DNA的酯酶催化活性研究

应用萘酯坚固蓝反应显色法对ＤＮＡ的酯酶催化活性进行了研究。结果表明，辣椒ＤＮＡ、鲱鱼精ＤＮＡ具有分解萘酯的活性；反应混合物中鲱鱼精ＤＮＡ浓度为０．００３４ｍｇ／ｍＬ时，ＤＮＡ仍有分解萘酯的活性；随着ＤＮＡ浓度增加，ＤＮＡ的催化活性增强。６种寡聚核苷酸均具有催化萘酯水解的能力，但活性强弱不同；４种ｄＮＴＰ均不能催化萘酯水解。双链ＤＮＡ、单链ＤＮＡ的显色反应完全来自ＤＮＡ的催化萘酯水解反应     

DNA的酯酶催化剂活性研究

应用萘酯坚固蓝反应显色法对ＤＮＡ的酯酶催化活性进行了研究。结果表明，辣椒ＤＮＡ、鲱鱼精ＤＮＡ具有分解萘酯的活性；反应混合物中鲱鱼精ＤＮＡ浓度为０．００３４ｍｇ／ｍＬ时，ＤＮＡ仍有分解萘酯的活性；随着ＤＮＡ浓度增加，ＤＮＡ的催化活性增强。６种寡聚核苷酸均具有催化萘酯水解的能力，但活性强弱不同；４种ｄＮＴＰ均不能催化萘酯水解。双链ＤＮＡ、单链ＤＮＡ的显色反应完全来处ＤＮＡ的催化萘酯水解反应。     

DNA催化活性的研究 Ⅲ.多聚核苷酸的催化作用

以多聚腺苷酸（ｐｏｌｙＡ），多聚尿苷酸（ｐｏｌｙＵ）及其混合复性的ｐｏｌｙＡ·ｐｏｌｙＵ与乙酸－α－萘酯及坚牢蓝ＲＲ盐混合保温，研究了多聚核苷酸催化乙酸－α－萘酯水解的作用，结果表明：由ｐｏｌｙＡ·ｐｏｌｙＵ组成的双链ＲＮＡ具有与ＤＮＡ分子相似的催化活性，ｐｏｌｙＡ这一单链多聚物也能起催化作用，ｐｏｌｙＵ则没有这一功能。据此认为，核酸分子的催化活性与核糖２＇－位脱氧与否无关，而碱基的堆积为素酯分子的疏水奈环基团提供足够的疏水空间，则是催化活性所必须的。双链ＤＮＡ及双链ＲＮＡ都能满足这一条件，ｐｏｌｙＡ中嘌呤碱基堆积则刚能容纳下萘环，所以均能催化萘酯的水解；而ｐｏｌｙＵ中嘧啶碱基的堆积不足以容纳下萘环，因而不具备这一催化作用。     

DNA催化活性的研究：Ⅰ.裸露DNA分解萘酯活性的检测

将小麦、鲤鱼和λ－噬菌体的裸露ＤＮＡ溶液分别与萘酯－固蓝染色液混合温浴，检测出ＤＮＡ分解萘酯的活性，支持了王身立等关于绿豆ＤＮＡ具有分解萘酯活性的发现，讨论了ＤＮＡ催化活性检测的有关问题及ＤＮＡ催化活性研究的重要意义     

具有生物活性的N—酰基丙氨酸类化合物的合成研究

通过用具有杀菌活性的Ｎ－（２,６－二甲苯基）－丙氨酸甲酯与具有除草活性的２－甲基－α－萘氧基（或β－萘氧基）－乙酸反应,合成获得Ｎ－酰基丙氨酸类新化合物。经除草和杀菌生物试验表明,这类新化合物具有一定的生物活性。     

棉蚜不同品系羧酸酯酶的酶标仪动力学测定研究

用分光光度计终点测定法和酶仪动力学测定法对3个抗性水平不同的棉蚜品系和1个敏感品系的羧酸酯酶进行了研究。以α-乙酸萘酯（α-NA）为底物时，敏感品系（S）和抗性品系R1，R2，R3终点测定法所需的最适酶量分别为1/2，1/20，1/33和1/100头蚜虫，β-乙酸萘酯（β-NA）为底物时分别为1/3，1/20，1/33和1/100头蚜虫。S品系对β-NA的水解活性明显高于α-NA，而抗性品系相反，对α-NA的活性明显高于β-NA。对α-NA水解的活性在不同品系间差异较大（近60倍），而对β-NA水解的活性差异小于对α-NA，最大约为14倍。用酶标仪动力学测定法研究表明，4个棉蚜品系间羧酸酯酶活性具有明显的差异，S，R1，R2和R3分别为38，85，198和762mOD·min^-1·虫^-1；与4个品系的抗性程度比较，酶动力学方法的测定结果更可靠。     

