高效液相色谱法在小麦激素测定中的优化

针对现有液相色谱检测植物激素方法检测效率低的问题,利用本试验建立了高效液相色谱法测定小麦组织中反式玉米素(tZ)、反式玉米素核苷(tZR)、赤霉素A3(GA3)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、吲哚-3-乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)和α-萘乙酸(NAA) 7种激素的方法,并将单个样品检测时间缩短到15 min。本方法采用双pH萃取法提取激素,以ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱分离,甲醇-0.8%冰醋酸梯度洗脱,检测波长260 nm,流速0.8 mL/min,柱温40℃。该试验条件下,能实现7种激素有效分离。7组标准曲线线性关系良好,R2范围为0.999 7～1.000 0。tZ、tZR、GA3、6-BA、IAA、ABA、NAA的加标回收率分别为91.45%±0.29%、97.96%±0.77%、96.65%±1.17%、 93.40%±0.45%、104.21%±1.85%、92.61%±0.15%和96.65%±2.84%。该方法检测激素种类多、检测时间短、重复性良好、适用性强,极大地提高了高效液相色谱法在现有激素检测中的检测能力和检测效率。     

高效液相色谱切变波长法测定艾蒿中内源激素

建立了高效液相色谱切变波长法同时测定植物样品中赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(3-IAA)、脱落酸(ABA)、细胞分裂素(6-BA)和α--萘乙酸(α--NAA)等五种植物内源激素的方法,采用Hypersil ODSC 18柱,以甲醇、乙腈和0.6%的乙酸为流动相梯度洗脱,分别在各组分的保留时间段设置其最佳检测波长:GA3为210nm;3-IAA为220nm;ABA为244nm;6-BA为267nm;α--NAA为283nm.该方法的回收率可达到90%～96%,线性相关系数(r)大于0.998,检测限在0.02～0.3μg/g之间.     

不同外源激素对桑树种子发芽的影响

为提高桑苗繁育效率,采用不同外源激素浸种以探索有效打破桑树种子休眠的方法。利用不同浓度的赤霉素(GA3)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、3-吲哚丁酸、a-萘乙酸(NAA)、芸苔素内脂5种外源激素浸种处理休眠状态下的秋雨桑种子,观察其发芽情况。结果表明:用赤霉素浸种处理可以有效解除秋雨桑种子休眠,促进其萌发。在一定浓度范围内,随着赤霉素浓度升高,秋雨桑种子发芽率显著提高,赤霉素浸种浓度以32~128mg·L-1为宜。6-苄氨基嘌呤(6-BA)对秋雨桑种子发芽的促进效果不明显。3-吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)、芸苔素内脂不能有效解除秋雨桑树种子休眠。     

植物生长调节剂对薰衣草种子发芽和幼苗生长的影响

分别采用不同浓度的赤霉素(GA3)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、吲哚乙酸( IAA)、萘乙酸(NAA)处理薰衣草种子.结果表明:不同浓度的GA3、6-BA、IAA、NAA均可缩短薰衣草种子发芽时间,提高种子发芽率、发芽势和活力指数以及简化活力指数等,对幼苗早期的生长有明显促进作用;处理效果比较:150 mg/L GA3>5 mg/L 6-BA>50 mg/L IAA>50 mg/L NAA.     

植物激素对附子产量的影响

在附子的苗期和子根膨大期喷施不同的激素,结果表明,赤霉素（GA）、吲哚乙酸（IAA）、α-萘乙酸（NAA）对提高附子子根总产量和1＋2子根产量有明显作用：6-苄氨基嘌呤（6-BA）和6-糠氨基嘌呤（KT）对子根产量没有影响;激素对附子子根个数没有明显作用。     

几种外源激素对番茄种子萌发及幼苗生长的影响

试验以红果王番茄为试材,采用浸种催芽的方法,研究了赤霉素(GA3)、萘乙酸(NAA)及6-苄氨基嘌呤(6-BA)等外源激素对番茄种子萌发及其幼苗生长的影响。结果表明,外源激素GA_3,NAA和6-BA都可促进番茄种子萌发和幼苗生长;与CK相比,GA_3的质量浓度为90 mg/L时,效果最好;而NAA与6-BA的理想浓度则分别为2,12 mg/L。     

