砂梨品种‘满天红’及其芽变品系‘奥冠’花青苷合成与相关酶活性研究

【目的】研究红色砂梨花青苷合成与苯丙氨酸解氨酶（PAL）和查尔酮异构酶（CHI）活性的关系。【方法】以红色砂梨‘奥冠’及其亲本‘满天红’为试材,研究果实着色过程中果皮中花青苷含量和PAL、CHI酶活性的变化,以及套袋对花青苷合成和相关酶活性的影响。【结果】在果实着色过程中,‘奥冠’花青苷含量高于‘满天红’,两个品种花青苷变化趋势基本一致,呈现先升高后下降的趋势;两品种PAL活性总体变化趋势基本一致,都呈下降趋势,且‘奥冠’PAL酶活性总体低于‘满天红’;并且,两品种CHI酶活性呈现相似的变化趋势,总体呈上升趋势;同时,‘奥冠’CHI酶活性高于‘满天红’;套袋抑制了‘奥冠’CHI酶的活性,也抑制了花青苷的合成,但对PAL酶活性的影响不明显;解袋后CHI酶活性和花青苷含量迅速上升,均超过了对照。但解袋对‘奥冠’果实PAL酶活性的影响不明显;并且,套袋‘奥冠’花青苷含量在果实成熟时下降。【结论】红色砂梨花青苷含量在果实着色早期上升,接近果实商品成熟期下降。PAL不是红色砂梨花青苷合成的关键酶,CHI与着色期砂梨花青苷含量关系密切。解袋后,‘奥冠’通过提高CHI酶的活性促进花青苷的合成。套袋试验表明：砂梨花青苷果实成熟时的降解不单是由光诱发的。光是花青苷合成的必需因素,同时又促进花青苷的降解。     

温度对采后‘红富士’苹果果皮色泽、色素及其相关酶活性变化的影响

以‘红富士’苹果为试材,研究不同贮藏温度下‘红富士’苹果果皮色泽、色素含量及其相关酶活性的变化,为‘红富士’苹果的贮藏保鲜提供技术依据及理论参考。设定2种贮藏温度,为0℃与20℃,研究2种贮藏温度下‘红富士’苹果果皮色素花青苷、叶绿素、类胡萝素含量的变化及色泽指标(L、a/b)的变化,以及不同贮藏温度下花青苷合成相关酶(PAL、CHI、DFR、UFGT)活性及花青苷降解相关酶(PPO、POD)活性的变化。结果表明:①与20℃贮藏相比,0℃贮藏促进果皮花青苷的采后再合成并延缓花青苷采后降解;延缓果皮叶绿素的降解;抑制果皮类胡萝素的积累;延缓色泽指标(L、a/b)的下降。②在采后贮藏过程中,果皮的PAL和UFGT活性都呈先升高后下降的变化,CHI和DFR的活性都呈下降的变化趋势;花青苷的合成与果皮PAL和UFGT活性密切相关,而与果皮CHI和DFR的活性变化关系不大。③贮藏期间,‘红富士’苹果果皮PPO和POD活性都呈升高后下降的变化趋势,但低温推迟酶活性峰的时间;0℃下POD活性高峰显著高于20℃的,而两温度间PPO活性高峰差异不显著。在采后贮藏过程中,0℃低温贮藏延缓果皮色泽、色素含量的变化,可较好地保持‘红富士’苹果果皮外观品质。     

套袋对妃子笑荔枝果实着色的影响

１９９７,１９９８年在广东省荔枝科普基地矮化栽培荔枝园采用硫酸纸袋、无纺布袋、纱网袋、报纸袋、牛皮纸袋对妃子笑荔枝进行套袋处理,结果表明：硫酸纸袋、无纺布袋可以使果皮提前１０ｄ着色,通过影响花青苷、类黄酮、可溶性酚等酚类物质和叶绿素含量,不同程度地改善果皮色泽品质,促进了苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）活性;报纸袋、牛皮纸袋显著抑制果皮花青苷合成,抑制了苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）活性;纱网袋促 色效果不明显     

