虎杖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

[目的]筛选虎杖（Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.）α-葡萄糖苷酶抑制活性物质。[方法]对中药虎杖的α-葡萄糖苷酶抑制活性进行测定,并对其活性物质进行了初步分离。[结果]虎杖水提物浓度为50 mg（生药）/ml时,对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率达68.5%,IC50约为37 mg/ml。虎杖水提物是α-葡萄糖苷酶的非竞争性抑制剂,抑制常数Ki为33 mg/L。采用层析分离得到了虎杖α-葡萄糖苷酶抑制剂,初步鉴定为多糖物质。[结论]该研究为植物源α-葡萄糖苷酶抑制剂的开发奠定了基础,对发现高效、安全的降低餐后血糖新药物具有重要作用。     

马齿苋活性成分中α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选

[目的]观察马齿苋活性成分对兔小肠黏膜α-葡萄糖苷酶活性的影响,筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂。[方法]提取分离马齿苋活性成分,在体外建立微量酶反应体系,pNPG作为底物,以阿卡波糖为参照,检测马齿苋活性成分对α-葡萄糖苷酶活性的影响。[结果]马齿苋总提取液、粗多糖和总生物碱对α-葡萄糖苷酶具有明显抑制作用,抑制效果接近于阿卡波糖,不饱和脂肪酸和总黄酮无抑制作用。[结论]马齿苋防治糖尿病的主要成分是生物碱和多糖,可能具有阿卡波糖样的降糖机制。     

桑茎浸提液对α-葡萄糖苷酶活性的影响

[目的]探讨桑茎的降血糖活性,为研究桑树的降血糖活性奠定理论基础。[方法]用4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)法测定3种不同浓度的桑茎浸提液对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用,并用SPSS统计软件对测定结果进行显著性分析。[结果]10.326、0.653和103.264 mg/ml桑茎浸提液对α-葡萄糖苷酶活性的抑制率分别为1.03%、-2.40%和0,表明桑茎浸提液对α-葡萄糖苷酶的抑制率低,抑制作用不明显。利用SPSS软件进行的显著性分析结果显示,3种浓度的桑茎浸提液在400 nm处的最终吸光值不存在显著差异,说明不同浓度的桑茎浸提液对α-葡萄糖苷酶的抑制率不存在显著差异。[结论]桑茎浸提液对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用不显著。     

余甘子主要活性成分柯里拉京对 α-葡萄糖苷酶的抑制活性

前期从余甘子中分离鉴定了一系列对α-葡萄糖苷酶有较好抑制活性的没食子单宁成分,柯里拉京为其中的1个主要活性成分,本试验进一步对柯里拉京抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用机制进行了研究。采用体外微量96孔板α-葡萄糖苷酶-PNPG反应模型测定了柯里拉京对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,并进行了抑制动力学试验,以非线性拟合法分析了其对α-葡萄糖苷酶的抑制动力学参数,同时采用分子对接模型研究了柯里拉京与α-葡萄糖苷酶相互作用的机制。结果表明,柯里拉京对α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度IC_(50)为15.33μmol/L,显著低于阳性对照阿卡波糖的IC_(50)(79.88μmol/L);非线性拟合结果发现,柯里拉京对α-葡萄糖苷酶的抑制作用为混合型抑制;氢键是柯里拉京与α-葡萄糖苷酶之间相互结合的主要作用力。结果为柯里拉京作为降糖保健品或药品开发提供了理论依据。     

儿茶素EGCG对Caco-2细胞α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用研究

试验对Caco-2细胞膜上蔗糖酶和麦芽糖酶这两种α-葡萄糖苷酶活性进行不同培养时间检测,并以儿茶素单体EGCG作为抑制剂,探究其对Caco-2来源的蔗糖酶和麦芽糖酶的抑制效果。结果表明,Caco-2细胞培养18 d后膜表面具有较高活性的蔗糖酶和麦芽糖酶,可用于进行α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选。儿茶素EGCG具有蔗糖酶和麦芽糖酶抑制活性,抑制IC50分别为31.08μg/m L和36.44μg/m L。     

辣椒叶提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性

收集不同辣椒品种,采用对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside,pNPG)对辣椒叶70%乙醇提取物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性测定,并通过动物糖负荷试验研究辣椒叶提取物的降糖效果.结果表明:辣椒叶品系间对α-葡萄糖苷酶抑制活性差异显著;同辣椒果实提取物相比,辣椒叶提取物对α-葡萄糖苷酶抑制活性高达60%,是辣椒果实提取物的10倍左右;辣椒叶提取物对不同来源α-葡萄糖苷酶表达不同,对于动物来源的蔗糖酶和麦芽糖酶的抑制具有不同程度的表达,而对于微生物来源的酵母(Saccharomycescerevisiae)和嗜热芽孢杆菌(Bacillus stearothermophillus)的α-葡萄糖苷酶抑制均没有表达;动物糖负荷试验表明,辣椒叶提取物具有较强的降血糖活性.     

