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相似文献
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1.
以PCR鉴定转基因植株的微量DNA提取方法   总被引:25,自引:2,他引:25  
报道了将Dr Marc Zabeau的AFLP技术中的DNA提取方法用于以PCR技术鉴定转基因植物-拟南芥、烟草和芜菁中。该方法需约1h可完成植物DNA的提取,样品用量仅为30 ̄100mg,产量可达30 ̄80μg/g。粗提DNA(溶于10μL TE缓冲液)不必经过纯化,用TE缓冲液稀释5 ̄10倍即可直接用于PCR分析。在拟南芥、烟草和芜菁转基因植物鉴定中应用表明这一方法是目前以PCR法鉴定转基因植  相似文献   

2.
提取植物和微生物DNA的SDS—CTAB改进法   总被引:7,自引:1,他引:7  
该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总DNA的方法,该法是对提取真菌DNA的SDS-CTAB法进行改进而成,经过修改后的SDS-CTAB法可在数小时内高效地提取细胞总DNA。制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于20kb的DNA主带,基本无DNA碎带;不用RNase处理,就已经无RNA的干扰。OD260/280值显示产物纯度较高,无需任何纯化处理即可以用于PCR扩增和RAPD分析。  相似文献   

3.
提取植物和微生物DNA的SDS-CTAB改进法   总被引:40,自引:1,他引:40  
该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总DNA的方法,该法是对提取真菌DNA的SDS CTAB法进行改进而成,经过修改后的SDS CTAB法可在数小时内高效地提取细胞总DNA.制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于20kb的DNA主带,基本无DNA碎带;不用RNase处理,就已经无RNA的干扰.OD260/280值显示产物纯度较高,无需任何纯化处理即可以用于PCR扩增和RAPD分析  相似文献   

4.
以PCR鉴定转基因植株的微量DNA提取方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
报道了将DrMarcZabeau的AFLP(AmplifiedFragmentLengthPolymor-phism)技术中的DNA提取方法用于以PCR(PolymeraseChainReaction)技术鉴定转基因植物——拟南芥、烟草和芜菁中。该方法需约1h可完成植物DNA的提取,样品用量仅为30~100mg,产量可达30~80μg/g.粗提DNA(溶于10μLTE缓冲液)不必经过纯化,用TE缓冲液稀释5~10倍即可直接用于PCR分析。在拟南芥、烟草和芜菁转基因植物鉴定中应用表明这一方法是目前以PCR法鉴定转基因植株T1代单株幼苗的一种简便、快速、有效的方法。  相似文献   

5.
植物总DNA和核DNA提取及其纯度的研究   总被引:18,自引:1,他引:18  
采用氯仿-异戊醇-RNA酶法及其改良法从小麦、燕麦黄化苗和大豆胚轴中提取植物总DNA和核DNA,结果表明:DNA纯度A260/A280≥1.80,A260/A230≥2,00,DNA片段为50Kb左右,均符合DNA分子育种的要求。  相似文献   

6.
球壳孢目真菌高分子量纯DNA的大量提取   总被引:2,自引:0,他引:2  
采用液氮冷冻研磨破碎菌体细胞壁,氯仿-异成醇反复抽提去蛋白的方法,成功地提取了球壳孢目5属17种24个菌株的DNA,所得样品纯度高,其A260/A280多在1.80~1.95之间,A230/A260在0.41~0.59之间,紫外吸收光谱符合天然DNA标准吸收光谱,热变性增色效应在32%~49%之间,可用于Tm值法测定G+Cmol%和分光光度法分析DNA同源性。此法每克湿干菌体可得纯DNA40~80μg,产量高时可达159.9μg/g,很适合真菌高分子量纯DNA的大量提取。  相似文献   

7.
采用异硫氰胍变性法提取鸡外周血淋巴细胞总RNA,通过斑点杂交试验探索了以糖皮质体cDNA为探针定量检测鸡糖皮质激素受体mRNA的简便快速方法。  相似文献   

8.
双链RNA分析技术在鉴定RNA病毒中的应用   总被引:3,自引:0,他引:3  
dsRNA技术是以无RNA病毒或类似病毒因子侵染的植物组织中不含有容易鉴定的同原大分子的dsRNA(>0.1×106)存在为前提。在植物体内dsRNA是RNA病毒和类病毒因子存在的迹象,dsRNA包括dsRNA病毒的基因或ssRNA病的复制中间型。dsRNA在寄主组织相当稳定,可以用物理和化学的方法分离出来。叙述了dsRNA技术用于植物病毒群、成员、同一病毒的不同株系、感染作物的新病毒及其复合侵染、类病毒、卫星病毒等的鉴定。证明该方法使用广泛、快速准确,不需要贵重设备,在一般实验室中即可进行。该方法有重要应用和学术价值,已引起植物病毒和植物病理学工作者广泛兴趣。  相似文献   

