影响辣椒花药胚状体发生的因素

对17个辣椒基因型材料进行了花药培养,分别研究了基因型、激素组合、高温预处理、接种时间对辣椒花药胚状体发生的影响。结果表明,不同基因型辣椒花药培养差异较大,其中,最易产生胚状体的是海花三号;添加合适的激素配比也可以提高辣椒花药培养效果,0.1 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L KT是辣椒花药胚状体诱导培养最适宜的生长调节剂组合;接种后35℃高温预处理6~10 d可大大提高胚状体诱导率;2—3月接种的花药最易出现胚状体。     

不同培养基和激素对辣椒花药培养的影响

选用试验前期筛选出的易产生愈伤组织和胚状体的8个不同基因型辣椒进行花药培养,对基本培养基成分、激素种类和浓度、材料基因型等影响花药培养的因素进行研究.结果表明:1)NTH培养基为适宜于辣椒花药培养的最佳培养基,MS和B5培养基次之.2)以NTH为基本培养基培养红艳花药,0.5 mg/L NAA +1.0 mg/L KT + 0.3 mg/L BA +1.0 mg/L 2,4-D是花药愈伤组织诱导培养最适宜的激素组合;0.3 mg/L NAA +1.0 mg/L KT + 0.1 mg/L BA是花药胚状体诱导培养最适宜的激素组合.3)在相同条件下,不同基因型辣椒花药培养后的愈伤组织诱导率和产胚率均不同,愈伤组织诱导率为8.0% ~ 23.5%,胚状体诱导率最高为2%,最低为零.     

不同温度和外源添加物对辣椒花药的培养效果

[目的]探讨不同温度和外源添加物对辣椒花药培养的效果,为辣椒高效育种提供参考依据.[方法]以杂6、辛香8号和20114等3个品种辣椒花药为试材,分别在4℃低温和35℃高温下进行不同时间预处理,诱导其花药胚状体和愈伤组织,并在前期温度处理的基础上,分析不同外源添加物对杂6、辛香8号和8024花药胚状体和愈伤诱导效果的影响.[结果]4℃低温预处理3个品种辣椒花蕾对其花药愈伤组织和胚状体的诱导无促进作用;35℃高温预处理花药7～8 d,可大幅度提高其愈伤和胚状体的诱导率;MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L KT+1.0％ AC是诱导辣椒花药愈伤组织和胚状体的最佳培养基组合.[结论]将辣椒花药直接接种于MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L KT+1.0％ AC培养基中,经35 ℃高温处理7～8 d可极大提高其胚状体诱导率和愈伤诱导率,诱导出的胚状体可进一步分化出再生植株.     

辣椒花药培养的初步研究

以20个不同辣椒品种为材料,采取固液双层培养体系及低温预处理方式,探索基因型、基本培养基及激素组合、活性炭和低温预处理时间对花药培养的影响,以期为建立高效辣椒花药培养体系奠定基础.结果表明,获得了多种不同形态的胚状体及愈伤组织,以及4个易出胚甜椒基因型材料,分别为红英达、欧卡、巴顿和环球201.MS+0.05 mg/L KT--0.005 mg/L 2,4-D以及NLN-H+ 0.5 mg/L ZT+0.5 mg/L IAA培养基适合多个辣椒基因型成功出胚,出胚率最高达4.2％.4℃低温预处理24 h以及添加0.5 g/L活性炭均可以提高辣椒胚状体诱导率.     

温度及培养基中添加物对辣椒花药培养胚状体诱导的影响

对11个辣椒基因型材料进行了花药培养研究,分别研究了温度处理、培养基中添加无机盐和激素对辣椒胚状体诱导的影响。结果表明:4℃低温预处理花蕾3~5 d和接种后33℃高温处理7~9 d均可大大提高胚状体诱导率;MS培养基中添加50μmol/L的AgNO3大幅度提高了胚状体诱导率。添加适量的激素也可以提高辣椒培养效果,其中,添加2,4-D或KT的最适浓度为0.1 mg/L,而添加较高浓度的NAA(1.0 mg/L)辣椒胚状体诱导率达到最高。     

仙客来花药培养胚状体诱导影响因素的研究

把不同基因型仙客来的花药接种于B5培养基上进行培养，研究低温预处理、蔗糖浓度、基因型和植物生长调节剂等因素对仙客来花药胚状体诱导的影响。结果表明，花蕾经过4℃48h的预处理，能明显促进花药胚状体的诱导；仙客来花药在添加90g/L蔗糖的B5＋0．02mg／L（或0．1mg／L）NAA＋6-BA1．0mg／L培养基上胚状体诱导率最高；胚状体诱导率在基因型之间有明显的差异。     

