黑河猪核型、Ag－NOR_s及C－带研究

采用微量外周血淋巴细胞培养及银染，Ｃ－分带技术，对黑河猪的核型、银染核仁组成区（Ａｇ－ＮＯＲ_ｓ）及Ｃ－带进行了研究。结果表明，其二倍体细胞染色体组成为３８，ｘＹ（公）或３８，ＸＸ（母）；Ａｇ－ＮＯＲ，为１，２，３和４的频率分别为０．１４６１，０．６２ｌ６，０．１８５４和０．０４６９，平均有２．２１条染色体呈银染阳性，Ａｇ－ＮＯＲ_ｓ联会百分率为０．３３％。１３，１５～１８号染色体Ｃ－带多态性研究表明，１３，１５～１７号染色体同源染色体之间大一中型Ｃ－带居多，１８号中－中型，大一中型居多，１０，１６号染色体有插入Ｃ－带。     

地塞米松与肝素对HL－60细胞增值和生物大分子合成的影响

用地塞米松（Ｄｅｘ）和肝素（Ｈｅｐ）Ｉｃ６０及Ｉｃ５０低一个剂量，对ＨＬ－６０细胞增殖、生长曲线和分裂指数均有明显的抑制作用，联合应用时抑制作用显著增强；对ＤＮＡ和蛋白质合成抑制作用大于ＲＮＡ，联合应用抑制作用均显著增强，提示两药抑制ＨＬ－６０细胞增殖、分裂和生长可能与它们抑制ＤＮＡ和蛋白质合成有关，亦与抑制ＲＮＡ合成有一定关系。     

两种贝壳杉烷型二萜2D－NMR研究

本文介绍了两种贝壳杉烷型二萜（３α，１６α，１７－三羟基贝壳杉烷Ⅰ和３α，１６α－二羟基贝壳杉烷－１７－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖甙Ⅱ）的二维核磁共振光谱（２Ｄ－ＮＭＲ）分析，通过采用高分辨核磁共振光谱（ＤＥＰＴ，￣１Ｈ－￣１Ｈｃｏｓｙ，￣１Ｈ－￣（１３）Ｃｃｏｓｙ）使一些相互掩盖的核磁共振信号得以确定。     

间接Dot—ELISA检测EDS—76病毒抗原的研究

本研究成功地建立了间接酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）用于检测ＥＤＳ－７６病毒抗原的标准化程序。对纯化ＥＤＳ－７６病毒抗原的最低检出量为１ｎｇ／Ｄｏｔ,其敏感性约为ＨＡ的１５．６倍。ＥＤＳ－７６阳性鸡血清特异性阻断试验及交叉反应试验证明,该法对ＥＤＳ－７６病毒抗原的检测具有特异性。试验结果表明,间接Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ－７６病毒抗原,具有敏感性高、特异性强、重复性好、经济、方便、快速等优点,适合于大规模样本的检测。     

用双夹心法ELISA检测兔轮状病毒的研究

建立了检测兔轮状病毒抗原的夹心法ＥＬＩＳＡ（ＤＳ－ＥＬＩＳＡ）。用此法检测了６７份兔腹泻粪便样品和腹泻死亡兔肠内容物样品。轮状病毒（ＲＶ）阳性检出率（３１．３４％）明显高于双抗体夹心法ＥＬＳＡ（２５．３７％）和对流免疫电泳（１６．４１％）。经阻断试验和重复性试验，证明了ＤＳ－ＥＬＩＳＡ具有特异性强和重复性好等优点。     

