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相似文献
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1.
山茶属植物RAPD分析中琼脂糖凝胶电泳条件的研究   总被引:8,自引:2,他引:6  
为了摸索适宜于山茶属植物DNA琼脂糖凝胶电泳分析,分析了电压,缓冲液,琼脂糖密度、EB(Ethyle Bromide)密度染色时间及操作方法对山茶属植物RAPD分析中琼脂糖凝胶电泳实验结果的影响。结果表明,适宜于山茶属植物DNA琼脂糖凝胶电泳条件是:琼脂糖凝胶密度为18g/L,电泳缓冲液为TBE,电压为6 ̄9V/cm,电泳时间为溴酚兰和二甲苯青之间跑出约5cm,电泳开始时先让缓冲液与凝胶保持水平电  相似文献   

2.
甘蓝型油菜微卫星标记PAGE及银染的高效检测   总被引:1,自引:0,他引:1  
一方面对甘蓝型油菜微卫星标记(SSR)的小垂直板聚丙烯酰胺变性凝胶电泳体系做了两点优化:①在制胶方面,确定了在不同温度下的最佳催化剂使用量,可保证顺利凝胶和不缩胶,②在保证电泳带型质量的前提下适当提高电泳电压,可缩短电泳时间,提高效率;另一方面对PAGE胶中DNA的银染方法做了简化:省略固定处理,简化为制胶前用乙醇擦净玻璃板、用纯水漂洗胶片后银染及降低染色液的AgNOs浓度,该简化可减少操作步骤,显著提高效率,并可节约药品。  相似文献   

3.
[目的]探索并建立马铃薯醇溶蛋白酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)方法和谱带分析技术。[方法]用25%2-氯乙醇提取马铃薯醇溶蛋白,借助酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对马铃薯醇溶蛋白进行分析,电泳采用浓度12.4%聚丙烯酰胺凝胶,考马斯亮蓝染色。[结果]不同品种都显示出各自特有的醇溶蛋白带谱组合,且清晰可辨。[结论]酸性凝胶电泳技术可用于马铃薯醇溶蛋白分析,具有快速、分辨率高、重复性好等特点,可为马铃薯品种(系)选育提供一种十分有效的方法。  相似文献   

4.
杂交稻与常规稻酯酶同工酶谱的差异研究(简报)李关荣,刘启金,吴建生(西南农业大学农学系重庆630716)当前在杂交稻的推行过程中,存在掺假的情况,严重影响了农业生产。为此,作者用垂直板电泳,分离胶浓度7.5%,浓缩胶浓度5%;染色液配方:50mg α...  相似文献   

5.
猪微卫星多态性两种检测方法的比较研究   总被引:5,自引:1,他引:5  
 为了确定一种安全、有效的检测猪微卫星多态性的实验方法,采用两种电泳和两种染色方法对大白猪基因组DNA进行了6个微卫星座位的PCR扩增,并将扩增产物在2.5%的琼脂糖凝胶上电泳,EB染色,然后又在8%的聚丙烯酰胺凝胶上电泳,AgNO3染色。结果表明两种方法检测出的等位基因数目和基因多态性水平存在差异,8%的聚丙烯酰胺凝胶电泳在区分微小差异片段能力上明显优于2.5%的琼脂糖凝胶电泳。  相似文献   

6.
穆淑梅  康现江  郭明申 《安徽农业科学》2010,38(32):18052-18053,18073
[目的]研究仿火箭电泳应用于单细胞凝胶电泳技术,为单细胞凝胶电泳技术寻求另一种可行的电泳方法提供参考。[方法]将仿火箭电泳方法应用于单细胞凝胶电泳技术,检验单细胞水平上的DNA损伤,并与传统的电泳方法比较,分析其优劣势。[结果]在细胞DNA未受损状态下,2种电泳方法所得的结果一致;而在细胞DNA受到损伤时,传统的电泳方法下一些细胞的慧尾发散出现漂移,仿火箭电泳方法得到的慧尾图像集中且未发生偏移。[结论]仿火箭电泳方法较传统的电泳方法存在一定优势。  相似文献   

7.
[目的]研究仿火箭电泳应用于单细胞凝胶电泳技术,为单细胞凝胶电泳技术寻求另一种可行的电泳方法提供参考。[方法]将仿火箭电泳方法应用于单细胞凝胶电泳技术,检验单细胞水平上的DNA损伤,并与传统的电泳方法比较,分析其优劣势。[结果]在细胞DNA未受损状态下,2种电泳方法所得的结果一致;而在细胞DNA受到损伤时,传统的电泳方法下一些细胞的慧尾发散出现漂移,仿火箭电泳方法得到的慧尾图像集中且未发生偏移。[结论]仿火箭电泳方法较传统的电泳方法存在一定优势。  相似文献   