预处理对萝卜离体小孢子发育的影响

研究了低温、甘露醇、秋水仙素预处理对5个萝卜品种离体小孢子发育的影响。结果表明,单纯的花枝低温预处理对小孢子发育没有影响,而低温结合甘露醇和秋水仙素预处理可提高萝卜离体小孢子的膨大率、成胚率及胚状体的再生率,且不同品种适宜的处理方式不同。B5-13培养基中添加15 g/L甘露醇预处理花药1 d或3 d,或B5-13培养基中添加10 mg/L秋水仙素预处理花药1 d或3 d均可不同程度地促进萝卜离体小孢子培养的成胚率。诱导出的胚状体除极少数没有形成再生植株外,大部分均获得了再生植株,有的再生率高达100%。     

国内外辣椒(C.annuum)单倍体育种技术研究进展

综述了辣椒花药和游离小孢子培养的研究进展.详细讨论了影响辣椒胚状体发生的主要因素,如基因型、供体植株生长环境条件、小孢子发育时期、预处理、培养基及其组成、培养条件等.指出了目前小孢子培养研究中存在的主要问题,并对单倍体育种技术的研究和应用作了展望.     

枸杞花药离体培养技术体系的建立

以宁杞1号为试验材料,探讨枸杞花药离体培养中不同激素组合、不同活性炭及蔗糖浓度、低温预处理或热激处理、不同光照培养条件对花药培养效果的影响.试验结果表明:最佳激素组合为2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,花药愈伤组织诱导率达11.7%;4 ℃低温预处理5 d和32 ℃高温预培养2 d,均可显著提高愈伤组织诱导率;添加活性炭能提高胚状体的诱导率;培养基中适宜的蔗糖浓度为3%;暗培养优于光照培养和弱光培养.愈伤组织转入分化培养基(MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L)分化出大量绿色小芽,分化芽转入生根培养基(MS+NAA 0.1 mg/L)中,20 d后得到完整植株.     

枸杞花药培养若干影响因子的研究

以宁杞1号、大麻叶、0207、蒙杞1号4种枸杞花药为试材,采用正交试验,对影响枸杞花药愈伤组织诱导率、胚状体发生率的因素进行了研究.结果表明:枸杞花药培养对基因型有很大的依赖性,宁杞1号是较容易培养的基因型;植物生长调节剂和基本培养基对枸杞花药培养的影响很大,1.0 mg/L 6-BA与0.1 mg/L NAA组合有利于胚状体的产生,1.0 mg/L 6-BA与0.5 mg/L 2,4-D组合适合于愈伤组织的诱导,MS培养基比B5培养基更适合枸杞花药培养;花药经过0.3%甘露醇预处理能提高愈伤组织诱导率;培养基中添加1.0 g/L活性炭、花药32 ℃热激处理24 h有利于枸杞胚状体的发生.     

辣椒组织培养再生体系的影响因素研究

以早熟辣椒、红线辣椒、茄门大辣椒(绿辣椒)3个品种为材料,研究了辣椒组织培养再生体系的影响因素。结果表明:红线辣椒为最佳基因型,辣椒离体再生最适外植体为茎段、子叶。诱导茎段愈伤生成的最佳培养基为MS+0.10 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA;子叶愈伤生成的最佳培养基为MS+0.10 mg/L6-BA+4.0 mg/L NAA;高效不定芽分化培养基为MS+5.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA;高效不定根分化培养基为MS+0.5 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA。     

辣椒组培外植体及不定芽诱导培养基的筛选

对辣椒杂交种陇椒3号和陇椒5号在不同培养基、不同激素水平下不定芽分化情况进行了研究,结果表明,B5培养基优于MS培养基,更能促进外植体的分化及再生;子叶的分化能力高于下胚轴,是辣椒离体组培的优良外植体;当B5培养基中激素配比组合为在6-BA 5.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L时,有利于陇椒3号和陇椒5号的分化再生,最早形成丛生芽。     

多效唑、矮壮素对彩色马蹄莲试管微型种球诱导的影响

【目的】利用植物生长调节物质对试管苗种球进行诱导,提高彩色马蹄莲种球繁育效率和组培苗移栽成活率,缩短育苗时间,减少病害发生,降低生产成本。【方法】挑选苗高3.0～7.0 cm、根茎直径0.3 cm以上的试管苗,接入添加不同用量蔗糖（2%～8%）、多效唑（1～8 mg/L）、矮壮素（2~16 mg/L）的培养基培养90 d后统计成球率,筛选适合彩色马蹄莲试管微型种球诱导的培养基。【结果】在改良MS培养基中,在相同多效唑和矮壮素用量条件下,随着蔗糖用量的增加,彩色马蹄莲成球率呈上升趋势;随着多效唑、矮壮素浓度的升高,成球率均呈先上升后下降的趋势,分别以添加4 mg/L多效唑、8 mg/L矮壮素的诱导效果最好,其中以多效唑4 mg/L与6％蔗糖的处理组合成球率最高,达100％,且平均直径与鲜重最高,形成的种球最大（3.2 cm）。多效唑与矮壮素对试管苗叶片、根的分化和伸长有明显的抑制作用。【结论】在改良MS+NAA 0.1 mg/L+琼脂7 g/L固体培养基中添加合适配比的蔗糖和PP333或多效唑,均可以成功诱导彩色马蹄莲组培苗在试管中结球,而多效唑对球茎的诱导形成作用明显优于矮壮素。     