应用RT-PCR和RFLP分析肾型鸡传染性支气管炎病毒基因型

对来自浙江省３个不同地区的肾型鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ－ＪＤ,ＤＱ,ＨＹ）和参考株Ｈ１２０,通过蛋白酶Ｋ－ＳＤＳ处理、酚－氯仿法抽提基因组ＲＮＡ,经ＲＴ－ＰＣＲ扩增得到了预期为１．７２ｋｂ的Ｓ１蛋白基因ｃＤＮＡ,用限制性内切酶ＨａｅⅢ,ＰｓｔＩ,Ｋｓｐ６３２１对Ｓ１基因ｃＤＮＡ进行ＲＦＬＰ分析。结果表明ＪＤ,ＤＱ,ＨＹ毒株的ＲＦＬＰ带型相同,但与经典的肾型ＩＢＶ代表株（即Ｔ株、Ｇｒａｙ株、Ｈｏ     

UV－B辐射对农垦58s某些生理特性和育性的影响

ＵＶ－Ｂ辐射对农垦５８ｓ某些生理特性和育性的影响李合生１）岳兵１）曾汉来１）戴秋杰２）（１）华中农业大学农学系，武汉４３００７０；２）江苏省农科院，南京２１００１４）ＥＦＦＥＣＴＯＦＵＶ－ＢＲＡＤＩＡＴＩＯＮＯＮＳＯＭＥＰＨＹＳＩＯＬＯＧＩＣＡＬＣＨ...     

CD58对猪PBMC分泌IL-2的作用

应用ＭＴＴ比色法,以Ｃ５７ＢＬ／６系小鼠脾细胞作为测定细胞,检测了ＳＲＢＣ和ＰＲＢＣ及自其表面提取的ＣＤ５８对猪ＰＢＭＣ分泌ＩＬ－２的作用,结果表明,上述ＲＢＣ和ＣＤ５８对ＰＨＡ－Ｐ诱导的猪ＰＢＭＣ分泌ＩＬ－２具有显著或极显著的协同作用（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）,单独作用也可引起猪ＲＢＭＣ分泌ＩＬ－２,其协同或单独诱导作用均具有剂量依赖性。同时证明来自猪和绵羊的ＲＢＣ及ＣＤ５８的上述作用间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。提出ＣＤ５８对猪ＰＢＭＣ的活化与特异性活化机制相似,依赖于ＩＬ－２基因点的激活。     

Dot－ELISA在鸡IBD免疫检测及诊断中的应用研究

利用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）细胞适应株在鸡胚ＣＥＦ单层培养物上增殖后经超速冷冻离心制备抗原，以国产ＮＣ膜为载体建立了检测与诊断鸡ＩＢＤ的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法。经与ＡＧＰ、ＶＮ、ＥＬＩＳＡ等方法进行比较，表明本方法灵敏，快速，简易，特异性强，重复性良好。对ＩＢＤ免疫抗体的检测结果表明，采用首次以ＩＢＤ弱毒苗与灭能油乳剂苗同时免疫、再次用油乳剂苗加强免疫的接种程序，可获得显著而持久的抗体水平；带母源抗体（ＭＡｂ）的雏鸡于２１日龄首次免疫，效果良好；带ＭＡｂ的鸡胚于１８日胚龄接种ＩＢＤ弱毒苗，雏鸡出壳后可在较长时间内获得良好的保护。     

5－Br－PADN双峰双波长法测定铁（Ⅲ）

研究５－Ｂｒ－ＰＡＤＮ与铁（Ⅲ）的显色反应，在ｐＨ９．０～９．４范围内，当有１０％ＳＤＳ存在时，铁（Ⅲ）与５－Ｂｒ－ＰＡＤＮ形成１：４的稳定配合物。λ＿（ｍａｘ）为５３４ｎｍ，ε为５．１３×１０￣４Ｌ·ｍｏｌ￣（－１）·ｃｍ￣（－１），铁（Ⅲ）浓度在０～１２．５×１０￣（－４）ｇ／Ｌ范围内符合Ｂｅｅｒ定律，用双峰双波长法测定茶叶中痕量铁（Ⅲ），结果满意。     

