茜草茎段组织培养灭菌方法研究

研究了不同灭菌剂(0.1%HgCl2、10%NaClO、10%H2O2)、不同灭菌时间、二步灭菌法对茜草不同年龄的茎段污染率和愈伤组织诱导率的影响.结果表明:75%酒精处理30 s+10%NaClO灭菌20 rain效果最好,污染率20%,愈伤组织诱导率为35%;二步灭菌法不适合于茜草茎段的灭菌;幼嫩茜草茎段愈伤组织诱...     

甜叶菊叶片灭菌方法的研究

为筛选出适宜甜叶菊叶片灭菌的条件,以甜叶菊叶片为外植体,通过统计污染率、枯死率和愈伤组织诱导率来评价灭菌效果,研究不同灭菌剂、灭菌时间对灭菌效果的影响。结果表明:单一灭菌剂的灭菌效果不好,以0.1%HgCl2灭菌5min的愈伤组织诱导率较高,为44.5%;75%酒精与其它灭菌剂组合的灭菌效果好于单一灭菌剂,以75%酒精与0.1%HgCl2组合最好,污染率和枯死率较低,愈伤组织诱导率较高,适宜甜叶菊叶片灭菌的组合为75%酒精4s+0.1%HgCl24min,愈伤组织诱导率达86.7%。     

长春花愈伤组织诱导研究

以长春花幼嫩顶芽与茎段为外植体，研究了不同灭菌剂及处理时间对外植体的灭菌效果及外植体材料对愈伤组织诱导的影响。结果表明，长春花顶芽为外植体，用75%酒精灭菌30 s+0.1%升汞灭菌300 s效果较好，此条件下外植体污染率为5.5%、褐变率为9.3%。愈伤组织诱导培养基以MS＋3.0 mg/L 6-BA ＋2.0 mg/L 2，4-D效果较好，诱导率可达86.6%。以长春花顶芽为外植体时产生愈伤组织的时间较旱，出愈率为92.6%，愈伤组织团块大、致密，表面有小疣突，预期有较好的不定芽分化能力。     

番茄温敏核不育系花药培养诱导愈伤组织的研究

[目的]探讨影响番茄温敏核不育系花药培养诱导愈伤组织的相关因子。[方法]研究不同灭菌处理、不同基本培养基、不同激素种类及浓度对番茄温敏核不育系花药培养诱导愈伤组织的影响。[结果]0．1％HgCl28min＋10％NaClO8min的灭菌处理效果最佳,菌污染率仅为1．95％,出愈率达71．73％;在MS、B5Miller3种基本培养基的比较试验中,以MS为基本培养基对花药愈伤组织的诱导效果最好;诱导愈伤组织的适宜浓度为2,4-D1mg／L、6-BA2mg／L、KT2mg／L。[结论]灭菌处理、基本培养基、激素种类及浓度可以影响番茄温敏核不育系花药培养诱导愈伤组织的效果。     

赫章县野生多星韭植物组织培养技术初探

为了保护和利用赫章县野生多星韭资源,试验以野生多星韭叶片作为外植体,进行了次氯酸钠不同浓度和不同灭菌时间对多星韭叶片灭菌效果的影响;以及叶片不同部位、不同NAA和6-BA浓度配比对多星韭叶片愈伤组织诱导的研究。结果表明,以野生多星韭叶片为外植体诱导愈伤组织时,5%次氯酸钠灭菌10min外植体污染率最低,为20.16%;以野生多星韭叶片基部为外植体时愈伤组织的诱导率最高,为65.34%;在野生多星韭叶片愈伤组织的诱导中,NAA与6-BA的最适配比为1.0mg/LNAA+1.0mg/L6-BA,愈伤组织的诱导率高达67.14%。     

黑麦草成熟胚离体培养技术研究

以黑麦草成熟胚为外植体材料,对外植体的灭菌、愈伤组织的诱导、继代及植株再生及其过程中部分影响因素进行了研究。结果表明:用75%酒精对外植体处理60 s后,用75%NaClO原溶液(有效氯为7%~10%)灭菌25~30 min,灭菌效果最佳。基本培养基类型、植物生长调节剂对愈伤组织诱导均有影响,采用MS为基本培养基,添加2,4-D浓度为2.0~3.0 mg/L,6-BA浓度为0.1 mg/L时最高诱导率达86.67%。     

紫苏不同外植体组培灭菌条件研究

分别以紫苏种子、子叶、下胚轴、叶片为外植体,采用不同酒精、升汞、NaClO灭菌时间进行处理,探讨不同处理对外植体污染和生长的影响以及不同外植体的最适灭菌条件。结果表明,不同酒精、升汞、NaClO灭菌时间对不同外植体的影响较明显,综合发芽率、污染率或愈伤组织的诱导和生长情况,紫苏种子较好的灭菌方法为：75％酒精20s＋0．1％升汞10min,污染率和发芽率分别为50％、36％;子叶、下胚轴较好的灭菌方法为：75％酒精20s＋0．1％升汞4min,其污染率和愈伤组织诱导率分别为：7％、8％和40％、36％;适于叶片灭菌的条件为：75％酒精30s＋0．1％升汞7min,其污染率和愈伤组织诱导率分别为10％、7％。该结果为紫苏再生体系的建立和快速繁殖技术研究奠定基础。     

