核桃青皮提取物对4种植物枯萎病菌的抑菌作用研究

为了研究核桃青皮提取物对4种植物枯萎病菌的抑菌作用,笔者采用甲醇、氯仿、石油醚对核桃青皮进行提取,并对抑菌活性最高的提取物(甲醇提取物)进行初步萃取分离,测定了不同溶剂粗提物和甲醇提取物不同溶剂萃取液对茄子枯萎病菌、黄瓜枯萎病菌、辣椒枯萎病菌和西瓜枯萎病菌的抑菌活性。结果表明,核桃青皮甲醇粗提液对4种供试枯萎病菌的抑制效果最好,浓度为4.0mg/mL时,对黄瓜、茄子、辣椒枯萎病菌的抑制率均在60%以上,对西瓜枯萎病菌也为37.9%;核桃青皮甲醇提取物石油醚萃取物对西瓜枯萎病菌的抑制效果最好,抑制率为65%,对菌丝生长的EC50为4.45mg/mL;氯仿萃取物对黄瓜、茄子枯萎病菌的抑制率最高,分别为65%、62.3%,对菌丝生长的EC50分别为4.46、3.51mg/mL;甲醇萃取物对辣椒枯萎病菌的抑制效果较好,抑制率为63.94%,对菌丝生长的EC50为4.23mg/mL。     

核桃青皮提取物对6种植物病原真菌的抑菌活性研究

采用5种溶剂对核桃青皮进行平行提取和液—液萃取。以苹果轮纹病菌、苹果腐烂病菌、桃褐腐病菌、苹果斑点落叶病菌、茄子枯萎病菌、小麦赤霉病菌6种病原真菌为靶标,对核桃青皮不同溶剂提取液进行抑菌活性测定。结果表明,核桃青皮水提取液对供试的6种病原真菌抑制效果最好,抑制率达到96%以上,石油醚提取液对供试的6种病原真菌抑制效果最差;核桃青皮甲醇提取物氯仿萃取物对桃褐腐病菌的抑制效果最好,抑制率为71.54%,乙酸乙酯萃取物对小麦赤霉病菌的抑制效果最差,抑制率仅为18.32%。     

旋覆花花序不同溶剂萃取物对植物病原真菌的抑菌活性

为明确旋覆花的农用杀菌活性,采用液-液分配法对旋覆花乙醇提取浸膏进行萃取分离,并采用离体法和活体组织法测定不同溶剂萃取物对13种植物病原真菌的抑菌活性.结果表明:石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇的萃取率分别为34.89%、8.99%、8.63%和22.72%;在1.0mg·mL-1剂量下,氯仿萃取物对各供试菌菌丝生长均有较强的抑制作用,其中对辣椒疫霉病菌和油菜菌核病菌菌丝生长抑制率分别达73.77%和66.25%,乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物对辣椒疫霉病菌和油菜菌核病菌菌丝生长也有较好的抑制活性,抑制率分别达67.69%、62.12%和56.07%、51.75%,石油醚萃取物对番茄灰霉病菌菌丝生长抑制率为58.70%;在1.0mg·mL-1剂量下,除苹果斑点落叶病菌外,氯仿萃取物可显著抑制麦冬炭疽病菌、棉花枯萎病菌、板栗炭疽病菌、玉米青枯病菌和辣椒枯萎病菌的孢子萌发,抑制率分别达96.00%、92.44%、80.43%、78.45%和71.84%,乙酸乙酯萃取物对各供试菌孢子萌发抑制率在40.86%～86.42%之间,石油醚萃取物对棉花枯萎病菌孢子萌发抑制率达82.52%;果实针刺法测定结果表明,在2.0mg·mL-1剂量下,氯仿萃取物对番茄灰霉病的治疗效果和保护效果分别为57.65%和50.60%(6d),其中治疗效果与对照药剂0.4mg·mL-1施佳乐无显著差异.     