碳源和植物生长调节剂对辣椒花药培养效率的影响（摘要）

[目的]为进一步提高辣椒花药培养效率。[方法]采用MS培养基,以博辣娇红为试材,研究碳源种类与浓度对花药愈伤组织诱导的影响;以佳玉为试材,按L16（4^5）正交试验设计,研究植物生长调节剂种类与浓度对辣椒花药培养效率的影响。[结果]愈伤组织和胚状体诱导率各浓度处理的均值麦芽糖虽略高于蔗糖,但未达差异显著水平;麦芽糖或蔗糖作碳源,3%～6%的浓度有利于提高愈伤组织与胚状体的诱导频率,超过6%以后,愈伤组织和胚状体诱导率随糖浓度的增加而极显著下降。生长调节剂对愈伤组织诱导率的影响为2,4-D﹥ZT﹥NAA﹥KT﹥6-BA;对胚状体诱导率的影响为2,4-D﹥NAA﹥ZT﹥KT﹥6-BA;2,4-D、ZT、NAA和KT对愈伤组织与胚状体诱导率均有显著或极显著影响;生长调节剂的使用浓度,2,4-D和ZT以1.0mg/L、NAA和KT对0.5mg/L的效果最好,ZT对提高愈伤组织和胚状体诱导率的效果比KT和6-BA都好;2,4-D1.0mg/L﹢ZT1.0mg/L﹢KT0.5mg/L﹢6-BA0.5mg/L是佳玉花药愈伤组织和胚状体诱导培养适宜的生长调节剂组合。[结论]该研究为辣椒花药培养研究提供了依据。     

青岛大花脱毒种苗快繁技术研究

【目的】探讨啤酒花品种青岛大花脱毒苗植株再生技术,以期获得青岛大花脱毒苗快速繁殖的便捷途径。【方法】以青岛大花脱毒苗的单芽茎段为外植体,分别以不同水质（自来水、凉开水、蒸馏水、当地井水）、不同前茬和简易营养液处理（带芽根茬、带芽根茬+简易营养液、新鲜培养基）及不同激素组合进行芽诱导和植株再生。【结果】在芽诱导及植株再生培养过程中,以当地井水进行外植体培养的效果较好,虽然其诱导芽数、新增芽数、增殖倍数稍低于对照蒸馏水,但生根茎段数、生根率、平均根长、茎粗和株高均最高,其次为凉开水处理;自来水处理的生根茎段数、诱导芽数、新增芽数、增殖倍数、株高等均明显低于蒸馏水对照。在前茬培养基上添加10 mL简易培养液对外植体培养20 d, 其诱导芽数、新增芽数、增殖倍数、株高均明显高于新鲜固体培养基处理,且叶色均浓绿。在不同激素组合中,随着6-BA、IAA浓度的增加,单芽茎段的诱导芽数、生根率、增殖倍数呈先降低后增加的趋势,其中以原继代培养的激素组合6-BA 0.1 mg/L +IAA 0.2 mg/L的诱导芽数、生根率、增殖倍数最高,其次为激素组合6-BA 0.01 mg/L +IAA 0.02 mg/L。【结论】在外植体诱导和植株再生培养中,可用当地井水、凉开水作为培养基介质取代蒸馏水;继续利用前代培养基并留茬、再适量添加简易培养液对外植体进行培养,可有效提高脱毒苗的增殖倍数,且再生苗质量不受影响;可使用含低浓度激素组合（6-BA 0.01 mg/L+IAA 0.02 mg/L）进行脱毒试管苗芽诱导和植株再生培养,从而节省生产成本。     

红叶石楠‘红罗宾’组织培养快繁技术的优化

试验以红叶石楠‘红罗宾’茎段为外植体,以MS为基本培养基,探讨了不同的植物生长调节剂及其组合对不定芽的诱导、增殖及生根的影响,从而优化红叶石楠的组培快繁体系。结果表明：（1）适宜的诱导培养基为：MS＋蔗糖30g/L＋琼脂7g/L＋NAA 0.1mg/L＋6-BA 1.0mg/L,诱导率为95%;（2）适宜的增殖培养基为：MS＋蔗糖30g/L＋琼脂7g/L＋TDZ 0.05mg/L＋ZT 0.2mg/L时,分化率达100%,增殖系数为7.1;（3）适宜的生根培养基为：1/2MS＋蔗糖30g/L＋琼脂7g/L＋NAA 1.0mg/L,生根率达95%,平均根数为16;（4）适宜的移栽基质为珍珠岩∶蛭石∶泥炭=1∶1∶1,成活率可达89%。     