酯酶同工酶的醋酸萘酯-铁氰化钾染色法的研究

酯酶可将α-醋酸萘酯和β-醋酸萘酯水解生成醋酸和萘酚，利用萘酚能与铁氰化钾反应生成有色物质萘醌的性质可对电泳凝胶上的酯酶同工酶进行染色。     

不同染色条件对大麦酯酶同工酶显色的影响

用聚丙烯酰胺垂直平板电泳技术研究了不同底物（α－萘醋酸酯和β－萘醋酸脂）、不同偶联剂（固蓝ＲＲ盐和固蓝Ｂ盐）、ｐＨ及温度条件对大麦酯酶同工酶电泳显色的影响。结果为：（１）绝大多数酶带可用α－萘醋酸酯或β－萘醋酸酯显色，极少数酶带只能用α－萘醋酸酯显示，混合底物显色时，酶带数目与α－萘醋酸酯底物显色相同，只是酶带颜色有差异；（２）用固蓝ＲＲ盐作偶联剂染色与用固蓝Ｂ盐相比，多数酶带的相对染色强度提高；（３）ｐＨ６．４比较适合酯酶同工酶染色，且以３７℃１０ｍｉｎ为最佳。表明各电泳酶带染色强度的相对差异并不一定反映各同工酶本身含量、酶活性的相对高低。     

酯酶同工酶的醋酸萘酯 -铁氰化钾染色法的研究

酯酶可将α-醋酸萘酯和β-醋酸萘酯水解生成醋酸和萘酚,利用萘酚能与铁氰化钾反应生成有色物质萘醌的性质可对电泳凝胶上的酯酶同工酶进行染色.     

一种具有对映选择性催化萘普生乙酯水解的多克隆抗体

研究了一种具有对映选择性催化萘普生乙酯水解的多克隆抗体。先设计并合成消旋膦酸酯Ｐ１，与载体蛋白偶联得到适于动物免疫的抗原体系Ｐ２和Ｐ３，通过适当的分离和离子交换色谱处理，得到一种新的免疫球蛋白（ＩｇＧ）－多克隆抗体。它能加速Ｒ－构型萘普生乙酯水解成为Ｓ－构型，且具有高度专一性，此多克隆抗体为超分子识别。     

不同染色条件对大麦酯酶同工酶显色的影响

用聚丙烯酰胺垂直平板电泳技术研究了不同底物、不同偶联剂、ｐＨ及温度条件对大麦酯酶同工酶电泳显色的影响。结果为：（１）绝大多数酶带可用α－萘醋酸酯或β－萘醋酸酯显色，极少数酶带只能用α－萘醋酸酯显示，混合底物显色时，酶带数目与α＝萘醋酸酯底物呈色相同，只是酶带颜色有差异；（２）用固蓝ＲＲ盐作偶联剂染色与用固蓝Ｂ盐相比，多数酶带的相对染色强度提高；（３）ｐＨ６４．比较适合酯酶同工酶染色，且以３７℃１０     

酶抑制法测定有机磷农药含量

通过测定乙酸-1-萘酯在酯酶(蚕蛹酶、鸡肝酶和面粉酶)催化下水解生成的乙酸被有机磷农药抑制前后pH值的变化,推算出有机磷农药对酯酶的抑制率,从而检测出有机磷农药的含量.以ΔpH值为指标,经由单因素试验得出最佳酶促反应条件:反应时间30 min、反应温度35 ℃、固蓝B盐1 mL、乙酸-1-萘酯3 mL.结果发现蚕蛹酶活性最高,且农药对酶的抑制具有选择性,混合酶液未出现特异性提高.     

有机相中脂肪酶催化合成乙酸芳樟酯的研究

[目的]以乙酸酐和芳樟醇为底物,采用脂肪酶催化法合成乙酸芳樟酯。[方法]通过考察不同种类的脂肪酶对该反应的催化效果,研究不同种类固定化载体对该脂肪酶活性的影响,探讨固定化后的脂肪酶在有机相中催化合成乙酸芳樟酯的条件。[结果]获得了一种对该反应催化效率较高的脂肪酶Novozym 435,得出其最佳固定化条件,确定了固定化后的脂肪酶在有机相中催化合成乙酸芳樟酯的最佳反应条件:异辛烷为最佳有机溶剂,以摩尔比为1∶1.5的芳樟醇和乙酸酐为底物,底物浓度为0.5 mol/L,在45℃下振荡反应24h,此条件下乙酸芳樟酯的收率较高。[结论]该反应体系的建立为今后工业生物催化法合成乙酸芳樟酯奠定了良好的基础。     

