茜草茎段组织培养灭菌方法研究

研究了不同灭菌剂(0.1%HgCl2、10%NaClO、10%H2O2)、不同灭菌时间、二步灭菌法对茜草不同年龄的茎段污染率和愈伤组织诱导率的影响.结果表明:75%酒精处理30 s+10%NaClO灭菌20 rain效果最好,污染率20%,愈伤组织诱导率为35%;二步灭菌法不适合于茜草茎段的灭菌;幼嫩茜草茎段愈伤组织诱...     

植物生长调节剂对甘蓝型油菜愈伤组织诱导和生长的影响

利用植物组织培养方法,探讨甘蓝型油菜种子的最佳消毒方式以及叶片和茎段在附加不同质量浓度KT,6-BA,NAA,2,4-D的MS培养基中愈伤组织诱导的影响。结果表明,对于不同品种甘蓝型油菜种子采用2种消毒方式进行培养,污染率都较低。B1,B10,A5品种的第Ⅱ种消毒方式(75%酒精2 min+0.1%HgCl220 min)较好;B4品种的2种消毒方式(75%酒精2 min+0.1%HgCl2 20 min和75%酒精3 min+0.1%HgCl230 min)差别不大。B1,B4,B10,A5品种的甘蓝型油菜叶片和茎段愈伤组织诱导的结果表明,不同激素组合对叶片和茎段愈伤组织诱导及生长都有很大的影响,其中,MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基有利于愈伤组织诱导及生长。     

三尖杉愈伤组织诱导及其分化的初步研究

以三尖杉茎尖、嫩叶为外植体,应用正交设计法对愈伤组织诱导及其继代分化进行了研究。结果表明,不同外植体灭菌的难易程度相差较大,叶片较茎尖容易;叶片用体积分数为75%的酒精浸泡30-45 s,经体积分数为0.1%HgCl2溶液灭菌12 min,效果最好;茎尖则用体积分数为75%酒精浸泡1 min,经体积分数为0.1%HgCl2溶液灭菌12 min,效果较好;诱导叶片、茎尖愈伤组织的最佳培养基配方为MS+NAA 1.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1;愈伤组织在继代培养基上均能进行分化,其中结构紧密的茎尖愈伤组织在MS+6-BA3.0 mg.L-1培养基上继代培养能诱导分化形成不定芽。     

不同因素对香石竹初代培养的影响

研究了不同因素对香石竹初代培养的影响,结果表明：用75%酒精灭菌1min,再用0.1%HgCl2灭菌20 min后,香石竹外植体的成活率最高;以4号培养基对叶片进行愈伤组织诱导,其诱导率最高,达到了95%;以黄色香石竹叶片为外植体进行初代培养,诱导率最高,为88%。     

不同激素浓度组合对甜叶菊幼叶诱导愈伤和芽分化的影响

为提高甜叶菊的组织培养效率,以甜叶菊幼叶为外植体,研究75%消毒酒精和0.1%氯化汞的不同消毒时间组合对外植体的消毒效果;以及不同激素浓度组合对外植体愈伤组织的诱导和芽分化的影响。结果表明:甜叶菊幼叶外植体材料的最佳灭菌条件为75%消毒酒精30s,0.1%氯化汞2min;最佳诱导愈伤组织和分化芽培养基为MS+1.5mg·L~(-1) 6-BA+0.5mg·L~(-1) NAA,此时不定芽增长率为85.7%,外植体适宜的生根培养基为1/2 MS十0.2mg·L~(-1)IAA,生根率为88.6%。     

影响野生毛葡萄种子灭菌效果和发芽率的相关因子研究

以广西柳城县的野生毛葡萄种子作为外植体材料,研究单一灭菌剂、两种灭菌剂组合以及三种灭菌剂组合对种子灭菌效果及种子发芽率的影响,并比较常温无菌水(20℃)、无菌温水(40℃)和添加GA3(0.5mg/L,40℃)的预处理对种子发芽率的影响。试验结果表明:单一灭菌剂0.1%升汞的适宜灭菌时间为16min;两种灭菌剂组合的75%酒精适宜处理时间为30s;三种灭菌剂组合处理灭菌的效果优于两种灭菌剂组合和单一灭菌剂处理,以75%酒精30s+0.1%升汞16min+15%次氯酸钠5min为最佳灭菌组合,野生毛葡萄种子的污染率为16.67%,发芽率为61.67%。三种不同处理中,以GA3(0.5mg/L,40℃)处理的效果最佳,野生毛葡萄种子的发芽率为73.33%。     