晚香玉组培技术研究

以单瓣、重瓣两个晚香玉品种叶片为材料,选用4种升汞消毒时间、6种愈伤组织诱导培养基、6种分化培养基和9种生根培养基,研究不同基因型和激素组合对再生体系建立的影响。结果表明：（1）叶片的消毒时间为0．1％HgCl2浸泡2min;（2）诱导单瓣叶片愈伤形成的较适培养基为：MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA1．0mg／L：诱导重瓣叶片愈伤形成的较适培养基为：MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．5mg／L．（2）2单瓣叶片分化最佳配方为：MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L;重瓣叶片分化的较适培养基为：MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．2mg／L,（3）诱导生根的最佳培养基为：1／2MS＋KT0．2mg／L＋NAA0．5mg／L＋6-BA0．2mg／L。     

玉米自交系愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

玉米的组织培养比较困难,其再生体系还不完善,建立骨干自交系稳定、高效的遗传转化体系是玉米转基因技术的必要前提。以玉米常用自交系齐319、478、502、黄C和7922不同大小（1.0、1.5和2.0 mm）的幼胚为外植体,探讨不同基因型、胚大小和植物生长调节剂浓度对幼胚再生的影响,从而建立玉米高频再生体系。结果表明：以1.5 mm大小的齐319幼胚为外植体,愈伤诱导率最高,达到了86.2%;1.5 mg/L的24-D有利于胚性愈伤的形成和胚性的保持;两步法分化培养可以提高愈伤组织分化、再生成苗。确定了玉米自交系齐319较适合的培养程序为：将1.5 mm大小的幼胚盾片向上接于诱导培养基（N6＋24-D 1.5 mg/L＋L-脯氨酸0.7 g/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂粉8 g/L＋硝酸银5μmol/L）,在25℃下暗培养20 d;挑选胚性愈伤组织在温度25℃、暗培养条件下进行继代培养,继代培养基与诱导培养基相同,每14 d继代1次;将愈伤组织继代42 d后转移至分化培养基1（MS＋肌醇100 mg/L＋蔗糖60 g/L＋gelrite 3 g/L）,继续暗培养10 d左右,待愈伤组织形成象牙白色的块状物且有绿点出现时,将其转移到分化培养基2（MS＋肌醇100 mg/L＋蔗糖30 g/L＋gelrite3 g/L）进行光培养,2～3 d即可分化出苗;待幼苗长到4～5 cm高时,移至生根培养基（1/2 MS＋IBA0.8 mg/L＋蔗糖30 g/L）,14～21 d幼苗长出大量的根系,形成完整的植株。     

荸荠试管苗壮苗培育及小球茎再生研究

【目的】探讨荸荠试管苗壮苗方法和结球茎条件。【方法】以广西荸荠品种桂蹄1号试管苗为材料,分别进行不同蔗糖、PP333、温度等因素对荸荠试管苗壮苗及小球茎再生的影响。【结果】当6-BA偏低时（1.0 mg/L）,在不同培养基中添加30.0～120.0 g/L蔗糖,均可不同程度诱导荸荠试管苗形成小球茎,其中以30.0 g/L蔗糖的效果最好;当蔗糖浓度过高时则抑制小球茎形成。当6-BA偏高时（2.5 mg/L）,荸荠试管苗仅能诱导形成匍匐茎,而以添加80.0～100.0 g/L蔗糖的效果较好。在添加NAA和IBA条件下,不同蔗糖量均能诱导荸荠试管苗长出匍匐茎,但添加30.0～60.0 g/L蔗糖时可在匍匐茎顶端膨大形成小球茎,其中以30.0 g/L蔗糖的诱导效果最好。在含有NAA和IBA的培养基中添加适宜的PP333（0.3~1.0 mg/L）均能促进荸荠试管苗生根,并具有显著的壮苗效果,而对诱导荸荠试管结球茎数量影响不明显。在15~20℃条件下培养荸荠试管苗,添加蔗糖的培养基均未能诱导形成试管小球茎,而采用培养前20 d温度28~30℃、培养后40 d温度15~26℃条件,在培养基中添加生长素类或较低浓度6-BA时,含较低蔗糖量的培养基均能诱导较多的小球茎;当6-BA浓度较高时,仅能诱导荸荠试管苗长出匍匐茎。【结论】在MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂粉3.5 g/L培养基中添加PP333 0.3~1.0 mg/L,均具有很好的壮苗效果。在适宜的温度条件下,添加适宜的6-BA或NAA和IBA或蔗糖（30.0　g/L）均能诱导荸荠试管苗形成小球茎。