产纤维素酶渤海丝状真菌ZDTJ097-1-(7)的筛选及产酶研究

[目的]筛选产纤维素酶渤海丝状真菌ZDTJ097-1-(7),并对其产酶条件和活性进行分析研究。[方法]从渤海湾水域获得的25株丝状真菌中,通过刚果红鉴别法和纤维素酶活性的比较,筛选出1株高产纤维素酶的菌株,并在发酵培养基的基础上,通过改变氮源、培养温度、初始pH值、通气量和接种量等因素,以及不同的反应温度和pH值,以酶的活性为检测指标,探究不同培养条件及反应条件对酶活性的影响。[结果]菌种ZDTJ097-1-(7)在以CMC-Na为唯一碳源的培养基中,可诱导活性较强的滤纸酶、CMC酶和β-葡萄糖苷酶,且在0.5%CMC-Na、0.2%NH4NO3、pH 6.0、25℃条件下,产酶能力最强。酶的最适反应温度为60℃,最适pH值为6.0。[结论]为该菌的进一步开发应用提供了试验依据。     

嘉宝果果皮提取物体外降糖活性研究

[目的]研究嘉宝果果皮提取物的体外降糖活性,为嘉宝果果皮中降血糖成分的开发和利用提供参考依据.[方法]以阿卡波糖为对照,采用分光光度法测定嘉宝果果皮粗提物及其不同极性部位对α-葡萄糖苷酶和猪胰α-淀粉酶的抑制活性,并通过Lineweaver-Burk双倒数法分析各提取物的酶促动力学.[结果]果皮粗提物及其正丁醇部位、乙酸乙酯部位和水部位对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度(IC50)分别为0.005、0.029、0.020和0.242 mg/mL,均远低于阿卡波糖(IC50=11.201 mg/mL);Lineweaver-Burk双倒数作图显示,果皮粗提物及其正丁醇部位和乙酸乙酯部位对α-葡萄糖苷酶的抑制作用类型均为混合型抑制,水部位为竞争性抑制,阿卡波糖为非竞争性抑制.果皮粗提物及其正丁醇部位、乙酸乙酯部位和水部位对猪胰α-淀粉酶的IC50分别为0.242、0.686、1.426和33.315 mg/mL,均高于阿卡波糖(IC50=0.184 mg/mL);Lineweaver-Burk双倒数作图显示,果皮粗提物对猪胰α-淀粉酶的抑制作用类型为反竞争性抑制,阿卡波糖为混合型抑制.[结论]嘉宝果果皮粗提物及其各极性部位对α-葡萄糖苷酶的抑制活性均高于阿卡波糖,对猪胰α-淀粉酶的抑制活性均低于阿卡波糖,可在一定程度上选择性抑制α-葡萄糖苷酶,具有减少胃肠道不良反应的潜力,可用于天然降糖功能因子的开发.     

两粤黄檀体外抗氧化及α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

研究了两粤黄檀茎不同溶剂(95%乙醇、丙酮、乙酸乙酯)提取物的抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性。采用清除DPPH自由基、清除ABTS+自由基和铁离子(Fe2+)还原能力检测体外抗氧化活性;体外建立酶反应体系,以pNPG作为底物,检测其α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,两粤黄檀茎乙酸乙酯提取物具有优异的抗氧化能力及α-葡萄糖苷酶抑制活性,两粤黄檀茎乙酸乙酯提取物具有作为天然抗糖尿病药物研究和开发的潜力。     

凡纳滨对虾肠道益生菌的分离· 筛选· 鉴定

[目的]获得具有拮抗常见病原菌活性、消化酶活性且具有安全性的凡纳滨对虾肠道内源性益生菌。[方法]从健康凡纳滨对虾肠道中经过初步分离与纯化得到1 220株细菌,对分离的菌株进行拮抗试验,并对产蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶能力进行定量和定性研究。对筛选的13株细菌进行了溶血试验和药敏试验,以评价其生物安全性。[结果]共筛选出13株抑菌活性强、产酶能力强且产酶种类多的菌株,最终确定了2株候选益生菌。菌株的16 S rDNA分子鉴定及Biolog系统鉴定结果表明,细菌3号与霍氏肠杆菌(Enterobacter hormaechei strain WW2,JN993998.1)相似性达到98%,细菌6号与乳酸菌(Lactic acid bacterium ZJGS0109,KC748440.1)相似性达100%。[结论]研究结果为今后益生菌制剂的开发和应用奠定了基础。     