骆驼蓬醇提物抑菌活性的初步研究

采用抑制菌丝生长法和毒力测定法,研究了骆驼蓬地上部醇提物的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水5个极性部位对南瓜枯萎病菌(Fusariumbulbigenum)、西瓜枯萎病菌(Fusariumoxysporumf.niveum)、辣椒疫霉病菌(Phytohthoracapsici)、苹果腐烂病菌(Valsamali)和番茄早疫病菌(Alternariasolani)等5种常见植物病原菌的抑制作用。结果表明,氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分对供试植物病原菌均有抑制作用。其中氯仿部分的抑菌效果较好,当质量浓度为15mg/mL时,其对5种植物病原菌的抑制率均在83%以上;15mg/mL乙酸乙酯部分和正丁醇部分分别对番茄早疫病菌和苹果腐烂病菌有强烈且稳定的抑制作用,抑制率达100.00%,正丁醇部分对这两种菌丝生长抑制毒力最好,EC50分别为0.090和0.279mg/mL。     

Evaluation on antifungal activity of different polar fractions of Enphorbia lunulata Bag obtained from Northwestern Hubei

[目的]探讨鄂西北产猫眼草对3种常见蔬菜病原真菌菌丝生长及孢子萌发的影响,以期为新型植物源杀菌剂开发提供一定的理论依据.[方法]以乙醇、甲醇、乙酸乙酯、氯仿4种有机溶剂依次对猫眼草全草进行浸提获得的提取物,分别采用生长速率法和孢子萌发法测定不同极性部位提取物对黄瓜枯萎病菌、大白菜灰霉病菌和辣椒白绢病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制活性.[结果]除甲醇部对大白菜灰霉病菌、辣椒白绢病菌菌丝生长抑制作用较弱外,其他不同极性部位提取物均对3种病原真菌菌丝生长表现出明显的抑制活性,且抑制作用均随着提取物浓度的升高而增强,其中氯仿部对黄瓜枯萎病菌菌丝的抑制效果最好,EC5o为0.007 g/mL,乙酸乙酯部对大白菜灰霉病菌和辣椒白绢病菌菌丝的抑制效果最好,EC50分别为0.008和0.011 g/mL.猫眼草不同极性部位提取物对3种病原真菌孢子的抑制作用均随着提取物浓度的升高而增强,其中甲醇部对3种病原真菌孢子的抑制作用相对较弱,乙酸乙酯部和氯仿部则明显较强,且氯仿部对黄瓜枯萎病菌孢子的抑制效果最好,EC50为0.005 g/mL,乙酸乙酯部对大白菜灰霉病菌和辣椒白绢病菌孢子的抑制效果最好,EC50分别为0.005和0.004 g/mL.[结论]猫眼草不同极性部位提取物对3种蔬菜常见病原真菌均具有一定的抑制作用,是一种潜在的、可用于生物杀菌剂开发的植物.     

鄂西北产猫眼草不同极性部位提取物抑菌活性评价

[目的]探讨鄂西北产猫眼草对3种常见蔬菜病原真菌菌丝生长及孢子萌发的影响,以期为新型植物源杀菌剂开发提供一定的理论依据.[方法]以乙醇、甲醇、乙酸乙酯、氯仿4种有机溶剂依次对猫眼草全草进行浸提获得的提取物,分别采用生长速率法和孢子萌发法测定不同极性部位提取物对黄瓜枯萎病菌、大白菜灰霉病菌和辣椒白绢病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制活性.[结果]除甲醇部对大白菜灰霉病菌、辣椒白绢病菌菌丝生长抑制作用较弱外,其他不同极性部位提取物均对3种病原真菌菌丝生长表现出明显的抑制活性,且抑制作用均随着提取物浓度的升高而增强,其中氯仿部对黄瓜枯萎病菌菌丝的抑制效果最好,EC5o为0.007 g/mL,乙酸乙酯部对大白菜灰霉病菌和辣椒白绢病菌菌丝的抑制效果最好,EC50分别为0.008和0.011 g/mL.猫眼草不同极性部位提取物对3种病原真菌孢子的抑制作用均随着提取物浓度的升高而增强,其中甲醇部对3种病原真菌孢子的抑制作用相对较弱,乙酸乙酯部和氯仿部则明显较强,且氯仿部对黄瓜枯萎病菌孢子的抑制效果最好,EC50为0.005 g/mL,乙酸乙酯部对大白菜灰霉病菌和辣椒白绢病菌孢子的抑制效果最好,EC50分别为0.005和0.004 g/mL.[结论]猫眼草不同极性部位提取物对3种蔬菜常见病原真菌均具有一定的抑制作用,是一种潜在的、可用于生物杀菌剂开发的植物.     