基于光谱信息的柑橘黄龙病无损检测及分级模型构建

柑橘黄龙病(Huanglongbing,HLB)是世界柑橘生产上最具毁灭性的病害,给果农和相关产业造成了巨大的损失.以柑橘叶片为载体,利用高光谱图像技术采集柑橘叶片表面的高光谱图像,用ENVI4.7进行图像处理,提取感兴趣区域(Region of Intest,ROI),统计感兴趣区域平均光谱数据,并进行相关植被植物的运算,最后通过PLS-DA(Partial Least Squares Discrimination Analysis)判别法进行鉴别并分类.结果表明:基于平均光谱值和植被指数的PLS-DA判别模型都能对健康、缺锌和HLB叶片进行鉴别.其中基于平均光谱值的PLS-DA模型鉴别健康柑橘叶片样品的灵敏度为100％,特异度为100％,准确度为100％;鉴别缺锌柑橘叶片样品的灵敏度为80.6％,特异度为91.7％,准确度为88.9％;鉴别HLB叶片的灵敏度为89.3％,特异度为88.3％,准确度为88.9％.基于植被指数的PLS-DA判别模型鉴别健康柑橘叶片样品的灵敏度为100％,特异度为100％,准确度为100％;鉴别缺锌柑橘叶片样品灵敏度为92.5％,特异度为89.3％,准确度为90.1％;鉴别HLB叶片的灵敏度为86.4％,特异度为95.3％,准确度为90.1％.识别正确率较高,说明利用高光谱进行柑橘黄龙病病情分类是可行的.     

冰冻切片免疫酶和免疫荧光技术快速检测REV抗原

以禽网状内皮组织增生病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)的单克隆抗体11B154作一抗,建立了在冰冻切片中快速检测REV的免疫酶(IHC)和免疫荧光技术(Mc-IFA)。运用两种技术对人工接种REV的肉种鸡和疑似REV田间病例的肝脏、脾脏、腺胃、心脏、骨髓等器官的组织进行了检测,并同病毒分离方法进行了敏感性和特异性的比较。结果表明:在人工接种的肉种鸡中,采用IHC、Mc-IFA和病毒分离方法结果一致,均为阳性;在送检的疑似RE的24份病料中,用IHC检测出阳性率51.7%(13/24),Mc-IFA检测出阳性率62.5%(15/24),其中13份存在交叉;病毒分离的阳性率为37.5%(9/24),阳性数包括在13份IHC阳性病料中。由此表明冰冻切片免疫酶和免疫荧光技术都可用于临床快速检测,其中免疫荧光可用于早期的粗检,而免疫酶可用于细胞内抗原定位。     

禽白血病病毒多重PCR检测法的建立及初步应用

根据GenBank中登录的禽白血病病毒A、B、J亚群的核苷酸序列设计合成了3对引物,各对引物可分别扩增出大小约为195、260、924bp的核苷酸片段;经优化建立禽白血病病毒多重PCR检测法,并进行其敏感性试验及对马立克病病毒(MDV)、火鸡疱疹病毒(HVT)、新城疫病毒(NDV)、传染性囊病病毒(IBDV)、传染性喉气管炎病毒(ILTV)、传染性支气管炎病毒(IBV)和DF-1细胞基因组的特异性试验;应用该方法对1 294份临床样品进行禽白血病病毒检测,对阳性检出样品抽样进行测序鉴定.结果表明:该方法的最小检出拷贝数为103,特异性试验均为阴性,检出临床样品中的核苷酸片段与参考毒株核苷酸序列的同源性达98%以上,符合率100%,具有良好的特异性、敏感性和符合率,可为禽白血病病毒感染的临床诊断及流行病学调查研究提供有效借鉴.     