新疆沙枣树叶提取物对糖尿病小鼠血糖的影响

用溶剂提取法制备新疆沙枣树叶的提取物,得到沙枣树叶乙酸乙酯提取物、沙枣树叶正丁醇提取物和沙枣树叶水提取物;用体外α-葡萄糖苷酶抑制模型,对3种沙枣树叶提取物进行α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选,并与阳性对照药阿卡波糖进行比较。采用腹腔注射四氧嘧啶构建糖尿病动物模型,造模成功后,将糖尿病小鼠分为模型对照组、二甲双胍处理组、新疆沙枣树叶乙酸乙酯提取物和水提取物处理组,另设正常对照组。连续灌胃给药18 d,每天一次,采血测空腹血糖。结果表明,新疆沙枣树叶的3种提取物对α-葡萄糖苷酶的活性有较好的抑制作用,有2个提取物的抑制率明显高于阿卡波糖,其中新疆沙枣树叶乙酸乙酯提取物活性最强,在浓度为0.075 g/L时,其酶抑制率为76.62%。阿卡波糖及3种提取物对α-葡萄糖苷酶抑制作用的IC_(50)分别为阿卡波糖IC_(50)891.38 mg/L,沙枣树叶乙酸乙酯提取物IC_(50)9.28mg/L,沙枣树叶正丁醇提取物IC_(50)103.5 mg/L,沙枣树叶水提取物IC_(50)73.99 mg/L。结果显示,新疆沙枣树叶提取物对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的血糖有降低的作用,和对照组比较有显著差异(P0.05)。新疆沙枣树叶提取物能显著抑制α-葡萄糖苷酶活性,对糖尿病小鼠具有降糖作用。     

海南山竹果实不同部位多酚提取物抗氧化活性、乙酰胆碱酯酶和α- 葡萄糖苷酶抑制活性研究

了解海南山竹果皮和果肉的多酚含量及其抗氧化活性、乙酰胆碱酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性,为引导消费、开发利用奠定基础。以采自海南五指山的山竹果实为材料,用95%的乙醇提取山竹果皮和果肉多酚,采用福林-酚法测定总酚含量。对获得的山竹果皮和果肉多酚提取物进行羟自由基(·OH)、DPPH自由基、ABTS自由基清除率以及乙酰胆碱酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性测定。结果表明,山竹果皮多酚含量很高,达21.36mg/g(干重),对·OH、DPPH自由基和ABTS+·均具有良好的清除活性,且呈现浓度依赖性,IC50分别为37.39、41.34、41.37μg/mL;山竹果皮多酚对乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶也具有很强的抑制活性,且呈现浓度依赖性,IC50分别为29.46、7μg/mL;山竹果肉多酚含量较低,为0.388mg/g(干重),清除DPPH自由基、ABTS+·和·OH活性较弱,但表现出浓度依赖效应。山竹果肉多酚对α-葡萄糖苷酶具有中等程度的抑制活性(IC50为2.24mg/mL),对乙酰胆碱酯酶抑制活性较弱。山竹果皮多酚具有良好的抗氧化性、乙酰胆碱酯酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性;山竹果肉多酚具有中等程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性,一定的抗氧化性和乙酰胆碱酯酶抑制活性。     

番石榴叶具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的倍半萜杂二醛分离与鉴定

目的分离纯化番石榴叶乙酸乙酯萃取物,并对其抑制α-葡萄糖苷酶活性作用进行研究。方法采用硅胶、凝胶柱层析分离纯化,波谱法进行结构鉴定,比色法进行活性测定。结果分离得到三种倍半杂萜二醛,分别鉴定为psidials A,psiguadial A和guajadial;活性测试结果显示guajadial具有抑制α-葡萄糖苷酶活性,且显著优于阿卡波糖。结论首次报导guajadial为番石榴叶具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的成分。     

人工合成异源六倍体小麦β-葡萄糖苷酶活性的变化

[目的]研究小麦多倍化初期β-葡萄糖苷酶活性的变化。[方法]以生长17d的人工合成异源六倍体小麦(第五代)及其父本粗山羊草、母本硬粒小麦的叶片为材料,采用pNPG法测定β-葡萄糖苷酶的活性,采用分光光度法测定可溶性蛋白含量,进而研究了六倍体小麦多倍化初期β-葡萄糖苷酶活性的变化。[结果]二倍体父本TQ27中β-葡萄糖苷酶的比活力略高于四倍体母本TTR04,但差异不显著。人工合成六倍体小麦AT5中β-葡萄糖苷酶的比活力最低,与其父本TQ27、母本TTR04中β-葡萄糖苷酶比活力差异显著。TQ27、TTR04和AT5中β-葡萄糖苷酶的平均比活力分别为62.36、64.66和24.15U/(μg.h)。[结论]异源多倍化初期六倍体小麦的β-葡萄糖苷酶活性较其双亲显著降低。     