胡萝卜愈伤组织诱导条件筛选

以17005和19501这2个胡萝卜品种为试验材料,研究种子灭菌条件以及基因型、外植体、培养基和激素对胡萝卜愈伤组织诱导的影响。结果表明,2个品种在无水乙醇灭菌30 s后再用20%H2O2溶液灭菌20 min,出苗率最高;2个品种均以下胚轴为外植体诱导的愈伤组织出愈率较高,其中,17005品种诱导率达到100%,19501品种诱导率也都在90%以上;在MS和B5培养基中同时添加2,4-D和6-BA诱导愈伤组织的效果要比只添加2,4-D的好,但相同激素条件下的MS和B5培养基诱导效果差异不显著。     

滇桂艾纳香的灭菌和愈伤组织诱导

对滇桂艾纳香的不同部位进行不同灭菌处理、不同基本培养基、不同激素种类及浓度的比较试验,结果表明:茎尖在8%NaCIO8' 0.1%HgCl28'的灭菌处理效果最好,菌污染率仅为3.48%;外植体不同部位的灭菌效果由好到差依次为茎尖、叶片、嫩茎、花苞、老茎;愈伤组织诱导率为茎尖＞嫩茎＞叶片＞花苞＞老茎;最佳基本培养基为MS,愈伤组织的诱导率达到86.67%;不同种类及浓度的激素处理,分别以6-BA1.0 mg/L、KT1.5 mg/L时较为适宜.     

雪莲果叶片愈伤组织的诱导

[目的]研究雪莲果叶片愈伤组织诱导的最佳灭菌方法和最佳培养基。[方法]以雪莲果叶片为外植体,用浓度0.1%升汞浸泡不同时间,筛选最佳灭菌方法;以MS为基本培养基,比较不同浓度生长调节物质对愈伤组织诱导的影响。[结果]用浓度0.1%升汞溶液灭菌8 min,外植体污染率为54.55%,死亡率为3.64%;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0~1.5 mg/L+NAA 0.5~1.0 mg/L。[结论]最佳灭菌方法为浓度0.1%升汞对叶片灭菌8 min;诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 1.0~1.5 mg/L+NAA 0.5~1.0 mg/L。     

咖啡胚性愈伤组织诱导研究

以咖啡叶片为外植体材料,开展了灭菌条件筛选、初级愈伤诱导及胚性愈伤诱导的研究。结果表明,1.5%次氯酸钠溶液灭菌30min结合采样前一周用农业杀菌剂处理采样植株为适宜的咖啡叶片外植体的灭菌条件;在细胞分裂素与生长素同时存在的条件下,不同配比激素处理均能诱导出初级愈伤组织,其中,1mg/L2,4-D+2mg/L6-BA处理诱导的初级愈伤组织紧实,水渍化比例较小,是较为适宜的初级愈伤诱导激素组合;相比KT,6-BA具有更好的胚性愈伤诱导效果,细胞分裂素与生长素比例在4∶1左右时,胚性愈伤诱导效率较高。本研究筛选出了咖啡胚性愈伤诱导的适宜条件,并对影响胚性愈伤诱导效率的相关因素进行了探讨,旨在为提高咖啡组培苗繁育效率及促进咖啡优良品种规模化推广应用提供技术支撑。     

野鸭椿组织培养的初步研究

以野鸭椿（Euscaphis japonica）茎段、叶片和根为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA进行愈伤组织诱导试验。通过对比试验,研究了不同外植体、灭菌剂及灭菌时间、激素对野鸭椿组织培养的影响。结果表明：对外植体灭菌用0.2%的升汞溶液,灭菌8min效果最好。以6-BA1.5mg/L＋NAA1.5mg/L的激素组合最有利于野鸭椿茎段愈伤组织的诱导,其诱导率最高,可达100%。     

拂子茅组培再生体系的建立

为建立拂子茅植株再生体系,以茎尖为外植体,对拂子茅花叶灭菌方式以及愈伤组织诱导和植株再生培养条件进行分析与筛选。结果表明:用75%乙醇灭菌30 s,再用0.1%升汞灭菌12 min,灭菌效果最佳,去污染率达到90%;在MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L的培养基上进行愈伤组织诱导,诱导率达33.4%;用MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L培养基诱导不定芽再生,诱导率最高、可达76.9%;用MS基本培养基诱导不定芽生根,生根率达到100%。     

野鸭椿组织培养的初步研究

以野鸭椿(Euscaphis japonica)茎段、叶片和根为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA进行愈伤组织诱导试验.通过对比试验,研究了不同外植体、灭菌剂及灭菌时间、激素对野鸭椿组织培养的影响.结果表明:对外植体灭菌用0.2%的升汞溶液,灭菌8 min效果最好.以6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.5mg/L的激素组合最有利于野鸭椿茎段愈伤组织的诱导,其诱导率最高,可达100%.     