植物生长调节剂对壶瓶枣果实品质的影响研究

为研究喷施赤霉素(GA)、脱落酸(ABA)、克裂一号、α-萘乙酸钠等植物生长调节剂对壶瓶枣果实品质的影响，本文设置赤霉素、脱落酸、克裂一号、α-萘乙酸钠和空白对照5个处理，测定壶瓶枣单果重、果形指数、含水量、可溶性固形物、可滴定酸等常规品质指标，探讨喷施植物生长调节剂对壶瓶枣果实品质的影响。结果显示，脆熟期α-萘乙酸钠处理的枣单果重显著高于GA、ABA处理，分别高出17.83%和12.13%。脆熟期GA和α-萘乙酸钠处理的果形指数显著高于ABA处理，同时完熟期α-萘乙酸钠处理显著高于克裂一号处理，高出6.69%。3脆熟期克裂一号处理后的果实含水量显著高于其他处理。脆熟期ABA和α-萘乙酸钠处理的可溶性固形物显著高于CK处理；完熟期ABA处理显著高于CK、α-萘乙酸钠处理，分别高出25.11%和32.57%。完熟期α-萘乙酸钠处理的枣果可滴定酸含量显著高于GA处理的，高出17.18%。表明喷施赤霉素、脱落酸、克裂一号、α-萘乙酸钠等处理不会降低壶瓶枣果实的品质。     

奥地利黑松不定芽增殖与伸长研究

通过影响奥地利黑松不定芽增殖和伸长因素的研究发现,接种到添加0.8mg/L6-苄氨基嘌呤(6-BA)和0.01mg/Lα-萘乙酸(NAA)的GD培养基上的不定芽增殖率最高可达1100%。不定芽伸长的适宜基本培养基为MS,添加0.02mg/LNAA伸长生长效果显著。继代培养中,用50g/L食用白糖代替30g/L分析纯蔗糖,可以降低试验成本。活性炭(AC)有利于促进奥地利黑松不定芽的伸长,而赤霉素(GA3)则抑制伸长。     

植物激素ABA和GA调控种子休眠和萌发的研究进展

综述了植物激素脱落酸(Abscisic acid,ABA)和赤霉素(Gibberellin acid,GA)及其相互作用调控种子休眠和萌发过程的研究进展.大量研究结果表明,ABA和GA是种子休眠获得和解除过程中起关键作用的内源信号分子,ABA诱导种胚细胞分裂停止、启动并维持种子休眠,而GA启动和促进种子萌发,两者在调节种子休眠和萌发过程中存在相互拮抗的关系.以糊粉层组织为例,阐述了ABA和GA在调控种子萌发时α-淀粉酶表达的信号通路.     

激素对蒺藜状苜蓿种子休眠的破除

[目的]研究蒺藜状苜蓿种子发芽对外源激素的响应。[方法]用0．1、1．0、1．5、2．0μmoL／L6-苄氨基嘌吟（6-BA）、赤霉素（GA3）、脱落酸（ABA）、萘乙酸（NAA）、乙烯利、吲哚乙酸（IAA）和吲哚丁酸（IBA）分别浸湿滤纸发芽床,每组50粒蒺藜状苜蓿种子进行发芽试验,以蒸馏水处理为对照,统计发芽率、发芽势、发芽指数和发芽天数。[结果]一定浓度的外源激素6-BA、GA3、IBA和乙烯利均能促进蒺藜状苜蓿种子的发芽,促进能力为6-BA、GA3和乙烯利强于IBA;NAA和IAA在低浓度时可抑制蒺藜状苜蓿种子发芽,但抑制作用随处理浓度升高而解除,ABA抑制蒺藜状苜蓿种子发芽,抑制能力为ABA〉IAA〉NAA。[结论]为阐明蒺藜状苜蓿种子休眠发芽机理与激素调控的关系提供了参考数据．     

日粮中添加月苋草油与胡麻油对蛋黄脂肪酸的影响

通过 2个试验研究了蛋鸡日粮中添加月苋草油和胡麻油对蛋黄中不饱和脂肪酸的影响。选用 6 4只健康、36周龄罗曼产蛋母鸡进行试验。Ⅰ :日粮设 4个处理组 ,月苋草油添加水平分别为 0、2 %、3%和 4 %。Ⅱ :日粮中胡麻油和月苋草油添加总量为 3% ,设 4个比例处理 :1∶4、2∶3、3∶2、4∶1。结果表明 :增加日粮中月苋草油 ,蛋黄中亚油酸 (LA)含量显著提高 (P <0 0 5 )且γ 亚麻酸 (GLA)含量和n 6脂肪酸总量以及n 6和n 3脂肪酸比值均有上升 ,α 亚麻酸 (ALA)和DHA(二十二碳六烯酸 )含量以及n 3脂肪酸总量变化不明显。随日粮中胡麻油对月苋草油比例的增加 ,蛋黄中LA和GLA含量、n 6脂肪酸总量以及n 6和n 3脂肪酸比值均下降 ,ALA和花生四烯酸含量以及n 3脂肪酸总量显著上升 (P <0 0 5 ) ,DHA含量变化不规律。说明 ,日粮油脂的脂肪酸组成影响了蛋黄中脂肪酸的沉积 ,且呈正相关 ,通过改变日粮中油脂添加水平可以调整鸡蛋中脂肪酸的组成和含量     