猪MHCⅠ类基因区基因组DNA的RFLP初步分析

用４种限制性内切酶ＥｃｏＲＩ，ＢａｍＨＩ，ＨｉｂｄⅢ和ＲｓｔＩ对纯种二花脸猪和梅山猪白细胞基因组ＤＮＡ进行内急酶消化和电泳，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ将ＤＮＡ转移到ＮＣ膜上，将来源于猪ＭＨＣ的Ⅰ类基因猪移植抗原基因片段克隆ＰＤ１－ＡＤＮＡ（４．３ｋｄ）用ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记作为ＤＮＡ探针，进行分子杂交反应，比较了不同品系和个体间的限制性酶切片段长度多态性（ＲＦＬＰ），结果表明：（１）经各种     

构成分子机器的一种新的结构单元: 三联吡啶盐的二醇合成

2－（羟乙氧在）乙基－4，4’联吡啶与a,a’－二（溴甲基）－2，2’联吡啶在乙腈中，油浴50℃反应三天，得到标题化合物，产率为45％，中间体（1）可以通过2-(羟乙氧基）乙基磺酸酯或碘化物与4，4’－联吡啶反应得到。前者具有较高的反应活性。     

不同地区棉蚜酯酶与有机磷杀虫剂抗性的关系

通过生物测定和生化分析研究了北京和山东高密地区木槿和棉花上棉蚜种群对杀虫剂的敏感性及体内α－乙酸萘酯（αNA）酶活力的变化。结果表明，高密地区木槿和棉花棉蚜对甲基对硫和久效磷的耐药性高于北京地区寄主植物棉蚜，同时高密棉花棉蚜对2种杀虫剂的耐药性高于木槿棉蚜，高密地区木槿和棉花上棉蚜的蛋白含量分别是北京地区对应棉蚜的3．86倍和1．73倍，北京和高密地区棉花棉划α－NA酯酶活力分别是木槿棉虹的1．74倍和2．1倍，说明棉蚜α－NA酯酶活力的变化与棉蚜对有机磷杀虫剂的抗药性有关。     

金雀花碱等对小菜蛾幼虫体内羧酸酯酶等水解酶活性的影响

金雀花碱是多种植物的次生代谢物质。苦豆碱存在于豆科植物苦豆子中。以小菜蛾幼虫为供试对象研究表明,两种生物碱对昆虫体内的α－乙酸萘酯酶和α－乙酸萘酯羧酸酯酶活性有明显抑制作用,体内和体外试验表明了相似的结果,且抑制作用程度随各自生物碱浓度的增加而提高。     

萘乙酸衍生物的合成及其生物活性的测定

从α-萘乙酸出发,衍生合成了萘乙酸甲酯、萘乙酰肼、丙酮萘乙酰腙、唑酮萘乙酰腙、萘乙酸三唑醇酯和萘乙酸烯唑醇酯,并通过核磁共振氢谱进行了结构表征.测定了所有化合物诱导大豆苗生根的活性和萘乙酸三唑醇酯、萘乙酸烯唑醇酯的室内抑菌活性.结果表明,所有衍生物均具有一定的植物生长调节活性,其活性的大小与化合物的油水分配系数没有直接的相关性;α-萘乙酸与三唑醇和烯唑醇等杀菌剂成酯反应后,酯化产物的抑菌活性比三唑醇和烯唑醇本身的抑菌活性低.     

生物素标记犬瘟热病毒DNA探针的制备与纯化

用以选择犬瘟热病毒ＲＮＡ的有关碱基顺序，设计ＤＮＡ探针，并在５＇末端偶关一个氨基连接分子：５×ＡＧＧＧＣＴＣＡ－ＧＧＴＡＧＴＣＣＡＧＣＡＡＴＧ３＇，共２３个碱基和一个氨基连接分子。ＮＨ２－ＤＮＡ探针在ＤＮＡ合成仪上合成。合成产物同生物素酰氨基已酸盐Ｎ－羟琥珀酰亚胺酯反应，反应物经高效硅胶薄层板纯化，得到生物素标记犬温热病毒ＤＮＡ探针。     

两种林木总DNA提取效果的比较

试验以刺槐（Ｒｏｂｉｎｉａｐｓｅｕｄｏａｃａｃｉａ）和华北落叶松（Ｌａｒｉｘｐｒｉｎｃｉｐｉｓ－ｒｕｐｐｒｅｃｈｔｉ）为ＤＮＡ提取材料，采用２种提取ＤＮＡ方法，紫外光检测林木ＤＮＡ提取纯度，并计算ＤＮＡ收率。实验结果表明，不同林木总ＤＮＡ提取的效果存在一定差异，从刺槐和落叶松两树种的生理特性和生长特点等方面对试验结果作了比较和分析。