蛋白亚基的分离效果

 采用SDS-PAGE浓缩胶浓度为7.5%，分离胶浓度分别为9%、10%、11%、11.5%、12%、13%、14%、15%、16%的凝胶系统，探讨不同分离胶浓度条件下椰子贮藏蛋白亚基的分离效果。结果表明，分离胶浓度对亚基电泳分辨率的影响非常明显。分离胶浓度为11%~12%时，蛋白质亚基的分辨效果很好；当分离胶浓度为11.5%时，椰子贮藏蛋白亚基的分离效果最好，可以得到9条清晰的亚基条带。     

天女木兰种子蛋白双向电泳体系的建立

【目的】探索一套适用于天女木兰种子蛋白的双向电泳体系,为研究其种子萌发过程中的蛋白表达差异奠定基础。【方法】比较蛋白的不同提取方法(酚提取法、三氯乙酸-丙酮-酚提取法、三氯乙酸-丙酮法和Tris-HCl法)、IPG胶条pH梯度(pH3～11NL、pH3～10和pH4～7)、裂解液中的尿素浓度(6,7,8,9mol/L)和分离胶浓度(10%和12.5%)等条件,对天女木兰种子蛋白双向电泳结果的影响,筛选适宜的双向电泳条件。【结果】以Tris-HCl法提取种子蛋白,在IPG胶条pH为4～7、裂解液中尿素浓度为9mol/L、分离胶浓度为12.5%的条件下,可以获得分辨率高、背景清晰、重复性好的天女木兰种子蛋白双向电泳图谱。【结论】建立了适用于天女木兰种子蛋白的双向电泳体系。     

不同分离胶浓度下槟榔胚蛋白亚基的分离效果

本试验采用SDS-PAGE浓缩胶浓度为7.5%,分离胶浓度分别为8%、10%、15%、14%、16%的凝胶系统,探讨不同分离胶浓度条件下槟榔胚蛋白亚基的分离效果。结果表明,分离胶浓度对亚基电泳分辨率的影响非常明显。当浓缩胶浓度为7.5%,分离胶浓度为12%时,槟榔胚蛋白亚基的分离效果最好,可以得到10条清晰的亚基条带。     

向日葵食用蛋白的提取和SDS-PAGE电泳技术研究

以向日葵种子为材料,采用SDS-PAGE电泳技术,以不同电泳条件对23种向日葵食用蛋白进行电泳谱带分析试验,研究不同电泳条件下向日葵食用蛋白的谱带变化,以选择出最佳的电泳条件。结果显示,最佳试验条件为:按照质量与体积比1∶3的比例用去离子水在4℃条件下30min提取水溶性蛋白。电泳时,在4℃条件下进行,凝胶板厚度1mm,分离胶浓度8%,浓缩胶浓度5%,电压300V,加样量控制在10μL。     

不同SDS-PAGE分离胶浓度下椰子贮藏蛋白亚基的分离效果

采用SDS-PAGE浓缩胶浓度为7.5%,分离胶浓度分别为9%、10%、11%、11.5%、12%、13%、14%、15%、16%的凝胶系统,探讨不同分离胶浓度条件下椰子贮藏蛋白亚基的分离效果.结果表明,分离胶浓度对亚基电泳分辨率的影响非常明显.分离胶浓度为11%～12%时,蛋白质亚基的分辨效果很好;当分离胶浓度为11.5%时,椰子贮藏蛋白亚基的分离效果最好,可以得到9条清晰的亚基条带.     

沙葱种子盐溶蛋白电泳技术体系构建

以沙葱种子为材料,利用PAGE的方法,探索了沙葱种子盐溶蛋白分离的适宜实验条件。其结果表明分离沙葱盐溶蛋白的PAGE电泳的适宜条件为：30%H2O2/1mL,胶浓度为13%,胶液为5μL,交联度为4%,加样量为20μL和25μL,电极液pH值是3.5,电泳方式为先低后高再低。     

含短小芽孢杆菌的种衣剂对棉花枯萎病防治效果的研究

用自鉴定分离的短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)KX-33株为有效成分配制种衣剂,对8种感枯萎病棉花种子和2种抗枯萎病棉花种子包衣。将含不同浓度KX-33菌液种衣剂包衣的棉花种子、含8%宁南霉素及含50%多菌灵种衣剂包衣的棉花种子在室内分别盆栽种植,分析各种衣剂组合对棉花发芽率的影响;将含不同浓度KX-33种衣剂包衣的棉花种子分别在大田种植,比较接种棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum)后不同时期病情指数和防治效果。结果表明,盆栽试验中含不同浓度KX-33菌液的种衣剂与对照比棉种发芽率差异不显著(P0.05),含8%宁南霉素和50%多菌灵的种衣剂与对照比发芽率差异显著(P0.05);大田试验中棉花接枯萎病菌第10天时,短小芽孢杆菌菌液浓度为1×10~8 CFU/mL种衣剂包衣的8种感病及2种抗病棉花品种(系)的防治效果普遍较好,分别为41.67%～72.22%和50.00%～55.56%。使用短小芽孢杆菌菌液浓度为1×10~8 CFU/mL的种衣剂,对棉花枯萎病防治具有较好的应用价值。     