9.
本研究改进了用PCR合成cDNA的方法。先用具有长链合成能力的高效反转录酶合成第一链cDNA,用多种RNA酶去除RNA后,在第一链cDNA3’端用末商转移酶特异性加上多个dGTP,再用具高保真和长链合成能力的耐高温DNA聚合酶PCR扩增总cDNA。总cDNA长度分析试验结果表明本法合成的总cDNA质量高。  相似文献   

10.
以对小麦白粉病菌免疫的小黑麦异多附加系M17(1R“6R”)为材料,一组接种小麦白粉病菌,另一组不接种.分别提取两组叶片的总RNA,经磁珠法分离出poly(A+)RNA,以Oligo(dT)为引物,经反转录合成cDNA.将接种组双链cDNA克隆进λgt10载体,得到一个含9.8×104个重组噬菌体的cDNA文库.两组cDNA双链经切口平移法制成总cDNA探针,分别与cDNA文库杂交,通过差别筛选的方法,找到了6个与小麦白粉病抗性有关的cDNA克隆.  相似文献   

11.
Web2.0,以个人为中心的互联网时代的到来   总被引:15,自引:0,他引:15  
本文介绍了Web2.0的知识和背景,对Web2.0出现的基础以及典型技术和应用作了阐述,同时对其作出了前景展望。  相似文献   

12.
【目的】 研究盐胁迫条件下,葡萄叶片中多胺含量、多胺氧化酶、多胺合成酶活性以及激素的动态变化,研究不同盐胁迫强度对多胺类物质及激素代谢的影响。【方法】 采用盆栽基质培养模拟盐胁迫环境,设置4个NaCl处理梯度:0 (CK)、1、2和3 g/kg。多胺和激素含量的测定采用高效液相色谱法,多胺合成及分解酶活性的测定采用紫外分光光度计比色法。【结果】 盐胁迫处理后,葡萄叶片中多胺含量和脱落酸含量较对照而言显著增加,玉米素含量显著降低,随胁迫时间的延长,Put、Spm、Spd、ABA以及PAO、DAO、ADC、ODC、SAMDC活性均呈先上升后下降趋势,在10 d及10 d后达到峰值。ZT呈逐渐下降的趋势,并随胁迫强度增大而减小;进行显著性分析后,叶片中多胺含量与Put、Spm、Spd含量呈极显著正相关,DAO、ADC、ODC活性与Put含量呈显著正相关,PAO与SAMDC活性与Spm和Spd含量也呈极显著正相关。【结论】 3种多胺经酶的合成代谢后和激素共同缓解葡萄苗所遭受到的盐胁迫,期间主要发生作用的是多胺合成酶,盐胁迫下多胺与激素含量之间的变化关系也十分密切。  相似文献   

13.
迟贵富  张昱  李亮  钟子琳 《安徽农业科学》2009,37(12):5585-5587
以抚顺地区3个国家基本站50余年气象资料为依托,采用Microsoft Excel工作表实现由气候和农业气候2部分构成的气象与农业综合信息处理系统的基本思路、方法、内容、用途和使用情况。为了实现气候分析及应用的科学化、客观化、系统化、规范化、程序化及连续化的业务目标,按业务流程设计与实现的,包括资料处理、气候趋势模拟、气候预测、气候鉴定、季节性信息化处理、农作物产量预报、气候生产潜力分析等一系列内容在内的系统建设。关键是解决了大量的计算问题,建立了区域性通用模式。  相似文献   

14.
葡萄盆栽技术,包括择土选种、露地扦插、田间管理、装盆及整形、肥水管理等内容,对葡萄盆栽爱好者有一定的指导意义。  相似文献   

15.
Biomass yields and concentrations of crude protein(CP), ether extract(EE), neutral detergent fiber(NDF), acid detergent fiber(ADF), and crude fiber(CF) were analyzed for five cultivars of summer-sown maize(Zea mays L.) stover grown in field trials at three rates of N fertilization, and sampled immediately after grain harvest.The results revealed differences in yields and concentrations of nutrients according to stalk height and hence harvest portion among the cultivars.N application greatly increased biomass yield and CP, especially in upper stalks and to a lesser extent, EE.Concentrations of NDF and ADF decreased as N rate increased.The results show that stovers from all local popular maize cultivars are suitable as animal fodder and that moderate N application improves feed quality of stover.  相似文献   