滇桂艾纳香的灭菌和愈伤组织诱导

对滇桂艾纳香的不同部位进行不同灭菌处理、不同基本培养基、不同激素种类及浓度的比较试验,结果表明:茎尖在8%NaCIO8' 0.1%HgCl28'的灭菌处理效果最好,菌污染率仅为3.48%;外植体不同部位的灭菌效果由好到差依次为茎尖、叶片、嫩茎、花苞、老茎;愈伤组织诱导率为茎尖＞嫩茎＞叶片＞花苞＞老茎;最佳基本培养基为MS,愈伤组织的诱导率达到86.67%;不同种类及浓度的激素处理,分别以6-BA1.0 mg/L、KT1.5 mg/L时较为适宜.     

长春花愈伤组织诱导研究

以长春花幼嫩顶芽与茎段为外植体，研究了不同灭菌剂及处理时间对外植体的灭菌效果及外植体材料对愈伤组织诱导的影响。结果表明，长春花顶芽为外植体，用75%酒精灭菌30 s+0.1%升汞灭菌300 s效果较好，此条件下外植体污染率为5.5%、褐变率为9.3%。愈伤组织诱导培养基以MS＋3.0 mg/L 6-BA ＋2.0 mg/L 2，4-D效果较好，诱导率可达86.6%。以长春花顶芽为外植体时产生愈伤组织的时间较旱，出愈率为92.6%，愈伤组织团块大、致密，表面有小疣突，预期有较好的不定芽分化能力。     

紫苏不同外植体组培灭菌条件研究

分别以紫苏种子、子叶、下胚轴、叶片为外植体,采用不同酒精、升汞、NaClO灭菌时间进行处理,探讨不同处理对外植体污染和生长的影响以及不同外植体的最适灭菌条件。结果表明,不同酒精、升汞、NaClO灭菌时间对不同外植体的影响较明显,综合发芽率、污染率或愈伤组织的诱导和生长情况,紫苏种子较好的灭菌方法为：75％酒精20s＋0．1％升汞10min,污染率和发芽率分别为50％、36％;子叶、下胚轴较好的灭菌方法为：75％酒精20s＋0．1％升汞4min,其污染率和愈伤组织诱导率分别为：7％、8％和40％、36％;适于叶片灭菌的条件为：75％酒精30s＋0．1％升汞7min,其污染率和愈伤组织诱导率分别为10％、7％。该结果为紫苏再生体系的建立和快速繁殖技术研究奠定基础。     

不同灭菌方法对茜草组织培养污染率控制的研究

利用不同灭菌方法对茜草外植体进行处理,观测组织培养污染率、愈伤组织诱导率。实验表明:10%高锰酸钾溶液浸泡3分钟效果最佳,污染率30%,愈伤组织诱导率25%;75%酒精溶液灭菌10s处理效果较差,污染率60%,愈伤组织诱导率为10%。     

公农1号紫花苜蓿离体培养中最佳消毒方式和外植体种类的筛选研究

研究了不同消毒方式对公农1号紫花苜蓿种子接种培养基的侵染情况和子叶、叶片、胚轴等不同外植体对愈伤组织诱导率的影响。结果表明：在消毒前,种子经无菌水浸泡24 h（预处理）比不浸泡的消毒效果好,75%乙醇预处理后可大幅降低种子的带菌率,但预处理时间不宜过长;所用消毒剂中0.1%升汞消毒效果最好,种子带菌率为零,三种消毒剂中10%次氯酸钙—无菌水处理的紫花苜蓿种子发芽率最高;三种外植体均容易形成愈伤组织,经过综合比较,胚轴为公农1号紫花苜蓿品种离体培养的最佳外植体。     

