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RNA: guiding gene silencing 总被引:1,自引:0,他引:1
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总结了RNA沉默及病毒RNA沉默抑制因子(VSRs)的研究进展,以及病毒基因沉默抑制因子利用甘氨酸/色氨酸(GW)模型作为ARGONAUTE(AGO)钩和寄主发生RNA沉默的重要作用部位相互结合从而抑制基因沉默的研究机制。通过研究发现,在酵母、动植物细胞中,一些包含GW模型的蛋白质被认为是RNA沉默效应复合物中AGOs的重要协助者。结果说明,GW模型是一种能用于调节RNA沉默途径活性的万能的、有效的工具,用GW模型竞争性结合AGOs并抑制寄主基因沉默可能是一种被许多病原菌用于抵抗寄主RNA沉默的方法。 相似文献
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双链RNA激发的植物基因沉默及其在植物育种上的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
在生物体内,存在大量的非编码RNA(ncRNA),小干扰RNA(siRNA)是其中一种,由双链RNA切割形成,能干扰基因表达,激发转录后的基因沉默。尽管双链RNA干扰是把基因"敲低"而不是"敲除",但它的高效和易操作性使之成为研究植物基因功能的有用工具,并通过转基因途径用于植物改良。与反义RNA技术和共抑制技术相比,RNA干扰对基因的沉默效率高,效果稳定。单基因RNA干扰就可调控多基因家族控制的农艺性状,而不必累积单基因突变。把病毒基因构建成反向重复结构转入植物体内,其转录出的RNA会通过分子内序列互补形成双链结构,激发转基因植物的RNA干扰机制,将入侵病毒的同源序列降解,使转基因植株获得对病毒的抗性。RNA干扰型抗病毒转基因植株中,转病毒基因的mRNA不存在或存在量很少,也不会翻译成有功能的病毒蛋白质,因此不存在病毒RNA重组、异源包装及协生作用的潜在生物风险,具有较高的生物安全性。 相似文献
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陈占洲 《邯郸农业高等专科学校学报》2004,21(4):3-5
本文根据目前RNA介导的植物病毒抗性(RMVR)、转录后基因沉默(PTGS)的研究成果,从RMVR与PTGS的关系和机制、植物采用基因沉默产生抗性、病毒抑制基因沉默致病及共同进化等几个方面进行介绍了基因沉默可能是植物抵抗病毒的一种机制,深入研究基因沉默不仅在抗病机制上有重要的理论意义,而且对彻底解决植物病毒问题有较大的潜在实用价值。 相似文献
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用反义RNA技术创造高直链淀粉玉米材料 总被引:3,自引:0,他引:3
【目的】利用反义RNA技术调控玉米淀粉的生物合成过程,创造高直链淀粉玉米材料。【方法】克隆玉米淀粉分支酶(sbe2a)基因片段,以载体pWGLL为基础,构建高效反义表达载体,通过花粉管通道法将其导入玉米自交系铁7922中。【结果】获得了4株转基因株系,GFP表达检测、PCR扩增和Southern杂交结果表明,目的基因已整合到基因组中,且能够遗传。对4株转基因植株进行RT-PCR和淀粉分支酶活性检测,结果表明转反义sbe2a玉米淀粉分子酶基因的转录受到了明显抑制,淀粉分支酶活性明显低于野生型,相差最多的降低79.4%;直链淀粉含量也发生明显的变化,最高的提高了84.3%,且总淀粉含量与对照之间基本没有差异。【结论】采用反义RNA技术通过沉默内源sbe2a,可获得高直链淀粉含量的玉米材料。 相似文献
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RNA干涉及其应用 总被引:1,自引:0,他引:1
在各种各样的真核生物当中,双链RNA(dsRNA)促使了有效的同源mRNA分子降解,这个过程被称为RNA干扰(RNAi)。RNAi现象通过调控RNA抑制基因表达,它在植物、动物、真菌中广泛存在,被认为是一种抑制病毒性复制和转座子活动的抗御机制,而在此过程中,侵染型病毒为了能够不被这种机制干扰抑制,继续在寄主体内生存、繁殖,则产生了一种反抗御机制———即产生抑制蛋白来对付转录后基因沉默(PTGS)。对RNAi以及RNAi抑制物的作用机制、抑制物类型、特点及相关应用方面作了比较详尽的综述。dsRNA介导的PTGS将是分子生物学领域的研究热点之一,在研究基因功能,基因治疗,抗病毒基因工程,解剖和调控次生代谢途径等方面有着广泛的应用前景。 相似文献
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Baulcombe DC 《Science (New York, N.Y.)》2000,290(5494):1108-1109
Eukaryotic cells have developed an elegant system called RNA silencing for getting rid of foreign RNAs whether they be of viral, retrotransposon, or transgene origin. In his Perspective, Baulcombe examines new findings (Wu-Scharf et al.) showing that in a green alga the gene responsible for RNA silencing encodes an RNA helicase (related to proteins in worms and other organisms) that is required for regulation of gene expression at the RNA level. 相似文献
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A calmodulin-related protein that suppresses posttranscriptional gene silencing in plants 总被引:1,自引:0,他引:1
Anandalakshmi R Marathe R Ge X Herr JM Mau C Mallory A Pruss G Bowman L Vance VB 《Science (New York, N.Y.)》2000,290(5489):142-144