核桃青皮抑真菌物质的分离鉴定与抑菌活性

[目的]分离鉴定出核桃(Juglans regiaL.)青皮中对植物病原真菌起抑制作用的化合物,并评价其抗菌活性.[方法]采用生长速率法依次测定核桃青皮乙醇粗提物,石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯萃取物以及石油醚相分离流分和活性化合物对葡萄蔓枯病菌(Cryptosporella viticola)等植物病原真菌的抑菌活性;结合抑菌活性追踪,采用硅胶柱层析、制备薄层层析分离纯化活性组分,核磁共振波谱(NMR)对活性物质进行结构鉴定.[结果]核桃青皮乙醇粗提物和3种萃取物以及石油醚萃取相的分离流分,分别对供试的10种、4种和3种植物病原真菌有抑制活性;流分Fr1-4和Fr1-5对葡萄蔓枯病菌(Cryptosporella viticola)、葡萄溃疡病菌(Botryosphaeria dothidea)和辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici)3种病原真菌的抑制率显著高于其他4个流分,流分Fr1-4对葡萄蔓枯病菌的抑制率达70.08％;分别从Fr1-4和Fr1-5鉴定出1个环状二芳基庚烷化合物胡桃素和4,8-二羟基-1-四氢萘酮(胡桃酮);胡桃素对供试的葡萄蔓枯病菌和辣椒疫霉病菌均显示出抑制活性,对其菌丝生长抑制中浓度(EC50)分别为0.060、0.124 mg/mL.[结论]核桃青皮乙醇粗提物及其石油醚、三氯甲烷萃取物均对供试的植物病原真菌有良好的抑制活性,从中分离获得的胡桃素对葡萄蔓枯病菌有显著抑菌活性,对辣椒疫霉病菌有中等的抑菌活性.     

八种中草药粗提物抑菌活性研究

采用菌丝生长速率法,以4种尖孢镰刀菌(番茄枯萎病菌、黄瓜枯萎病菌、茄子枯萎病菌、辣椒枯萎病菌)为供试病原菌对8种中草药的粗提物进行抑菌活性的筛选。研究结果表明:乙醇提取物中,地肤对4种尖孢镰刀菌的抑制作用最好,抑菌率在70%以上,并与其他植物的抑菌效果有显著性差异;鸦胆子的抑菌效果次之,在40%以上。不同溶剂的中草药提取物中,地肤氯仿提取物对番茄枯萎病菌的抑制效果最好,为80.29%;鸦胆子乙醇提取物对黄瓜枯萎病菌的抑制效果最好,为47.92%。     

菊科4种植物萃取物对核桃病原真菌的抑菌活性研究

以菊科4种植物为实验材料,分别用石油醚和乙酸乙酯对菊科4种植物的提取物进行萃取,采用生长速率法测定了不同萃取物对5种核桃病源的抑菌活性,通过SPSS 19软件计算了不同的萃取物对5种核桃病原真菌的毒力回归方程和半抑制浓度。结果表明:菊科4种植物的有机溶剂萃取物对5种核桃病原真菌的生长均有不同程度的抑制效果。小飞蓬石油醚萃取物对壳梭孢、壳二孢、炭疽菌的抑制效果最好,抑制率到达了77.5%、81.6%、79.5%,EC50值分别为1.31、1.34、0.71 mg/mL。波斯菊石油醚萃取物对叶点霉病原菌抑制效果最好,抑制率为74.1%,EC50值为0.56 mg/mL。小飞蓬乙酸乙酯萃取物对拟茎点霉病原菌的抑制效果最好,抑制率为61.8%,EC50值为3.63 mg/mL。     