‘美人酥’和‘云红梨1号’红皮砂梨果实的着色生理

【目的】研究两个不同遗传背景的红皮砂梨品种在其着色过程中色素的变化与相关酶活性及糖积累的关系,旨在了解砂梨果实着色的一般规律。【方法】选择两个云南地区主栽的红皮砂梨品种‘美人酥’和‘云红梨1号’,系统研究果实整个生长发育过程果皮中花青苷、叶绿素、类胡萝卜素、类黄酮、总酚等色素含量和花青苷积累相关的酶活性,以及果肉中糖含量的变化。花青苷含量采用pH示差检测法测定,叶绿素、类胡萝卜素、类黄酮和总酚含量采用比色法测定。苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性采用比色法测定,类黄酮半乳糖苷转移酶(UFGT)活性采用高效液相色谱法测定。糖含量采用高效液相色谱法测定。【结果】在果实整个生长发育过程中,两个品种呈现了相似的生理变化趋势。果实生长前期,果皮中叶绿素、类胡萝卜素、类黄酮和总酚的含量不断上升,几乎没有花青苷的积累;果实生长中后期(花后13周)开始,叶绿素急剧降解,花青苷不断积聚并在成熟时达到最高值。在果实着色始期,PAL和UFGT活性相继达到最高值;之后随着花青苷的快速合成,PAL活性急剧下降,但UFGT活性一直保持在很高的水平。果实整个发育过程中可溶性总糖含量持续上升,其中蔗糖开始有明显积累的时期与花青苷开始大量积累的时期相吻合。【结论】红皮砂梨花青苷的合成积累主要是在果实生长发育后期,伴随着果实的成熟,花青苷含量达最大值。PAL与花青苷合成的启动有关,UFGT与花青苷的积聚密切相关。花青苷的积累伴随着果肉中可溶性总糖的上升。     

套袋和外源5-氨基乙酰丙酸处理对‘云红梨2号’果皮着色的影响

以‘云红梨2号’为试材,研究套袋、外源5-氨基乙酰丙酸(ALA)处理对果皮花色素苷含量、花色苷合成关键酶活性、可溶性总糖含量以及内源ALA含量变化的影响,并探讨果皮花色素苷含量与酶活性及可溶性总糖含量的关系。结果表明:在果实着色初期,套袋和外源ALA处理均有明显的促进果皮着色的效果,且两者共同处理促进作用更为显著;随着果实接近成熟,花色素苷含量有所下降。在正常光照情况下,果实摘袋后5 d左右对促进着色效果较好。相关性分析表明,套袋处理的果皮花色素苷含量与苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性显著相关;不同处理及对照果皮花色素苷含量均与类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶(UFGT)活性显著相关,但与果实可溶性总糖含量无显著相关性。     

套袋对巨峰葡萄果实色素形成及PPO和PAL活性的影响

以巨峰葡萄为试材,研究了套袋对葡萄果皮色素形成及PPO、PAL活性的影响.结果表明:套袋处理总体上降低了葡萄果皮叶绿素、类胡萝卜素、花青苷、类黄酮、总酚的含量及PPO、PAL活性;类黄酮、总酚、PPO含量的变化与花青苷含量的变化具有显著或极显著的相关性,套袋处理可以降低部分指标间的相关系数;葡萄果皮花青苷含量与果皮PA...     

苹果黄绿品种着色规律的研究

以8年生苹果品种(王林、陆奥和宫滕富士)的果实为试材,采用套袋处理对黄绿品种的果实着色规律进行了研究,并采用纸层析技术分析了着色果皮的色素种类。结果表明苹果的黄色和绿色品种具有合成花青苷的潜能,经套袋处理,着色潜能就能发挥出来,果皮可以由非红转变为红色。摘袋后,富士套袋果的花青苷含量迅速上升,经6　d即达到非套袋果水平;而黄绿品种套袋果的花青苷合成对光反应迟钝,在摘袋后16　d才开始增加。黄绿品种果皮形成红色是由于花青苷合成的增加;而套袋处理改善红色品种着色,并非由于提高花青苷含量。着色的黄绿品种果皮上的色素种类与正常红色品种果皮的大致相同。     