检测猪繁殖与呼吸综合征病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立及初步应用

利用反转录PCR （RT-PCR）技术扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5基因部分片段,并克隆到pGEM-T Easy载体上,得到重组质粒作为荧光定量PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立PRRSV的荧光定量PCR检测方法。该方法检测灵敏度可达10拷贝/μL,与猪圆环病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪流感病毒和猪细小病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对16份临床疑似病料进行了检测,发现15份均为荧光定量PCR阳性,而常规RT-PCR只能检测出12份阳性。结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床PRRSV感染的早期诊断以及分子流行病学调查。     

猪瘟病毒4种检测方法的比较

应用病毒分离鉴定、荧光抗体法、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和夹心ELISA 4种方法,分别对23份猪瘟病料组织中的猪瘟病毒(CSFV)进行了检测,并比较4种检测方法的优缺点。结果显示,病毒分离鉴定法准确性较高,诊断比较容易,但存在试验步骤繁琐,所需时间长的缺点;荧光抗体检测法所需时间较短,但需要经验比较丰富人员来判定结果,且存在假阳性结果,特异性比较差;RT-PCR检测法具有快速、敏感等优点,特别是样品保存不理想时更有价值,利用套式PCR(nested-PCR)可以提高检测的特异性;夹心ELISA检测法具有快速、敏感等优点,但在样品保存不理想时会出现假阴性结果。     

GC/MS/MS在烟草生物碱分析中的应用研究

以烟草为分析对象,研究离子阱质谱在植物样品分析中的应用。结果表明,GC/MS/MS通过选择特定的先驱离子,具有很高的特异性,基本排除了样品中其它物质的干扰。6种烟草生物碱相对标准偏差为0.45%～4.52%;最低检出限达到0.33μg/g。     

北京地区家畜钩端螺旋体病优势菌型的研究——Ⅰ.部分场猪群钩端螺旋体病优势菌型的研究

共采集了145份猪血清,36份猪肾和31份猪尿。在145份猪血清中,用13群15型单价平板凝集有色抗原分别进行检查,波摩纳型抗原检出阳性反应27例,占18.62%,豕型抗原检出阳性反应6例,占4.13%;在67份猪肾和猪尿中,分离到波摩纳型钩端螺旋体5株,占7.46%,豕型1株,占1.49%。试验结果表明,血清学和病原学试验具有同型特异性。     

甜瓜枯萎病菌ELISA检测方法的初步建立

采用甜瓜枯萎病病菌菌丝蛋白作为抗原,制备该病菌菌丝蛋白的多克隆抗体,建立检测甜瓜枯萎病菌的间接ELISA检测方法。利用检测技术对田间病样和土壤中的病原菌含量进行了定性、定量检测,表现出方便、特异性强、灵敏度高的特点。可运用此方法对甜瓜枯萎病进行田间检测。     

Concanavalin A alters synaptic specificity between cultured Aplysia neurons

Factors that regulate synaptic specificity were investigated with Aplysia buccal and bag cell neurons in primary cell culture. In the presence of fetal calf serum electrical synapses are formed between buccal-buccal or bag-bag cell pairs, but not between buccal-bag cell pairs. Instead, buccal neurons make inhibitory chemical synapses on bag cells. However, in the presence of nanomolar concentrations of the lectin concanavalin A this pattern changes, such that more than 75 percent of buccal-bag pairs exhibit electrical synapses and the frequency of occurrence of buccal-bag chemical synapses is reduced. Such changes in synaptic specificity may be important in determining the types of synapses formed during neuronal development and neurite regeneration.     

单克隆抗体夹心ELISA试验检测鸡新城疫病毒抗原的研究

从10株抗鸡新城疫病毒(NDV)特异性单克隆抗体(MAbs) 中筛选出2株MAbs—M22和F23,分别用作包被抗体和酶标抗体而建立的MAbs—夹心ELISA试验,对提纯NDV的最小检出量为25ng/ml病毒蛋白.NDV鸡阳性血清对本试验的特异性阻断作用和与其他禽类病毒交叉反应的阴性结果,证明本试验对NDV的特异性。从临床疑为鸡新城疫的724只病鸡的口腔棉试样品中共检出阳性502只,其中200个样品与病毒分离试验结果完全一致,两者均查出阳性鸡176只。