8.
[目的]研究仿火箭电泳应用于单细胞凝胶电泳技术,为单细胞凝胶电泳技术寻求另一种可行的电泳方法提供参考。[方法]将仿火箭电泳方法应用于单细胞凝胶电泳技术,检验单细胞水平上的DNA损伤,并与传统的电泳方法比较,分析其优劣势。[结果]在细胞DNA未受损状态下,2种电泳方法所得的结果一致;而在细胞DNA受到损伤时,传统的电泳方法下一些细胞的慧尾发散出现漂移,仿火箭电泳方法得到的慧尾图像集中且未发生偏移。[结论]仿火箭电泳方法较传统的电泳方法存在一定优势。  相似文献   

9.
聚丙烯酰胺凝胶电泳检测致病疫霉菌SSR标记方法改良   总被引:2,自引:1,他引:1  
张芳  权军利  单卫星 《安徽农业科学》2011,39(27):16606-16607
[目的]改进聚丙烯酰胺凝胶电泳检测致病疫霉菌SSR标记方法。[方法]以2009年在宁夏固原地区采集的马铃薯晚疫病样为试验材料,提取其DNA,PCR扩增,并将其产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。[结果]采用12%聚丙烯凝胶电泳检测引物D13、G11,8%聚丙烯凝胶电泳检测引物PI4B、PI63、SSR4,最后采用0.1%硝酸银染色,取得了比较理想的电泳及染色效果。[结论]该研究建立的适用于致病疫霉菌SSR标记的电泳和染色技术方法具有检测灵敏度高、操作简单、获得的条带清晰等特点,是一种行之有效、简便快捷的检测方法。  相似文献   

10.
一种改进的双色SDS-PAGE凝胶和可视化上样电泳方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
SDS-PAGE电泳是蛋白质分析和研究中的重要高效手段.由于分离胶、浓缩胶与电泳缓冲液以及空气都是无色透明的物质,在胶的制作和点样过程中仅仅通过浓缩胶相与缓冲液水相或空气相对光的折射来准确判断点样孔的位置并进行点样操作,因而比较困难.该文介绍1种在浓缩胶中添加颜色染料,使浓缩胶显现颜色,以此可视化区分浓缩胶中点样孔(井)位置的方法,可以准确而高效完成点样操作,使传统的SDS-PAGE点样过程通过折光性来判断变为可视化准确判断,提高点样效率和电泳质量.   相似文献   

11.
核酸染色应用在许多DNA检测相关的技术领域,然而染色剂结合DNA会造成电泳迟滞。为研究溴化乙锭(ethidium bromide,EB)和GelRed这2种核酸染色剂对DNA在琼脂糖凝胶电泳中迁移速度的影响,分别用这2种染色剂采用前、后染色的方法对DNA进行染色,以琼脂糖凝胶电泳作为检测方法,凝胶成像系统拍照观察,用Reptation理论分析数据。研究结果表明EB和GelRed染色均使DNA迁移发生了滞后,但EB对于目的基因片段大小的判读未受电泳滞后的影响,而GelRed对目的基因判读略有影响。然而,与EB相比,GelRed具有荧光效果强、安全、环保等诸多优点。总之,需要精确鉴定目的基因片段大小可以选择后染色或EB前染色,对于鉴定目的基因片段大小要求不高且需要荧光效果好、环保的染色剂可以选择GelRed。  相似文献   

12.
为寻找适合SSR标记定位小麦抗白粉病基因的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的理想体系。主要研究Arc+Bis占凝胶的质量浓度、Arc/Bis质量比、上样量、电泳电压及染色等因素对变性聚丙烯酰胺凝胶电泳效果的影响。结果表明电泳效果较好的体系为:凝胶中Arc+Bis 60g/L、m(Arc)∶m(Bis)=29∶1、上样量5μL(含φ=20%的6×loading dye)、1 500V恒压、强碱法染色。此变性凝胶电泳体系下得到的图谱较为清晰。  相似文献   