芜菁花叶病毒对不结球白菜内源激素含量及代谢相关基因转录水平的影响

以不结球白菜感病品种‘矮脚黄’为材料,采用ELISA和Real-time PCR技术研究了芜菁花叶病毒(TuMV)侵染后不结球白菜内源生长素(IAA)、赤霉素(GA3)、脱落酸(ABA)和茉莉酸(JA)的动态变化以及内源激素相关基因的表达差异。结果表明:TuMV侵染后,植株发病症状的严重程度与IAA含量呈正相关;光敏色素相关蛋白基因PAP1对IAA的合成起负调控作用。处理植株体内GA3含量及其代谢相关基因,即原表皮因子基因PDF1表达量均明显低于对照植株,而ABA含量则随着接种时间的延长不断积累,始终高于对照植株。且发病症状越严重的植株中,GA3含量越低,ABA含量越高。处理植株JA含量和JA诱导基因,即营养贮藏蛋白基因Vsp1表达量在接种后均出现2次上升,且植株病症越严重,JA含量越低。TuMV侵染后,植株中IAA/ABA和GA3/ABA的值则明显低于对照植株,表明TuMV的侵染破坏了内源激素的平衡,干扰了植物的正常生长发育。     

不同外源激素对二晚后期叶片衰老的影响

采用田间小区试验研究了齐穗期喷施3种外源激素(GA3、6-BA、BR)对二晚生长后期叶片衰老的影响,测定了剑叶的膜透性、丙二醛(MDA)含量与SOD、CAT活性等与衰老相关的指标。结果表明:3种外源激素对水稻叶片的衰老都有延缓作用,并能提高结实率,最终达到增加产量的目的,其中以6-BA的效果最好。但外源激素对水稻叶片衰老作用的延缓具有时效性,大约2周左右。     

地表水中有机物的氯化活性研究

本文考察了不同种类天然有机物氯化消毒时生成消毒副产物情况。利用一系列的树脂,将地表水中的腐殖质进行富集和分类,得到天然水体中的富里酸和胡敏酸,富集结果发现在地表水的腐殖质中以富里酸为主,含量为83%。将富集到的富里酸和胡敏酸分别进行氯化处理,用电子捕获气相色谱仪测定消毒副产物。结果发现,相同底物浓度,相同消毒剂投量,富里酸氯化生成的消毒副产物要高于胡敏酸的,表明地表水体中富里酸是主要的消毒副产物的前驱物质。     

鸡白介素-6(ChIL-6)基因的克隆与序列分析

分别用鸡传染性法氏囊病病毒感染和用ConA免疫刺激健康鸡，无菌取处理鸡的脾脏，匀浆后用Tr-izol抽提细胞总RAN，应用随机引物反转录获得cDNA，设计引物，经PCR扩增获得鸡白介素-6（ChIL-6)基因，应用pGEM-T载体克隆该基因，经测序，表明其与Gene Bank中公布的唯一的一个ChIL-6基因为同源基因。     

外源脱落酸对洋葱鳞茎休眠的影响

研究了不同浓度外源脱落酸(ABA)对洋葱鳞茎休眠的影响.结果表明:10 μmol·L-1的ABA处理效果最好,其贮存100 d后的鳞茎发芽率只有2.9%,比对照低63.8%.进一步对ABA处理后洋葱不同部位的可溶性蛋白、可溶性糖含量和过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性变化进行了研究.结果表明:从处理后第1天至第4天,新叶除了POD活性外其他指标处理后均高于对照;鳞茎内层可溶性蛋白和可溶性糖含量处理后均低于对照;SOD和POD在处理后前期低于对照,处理1 d后逐步高于对照.处理4 d后各部位除了POD活性外,其他指标和对照基本一致.     