谷子盐溶蛋白A-PAGE电泳方法的探索

以10个谷子品种为材料,利用A-PAGE的方法,探索了谷子盐溶蛋白分离的适宜实验条件。通过改变H2O2用量、胶浓度、交联度、电极液pH值、进样量及有无浓缩胶等因素,获得了不同盐溶蛋白酸性电泳图谱,经综合分析,提出了分离谷子盐溶蛋白的适宜A-PAGE电泳体系。具体指标为:1 ml胶液中用1μl 3%H2O2,胶浓度13%,交联度4.0%,电极液pH值3.7,进样量控制在20~30μl之间。在有浓缩胶的条件下,盐溶蛋白分离效果好,电泳图谱清晰,分辨率高。     

基于Image J软件的肌原纤维蛋白SDS-PAGE优化

采用浓缩胶浓度为5%,分离胶浓度为12%的SDS-PAGE凝胶系统,运用Image J软件分析不同蛋白质浓度、pH、NaCl浓度对肌原纤维蛋白的分离效果。结果表明,在蛋白质浓度为1.2 mg/m L、pH为7.5、NaCl浓度为0.5 mol/L时,肌原纤维蛋白中各蛋白质及其亚基实现较好分离,均匀分布于整个电泳条带,且各蛋白条带光密度值能清晰分辨。Image J软件能有效地应用于SDS-PAGE图像分析。     

美洲商陆浸提液对3种作物种子萌发及幼苗生长的化感效应

为了探讨美洲商陆根部浸提液对不同作物种子萌发及幼苗生长的化感作用,以萝卜、小麦和棉花3种常见的作物为材料,采用培养皿发芽试验等方法,研究不同浓度美洲商陆根部浸提液对3种作物种子萌发、幼苗生长以及保护酶活性、渗透调节物质和丙二醛含量的影响。结果表明,美洲商陆根部浸提液对3种作物种子发芽率、发芽势、发芽指数,幼苗苗高、根长和鲜重均产生不同程度的抑制作用,浸提液浓度越高,抑制作用越强;随着浸提液浓度升高,萝卜和小麦的SOD、POD活性和棉花的SOD活性呈现先升高后下降趋势,而棉花的POD活性始终呈现升高趋势,小麦和棉花的可溶性糖、可溶性蛋白、Pro和MDA含量均呈现逐渐升高趋势,而萝卜的可溶性蛋白含量呈现先升高后下降趋势,综合比较,浸提液对萝卜种子萌发和幼苗生长抑制作用较强,对棉花种子抑制作用较弱。     

油棕仁贮藏蛋白质亚基组成和含量分析

[目的]为油棕仁中蛋白质的进一步研究与开发利用提供指导。[方法]采用非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和十二烷基硫酸钠-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对油棕仁中贮藏蛋白质亚基进行研究,分析油棕仁蛋白主要亚基的组成、分子量、含量、二硫键的位置及种间差异。[结果]油棕仁中贮藏蛋白质在浓缩胶浓度为7.5%、分离胶浓度为12%的SDS-PAGE凝胶系统中可以得到很好的分离。在油棕仁贮藏蛋白中含有6条主要亚基,分子量范围为18.8~51.5 k Da,主要是中、小分子量亚基;各亚基之间含一定量的二硫键。非变性凝胶电泳分析表明,油棕仁贮藏蛋白中含有4个不同分子量、不同电荷的组分。[结论]该研究所选的不同油棕品种之间亚基的组成和含量没有显著性差异。     

棉花秸秆水浸提液对生菜的化感效应

以棉花秸秆水浸提液为营养液,生菜种子为受试材料,采用室内生物测定方法研究不同梯度(0,5,10,20,40 mg/mL)棉花秸秆水浸提液对生菜种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,低质量浓度(≤10 mg/mL)的棉花秸秆浸提液对生菜种子的萌发、幼苗根长、苗高、鲜质量、可溶性糖、可溶性蛋白及Vc含量均有明显的化感促进作用,但随着水浸提液质量浓度的增加,其对受体的促进作用逐渐转变为抑制作用。     

棉花种子蛋白多态性与品种鉴定方法的研究

蛋白分步提取电泳结果表明,棉花种子蛋白主要是以水溶性蛋白为主,盐溶性蛋白较少,醇溶性蛋白更少。因此,以蛋白质作为棉花品种的生化标记,应以水溶性蛋白为宜。AUGPAGE是一种新的棉花种子蛋白多态性研究方法,简单、快速、分离效果好。在凝胶溶液为10%丙烯酰胺、0.2%甲叉双丙烯酰胺、2%冰醋酸、10%尿素、0.05%甘氨酸的条件下,以2%冰醋酸为电极液,水、2.5%NaCl、50%异丙醇所提取的蛋白质均可得到良好的分离,以水溶性蛋白谱带最丰富、清晰,其多态性强,可作为棉花品种鉴定和种质资源研究的依据。     