亚硒酸钠促进大豆芽苗菜下胚轴花青苷合成的机制

[目的]本文旨在探究亚硒酸钠(Na_2SeO_3)对大豆芽苗菜下胚轴中花青苷合成的作用及机制。[方法]以大豆芽苗菜(品种:‘东农690’)为试验材料,处理组为8μmol·L~(-1) Na_2SeO_3根施培养的大豆芽苗菜,对照组为不加Na_2SeO_3的1/4 Hoagland培养液根施培养的大豆芽苗菜。采用酶标仪测定光照0、12、18、24和36 h时,大豆芽苗下胚轴花青苷总含量、H_2O_2、MDA、■含量和花青苷合成过程中关键酶(PAL、CHI、CHS、DFR、UFGT)活性,采用超高效液相色谱串联质谱法测定主要单体含量,利用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)测定花青苷合成的结构基因(PAL、4CL、C4H、CHS、CHI、F3H、F3′H、DFR、ANS、UFGT)以及转录因子(MYB75)的相对表达水平。[结果]Na_2SeO_3处理组花青苷总含量和单体(除天竺葵素-3-O葡萄糖苷)含量显著高于对照组。H_2O_2、MDA、■含量随时间的变化趋势与花青苷总含量的变化趋势不一致。光照18 h时,对照组和Na_2SeO_3处理组中H_2O_2、MDA含量较高,分别是对照组的2.11和1.05倍。但花青苷总含量在光照12 h时已显著增加,约是对照组的1.72倍;光照18、24和36 h时,Na_2SeO_3处理组的H_2O_2、MDA、■含量显著高于对照组。Na_2SeO_3处理组花青苷合成的关键酶活性与关键基因的相对表达水平均显著高于对照组。[结论]与对照组相比,8μmol·L~(-1) Na_2SeO_3处理组的大豆芽苗菜光照36 h,苯丙烷类代谢途径中花青苷合成的关键酶含量、关键结构基因和转录因子表达量均提高,下胚轴花青苷总含量提高了61.86%。     

UV-A诱导大豆芽苗菜下胚轴中花青苷积累的分子机理

【目的】研究长波紫外光（UV-A）、白光（W）和蓝光（B）对大豆芽苗菜下胚轴中花青苷含量、花青苷合成相关酶活性、花青苷合成途径相关基因及光受体基因表达量的影响,以探明UV-A诱导大豆芽苗菜下胚轴中花青苷生物合成的分子机理,为光质调控技术应用于大豆芽苗菜工业化生产提供理论依据。【方法】以大豆‘东农690’为试材,以黑暗培养为对照,连续的UV-A、白光（W）和蓝光（B）光照培养作为试验处理,在处理0 h、12 h、24 h和36 h后各采样一次,分别测定花青苷含量,苯丙氨酸解氨酶（PAL）、查尔酮异构酶（CHI）以及类黄酮半乳糖苷转移酶（UFGT）活性,相关基因（PAL、CHS、CHI、DFR、ANS、UFGT、MYB75、CRY1、CRY2、UVR8）表达量。花青苷含量采用分光光度法测定,苯丙氨酸解氨酶（PAL）及查尔酮异构酶（CHI）活性采用分光光度法测定,类黄酮半乳糖苷转移酶（UFGT）活性采用超高效液相色谱法（UPLC）测定。材料总RNA采用Trizol试剂法提取,基因表达量采用qRT-PCR测定。【结果】黑暗培养下的大豆芽苗菜子叶为黄色,而白光（W）、蓝光（B）和UV-A培养下的大豆芽苗菜子叶为绿色。与黑暗培养及其他光质处理相比,UV-A显著提高大豆芽苗菜下胚轴中花青苷含量;随着处理时间的延长,花青苷积累逐渐增加。0 h处理下,大豆芽苗菜下胚轴中花青苷含量较低,约2 U·g^-1FW。经36 h的UV-A处理,大豆芽苗菜下胚轴中花青苷含量达到最大值（43 U·g^-1FW）,显著高于黑暗及其他光照处理。0 h处理下,PAL和CHI酶活性较高。与黑暗培养及其他光质处理相比,24 h及36 h UV-A处理显著提高了PAL酶活性;12 h及24 h UV-A处理显著提高了UFGT酶活性。0 h处理下,不同处理间的花青苷合成相关基因表达均无差异。与黑暗培养及其他光质处理相比, UV-A处理36 h显著上调了MYB75、CRY1、CRY2及UVR8的表达,分别上调约12倍、30倍、6倍和2倍;UV-A处理12 h显著上调了花青苷合成相关结构基因（PAL、CHS、CHI、DFR、ANS、UFGT）的表达,分别上调约5倍、58倍、10倍、6倍、44倍和47倍。【结论】UV-A通过提高PAL、UFGT酶活性及上调花青苷合成和光受体相关基因的表达,诱导了大豆芽苗菜下胚轴中花青苷的积累。     

