基于psbA-trnH序列对药用黄芪及其混伪品的鉴别

试验以道地产区的药用黄芪蒙古黄芪和膜荚黄芪为研究对象,利用psb A-trn H通用引物进行扩增和测序,其结果序列经人工拼接校对获得黄芪完整的psb A-trn H序列,分析统计序列长度及G+C含量;利用MEGA 7软件计算药用黄芪种内、居群间遗传距离以及分析各序列的变异程度;并从GenBank上下载黄芪混伪品蜀葵、紫花苜蓿、锦鸡儿的psb A-trn H序列作为对照,基于Neighbor-Joining(NJ)法构建系统发育树。结果表明,药用黄芪G+C含量为26.10%～27.88%,psb A-trn H序列总长度为345～378 bp;药用黄芪有337个保守位点,保守率为95.74%,有13个变异位点,变异率为3.69%;药用黄芪的种内遗传距离为0.000～0.023,各居群之间的遗传距离为0.002～0.009;从构建的系统发育树来看,药用黄芪聚为一大支,其他混伪品聚为另一大支。试验说明可以利用psb A-trn H序列鉴别药用黄芪及其混伪品。     

宁夏产秦艽中龙胆苦苷分布状态研究

[目的]研究宁夏产秦艽中龙胆苦苷的分布状态。[方法]采用RP-HPLC测定宁夏产3种秦艽不同部位中龙胆苦苷的含量。[结果]根部龙胆苦苷的含量高于地上其他部位,而且秦艽最高,麻花秦艽次之,小秦艽最低;部分秦艽的花、叶或茎所含的龙胆苦苷超过中国药典2％的要求。[结论]考虑开发利用秦艽的地上资源。     

RP-HPLC法测定秦艽不同器官中獐牙菜苦苷含量的研究

［目的］建立秦艽不同器官中獐牙菜苦苷含量测定的RP HPLC方法。［方法］定量分析秦艽不同器官中獐牙菜苦苷含量。［结果］獐牙菜苦苷 在0.20～1.8 μg范围内成良好的线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为98.6%（RSD=1.32%）。麻花秦艽叶中獐牙菜苦苷的含量最高,茎中含量最低。［结论］该研究可为秦艽药材的合理开发利用提供依据。     

中药秦艽基原植物的DNA分子鉴定

[目的]分析秦艽基原植物间不同DNA序列的差异,为秦艽药材DNA条形码的筛选和基原鉴定提供分子证据。[方法]采用PCR扩增纯化后直接测序的方法,测定大叶秦艽（G.macrophylla Pall.）、麻花艽（G.straminea Maxim.）、粗茎秦艽（G.crassicaulis Duthie exBurk.）、小秦艽（G.dahurica Fisch）、黄管秦艽（G.officinalis H.Smith）5种植物的核糖体DNA ITS、叶绿体DNApsbA-trnH核苷酸序列,并作序列同源性分析。[结果]cpDNApsbA-trnH序列长度变异范围为316~318 bp,有7种不同的单倍型,单倍型间有7个变异位点,序列的GC含量为21.2%;最大简约树的聚类结果与单倍型反映的结果一致。nrDNAITS序列长度变异范围为624~625 bp,有5种不同的单倍型,单倍型间有12个变异位点,序列的GC含量为59.3%;最大简约树的聚类结果表明,小秦艽与麻花艽聚为一支,大叶秦艽与黄管秦艽聚为一支,粗茎秦艽位于聚类图的最基部。[结论]nrDNAITS序列较适合作秦艽基原植物的DNA分子鉴定。     

黔产龙胆不同部位中龙胆苦苷的含量测定

为了对贵州栽培药材龙胆的质量评价及用药部位的选择提供参考,测定了龙胆不同部位(根、茎、叶)的龙胆苦苷有效成分含量.结果表明,龙胆不同部位中龙胆苦苷的含量分别为:根3.633 %、茎1.256 %,叶1.958 %,达到了<中国药典>2005版规定的含量标准(龙胆苦苷含量不得低于1 %),栽培药材龙胆可作为商品来源替代野生中药材龙胆.     

中药秦艽基原植物的DNA分子鉴定

[目的]分析秦艽基原植物间不同DNA序列的差异,为秦艽药材DNA条形码的筛选和基原鉴定提供分子证据。[方法]采用PCR扩增纯化后直接测序的方法,测定大叶秦艽G.macrophylla pall.、麻花秦艽G.straminea Maxim.、粗茎秦艽G.crassicaulis Duth-ieex Burk.、小秦艽G.dahurica Fisch、黄管秦艽G.officinalis H.Smith5种植物的核糖体DNAITS、叶绿体DNA psbA-trnH核苷酸序列,并作序列同源性分析。[结果]cpDNA psbA-trnH序列长度变异范围为316-318bp,有7种不同的单倍型,单倍型间有7个变异位点,序列的GC含量为21.2%。最大简约树的聚类结果与单倍型反映的结果一致。nrDNA ITS序列长度变异范围为624～625bp。有5种不同的单倍型、单倍型间有12个变异位点,序列的GC含量为59.3%。最大简约树的聚类结果表明,小秦艽与麻花艽聚为一支,大叶秦艽与黄管秦艽聚为一支,粗茎秦艽位于聚类图的最基部。[结论]nrDNAITS序列较适合作秦艽基原植物的DNA分子鉴定。     

