青钱柳叶片、愈伤组织及悬浮细胞中齐墩果酸和熊果酸测定

建立高效液相色谱(HPLC)法测定青钱柳叶片、愈伤组织及悬浮细胞中齐墩果酸和熊果酸含量。考察齐墩果酸和熊果酸在不同色谱柱及流动相下的分离效果,并进行比较分析,确定色谱条件为:色谱柱Waters Sym-mitry C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.1%磷酸溶液(87∶13,V/V),流速0.85 mL/min,检测波长210 nm,柱温40℃。结果表明,齐墩果酸和熊果酸标品进样量在0.1～20μg时线性关系良好,相关系数R2均大于0.999,平均加样回收率分别为97.87%、96.91%,RSD为1.90%、2.08%,青钱柳叶片、愈伤组织、悬浮细胞中齐墩果酸、熊果酸的含量差异较大。该方法简便快速,准确可靠,可用于青钱柳齐墩果酸和熊果酸含量的测定。     

大孔树脂吸附纯化粗提玫瑰茄红色素研究

对大孔树脂吸附纯化玫瑰茄花萼粗提红色素的条件和方法进行了研究,结果表明:X-5树脂对玫瑰茄红色素具有较好的吸附性能;上柱液pH3.0、质量浓度5.63 mg/mL、流速2.0 mL/min、室温为优选工艺条件;φ=60%的乙醇为优选洗脱剂;经吸附纯化的色素,色价从5.1提高到了32.3;树脂经8次重复使用,吸附性能无明显减弱,可以循环使用。     

超声辅助提取青钱柳叶总三萜化合物研究

以青钱柳叶为原料,以乙醇为溶剂,超声辅助提取总三萜化合物。对提取液乙醇体积分数、料液比和提取时间3个主要因素进行单因素和正交优化实验,并对提取级数和正丁醇萃取次数进行探索。结果表明:体积分数为65%乙醇提取液、1:12料液比、30min提取时间为优化参数,优化条件下得率为9.19%;乙醇溶液2级提取和正丁醇2次等体积萃取,总三萜化合物提取较为完全。     

分光光度法测定青钱柳叶中总三萜皂甙含量

以分光光度法定量,优化香草醛-高氯酸法的显色条件:50 g/L香草醛-冰乙酸与高氯酸分别为0.3 mL和0.6 mL,80℃水浴10 min,测定波长550 nm。以人参皂甙Rb1为对照品,绘制标准曲线,回归方程m=0.162 7A 0.000 1,相关系数r=0.999 6。结果显示,分光光度法测定青钱柳叶中总三萜皂甙含量的精密度、加样回收率、稳定性试验RSD分别为2.28%、2.42%、1.99%。     

白背三七愈伤组织诱导及培养条件优化

以白背三七带芽嫩叶和茎段为外植体诱导愈伤组织,建立愈伤组织培养体系,并对主要培养条件进行了优化。结果表明:白背三七带芽嫩叶在MS培养基与1.0 mg/L KT+0.5 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA激素组合下能快速诱导出愈伤组织,最佳诱导时期为3月份。白背三七在B5培养基与0.5 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA激素组合下可获得疏松易碎、有金属光泽、生长旺盛的愈伤组织,呈平缓的"S"型生长曲线,接种后第18天生物量达到最大值19.54 g/瓶。     

青钱柳营养器官总黄酮含量测定及分布规律研究

对不同海拔、不同产地、不同生长月份的青钱柳营养器官中的总黄酮含量进行测定和分析,结果表明:青钱柳的根和茎总黄酮含量都随着海拔的升高呈先升后降之势,均以海拔690 m的含量最高,分别为67.818 4 mg/g、51.254 7 mg/g,叶中总黄酮含量随着海拔的升高呈锯齿形变化,以海拔915 m的含量最高,为46.930 2 mg/g,各营养器官总黄酮含量与海拔的相关性都不显著;不同产地青钱柳根、叶中总黄酮含量差异较大,其中产于靖安的含量最高,根、叶含量分别为59.816 2 mg/g、44.676 1 mg/g,产于修水的含量最低,根、叶含量分别为51.574 5 mg/g、33.721 4 mg/g,不同产地青钱柳茎中总黄酮含量差异不显著;同一植株不同月份青钱柳叶总黄酮含量差异较大,但未发现无明显的变化规律性,其中以7月份含量最高,达到49.347 mg/g.     

余甘子主要活性成分柯里拉京对 α-葡萄糖苷酶的抑制活性

前期从余甘子中分离鉴定了一系列对α-葡萄糖苷酶有较好抑制活性的没食子单宁成分,柯里拉京为其中的1个主要活性成分,本试验进一步对柯里拉京抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用机制进行了研究。采用体外微量96孔板α-葡萄糖苷酶-PNPG反应模型测定了柯里拉京对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,并进行了抑制动力学试验,以非线性拟合法分析了其对α-葡萄糖苷酶的抑制动力学参数,同时采用分子对接模型研究了柯里拉京与α-葡萄糖苷酶相互作用的机制。结果表明,柯里拉京对α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度IC_(50)为15.33μmol/L,显著低于阳性对照阿卡波糖的IC_(50)(79.88μmol/L);非线性拟合结果发现,柯里拉京对α-葡萄糖苷酶的抑制作用为混合型抑制;氢键是柯里拉京与α-葡萄糖苷酶之间相互结合的主要作用力。结果为柯里拉京作为降糖保健品或药品开发提供了理论依据。     

光皮木瓜总三萜化合物提取和含量测定

通过分光光度法定量,研究了光皮木瓜中总三萜化合物的乙醇浸提工艺。在单因素实验基础上采用L9(34)正交试验设计,考察了浸提时间、浸提温度、料液比等因素对光皮木瓜总三萜化合物提取率的影响。结果表明,在无水乙醇体系中浸提温度为80℃,浸提时间为3 h,料液比为1∶16时提取效果最好,总三萜化合物提取率为2.83%。     

几种理化因子对青钱柳悬浮细胞生长的影响

为了利用细胞悬浮培养技术生产青钱柳细胞及其代谢物质以解决青钱柳资源稀缺问题,采用单因素和正交试验优化青钱柳细胞悬浮培养条件。结果表明,在供试的WPM、MS、1/2MS、B5、N6、DKW、White7种培养基中,WPM、MS、B5均有利于悬浮细胞的生长;有利于悬浮细胞生长的碳源是果糖和蔗糖;2,4-D是影响青钱柳悬浮细胞生长的关键因子,对细胞生长影响极显著,最佳激素组合为0.4mg/L 2,4-D+0.4mg/LNAA+0.4mg/L KT+0.4mg/L 6-BA;通过L9(34)正交试验得出几种物理因子对悬浮细胞生长的影响效应排序为接种量>装液量>转速>pH,最佳条件组合为接种量80g/L、装液量40%、摇床转速115r/min、pH 5.0。     

青钱柳悬浮培养细胞三萜酸的分离及结构鉴定

通过大孔树脂吸附、硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶层析、半制备高效液相色谱及重结晶对青钱柳悬浮培养细胞三萜酸进行分离纯化,获得5个单体三萜酸,经高分离度快速液相-飞行时间质谱(RRLC-TOF/MS)、核磁共振氢谱(1H NMR)和核磁共振碳谱(13C NMR)等分析,分别被鉴定为2α-羟基齐墩果酸、2α-羟基熊果酸、白桦脂酸、齐墩果酸、熊果酸,其中2α-羟基齐墩果酸和白桦脂酸是首次在青钱柳中得到分离鉴定.