肉种鸡场传染性鼻炎的分离鉴定及防治

2008年2月某规模化肉种鸡场种鸡出现鼻腔与鼻窦发炎、流鼻涕、甩头、脸部肿胀等症状,疑为传染性鼻炎。对该鸡场进行病原分离,从25份病料中分离副鸡嗜血杆菌,经血清型鉴定A型8株,C型5株。药敏试验后,用敏感药物给发病鸡饮水配合研制的二价油乳灭活苗给发病鸡紧急免疫接种,治疗鸡传染性鼻炎效果很好。该研究为制定鸡传染性鼻炎的防治措施提供了试验依据。     

肉种鸡大肠杆菌脑型病原的分离鉴定及防治试验

[目的]为了明确河南省新乡市某肉种鸡场种鸡的发病原因。[方法]利用常规培养基,对190日龄发病种鸡的脑组织进行细菌分离与培养、生化鉴定、血清型鉴定、回归试验和药敏试验,并研制鸡大肠杆菌疫苗。[结果]从病鸡脑中分离到10株大肠杆菌,经O血清型鉴定,表明O22和O53各为4株,O86为2株。通过病原分离鉴定,确定此次肉种鸡脑型大肠杆菌病的病原为O22、O53和O86,并以此研制出油乳剂灭活苗。药敏试验结果表明,分离菌株对氟苯尼考、硫酸新霉素敏感。选择敏感药物进行积极治疗,及时有效地控制了疫情。[结论]用分离菌株研制成油乳剂灭活苗,用于鸡大肠杆菌病的预防,效果十分理想。     

鸡传染性鼻炎多价油乳剂灭活苗的研究

应用鸡传染性鼻炎标准A型菌株 (HPG— 0 0 83)和标准C型菌株 (HPG—Modesto)与山东分离株HPG—HZ株制备的鸡传染性鼻炎多价油乳剂灭活苗 ,通过多批次免疫试验 ,安全性试验 ,攻毒保护试验 ,抗体产生及其变化规律和免疫期测定 ,结果表明 ,疫苗接种后 15天产生HPG血清凝集抗体 ,免疫接种 6个月用强毒攻击 ,免疫保护率为 10 0 % ,疫苗保存期一年以上     

鸡肾型传染性支气管炎的诊断与防治

甘鸡场鸡发生以呼吸道及肾病变为主的疾病经流行病学调查、病理剖检、病毒分离、电镜观察生物学特性及理化特性试验，血清中和试验，动物回归等确诊为肾型传染性支气管炎。采用分离毒鸡组织灭活苗结合Ａｕｓｔ－Ｔ株灭活油乳苗有效地防治了该病。     

副鸡嗜血杆菌的分离与鉴定

[目的]对1例鸡传染性鼻炎疑似病例进行病原菌的分离与鉴定。[方法]从安徽省某鸡场发生的以脸面肿胀、流泪和产蛋下降为临床特征的病鸡上呼吸道分泌物中分离细菌,并进行染色、镜检、菌落形态观察,并利用"卫星现象"和PCR等方法进行鉴定。[结果]成功分离到1株副鸡嗜血杆菌,经鉴定为C型副鸡嗜血杆菌。动物回归试验表明,该分离株能引起典型的鸡传染性鼻炎,对鸡具有较强的致病力。[结论]该研究可为鸡传染性鼻炎的预防与控制提供依据。     

鸡传染性鼻炎多阶油乳剂灭活苗的研究

应用鸡传染鼻炎标准Ａ型菌株（ＨＰＧ－００８３）和标准Ｃ型菌株（ＨＰＧ－Ｍｏｄｅｓｔｏ）与山东分离株ＨＰＧ－ＨＺ株制备的鸡传染性鼻炎多价油乳剂灭活苗,通过多批次免疫试验,安全性试验,攻毒保护试验,抗体产生及其变化规律和免疫测定,结果表明,疫苗接种后１５天产生ＨＰＧ血清凝集抗体,免疫接种６个月用强毒攻击,免疫保护率为１００％,疫苗保存期一年以上。     

猪链球菌的分离鉴定及自家灭活苗研制

为确诊猪链球菌病,筛选敏感药物和研制自家灭活苗防治该病,从送检病猪体内分离病原菌,通过对分离菌的形态染色、分离培养、生化试验、血清型鉴定等方法鉴定菌株;并通过药敏试验筛选敏感药物,配制铝胶佐剂,制备自家铝胶灭活苗对其进行防治。实验结果表明,分离鉴定的菌株为2型猪链球菌,分离菌对恩诺沙星、氨苄青霉素、庆大霉素、阿莫西林、头孢拉定高敏,用研制的猪链球菌自家铝胶灭活苗防治该病安全有效。结果提示,猪场链球菌病须经实验室分离鉴定病原才可确诊,临床治疗用药应筛选敏感药物,用自家灭活苗防治有较好效果。     