省沽油组培过程中外植体灭菌技术的研究

[目的]寻求省沽油组织培养中适宜的外植体灭菌方法。[方法]研究了70%乙醇、0.1%HgCl2、0.1%HgCl2+70%乙醇组合在不同灭菌时间内对外植体生长的影响。[结果]适宜的外植体灭菌技术:茎尖用1%HgCl2+70%乙醇处理时间分别为5 min+50 s,成活率100%;茎段用1%HgCl2处理时间为15 m,成活率95%;幼叶用1%HgCl2处理时间为12 min,成活率85%。[结论]1%HgCl2+70%乙醇、1%HgCl2是省沽油外植体的有效灭菌剂。     

甜叶菊组培快繁技术研究

[目的]研究甜叶菊的组培快繁技术。[方法]以甜叶菊茎段为外植体,筛选其最佳外植体消毒条件、最佳不定芽增殖及壮苗生根培养基。[结果]甜叶菊外植体材料的灭菌最佳条件为75%酒精20 s,0.1%升汞5～8 min;最佳不定芽增殖培养基为MS+1.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L NAA,此时不定芽增殖率达80%;最佳壮苗生根培养基为1/2MS+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA。[结论]该研究为甜叶菊的工厂化规模生产提供了科学依据。     

一串红高效离体再生体系研究

为建立一串红高效再生体系,研究了0.1% HgCl2不同灭菌时间对一串红种子和外植体污染率和启动率(发芽率)的影响,以及不同激素组合对一串红外植体茎段、带节茎段和叶片愈伤组织诱导率及其分化率的影响。结果表明：采用0.1% HgCl2处理9 min是一串红外植体较为理想的表面灭菌时间,而一串红种子处理8 min有较低的污染率和较高的发芽率;采用无菌苗的茎段和叶片能诱导出质量较好的愈伤组织,但其进一步分化产生不定芽的能力较差,而采用带节茎段诱导愈伤获得了较多的分化苗,且1.5 mg ·L-1 6-BA+1.0 mg·L-1 2,4-D+0.2 mg ·L-1 NAA配方适于一串红愈伤组织的诱导,2.0 mg ·L-16-BA+0.1 mg ·L-1 NAA组合是适宜一串红愈伤组织分化的激素配方。此外,含0.5 mg ·L-1 NAA的1/2MS固体培养基能使一串红分化苗生根率在90%以上,且移栽后一串红成活率可达80%以上。     

红腺忍冬外植体灭菌与芽诱导研究

【目的】探讨影响红腺忍冬外植体消毒灭菌和芽诱导效果的因子,为开发红腺忍冬组培快繁技术提供依据。【方法】以红腺忍冬带腋芽茎段为外植体,按不同灭菌时间（10、12、14、16 min）、外植体取材季节（春、夏、秋、冬）、茎段直径大小（0.79、0.51、0.27 cm）和处理部位（未木质化、半木质化、完全木质化）分别进行腋芽诱导。【结果】以0.1%升汞加吐温灭菌14 min的外植体芽诱导率最高,为41.19%;未木质化茎段的芽诱导率最高,为41.36%;春季和秋季是比较理想的取材季节,外植体的芽诱导率分别为41.61%、39.42%;以平均直径为0.79 cm的茎段进行初代培养,芽诱导效果最好,诱导率为41.81%,芽平均高度为2.35 cm,平均叶片数为6.06张。【结论】选择未木质化、直径大小为0.79 cm左右的茎段,在春季和秋季取外植体,以0.1%升汞加吐温灭菌14 min,均可获得较理想的外植体芽诱导效果。     

菊花茎段组织快繁体系的建立

通过对菊花茎段采用不同的消毒处理,然后进行诱导、增殖和生根试验,建立了菊花离体快繁体系：消毒灭菌处理以70％酒精浸泡10s后,在0.1％升汞溶液中浸泡3min为最佳;带腋芽茎段诱导的最适宜培养基是MS＋6-BA2.0 mg·L-1＋ NAA0.1mg·L-1;腋芽增殖的最适宜培养基为MS＋6-BA2.0 ～3.0 mg·L-1＋NAA0.1mg·L-1;利用不带腋芽的茎段诱导愈伤组织的最适宜培养基是MS＋6-BA0.5mg·L-1＋ NAA0.5mg·L-1;愈伤组织再分化成丛生芽的最适宜培养基是MS＋6-BA2.0 mg·L-1＋ NAA0.1mg·L-1;诱导生根的适宜培养基为1/2MS＋ NAA0.5 mg·L-1;生根率为100％;试管苗移栽到疏松透气的蛭石＋珍珠岩＋园土（1：1：1）混合基质中,成活率可达98％.     