鸦胆子废渣抑菌活性成分分析

【目的】探究鸦胆子去油后废渣的抑菌活性成分,为开发生物药肥提供理论依据。【方法】采用菌丝生长速率法、孢子萌发法和滤纸片法等测定鸦胆子废渣粗提物及不同溶剂萃取物对禾谷镰刀菌、茄子黄萎病菌和西瓜枯萎病菌等18种供试植物病原真菌的生物活性,并通过生物活性跟踪对其乙酸乙酯萃取物的化学成分进行分离及鉴定。【结果】在10 mg/mL浓度下鸦胆子甲醇提取物仅对水稻纹枯病菌具有抑制活性,其抑制率为33.33%;但在5 mg/mL浓度下其石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物对供试病原真菌均具有一定的抑制作用,以乙酸乙酯萃取物的抑菌活性最明显,对12种供试病原真菌菌丝生长均具有一定的抑制作用,其中对火龙果溃疡病菌、苦瓜枯萎病菌和水稻纹枯病菌的抑制率分别达75.71%、56.47%和51.72%,对应的致死中浓度（EC₅₀）分别为2.65、3.48和2.10 mg/mL。乙酸乙酯萃取物对火龙果溃疡病菌孢子萌发的抑制作用随浓度的升高而增强,在浓度为2.5000 mg/mL时抑制率达100.00%;在紫外光和自然光条件下乙酸乙酯萃取物对火龙果溃疡病菌的抑菌活性稳定。从乙酸乙酯萃取物中分离得到catechol（1）、benzofuran-2-carboxaldehyde（2）、1H-Indazole（3）、vanillic acid（4）、cleomiscosin A（5）等5种化合物,其中,化合物2和3为首次从鸦胆子中分离获得,但化合物1、2、4和5对供试火龙果溃疡病菌、苦瓜枯萎病菌和水稻纹枯病菌均无显著抑菌活性（P>0.05）。【结论】鸦胆子废渣中含有抑菌活性成分,在植物病害防控上具有良好的应用前景。     

西芹根水浸提液对黄瓜枯萎病菌的化感作用

本试验利用生长速率法研究了西芹根水浸提液对黄瓜枯萎病菌的化感作用。试验结果表明,西芹根水浸提液在较高浓度下(从100%到20%)对黄瓜枯萎病菌有化感抑制作用,抑制率最高达38.07%,最低为5.25%;除了20%浓度的处理在作用时间为132h、144h时菌落直径与对照ck无显著差异外,其余各浓度处理在不同作用时间里对黄瓜枯萎病菌的化感抑制作用都达到了显著或极显著水平,并且抑制效果随着时间的增加呈逐渐减弱的趋势。当在10%和1%浓度下,西芹根水浸提液的处理对黄瓜枯萎病菌有化感促进作用,并且促进作用随时间的增加呈先升高后下降的趋势,但各浓度间的化感作用的差异性随作用时间的不同而无规律的变化。     

