年龄、不同季节的440份犬猫血清样品进行抗体检测。[结果]酶联免疫吸附试验检测阳性率为20.23%(89/440),宠物犬阳性率为15.50%(31/200),宠物猫阳性率为10.00%(2/20),流浪犬阳性率为24.00%(48/200),流浪猫阳性率为40.00%(8/20),流浪犬阳性率显著高于宠物犬(P0.05),散养猫阳性率显著高于宠物猫(P0.05);第二季度犬的感染率最高,为27.00%(27/100),与第一季度差异显著(P0.05);1岁以内犬组与6岁以上犬组差异极显著(P0.01),1~3岁与6岁以上犬组差异显著(P0.05);弓形虫抗体快速诊断试纸(免疫色谱分析法)检测阳性率为21.14%,与酶联免疫吸附试验检测方法差异不显著(P0.05)。[结论]伊宁市犬猫弓形虫抗体阳性率处于较高水平,阳性率高低与犬猫年龄、生活状态以及季节性等因素有关。