正交优选动态回流法提取秦艽中龙胆苦苷工艺

采用正交试验法,以龙胆苦苷含量为指标,研究溶剂用量、提取时间及提取次数对秦艽中龙胆苦苷提取率的影响,优选出合理的提取工艺。结果表明:以65%乙醇为溶剂,用动态回流法提取秦艽龙胆苦苷的最佳工艺条件是溶剂用量为药材的10倍,提取时间为30min,提取次数为1次。经验证性试验证明所优选条件可靠,可供秦艽中龙胆苦苷的提取工艺参考。     

RP-HPLC测定宁夏产秦艽中龙胆苦苷的含量

[目的]建立测定宁夏产秦艽中龙胆苦苷含量的方法。[方法]秦艽经超声提取后,采用RP-HPLC测定宁夏产秦艽中龙胆苦苷的含量。[结果]宁夏产秦艽中龙胆苦苷的含量均符合药典规定,属于正品秦艽,且栽培秦艽中龙胆苦苷的含量高于野生秦艽。[结论]随着野生秦艽大量被采挖,目前秦艽市场的供需矛盾日益加剧,因此进行秦艽的人工种植及栽培研究,有一定的现实意义。     

乙醇浓度对宁夏六盘山栽培秦艽中龙胆苦苷提取率的影响

[目的]探讨乙醇浓度对宁夏六盘山栽培秦艽中龙胆苦苷提取率的影响。[方法]以室温冷浸为提取方法,采用HPLC测定秦艽中龙胆苦苷的含量,比较浓度45%、55%、65%和75%的乙醇对宁夏六盘山栽培秦艽中龙胆苦苷提取率的影响。[结果]采用浓度45%、55%、65%和75%的乙醇提取的秦艽龙胆苦苷提取率分别为12.50%、13.26%、14.53%和14.42%;当乙醇浓度为65%时,提取率最高。[结论]乙醇浓度对宁夏六盘山栽培的秦艽中龙胆苦苷的提取率有明显影响,以浓度65%的提取率最高。     

秦艽小拱棚育苗技术

秦艽又名西秦艽、大叶秦艽、大叶龙胆,为龙胆科多年生草本植物,其干燥根人药,有祛风湿、清湿热、止痹痛等功效。秦艽（Gentianamacrophyfla Pall．）、麻花秦艽（G．straminea Maxim．）、粗茎秦艽（G．crassicaulis Duthie et Burk．）和小秦艽（G．dahurica Fisch．）的干燥根,是我国传统常用中药,     

坚龙胆中龙胆苦苷含量的测定

为扩展坚龙胆中龙胆苦苷含量测定方法及坚龙胆药材资源的更好利用和临床应用,采用高效毛细管区带电泳法(简称HPCE)测定坚龙胆中龙胆苦苷含量,并对坚龙胆的不同部位、不同炮制品中龙胆苦苷含量进行测定。结果表明:HPCE法测定龙胆苦苷在0.06～0.48 mg/mL呈良好的线性关系(r=0.999 3),平均回收率为101.31%,RSD为1.99%,该方法准确性、重现性好;坚龙胆不同部位、不同炮制品中龙胆苦苷含量有较大差异,其根含量>叶含量>茎含量,生品>炮制品。     

栽培因子对秦艽产量和龙胆苦苷含量的影响

[目的]研究不同的栽培因子对秦艽产量和有效成分龙胆苦苷含量的影响。[方法]进行了秦艽栽培密度试验、追施肥料试验、生长年限试验,并对秦艽产量和龙胆苦苷含量进行了测定。[结果]秦艽生长苗间距以8~10 cm为最好的生长密度;追施肥料对秦艽生长有促进作用,综合来看,尿素对秦艽生长最有利;随着生长年限的增加,秦艽的产量和龙胆苦苷含量也在增加,4年生秦艽龙胆苦苷含量和产量最高。[结论]4年生秦艽最具有栽培价值,为秦艽的高效人工种植提供了依据。     

宁夏栽培秦艽中龙胆苦苷含量的影响因素研究

[目的]考察生态及人工因素对宁夏栽培秦艽中龙胆苦苷含量的影响,为评价栽培秦艽的质量、开发利用当地秦艽资源和确保人工种植的品质提供科学依据。［方法]采用PR-HPLC测定秦艽中龙胆苦苷的含量。[结果]产地、生长年限、采收季节、肥料类型及施肥水平等因素对宁夏栽培秦艽中龙胆苦苷的含量都产生影响。［结论]宁夏隆德适合大面积种植秦艽;在秋季采收3年生秦艽为宜;单一使用草木灰和复合使用尿素、磷肥为5.0、20.0 kg/hm^2栽培秦艽时,龙胆苦苷的含量最高。     