核桃内生真菌SYS-5-2的鉴定及其抑菌活性

选取实验室保存的核桃内生真菌SYS-5-2，对其进行形态学和分子生物学鉴定，并通过生长速率法综合评价该菌株发酵产物的抑菌活性。结果表明，综合形态学分类方法和基于ITS序列基础上的系统发育分析，核桃内生真菌SYS-5-2鉴定为裂褶菌属。菌株SYS-5-2发酵产物对供试的6种植物病原菌均有不同程度的抑菌效果；液体发酵产物浓缩倍数越大，抑菌率越高，且相同浓度下，供试液B的抑菌效果整体优于供试液A；固体发酵产物中，乙酸乙酯和正丁醇相萃取物对水稻纹枯和苹果腐烂病原菌均表现出较好的抑菌效果，抑菌率均>90%；不同浓度的乙酸乙酯萃取物对6种病原菌的抑菌效果不同，浓度20 mg·mL^-1时，对水稻纹枯病原菌的抑菌率已达到81.25%，80 mg·mL^-1时，完全抑制了水稻纹枯病原菌的生长，IC₅₀仅为10.28 mg·mL^-1，而对其他病原菌的IC₅₀都在33.19～43.47 mg·mL^-1。     

9种植物精油及精油单体成分对黄瓜枯萎病的抑菌活性

[目的]研究9种植物精油及精油单体成分对黄瓜枯萎病的抑菌活性。[方法]采用滤纸片法和试管梯度稀释法测定了9种精油及精油单体成分对黄瓜枯萎病的抑菌活性。[结果]与阳性对照福美双相比,异硫氰酸丙烯酯和肉桂精油对黄瓜枯萎病的抑制作用较强,抑菌圈直径分别达(32.0±0.3)和(20.4±0.2)mm。异硫氰酸丙烯酯对黄瓜枯萎病的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MFC)均为0.049μL/mL,肉桂精油对黄瓜枯萎病菌的MIC和MFC均为0.098μL/mL,其余精油及精油单体的抑菌效果较弱。[结论]异硫氰酸丙烯酯和肉桂精油对黄瓜枯萎病的抑菌活性较好,具有进一步研究的价值。     

抑菌植物的筛选及甘草对5种植物病原真菌抑菌活性的研究

为了寻找新的植物源杀菌剂,采用菌丝生长速率法测定了17种植物提取物对荔枝霜疫霉病菌Peronophythora litchi的抑菌活性.结果显示:辣蓼Polygonum lapathifolium、白花油茶Camellia oleifera甲醇提取物(干粉)10 mg/mL处理7 d后的抑菌率分别达74.37%、77.02%,而甘草Glycyrrhiza uralensis根甲醇提取物相同质量浓度时的抑菌率达到97.83%;甲醇对甘草的提取率为23.04%,甘草的甲醇提取物1和5 mg/mL处理对荔枝霜疫霉病菌菌丝生长的抑菌率分别为63.84%和80.68%,对荔枝霜疫霉病菌孢子囊芽管萌发的抑制中质量浓度(EC50)为0.47 mg/mL,对荔枝霜疫霉病菌、辣椒疫霉病菌Phytophthora capsici、芒果炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides、香蕉枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.cubense和草莓叶斑病菌Cladosporium herbarum菌丝生长的EC50依次为0.62、0.89、9.70、6.42和4.53 mg/mL,表明甘草甲醇提取物具有较好的抑菌活性,有望继续研究开发成新的杀菌剂.     

红树内生细菌AmS2对多种植物病原真菌的抑制作用

采用平板对峙生长法测定了红树内生细菌AmS2菌株对辣椒疫霉和香蕉枯萎菌等多种植物病原真菌的抑制作用,通过生长速率法研究了发酵液甲醇提取物对多种植物病原真菌的毒力作用.结果表明,菌株AmS2对多种病原菌均具有较强的抑制作用,其中对辣椒炭疽菌的抑制作用最强,抑菌带宽为11.5 mm,显微观察抑菌带边缘菌丝末端膨大成球状、分枝增多、细胞壁破裂.发酵液甲醇提取物能够抑制6种病原真菌的生长,随着浓度的增加,抑菌效果增强,其中对辣椒炭疽菌的抑菌效果最好,EC50和EC95分别为0.8923 mg/mL和2.4939 mg/mL.     