鸡大肠杆菌多价灭活苗的研制

人福建省几个主要养鸡地区发病鸡场的病、互鸡的内脏和死胚中分离到的大肠杆菌，对其进行了生化试验，致病性试验和血清型鉴定，选择血清型为O78、O2、O1和O36的4个代表菌株，以油乳剂、蜂胶和铝胶为佐剂，按一定比例配制成每毫升含100亿个大肠杆菌的多价灭活苗，经现场试验证明，该疫苗安全、有效、其中油乳剂灭活苗的保护期比蜂胶灭活苗长，但蜂胶灭活苗的抗体水平上升比油乳剂苗快；铝胶苗的效果不及蜂胶苗和油苗。     

鸡传染性支气管炎及大肠杆菌病二联灭活油乳苗的研制和应用

用本地分离株及标准株筛选出４个ＩＢＶ强毒株（呼吸型和肾型）及７个至Ｅ．ｃｏｌｉ强毒菌株（血清型为Ｏ１，Ｏ２，Ｏ７８）作为制苗基础毒株和菌株，并加入发病鸡场的自家分离株，作为制苗毒种和菌种，并将制成灭活的尿囊液和菌液以及油佐剂配成鸡传染性支气管炎及大肠杆菌病二联灭活油甩苗。试验证明：该油苗可使鸡产生坚强的免疫力，二免后１０个月攻毒保护率达１００％，ＩＢＶ抗体的ＨＩ价为１：２５６，Ｅ．ｃｏｌｉ抗体直接     

山西省鸡传染性鼻炎病原株的分离鉴定

从山西省某鸡场疑似鸡传染性鼻炎的病鸡眶下窦分离到2株革兰氏阴性小杆菌,通过PCR扩增其16S rDNA序列,测序结果经过比对鉴定为副鸡嗜血杆菌。玻板凝集试验结果确定分离株血清型为A型;抗生素药物敏感试验结果表明,分离菌株对磺胺甲恶唑、磷霉素高敏,对头孢哌酮、头孢噻肟、氯霉素、卡那霉素中敏,对庆大霉素、氧氟沙星耐药。     

潍坊地区肉鸡致病性大肠杆菌的血清型鉴定及药敏试验

从山东潍坊地区不同鸡场采集病料,经生化试验和血清型鉴定了95株大肠杆菌,78株为致病性大肠杆菌,它们覆盖了14种血清型,其中O78、O2、O15、O11优势血清型.对这些致病性大肠杆菌进行药敏试验,受试菌的平均耐药率为40.6%,同时多重耐药现象普遍.在21种受试药物中,高敏的药物有4种,分别为头孢噻肟钠、磷霉素钠、氟苯尼考、头孢曲松钠.试验结果对指导潍坊地区肉鸡大肠杆菌病防治具有参考价值.     

蛋鸡重组高致病性禽流感H5N1(Re-4+Re-5)2价灭活疫苗免疫效果的评价

参照农业部既定的蛋鸡高致病性禽流感免疫程序,对100只蛋鸡雏免疫重组高致病性禽流感H5N1(Re-4+Re-5)2价灭活疫苗,300只蛋鸡雏分3组分别免疫重组高致病性禽流感H5N1(Re-4)株、(Re-5)株灭活单苗作为对照,通过免疫应激反应观察、抗体效价检测,以评价该疫苗的免疫效果。     

鸡新城疫病毒和禽肺炎病毒二重RT-PCR检测方法的建立及应用

[目的]建立一次性可同时扩增鉴别鸡新城疫病毒(NDV)和禽肺炎病毒(APV)的二重RT-PCR,为有效防控鸡新城疫和禽肺炎病毒病提供技术支持.[方法]根据GenBank已发表NDV的F基因序列(GenBank登录号JX840454)和APV的F基因序列(GeneBank登录号AF187154)分别设计2对特异性引物,应用这2对引物建立可同时检测鉴别NDV和APV的二重RT-PCR,对扩增条件进行优化,并通过特异性试验、敏感性试验和临床样品检测等验证其实用性.[结果]优化后的二重RT-PCR可特异性扩增出参试NDV毒株(LaSota株、F48E9株、I株)及APV/MN-10毒株的目的条带,其大小分别为247和424 bp,而其他对照参试毒株在247和424 bp处均无特异条带出现.二重RT-PCR针对NDV和APV的最低检出限均为10 pg的RNA.应用建立的二重RT-PCR对132份从广西采集的病鸡样品进行检测,结果得到NDV阳性样品26份、APV阳性样品2份,与血清学方法的鉴定结果一致.随机选取的2份NDV阳性PCR产物与NDV(GenBank登录号JX840454)的F基因序列一致,同源性达100%;2份APV阳性PCR产物与APV(GenBank登录号AF187154)的F基因序列也完全一致,同源性达100%.[结论]针对NDV和APV建立的二重RT-PCR具有特异性好、灵敏度高、简便快速的特点,可用于临床快速鉴别诊断,为有效防控鸡新城疫和禽肺炎病毒病提供了技术支持.     