柑橘Rboh家族鉴定及其对激素和柑橘溃疡病的响应

【目的】活性氧（reactive oxygen species,ROS）是植物抗病反应中重要的信号分子,而Rboh是参与活性氧产生的关键酶之一。本研究通过鉴定和分析柑橘全基因组中Rboh基因家族生物信息学特性、生物胁迫相关植物激素和溃疡病菌（Xanthomonas citri subsp. citri,Xcc）侵染诱导下表达模式,为研究Rboh基因家族与柑橘抗溃疡病过程的相关性,进一步研究和利用柑橘Rboh基因打下基础。【方法】利用过氧化物酶数据库RedOxiBase和柑橘（甜橙）CAP数据库获得柑橘Rboh家族序列信息;利用生物信息学软件对CsRboh进行理化性质、系统进化关系、染色体定位、基因结构、蛋白功能结构域、保守基序和启动子元件系统分析。通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析植物激素水杨酸（salicylic acid,SA）、茉莉酸（jasmonic acid,JA）、脱落酸（abscisic acid,ABA）和溃疡病菌处理下CsRboh表达模式。【结果】鉴定得到7个柑橘Rboh家族成员（CsRboh01—CsRboh07）,其编码蛋白包含784—946个不等的氨基酸残基,等电点（PI）分布在8.67—9.40,主要定位于细胞膜结构和细胞质。根据系统进化树可将柑橘Rboh家族划分为I—IV 4个亚家族。CsRboh家族基因不均匀分布在甜橙的5条染色体,均含有典型的呼吸爆发NADPH氧化酶结构域（NADPH_Ox）、铁还原酶跨膜组件（Ferric_reduct）、FAD结合结构域（FAD_binding）和铁还原酶NAD结合结构域（NAD_binding）4个功能结构域。CsRboh家族各基因的启动子区域含不同激素响应元件,数目和类型各有差异。qRT-PCR结果显示CsRboh基因家族各成员可响应激素和溃疡病菌诱导,在不同激素和溃疡病菌处理下感病品种晚锦橙和抗病品种四季橘中表达模式具有差异。结合系统进化树聚类分析、同源基因功能研究及其启动子区域顺式作用元件分析发现,CsRboh02、CsRboh04和CsRboh06在抗、感两个品种中受柑橘溃疡病菌诱导表现出明显不同的表达趋势和表达量。【结论】CsRboh02、CsRboh04和CsRboh06可能与柑橘品种抗、感性密切相关,是3个有潜力的抗溃疡病分子育种候选基因,初步确定CsRboh家族基因在柑橘响应溃疡病过程中发挥关键作用。     

应用改良TAIL-PCR克隆黄瓜6PGDH基因上游序列

运用改良的热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR, TAIL-PCR)对黄瓜6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因(6-phosphogluconate dehydrogenase gene, 6PGDH)的上游序列进行了克隆。与最初的TAIL-PCR相比较,主要改进之处有:(1)根据Primer 5.0软件计算结果从随机RAPD引物库中筛选出合适的上游引物,低严谨和高严谨反应中的退火温度也分别进行了调整;(2)将热不对称交替反应继续应用到第3轮PCR扩增反应中以提高特异目的条带和减少非目的条带。经过3轮PCR扩增反应最终获得位于黄瓜6PGDH起始密码子ATG上游长度为517 bp新序列。试验结果表明,应用改良TAIL-PCR能快速、有效地克隆与已知区域相邻的序列。     

土壤中水溶性有机质的结构特征及环境意义

采用元素分析，^1H—NMR和FTIR研究了3种水稻土中水溶性有机质(DOM)的组成及结构特征，并与富里酸(FA)、胡敏酸(HA)进行了比较。结果表明，DOM主要由碳水化合物组成，芳香族物质少，烷基链烃含量少且支链短，分子结构简单；HA含有大量的芳香族不饱和物质，烷基链烃含量多且支链长；FA含有大量的羧基官能团。3种土壤HA的结构组成相似，而DOM则变化较大，即桑园土壤DOM碳水化合物含量相对较多；水杉土壤DOM烷烃物质和芳香族不饱和物质较多，而碳水化合物相对少；水田土壤DOM介于两者之间。     

饲料中添加鱼油对肥育猪脂肪酸组成的影响

在肥育猪饲料中添加鱼油生产富含DHA(docosahexaenoic acid),EPA(eicosapentaenoic acid)的猪肉.结果表明:在肥育猪饲料中添加2.5鱼油,可以极显著提高脂肪、肌肉中的DHA,EPA含量.100 g肌肉中EPA对照组为4.7 mg,鱼油组为30.4 mg,是对照组的6.5倍;DHA对照组为13.5 mg,鱼油组为53.8 mg,是对照组的4倍,证明在饲料中添加鱼油生产富含DHA,EPA的猪肉可行.在肥育猪饲料中添加鱼油对猪生产性能、肉质均没有影响.