一辛基代二亚乙基三胺抑菌活性初步研究

采用菌丝生长速率法测定了一辛基代二亚乙基三胺对12种植物病原真菌的抑菌活性。结果表明:当一辛基二亚乙基三胺的浓度为100mg/L时,对小麦根腐病菌、葡萄白腐病菌有较高的抑菌活性,抑菌率分别为89.95%、100%。当浓度达到200mg/L时,对番茄绵腐病菌、小麦赤霉病菌也有较高的抑菌活性,抑菌率分别为79.86%、100%。化合物对番茄绵腐病菌、小麦根腐病菌、小麦赤霉病菌、葡萄白腐病菌都有较高的抑菌活性,有效中浓度(EC50)分别为81.68mg/L、24.45mg/L、90.63mg/L和44.00mg/L。对柑橘炭疽病菌和黄瓜枯萎病菌的抑制效果不明显,有效中浓度(EC50)分别为210.46和262.69mg/L。与对照药剂多菌灵相比,对番茄绵腐病菌、小麦纹枯病菌和小麦根腐病菌具有明显的抑制效果,有效中浓度(EC50)分别为81.68mg/L、44.00mg/L和93.74mg/L,大大优于多菌灵的4.96×108、1.37×105和551.01mg/L。     

狭叶坡垒枝叶粗提物抑菌活性研究

采用菌丝生长速率法,以西瓜枯萎菌(Fusarium oxysporum Schl.f.sp.cucumerirum Owen)、烟草赤星菌[Alternaria longipes(Ell.et Eu)Tisdale et Wadk]、香蕉大灰斑菌[Curvularia lunata(Wakker)Boedijin]、烟草灰霉菌(Botrytis cinerea Pers)和水稻纹枯菌(Rhizoctonia solani Kuhn)为靶标,对采自广西十万大山的16种植物的甲醇粗提物进行了生物活性筛选,结果表明,狭叶坡垒(Hopea chinensis Hand.Mass)、水茄(Solanum touvum Swartz)等7种植物粗提物对5种供试真菌均有活性,其中狭叶坡垒抑菌活性最为显著;进一步测定了狭叶坡垒石油醚萃取层、乙酸乙酯萃取层及水萃取层对玉米大斑菌(Helminthosporium turcicum Pass)、稻胡麻叶斑菌(Helminthosporium oryzae Breda de Haan)和西瓜枯萎菌(F.oxysporum Schl.f.sp)等21种供试植物病原真菌的生物活性,结果表明,5 mg/mL狭叶坡垒乙酸乙酯萃取物的抑菌活性最强,对水稻恶苗菌[Gibberella fujikuroi(Saw)Wollenw]、香蕉黑条叶斑菌(Mycosphaerella fijiensis Marelet)和香蕉褐缘灰斑菌(Cercospora musae Zimm)等18种植物病原菌均有一定抑制作用,其中对烟草黑胫病菌(Phytophthora nicotianae Breda)的抑制率达100%,对香蕉叶缘枯菌(Alternaria musae Bour.et Bat)、香蕉大灰斑菌[Curvalaria lunata(Wakker)Boedijin]、甘蔗凤梨病菌[Ceratocystis paradoxa(Dade)Moreau]、甘蓝黑斑菌[Alternaria brassicola(Schw.)Wiltshire]和水稻纹枯菌(R.solani)的抑制率分别为89.00%、94.12%、90.35%、89.93%和85.13%。对烟草黑胫病菌(C.nicotianae)、香蕉叶缘枯菌(A.musae)、香蕉大灰斑菌(C.lunata)、甘蔗凤梨病菌(C.paradoxa)、甘蓝黑斑菌(A.brassicola)和水稻纹枯菌(R.solani)的EC50分别为:0.475 8,2.642 9,0.614 7,0.467 4,0.977 7,3.463 7 mg/mL。对甘蔗凤梨病菌(C.paradoxa)、甘蓝黑斑菌(A.brassicola)进行孢子萌发实验,其EC50分别为0.716 6 mg/mL、1.784 4 mg/mL。研究结果为进一步研究狭叶坡垒枝叶中的抑菌活性成分提供了基础数据。