60CO-γ辐照灭菌对秦艽花中龙胆苦苷含量的影响

[目的]研究60CO-γ辐照灭菌对秦艽花中龙胆苦苷含量的影响。[方法]色谱柱为Luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-浓度0.1%醋酸(15∶85,V/V),检测波长为272 nm,建立HPLC含量测定方法测定秦艽花中龙胆苦苷的含量,并通过测定不同60CO-γ辐照剂量对秦艽花中龙胆苦苷含量来评价60CO-γ辐照灭菌对秦艽花品质的影响。[结果]秦艽花中龙胆苦苷含量随60CO-γ射线照射灭菌剂量的增大而明显降低。[结论]秦艽花及其相应产品不适用采用60CO-γ辐照灭菌。     

青海栽培黄管秦艽的叶绿体DNA psbA-trnH核苷酸变异和遗传分析

[目的]研究青海栽培黄管秦艽（Gentiana officinalis H.Smith）的遗传多样性,对黄管秦艽遗传分化进行分析,为其品种选育提供建议。[方法]应用叶绿体DNApsbA-trnH序列对青海地区栽培黄管秦艽6个居群进行遗传多样性分析。[结果]共发现10种不同的单倍型,通过单倍型序列间比对,发现了7个变异位点,黄管秦艽具有较高的遗传多样性（h=0.771）,单倍型多态性水平（h）为0.563~0.857,核苷酸多态性水平（π）为0.002 43~0.006 31。居群遗传分化系数Gst为0.196 0,基因流Nm值为2.05,80.40%遗传变异主要存在于居群内。[结论]青海栽培黄管秦艽的种质遗传多样性较高,有利于培育高品质的药材。     

不同栽培模式对滇龙胆中龙胆苦苷含量的影响

滇龙胆为龙胆科重要资源植物,本研究以云南临沧栽培滇龙胆为研究对象,利用高效液相色谱法测定滇龙胆根、茎、叶、花各部位中龙胆苦苷的含量.结果表明,栽培模式对滇龙胆不同部位龙胆苦苷的含量具有影响.木瓜茶树滇龙胆套种时根部龙胆苦苷含量最高(3.80 mg/g),荒坡种植时叶(1.34 mg/g)、花(1.22 mg/g)部龙胆苦苷含量最高;4种栽培模式滇龙胆根均可作为龙胆药材入药,质量较好.本研究结果可为滇龙胆质量控制、栽培技术研究提供基础数据.     

黔产栽培龙胆药材龙胆苦苷的含量测定

经高效液相色谱法测定,贵州栽培中药材龙胆根有效成分龙胆苦苷的含量为3.633%,超过《中国药典》2005版中龙胆药材中龙胆苦苷的含量不得<1%的最低限度标准,可作为商品来源替代野生中药材龙胆。     

陕西产秦艽中龙胆苦苷的提取和含量测定

[目的]采用超声技术提取秦艽中主要成分龙胆苦苷,建立高效液相色谱技术测定龙胆苦苷含量的方法。[方法]采用单因素试验,考察超声频率、超声功率、提取时间、提取剂用量对超声波提取的影响,以正交试验确定最佳提取条件;采用高效液相色谱法进行含量测定。[结果]最佳工艺条件为超声频率为80 KHz,超声功率为420 W,提取时间为20 min,提取剂用量为20 ml;在此情况下,龙胆苦苷的提取率为2.72%。[结论]该方法灵敏、准确、简便,适用于秦艽中龙胆苦苷的提取和含量测定。     

正交设计法优化宁夏六盘山区产秦艽醇提工艺

[目的]优化宁夏六盘山区产秦艽的醇提工艺。[方法]以测定秦艽中龙胆苦苷提取率作为考察指标,采用L9（3^4）正交设计法,考察提取醇量、提取时间、提取次数、提取温度对龙胆苦苷提取率的影响。[结果]宁夏六盘山区产秦艽的最佳醇提工艺为当秦艽质量为0．5g时,溶剂用量为35m1,提取时间为20min,提取次数为3次,提取温度为30℃。[结论]为提取秦艽中龙胆苦苷生产工艺提供参考。     

抱茎獐牙菜中3种药效成分的HPLC测定

[目的]测定抱茎獐牙菜中不同部位的药效成分。[方法]采用反相高效液相色谱法,测定抱茎獐牙菜中不同部位獐牙菜苦苷、龙胆苦苷及芒果苷的含量。[结果]结果表明,HPLC法测定3种药效成分的最佳条件为流动相甲醇-0．02％磷酸水溶液,梯度洗脱,洗脱条件0～25min,甲醇：20％～50％;流速1ml／min,检测波长为260nm。该方法具有很好的线性关系和回收率。[结论]抱茎獐牙莱根部龙胆苦苷的含量最高,其余2种药效成分在花的部位有较高的含量。