红腺忍冬外植体灭菌与芽诱导研究

【目的】探讨影响红腺忍冬外植体消毒灭菌和芽诱导效果的因子,为开发红腺忍冬组培快繁技术提供依据。【方法】以红腺忍冬带腋芽茎段为外植体,按不同灭菌时间（10、12、14、16min）、外植体取材季节（春、夏、秋、冬）、茎段直径大小（O．79、0．51、0．27cm）和处理部位（未木质化、半木质化、完全木质化）分别进行腋芽诱导。【结果】以0．1％升汞加吐温灭菌14min的外植体芽诱导率最高,为41．19％;未木质化茎段的芽诱导率最高,为41．36％;春季和秋季是比较理想的取材季节,外植体的芽诱导率分别为41．61％、39．42％;以平均直径为0．79cm的茎段进行初代培养,芽诱导效果最好,诱导率为41．81％,芽平均高度为2．35cm,平均叶片数为6．06张。【结论】选择未木质化、直径大小为0．79cm左右的茎段,在春季和秋季取外植体,以0．1％升汞加吐温灭菌14min,均可获得较理想的外植体芽诱导效果。     

马铃薯新品种桂农薯1号组培快繁研究

【目的】探索马铃薯新品种桂农薯1号组培快繁技术,为实现工厂化生产脱毒种薯提供技术支撑。【方法】采用茎尖培养脱毒法,以马铃薯顶芽为外植体,按不同灭菌时间进行单因子(3%NaClO和0.1%HgCl2)和双因子(75%酒精和0.1%HgCl2)消毒处理,再剥取0.3~0.7 mm茎尖接种到分别添加了不同浓度GA3、6-BA及6-BA和NAA的诱导培养基上诱导成苗。将诱导出的苗进行单腋芽切段快繁,并接种到添加有6-BA和PP333的单因子及双因子组合MS培养基中进行无菌苗继代增殖。【结果】75%酒精+0.1%HgCl2双因子灭菌较单因子3%NaClO和0.1%HgCl2效果好,污染率降至21.67%;茎尖诱导培养中,GA3和6-BA均能诱导茎尖萌芽,诱导趋势均先增后减,而以1.5 mg/L 6-BA和0.2 mg/L NAA配合,诱导率达53.67%;增殖壮苗阶段,0.1 mg/L PP333和2.5 mg/L 6-BA配合,增殖倍数达6.59倍,且苗长势好,茎粗壮、叶色正常。【结论】桂农薯1号外植体消毒最佳灭菌处理为:75%酒精2 min+0.1%HgCl211 min;最佳茎尖诱导配方为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;适合继代增殖壮苗培养基为:MS+2.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L PP333。     

玉竹初代培养最适条件的筛选

以玉竹[Polygonatum odoratum(Mill.)Druce]的叶片、茎段以及根茎作为外殖体,采用不同灭菌方式进行灭菌,在不同基本培养基上进行培养,添加不同种类生长调节剂,分析其最适的初代培养条件。结果表明,最适灭菌方法为75%乙醇处理10 s配合0.1%升汞处理7 min,其污染率为13.3%。根茎作为外殖体有较高的诱导率,达到90.0%;在培养中,最适宜初代培养的基本培养基为MS,其诱导率为86.7%;最适宜根茎分化的生长调节剂为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,其次为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA,其分化率分别为80%和62%。     

钟冠唇柱苣苔组织培养研究

为了筛选出适合钟冠唇柱苣苔[Chirita swinglei (Merr.) W.T.Wang]不定芽诱导、分化和生根的培养体系,以其嫩叶为材料,在不同培养条件下进行了组织培养研究.结果表明,用体积分数为75％的乙醇灭菌20 s,再用1g/L HgCl2浸泡7 min为最佳的外植体灭菌方法;MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L为不定芽诱导的最适培养基;MS+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L为不定芽分化的最适培养基;1/2MS+NAA 0.1 mg/L+活性炭1 g/L为最适的生根培养基.