水杨酸浸种对不同温度和盐浓度下棉花种子萌发的影响

以抗虫杂交棉为材料,研究了水杨酸(SA)浸种对不同温度和盐浓度下棉花种子萌发的影响。结果表明,SA能显著提高不同温度和盐浓度下棉花种子的发芽率和发芽势,但在不同温度和盐浓度下SA浸种对棉花种子的发芽率和发芽势影响不同。较低温度(12℃)下,0.3%NaCl浓度时SA浸种较未采用SA处理种子发芽率提高179.7%,而0.9%NaCl浓度下SA浸种较未采用SA处理种子发芽率提高494.7%。0.3%NaCl浓度、温度12℃下SA浸种较未采用SA处理种子发芽势提高581.1%,而在0.3%NaCl浓度、温度24℃下SA浸种处理较未处理种子发芽势提高1.8%。研究认为水杨酸能缓解低温和盐胁迫对棉花种子萌发的抑制作用。     

电泳条件的优化与玉米贮藏蛋白聚丙稀酰胺凝胶电泳

研究了影响玉米贮藏蛋白不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳分离效果的主要因素。结果表明，分离胶缓冲液的离子强度、pH值、电极缓冲液的离子强度和胶浓度是影响分离效果的主要因素，催化剂用量对分离效果影响不大。     

棉花萌发期和幼苗期的盐胁迫反应及耐盐鉴定指标的筛选

[目的]比较分析盐分胁迫下棉花种子萌发和幼苗生长情况,确定合适的棉花耐盐鉴定胁迫浓度和评价指标。[方法]采用室内种子萌发试验和盐池试验,研究不同盐分胁迫下不同棉花品种发芽率、相对发芽率、相对出苗率和相对株高的变化。[结果]棉花发芽率、相对发芽率、相对出苗率和相对株高与盐分浓度均呈负相关。[结论]0．5％盐分浓度可以作为棉花耐盐鉴定的胁迫浓度;相对发芽率和相对株高可以作为棉花耐盐鉴定参考指标之一。     

PGE-6000模拟干旱胁迫对彩棉种子萌发的影响

以彩色棉品种BC05、陇绿棉3号为试验材料,采用不同浓度的PEG-6000模拟干旱条件,研究彩色棉种子在萌发期对干旱胁迫的响应和抗旱性分析。结果表明,低浓度PEG-6000处理对棉花种子发芽势、发芽率影响不显著;但随着PEG-6000浓度的增加,2个彩色棉品种的种子发芽势、发芽率均呈下降趋势,种子萌发受到抑制。PEG-6000浓度为30%时,棉花种子萌发完全受到抑制。     

利用色谱聚焦和离子交换色谱快速分离分析薏苡38ku抗真菌蛋白

联合利用色谱聚焦和离子交换色谱对薏苡种子抗真菌蛋白进行了快速分离分析,首次发现一种新的薏苡抗真菌蛋白。该蛋白经SDS-PAGE检测相对分子质量在38左右,利用胶内酶切和MALDI-TOF-MS完成了肽谱分析,并进行了数据库搜索。     

棉花植株水提取液对种子萌发和幼苗生长的自毒作用

[目的]分析棉花植株提取液对自身种子萌发和幼苗生长的影响.[方法]以种子发芽率、发芽势和发芽指数为种子萌发参数,以茎粗、子叶节高度和根、茎叶的湿重作为幼苗参数,分析棉花根系、茎叶不同浓度提取液对自身种子萌发和幼苗生长的影响.[结果]棉花水浸提取液对棉花种子发芽有“低促高抑”的影响,对茎、根和叶的生物质合成量有着不同程度显著或极显著的影响,整体表现为抑制幼苗生长.[结论]高浓度棉花水浸提取液对棉花种子发芽、幼苗生长有抑制作用,自毒作用在多年棉花连作产生连作障碍中起到不可忽视的作用.     

玉米贮藏蛋白质的提取及亚基电泳分析

采用SDS-PAGE,浓缩胶浓度为5%,分离胶浓度为12%,对2种新品种玉米——强盛49和奥玉3101的贮藏蛋白亚基进行了电泳分析,并对组成2种玉米贮藏蛋白的各亚基的分子量和含量进行了分析。结果表明,分离胶浓度为12%的电泳图谱最佳。2种玉米蛋白的亚基组成相同,都含有14个亚基,二者分子量分布范围也接近,但是亚基含量差别较大,尤其是亚基13差别最为显著。在玉米蛋白的亚基组成中,以低分子量亚基为主,玉米蛋白亚基分子质量范围约为1.0×104～8.0×104Da。