13.
概述了脉冲电场凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶法、梯度浓度凝胶电泳法、等电聚焦电泳法及高效毛细管电泳法等核酸、蛋白质电泳技术,以及与核酸电泳有关的DNA限制性长度多态性和随机片段多态性DNA分析技术;回顾和展望上述生物技术在食用真菌学研究应用上的现状及前景。还简要介绍了高效毛细管电泳,以及近年来发展较快的双向凝胶电泳技术和凝胶成像分析。  相似文献   

14.
小麦叶片蛋白质双向电泳的改良方法   总被引:5,自引:0,他引:5  
以普通小麦叶片为实验材料,在原有双向电泳基础上通过对样品制备、样品溶解、等电聚焦电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳以及染色方法等关键步骤进行改进和优化,在小麦叶片可溶性蛋白的分析中获得了满意的双向电泳图谱。  相似文献   

15.
荞麦同工酶多态分析   总被引:5,自引:0,他引:5  
从已收集到的200份样品中,选出具有代表性的甜荞和苦荞各10份,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对其中的4种酶进行了分析。结果表明,在供试的20个样品中,甜荞超氧化物歧化酶(SOD)出现3条强活性谱带,苦荞仅有1条强活性谱带。酯酶(EST)在不同样品中表现出较大差异,存在快电泳变异型、慢电泳变异型和缺失电泳型3种类型。苹果酸脱氧酶(MDH)和谷氨酸脱氧酶(GDH)种内、种间存在较小差异  相似文献   

16.
对玉米毛82-2交系的16个姊妹系或姊妹种分别运用垂直板聚丙烯酸胶凝胶电泳方法分析过氧化物酶、酯酶同功酶,运用等电聚焦电泳方法分析过氧化物酶同工酶。结果表明:在姊妹系间、姊妹种间、姊妹系与其对应姊妹种间,酯酶同工酸酶谱差异甚微,而过氧化物酶同功酶酶话有明显差异.对过氧化物酶同工酸酶谱,用等电聚焦电泳所得酶带比用垂直板聚丙烯酸肢凝胶电泳所得酶带丰富,故显示出的差异更明显。  相似文献   

17.
西施舌鳃蛋白质组学研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
申欣  田美  孟学平  程汉良 《安徽农业科学》2010,38(19):10096-10098
[目的]研究西施舌(Coelomactra antiquate)鳃蛋白质组学。[方法]以西施舌的鳃组织为研究对象,经破碎、裂解和离心等抽提方法提取鳃组织蛋白质样品,利用Bradford蛋白质定量试剂盒作蛋白定量后,进行一向等电聚焦电泳和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。电泳后的凝胶用考马斯亮蓝染色,利用Image ScannerⅢ扫描仪扫描凝胶,获得凝胶图像。[结果]经研究首次得到西施舌鳃蛋白质双向电泳图谱,初步构建了西施舌鳃蛋白质组的双向电泳技术体系。在pH值为4~7的范围内分布着大部的蛋白质,且多为酸性蛋白。其中,在低pH值区蛋白质分布较多,甚至还出现了高丰度蛋白质,在同一水平线上的蛋白质为分子量相近的蛋白质。[结论]该研究可为进一步探索西施舌鳃组织的生理生化机制奠定基础。  相似文献   

18.
脉冲电场凝胶电泳技术朱国强崔治中王永坤(江苏农学院动物医学系,扬州225009)脉冲电场凝脉电泳(pulsed-fieldgelelec-trophoresis,PFGE),又称脉冲式交变电场电泳,随着时间与电流大小的交替改变,使DNA分子能不断地调...  相似文献   

19.
棉花种子蛋白凝胶电泳方法及其在品种鉴定中的应用   总被引:3,自引:0,他引:3  
5个棉花材料的种子蛋白凝胶电泳分析结果表明,棉花种子中含有的脂类物质干扰分析,须脱脂处理方能获得准确结果;分离胶浓度对蛋白质分离效果有影响,本试验以14%的分离胶浓度为棉花种子蛋白电泳的较适宜浓度,不同品质间,同一品种不同纯度间种子蛋白存在差异。这可以作为品种鉴定的一种手段。  相似文献   

20.
目前,变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)多用于微生物和临床医学检测,而用于水产动物基因片段检测的报道甚少。相关研究显示,针对不同的目的基因,其PCR条件、变性剂浓度梯度和电泳时间是DGGE检测实验成败的关键。因此,为应用DGGE技术分析中华绒螯蟹线粒体Cytb基因片段的遗传多样性,探讨了DGGE技术的关键因子,确定了PCR反应体系和循环参数、电泳时PCR产物的上样量、变性剂浓度范围和电泳的最适时间。  相似文献   

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