垂枝侧柏离体再生体系建立初探

以垂枝侧柏[Platycladus orientalis (L) Francocv Pendula]当年生鳞叶茎段作为外植体,探索灭菌和愈伤组织诱导的最佳条件.结果表明,茎段经1 g/L HgCl2和7.5 g/L多菌灵组合处理8 min,灭菌效果最好,污染率仅为10.8％;愈伤组织诱导的最佳配方是1/2MS+BA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L.     

一串红高效离体再生体系研究

为建立一串红高效再生体系,研究了0.1% HgCl2不同灭菌时间对一串红种子和外植体污染率和启动率(发芽率)的影响,以及不同激素组合对一串红外植体茎段、带节茎段和叶片愈伤组织诱导率及其分化率的影响。结果表明：采用0.1% HgCl2处理9 min是一串红外植体较为理想的表面灭菌时间,而一串红种子处理8 min有较低的污染率和较高的发芽率;采用无菌苗的茎段和叶片能诱导出质量较好的愈伤组织,但其进一步分化产生不定芽的能力较差,而采用带节茎段诱导愈伤获得了较多的分化苗,且1.5 mg ·L-1 6-BA+1.0 mg·L-1 2,4-D+0.2 mg ·L-1 NAA配方适于一串红愈伤组织的诱导,2.0 mg ·L-16-BA+0.1 mg ·L-1 NAA组合是适宜一串红愈伤组织分化的激素配方。此外,含0.5 mg ·L-1 NAA的1/2MS固体培养基能使一串红分化苗生根率在90%以上,且移栽后一串红成活率可达80%以上。     

籼稻粤香占和木棉占再生体系建立的探讨

以籼稻粤香占和木棉占为材料,研究了影响愈伤诱导和再分化的一些因素。结果表明:2,4-D过滤灭菌的愈伤组织诱导率明显高于高温灭菌,约高20%;DL-丙氨酸不但可以提高愈伤组织诱导率,而且可以明显改善其质量,促进分化;在分化培养基中添加铜离子,两个品种的愈伤组织分化率分别为65%和45%,明显高于添加银离子、甘露醇和山梨醇等的分化率。     

石栗树腋芽外植体消毒方法的筛选

[目的]筛选石栗树腋芽外植体的消毒方法,解决石栗组织培养中大田外植体污染问题,提高石栗组织培养的成活率.[方法]设计3因子3水平的正交试验,3因子分别是自来水冲洗、0.1% HgCl2和10% NaClO3溶液;3水平是自来水冲洗时间分别为60、120、180 min,0.1% HgCl2溶液浸泡时间分别为0、8、16 min,10% NaClO3溶液浸泡时间分别为0、12、24 min.观察9种处理后石栗枝条表面消毒效果.[结果]自来水冲洗120 min,0.1% HgCl2溶液浸泡16 min,10%NaClO3溶液浸泡24 min,可使污染率降到最低,为16.67%,而诱导愈伤组织成功率达到80.00%.[结论]石栗外植体灭菌的最佳组合能在外植体的承受范围之内使污染率降低到16.67%;在低温干燥和树龄小的植株上取材,污染率较低.     

福鼎大白茶外植体选择及愈伤组织诱导条件初探

以茶叶品种福鼎大白茶为材料，进行了愈伤组织的诱导。在愈伤组织诱导培养过程中，着重考察了外植体灭菌方式、外植体的选择类型、培养基种类及pH对愈伤组织的诱导过程的影响。确立以福鼎大白茶树幼嫩茎段为外植体，在磁力搅拌形式下采用加75%的酒精灭菌和0.1%升汞方式灭菌处理效果良好。以MS培养基、pH5.8培养，是该愈伤组织生长的适宜条件。     

不同因素对油樟愈伤组织生长的影响

[目的]筛选油樟组培条件。[方法]以油樟带芽茎段为外植体,通过愈伤组织诱导率、污染率、褐变等指标研究无机盐、光照、抗生素等因素对愈伤组织生长影响。[结果]愈伤组织在2种培养基上均能明显增殖,且MS的培养效果好于1/2MS。由带芽茎段诱导的新生愈伤组织略带绿色。继代培养后,黑暗中诱导和培养的愈伤组织为淡黄色或白色,光照下培养的愈伤组织为褐色。愈伤组织诱导率和外植体污染率都随抗生素浓度的增加而降低,25～50mg/L的链霉素处理出愈率最高(60%～72%),污染率最低(0～15%),死亡率也最低(0)。在相同浓度下,使用链霉素外植体死亡率最低。[结论]MS培养基+25～50mg/L链霉素是油樟组培的最佳条件。