患红底板症的中华鳖幼鳖的病原菌分离与鉴定

【目的]为中华鳖红底板病病原鉴定和防治提供参考依据。[方法]从患红底板症的中华鳖幼鳖的血、心、肝、脾、肠等组织中分离病原菌,并进行形态学观察、16SrDNA序列分析鉴定及药敏试验。[结果]从中华鳖中分离到2株细菌,分别为嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）和格氏乳球菌（Lactococcus garviae）。人工感染试验结果表明2株分离菌对中华鳖都有致病性;用含有抗生素的20种药敏纸片进行药敏试验,发现该株嗜水气单胞菌对复达欣高敏,对呋喃妥因中敏,对其他18种药物耐药;该株格氏乳球菌对复达欣、万古霉素、呋喃妥因、妥布霉素、头孢唑啉等5种高敏,对庆大霉素、卡那霉素、头孢西丁等3种中敏,而其他13种药物耐药。[结论]从中华鳖幼鳖中分离的2株细菌具有较强的致病性和耐药性。     

黑龙江大庆地区禽流感流行病学调查

为了了解禽流感病毒在黑龙江大庆地区禽类中的流行情况,我们在大庆地区五区四县采集了1180份样品,采用常规鸡胚尿囊腔接种方法分离病毒,利用微量血凝试验（HA）及RT—PCR鉴定。结果在大庆地区所采集的样品,未检测出有血凝活性;而在绥化地区采集样品中检测出3株禽流感病毒。虽然大庆地区未检测出禽流感病毒,但在周边的绥化地区检测出禽流感病毒,大庆市有被禽流感传染的威胁,提示应加强对禽流感的预防。     

健康水貂肠道中拟杆菌的分离鉴定及药敏实验

从健康水貂肠道粘膜及内容物分离出3株菌株,编号为B1、B2和B3。对所分离菌株进行纯化培养、形态学观察、革兰氏染色及生化试验鉴定。初步鉴定结果表明:B1、B2为脆弱拟杆菌,B3为多形拟杆菌。药敏试验显示分离到的菌株对头孢拉叮、二甲嘧啶、硫酸红霉素、阿莫西林、硫酸庆大霉素、多粘菌素不敏感,对硫酸链霉素、氧氟沙星、头孢噻肟敏感。本试验为毛皮动物专用微生态制剂的研制奠定了理论基础。     

广西香蕉枯萎病病原菌4号生理小种的分子检测与鉴定

[目的]明确在广西个别香蕉产区发现的香蕉枯萎病病原种类,为防控该病害提供科学依据.[方法]从广西不同香蕉产区采集香蕉枯萎病病株样本,分离纯化获得6株菌株,以香蕉枯萎病1号和4号生理小种为阳性对照,采用特异PCR的方法,对分离到的6株菌株进行分子检测,并用盆栽香蕉和西贡蕉小苗接种进行菌株致病性鉴定.[结果]经ST1/ST2特异引物扩增,1号菌株与香蕉枯萎病菌1号生理小种扩增到约200 bp片段;2~6号菌株和香蕉枯萎病菌4号生理小种扩增到约250 bp片段.与标样对比结果表明,1号菌株为香蕉枯萎病1号生理小种,2~6号菌株为香蕉枯萎病4号生理小种;盆栽接种致病性鉴定结果与分子检测结果相同.[结论]广西个别蕉区已遭受香蕉枯萎病菌4号小种侵染,各级部门应高度重视.     

禽呼肠孤病毒分离株σ2蛋白基因克隆及序列分析

为了解禽呼肠孤病毒（ARV）广西分离株与常用疫苗株在基因水平上的差异,将从广西某鸡场分离获得的2株ARV（R1、R2）分离株的σ2蛋白基因经RT-PCR扩增后,连接pMD18-T载体并转化大肠杆菌DH5α,重组质粒经PCR、双酶切鉴定及序列分析。结果表明,2株ARV分离株的σ2蛋白基因已成功克隆到质粒载体上;经序列分析发现,2株ARV分离株与ARV标准株S1133的核苷酸同源性分别高达99.2%和99.3%,其推导的氨基酸同源性分别高达98.1%和98.4%;两分离株间的核苷酸同源性为99.7%,其推导的氨基酸同源性为98.5%,具有很高的同源性。     

湖南省岳阳市鸡源性大肠杆菌血清型鉴定

从湖南省岳阳市周边8个养鸡场收集病料,从中分离出169株大肠埃希氏菌;血清型鉴定结果表明,岳阳市周边鸡源性大肠杆菌的主要血清型为：O78（41株）、O1（35株）、O2（22株）、O55（16株）,共占总待检菌株的67．4％,占定型菌株的80．9％。