套袋对荔枝果皮中的色素、酚类物质

抑制酚类物质合成的牛皮纸袋处理去袋后，导致了荔枝（Litchi chinensis Sonn.)果皮ABA含量明显升高，相伴随的是果皮酚类物质合成加速，果实迅速上色，IAA、iPAs含量也上升，且超过对照果，而GA1／3含量相对较低，促进着色的无纺布袋去袋后，激素变化与牛皮纸袋去袋后呈现相反的变化规律，与2种类型的套袋处理去袋后酚类物质代谢呈相反的变化规律相一致，ABA是调节荔枝果皮青苷合成的关键因素，iPAs和GA1／3都参与荔枝果皮花青苷的合成，调节荔枝果皮色素的形成是多种激素综合作用的结果。     

Relationship Between Anthocyanin Biosynthesis and Related Enzymes Activity in Pyrus pyrifolia Mantianhong and Its Bud Sports Aoguan

The aim of this article is to study the relationship between biosynthesis of anthocyanin and activities of phenylalanine ammonia lyase （PAL）, chalcone ismoerase （CHI） enzymes in Pyrus pyrifolia. Changes in the level of anthocyanin and the activities of enzymes of anthocyanin biosynthesis including PAL, CHI were studied in the pericarp of Pyrus pyrifolia Aoguan and Mantianhong during the period of pigment formation. Bagging treatment was also carried out to manipulate the synthesis of anthocyanin and the activities of related enzymes during the period of pigment formation. The results demonstrated that the level of anthocyanin of Aoguan was higher than that of Mantianhong. However, the content of anthocyanins has the similar changing trend in Aoguan and Mantianhong, highest anthocyanin concentrations of two varieties appeared in immature fruit and faded toward harvest. Meanwhile, similar changing trends of activities of PAL and CHI were also observed in both varieties. Aoguan has a lower activity of PAL than Mantianhong, whereas activity of CHI in Aoguan was higher than that in Mantianhong. Activity of PAL decreased during the period of pigment formation and was apparently not limiting to color development, whereas CHI activity increased at the same period and was closely related to the synthesis of anthocyanin. The results of bagging treatment showed that bagging treatment inhibited the activity of CHI, as well as the synthesis of anthocyanin, whereas debagging enhanced both the activity of CHI and synthesis of anthocyanin. The activity of CHI in debagging Aoguan pericarp was higher than the untreated Aoguan. However, effect of bagging treatment toward PAL activity was not obvious. Anthocyanin of bagging treated Aoguan decreased toward harvest. The content of anthocyanin of Pyruspyrifolia increased at the beginning of fruit coloration period and decreased toward fruit harvest. Activity of PAL was apparently not limiting to color development, whereas CHI activity was closely related to the synthesis of ant     

荔枝果皮中4种酚类代谢酶活性的测定方法

为了改进酚类物质生物合成途径中关键酶酶活性的测定方法,以南方重要常绿果树荔枝 Litchi chinensis 果皮为材料,采用两点法和酶动力法2种酶活性研究方法,结合分光光度法和高效液相色谱法检测产物浓度变化,优化了4种酚类代谢常见酶［包括苯丙氨酸解氨酶(PAL)、查儿酮异构酶(CHI)、二氢黄酮醇还原酶(DFR)和类黄酮糖基转移酶(UFGT)］的测定方法,指出了酶液的纯化、酶活性的保护以及反应底物的溶解方法等对试验结果的稳定性和可靠性的影响,介绍了试验过程中常遇到的问题和具体的解决方法以及试验过程中的注意事项.应用改进后的方法测定荔枝发育过程中果皮PAL、CHI、DFR和UFGT的酶活性,结果发现活性变化趋势与前人的报道基本一致.改进的PAL、CHI、DFR和UFGT酶活性的测定方法可靠,可为相关的研究提供重要的参考.     