越南红土沉香的化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

综合运用硅胶、葡聚糖凝胶、高效液相色谱等多种色谱分离技术从越南红土沉香乙醇提取物中分离得到7个化合物,经过现代波谱学技术鉴定其结构为:(-)-aquisinenoneD (1),6,7-二羟基-2-[2-(4-甲氧基苯基)乙基]色酮 (2),6,8-二羟基-2-[2-(4-甲氧基苯基)乙基]色酮 (3),6-甲氧基-7-羟基-2-[2-(3-羟基-4-甲氧基苯基)乙基]色酮 (4),6-羟基-7-甲氧基-2-[2-(3-羟基-4-甲氧基苯基)乙基]色酮 (5),假虎刺酮 (6),nor-ketoagarofuran (7)。其中,化合物1为色酮聚合物,化合物2～5为2-(2-苯乙基)色酮类化合物,化合物6～7为倍半萜类化合物,所有化合物均为首次从越南红土沉香中分离得到。采用pNPG法对部分化合物的α-葡萄糖苷酶抑制活性进行筛选,结果表明:化合物3具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性,IC_(50)值为78.56±9.19μmol·L~(-1)。     

山茱萸不同部位提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

[目的]测定山茱萸果肉和果核提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,为山茱萸资源的药用开发提供参考。[方法]采用乙醇和水分别对山茱萸果肉和果核进行提取,并测定其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。[结果]山茱萸果核提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为20倍醇提99.23%、30倍醇提98.96%、40倍醇提99.29%、20倍水提99.36%、30倍水提99.32%、40倍水提99.17%。山茱萸果肉提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为20倍醇提52.10%、30倍醇提60.77%、40倍醇提21.67%、20倍水提11.88%、30倍水提0.53%、40倍水提1.59%。[结论]山茱萸不同部位的水提取物和乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶均有一定的抑制作用,其中山茱萸果核部位对α-葡萄糖苷酶的抑制作用最为显著,其抑制率可高达99%以上,可见山茱萸果核中含有丰富的抑制α-葡萄糖苷酶活性的物质,可作为药用资源予以开发利用。     

油梨和羊奶果果肉粗提物对α-葡萄糖苷酶的体外抑制

收集不同油梨和羊奶果资源,对油梨和羊奶果果肉粗提物进行α-葡萄糖苷酶的体外抑制活性实验。结果表明:16份油梨果肉对α-葡萄糖苷酶抑制活性较弱,而9份羊奶果果肉对α-葡萄糖苷酶抑制活性较强,其中羊奶果6号对α-葡萄糖苷酶抑制活性最强,达到99.84%,仅次于阿卡波糖。     

β-葡萄糖苷酶产生菌的选育及其性质研究

[目的]筛选β-葡萄糖苷酶高产菌株,确定产酶的最佳工艺条件。[方法]利用几种黑曲霉进行产β-葡萄糖苷酶的筛选,得到1株β-葡萄糖苷酶高产菌株黑曲霉3.316。通过单因素和正交试验,确定产酶的最佳工艺条件,研究不同碳源(麸皮、可溶性淀粉、豆粕和米糠)在相同碳源浓度(2%)及相同发酵条件下对β-葡萄糖苷酶活力的影响。[结果]β-葡萄糖苷酶高产菌株的最佳产酶工艺条件为:麸皮2%,蛋白胨0.1%,KH2PO40.1%,初始pH值6.0。测得酶活力为152.20 U/mg。β-葡萄糖苷酶酶学性质的测定结果表明,反应液浓度为0.1 mol/L醋酸缓冲液时酶活力最高,最佳反应温度为55℃,pH为5.0。[结论]不同碳源对产酶有较大影响,麸皮做碳源时产酶最高。     

柿叶提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

以干柿叶为试材,依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇溶剂萃取其醇提物,测定各组分对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并对活性抑制最强的组分进行动力学研究。结果表明:乙酸乙酯萃取物的酶活性抑制率最高,达到89.83%,其能在短时间内与酶快速结合,有较强的α-葡萄糖苷酶活性抑制能力,且显示为非竞争性抑制类型。     

高良姜提取物的降血糖活性

利用α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选对海南产高良姜的不同提取部位及其主要化学成分进行降血糖活性测试。结果表明,高良姜的根茎、花、果实和茎叶的乙醇提取物及其主要成分高良姜素、山奈素、异鼠李素和槲皮素对α-葡萄糖苷酶的抑制活性显著高于阳性对照药阿卡波糖。