16.
民勤绿洲荒漠交错带三种沙丘类型的自然植被特征   总被引:4,自引:1,他引:4  
基于对民勤沙井子地区植被调查数据,研究了固定沙丘、半固定沙丘和流动沙丘3种沙丘类型的自然植被特征.结果表明:从固定沙丘、半固定沙丘到流动沙丘,总盖度、灌木盖度下降,草本盖度增加.物种丰富度减小是物种多样性下降的主要原因.从植物的生活型来看,多年生草本和灌木类植物受沙丘类型的影响最大,而一年生草本和半灌木可存活于不同沙丘类型.白刺的生态优势度(重要值)由小到大依次为固定沙丘、半固定沙丘、流动沙丘.植物多样性与白刺的生态优势度呈负相关.不同沙丘类型白刺地上生物量变化明显,半固定沙丘白刺生物量最大.  相似文献   

17.
寄生虫引起的草鱼鳃病的组织病理比较研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
本文对草鱼的隐鞭虫病、车轮虫病、小瓜虫病、指环虫病、三代虫病及中华鱼蚤病六种寄生虫性鳃病的组织病理变化进行比较研究,寄生虫性鳃病均可引起鳃组织发生炎症反应,粘液分泌亢进,嗜酸粒细胞和淋巴细胞浸润;但又因病原体的种类不同,危害鱼的方式、方法不同,因此病理变化又有很大差别,对鱼危害较大的均为变质性炎,如隐鞭虫病;对鱼危害较小的则属增生性炎,如中华鱼蚤病.  相似文献   

18.
Urban water consumption has some characteristics of grey because it is influenced by economy, population, standard of living and so on. The multi-variable grey model (MGM(1,n)), as the expansion and complement of GM(1,1) model, reveals the relationship between restriction and stimulation among variables, and the genetic algorithm has the whole optimal and parallel characteristics. In this paper, the parameter q of MGM(1,n) model was optimized, and a multi-variable grey model (MGM(1 ,n,q)) was built by using the genetic algorithm. The model was validated by examining the urban water consumption from 1990 to 2003 in Dalian City. The result indicated that the multi-variable grey model (MGM(1,n,q)) based on genetic algorithm was better than MGM(1,n) model, and the MGM(1,n) model was better than MGM(1,1) model.  相似文献   

19.
Campylobacter species are a major cause of foodborne bacterial infections in both developed and developing countries worldwide. Campylobacter jejuni is responsible for the majority of infections. This study was conducted to identify virulenceassociated genes in Campylobacter species isolated from livestock production systems in South Africa. A total of 250 fecal samples consisting of cattle(n=50), chickens(n=50), goats(n=50), sheep(n=50) and pigs(n=50) were randomly collected from livestock in Eastern Cape and KwaZulu-Natal provinces of South Africa between April and October 2018. The samples were analyzed for the presence of virulence genes in Campylobacter species using molecular PCR-based methods. It was found that 77 and 23% of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli respectively were isolated from all the livestock samples. There were positive significant(P0.05) correlations amongst all the virulence genes that were investigated. Chisquare and Fisher's exact tests were implemented to test for the effect of livestock species on the presence or absence of virulence genes. The study demonstrated that most of livestock species can potentially cause zoonotic infections and food poisoning due to the high prevalence of Campylobacter. The high prevalence of virulence genes highlights the significance of Campylobacter in livestock production systems in South Africa. This requires the implementation of one-health approaches to reduce the impact of foodborne and zoonotic diseases for the welfare of human and animal health.  相似文献   

20.
选体重约38公斤的长白(♂)×成华(♀)杂交猪20头,随机分为四组,饲予四种不同的饲粮,研究饲粮中添加铜和/或喹乙醇对猪生产性能和某些血液生化指标的影响。结果表明:基础组、加铜组、加喹乙醇组和两者同时加组全期日增重分别为674、761、796、678克,日采食量分别为2.50、2.65、2.74、2.40公斤,饲料利用率分别为3.73、3.49,3.44、3.54,添加铜和/或喹乙醇对试验第65天血清铜兰蛋白、尿素氨及屠宰率、背膘厚和眼肌面积无显著影响(p>0.05);添加铜使65天血清碱性碱酸酶活性极显著增高(p<0.01),添加喹乙醇有使之升高的趋势,两者同时添加时,碱性酸磷酶活性降低。  相似文献   

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