妃子笑荔枝果皮花色苷合成的相关因素分析

以妃子笑荔枝为试材，研究了主要内部相关因素对果皮色苷合成的影响，结果表明：果皮转色前，可溶性糖和花色苷同步快速上升，糖的合成与花色苷的合成有重要的相关性，还不足以证明PAL是花色苷合成的关键酶；果实商品成熟期果皮pH值的增加不利于花色苷红色的表现，pH值对花色苷合成的影响比较复杂，还有待进一步的研究。     

贮藏荔枝果皮多酚氧化酶及过氧化物酶与褐变的研究

以“淮枝”的材料,着重研究了分析了荔枝（ＬｉｃｈｉｃｈｉｎｅｎｓｉｓＳｏｍ）贮藏过程中果皮多酚氧化酶及过氧化物酶的活性及其同工酶谱的变化,结果发现,荔枝果皮多酚氧化酶（ＰＰ）和过氧化物酶（ＰＯＤ）均具有游离态和结合态两种形式,它们在果皮褐变过程中活性的变化规律有所差别,随着果皮的褐变,ＰＰＯ和ＰＯＤ均有新的同工酶带出现,新酶带与酶活性的变化和果皮褐变程度有关。     

荔枝果皮叶绿素、类胡萝卜素、花色苷的形成规律及对果色的影响

荔枝果色的形成是多种色素共同作用的结果,不同的荔枝品种果皮色素的变化规格各不相同,。妃子笑着色较差的一个重要原因是因其果皮叶绿素含量过高,妨碍了花色苷红色的表现,糯米糍果皮叶绿素的降解为红色的显现提供了有利条件。     

紫娘喜和小丁香荔枝果实的低温耐藏性及几个生理指标的比较

研究了在(5±1)℃贮藏条件下海南特色荔枝品种紫娘喜和小丁香果实的贮藏效果及某些与耐贮藏性相关的生理指标。结果表明:紫娘喜明显比小丁香耐贮藏;在低温处理条件下,随着时间的增加,两品种的果皮的相对电导率、匀浆pH值、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)的活性均有不同程度的上升,在相同时间内小丁香果皮的相对电导率、匀浆pH、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)的活性的值均比紫娘喜大;而花色素苷和总酚含量随着时间的增加有下降的趋势,但总酚含量以紫娘喜为高,而花色素苷则以小丁香含量为高。     

光质在血橙果皮花色苷合成中的调控作用

【目的】探明光质在血橙果皮花色苷合成中的调控作用,为精确解答生产中血橙果面花色苷着色规律和研发血橙提质增效方法提供科学依据。【方法】对血橙果实进行遮光处理,采用可见光(390~780 nm)、紫外+可见光(300~780 nm)、长波紫外线(365 nm)和中波紫外线(311 nm)在果实转色期间照射,以不作照射的遮光果实为对照,动态测定各处理血橙果皮中总花色苷和可溶性糖含量,使用实时荧光定量PCR测定果皮中7个花色苷合成相关基因的动态表达情况。【结果】血橙转色期间,遮光条件下经对照、可见光和长波紫外线照射的果实,其果面均无花色苷着色;紫外+可见光和中波紫外线照射果实,其果面在照射46 d时均呈现花色苷着色,果皮花色苷含量分别为1.78和1.75 mg/kg,照射61 d时,果皮花色苷含量分别为8.78和6.15 mg/kg。试验期间,对照和各补光处理的血橙果皮中果糖和葡萄糖含量持续累积,尤其在紫外+可见光、长波紫外线和中波紫外线光质照射下,果皮果糖和葡萄糖含量明显高于可见光处理。转色期间,血橙果皮中7个花色苷合成相关基因(4CL、CHS、DFR、ANS、UFGT、GST和Ruby)在不同补光条件下的表达量均呈增长趋势,尤其在紫外+可见光和中波紫外线照射果实中,上述7个基因在各采样期的表达均明显高于同期其他处理,补光61 d时果皮中7个基因的表达量分别比同期其余处理至少高2.42和2.76倍、26.46和23.91倍、46.68和44.24倍、10.94和9.70倍、2.09和2.09倍、42.84和36.28倍、5.58和4.99倍。【结论】中波紫外线是诱导血橙果皮花色苷合成的真正光质,血橙转色过程中,其激发果皮中花色苷合成相关基因的大量表达,促进果糖、葡萄糖的快速积累,最终促成花色苷在果皮中的快速合成。     

2种套袋方式对‘鸡嘴荔’果实若干品质指标的影响

以不套袋为对照,研究单果套袋和整穗套袋对鸡嘴荔果实若干品质的影响。结果表明,单果套袋在改善鸡嘴荔果皮色泽,促进提前转色,增加单果重和果个大小方面均优于整穗套袋和不套袋,而在果实内在品质方面,除显著性增加可溶性固形物含量外,单果套袋却增加了采收期果实可滴定酸含量,降低了可溶性糖含量和维生素C含量,但与其他处理并无显著性差异。