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Identification of virus-encoded microRNAs 总被引:1,自引:0,他引:1
Pfeffer S Zavolan M Grässer FA Chien M Russo JJ Ju J John B Enright AJ Marks D Sander C Tuschl T 《Science (New York, N.Y.)》2004,304(5671):734-736
RNA silencing processes are guided by small RNAs that are derived from double-stranded RNA. To probe for function of RNA silencing during infection of human cells by a DNA virus, we recorded the small RNA profile of cells infected by Epstein-Barr virus (EBV). We show that EBV expresses several microRNA (miRNA) genes. Given that miRNAs function in RNA silencing pathways either by targeting messenger RNAs for degradation or by repressing translation, we identified viral regulators of host and/or viral gene expression. 相似文献
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【目的】研究细胞色素P450超家族CYP85A亚家族基因在棉花株高发育中的生物学功能,为陆地棉株高分子育种提供理论依据和基因资源。【方法】 采用同源克隆方法,从陆地棉中克隆CYP85A家族基因GhCYP85A2-1,利用烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus, TRV)诱导的基因沉默技术(Virus-induced gene silencing, VIGS)构建GhCYP85A2-1基因沉默载体,利用qRT-PCR技术检测侵染棉花幼苗的基因表达量。【结果】 GhCYP85A2-1基因沉默植株的株高显著降低,基因的表达量也显著下降。【结论】 GhCYP85A2-1基因在棉花株高发育过程中起到重要调控作用。 相似文献
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植物病毒编码RNA沉默抑制子的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
RNA沉默是真核生物用来抵抗病毒入侵的一种普遍而又古老的防御机制,而病毒在进化过程中也相应地产生了一些与之抗衡的功能,其中编码沉默抑制子就是对抗RNA沉默的有效策略。它们分别能够在不同阶段,以不同的方式干扰来自于寄主的RNA沉默,从而有效地建立侵染。本文主要针对目前已经发现的由植物病毒编码RNA沉默抑制子的作用特征、鉴定方法以及作用副效应进行综述,并讨论了RNA沉默抑制子的研究及应用前景。 相似文献
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RNA polymerase IV directs silencing of endogenous DNA 总被引:1,自引:0,他引:1
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植物转基因沉默可以发生在染色体DNA、转录和转录后3种不同的层次上,转录水平基因沉默机制涉及DNA甲基化、位置效应、重复序列和同源序列等的作用,转录后水平基因沉默机制常用RNA阈值模型、异常RNA模型、双链RNA模型和未成熟翻译终止模型等解释。使用去甲基化、控制外源基因的拷贝数及结合位点、利用MAR序列、优化使用增强子、启动子等手段可以解除部分转基因沉默。 相似文献
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Argonaute2 is the catalytic engine of mammalian RNAi 总被引:4,自引:0,他引:4
Liu J Carmell MA Rivas FV Marsden CG Thomson JM Song JJ Hammond SM Joshua-Tor L Hannon GJ 《Science (New York, N.Y.)》2004,305(5689):1437-1441
Gene silencing through RNA interference (RNAi) is carried out by RISC, the RNA-induced silencing complex. RISC contains two signature components, small interfering RNAs (siRNAs) and Argonaute family proteins. Here, we show that the multiple Argonaute proteins present in mammals are both biologically and biochemically distinct, with a single mammalian family member, Argonaute2, being responsible for messenger RNA cleavage activity. This protein is essential for mouse development, and cells lacking Argonaute2 are unable to mount an experimental response to siRNAs. Mutations within a cryptic ribonuclease H domain within Argonaute2, as identified by comparison with the structure of an archeal Argonaute protein, inactivate RISC. Thus, our evidence supports a model in which Argonaute contributes "Slicer" activity to RISC, providing the catalytic engine for RNAi. 相似文献