RP-HPLC测定宁夏产秦艽中龙胆苦苷的含量

[目的]建立测定宁夏产秦艽中龙胆苦苷含量的方法。[方法]秦艽经超声提取后,采用RP-HPLC测定宁夏产秦艽中龙胆苦苷的含量。[结果]宁夏产秦艽中龙胆苦苷的含量均符合药典规定,属于正品秦艽,且栽培秦艽中龙胆苦苷的含量高于野生秦艽。[结论]随着野生秦艽大量被采挖,目前秦艽市场的供需矛盾日益加剧,因此进行秦艽的人工种植及栽培研究,有一定的现实意义。     

宁夏产栽培秦艽水溶部位化学成分研究

[目的]对宁夏产栽培秦艽根(Radix Gentianae Macrophyllae)的化学成分进行系统研究。[方法]应用多种色谱技术对秦艽根的化学成分进行分离纯化;通过理化方法和波谱数据进行结构鉴定。[结果]从水溶部位分离并鉴定了4种化合物,分别为龙胆苦苷、獐牙菜苷、獐牙菜苦苷和6′-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷。[结论]该研究分离获得的4种化合物均为首次从宁夏产栽培秦艽中分离得到。     

宁夏栽培秦艽中龙胆苦苷含量的影响因素研究

[目的]考察生态及人工因素对宁夏栽培秦艽中龙胆苦苷含量的影响,为评价栽培秦艽的质量、开发利用当地秦艽资源和确保人工种植的品质提供科学依据。［方法]采用PR-HPLC测定秦艽中龙胆苦苷的含量。[结果]产地、生长年限、采收季节、肥料类型及施肥水平等因素对宁夏栽培秦艽中龙胆苦苷的含量都产生影响。［结论]宁夏隆德适合大面积种植秦艽;在秋季采收3年生秦艽为宜;单一使用草木灰和复合使用尿素、磷肥为5.0、20.0 kg/hm^2栽培秦艽时,龙胆苦苷的含量最高。     

乙醇浓度对宁夏六盘山栽培秦艽中龙胆苦苷提取率的影响

[目的]探讨乙醇浓度对宁夏六盘山栽培秦艽中龙胆苦苷提取率的影响。[方法]以室温冷浸为提取方法,采用HPLC测定秦艽中龙胆苦苷的含量,比较浓度45%、55%、65%和75%的乙醇对宁夏六盘山栽培秦艽中龙胆苦苷提取率的影响。[结果]采用浓度45%、55%、65%和75%的乙醇提取的秦艽龙胆苦苷提取率分别为12.50%、13.26%、14.53%和14.42%;当乙醇浓度为65%时,提取率最高。[结论]乙醇浓度对宁夏六盘山栽培的秦艽中龙胆苦苷的提取率有明显影响,以浓度65%的提取率最高。     

正交设计法优化宁夏六盘山区产秦艽醇提工艺

[目的]优化宁夏六盘山区产秦艽的醇提工艺。[方法]以测定秦艽中龙胆苦苷提取率作为考察指标,采用L9（3^4）正交设计法,考察提取醇量、提取时间、提取次数、提取温度对龙胆苦苷提取率的影响。[结果]宁夏六盘山区产秦艽的最佳醇提工艺为当秦艽质量为0．5g时,溶剂用量为35m1,提取时间为20min,提取次数为3次,提取温度为30℃。[结论]为提取秦艽中龙胆苦苷生产工艺提供参考。     

栽培因子对秦艽产量和龙胆苦苷含量的影响

[目的]研究不同的栽培因子对秦艽产量和有效成分龙胆苦苷含量的影响。[方法]进行了秦艽栽培密度试验、追施肥料试验、生长年限试验,并对秦艽产量和龙胆苦苷含量进行了测定。[结果]秦艽生长苗间距以8~10 cm为最好的生长密度;追施肥料对秦艽生长有促进作用,综合来看,尿素对秦艽生长最有利;随着生长年限的增加,秦艽的产量和龙胆苦苷含量也在增加,4年生秦艽龙胆苦苷含量和产量最高。[结论]4年生秦艽最具有栽培价值,为秦艽的高效人工种植提供了依据。     

60CO-γ辐照灭菌对秦艽花中龙胆苦苷含量的影响

[目的]研究60CO-γ辐照灭菌对秦艽花中龙胆苦苷含量的影响。[方法]色谱柱为Luna C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-浓度0.1%醋酸(15∶85,V/V),检测波长为272 nm,建立HPLC含量测定方法测定秦艽花中龙胆苦苷的含量,并通过测定不同60CO-γ辐照剂量对秦艽花中龙胆苦苷含量来评价60CO-γ辐照灭菌对秦艽花品质的影响。[结果]秦艽花中龙胆苦苷含量随60CO-γ射线照射灭菌剂量的增大而明显降低。[结论]秦艽花及其相应产品不适用采用60CO-γ辐照灭菌。     

宁夏六盘山区野生和栽培秦艽的质量对比研究

[目的]比较宁夏六盘山区野生和栽培秦艽的质量。[方法]对宁夏六盘山区的秦艽的3种栽培品与野生品的药材性状、显微特征和其中龙胆苦苷的含量等方面进行比较研究。[结果]宁夏六盘山区栽培秦艽与野生秦艽的质量基本一致。[结论]宁夏六盘山区秦艽栽培品与野生品之间无明显质量差异,为人工栽培秦艽提供了科学依据。     

正交设计法优化宁夏六盘山区产秦艽水提工艺

[目的]优化宁夏六盘山区产秦艽的最佳水提工艺。[方法]以测定秦艽中龙胆苦苷提取率作为考察指标,采用L9（3^4）正交试验,考察提取水量、提取时间、提取次数、提取温度对龙胆苦苷提取率的影响。[结果]各因素对检测指标影响大小顺序是：提取次数〉提取温度〉提取水量〉提取时间,最佳水提工艺为当秦艽质量为0．5g时,溶剂用量为15ml,提取时间为45min,提取次数为3次,提取温度为30℃。[结论]提取次数对龙胆苦苷提取影响显著。     

陕西产秦艽中龙胆苦苷的提取和含量测定

[目的]采用超声技术提取秦艽中主要成分龙胆苦苷,建立高效液相色谱技术测定龙胆苦苷含量的方法。[方法]采用单因素试验,考察超声频率、超声功率、提取时间、提取剂用量对超声波提取的影响,以正交试验确定最佳提取条件;采用高效液相色谱法进行含量测定。[结果]最佳工艺条件为超声频率为80 KHz,超声功率为420 W,提取时间为20 min,提取剂用量为20 ml;在此情况下,龙胆苦苷的提取率为2.72%。[结论]该方法灵敏、准确、简便,适用于秦艽中龙胆苦苷的提取和含量测定。     

秦艽地上部位中环烯醚萜苷类功效成分提取分离工艺研究

[目的]优选出秦艽中环烯醚萜苷的最佳提取工艺,筛选出适合分离环烯醚萜苷的大孔吸附树脂。[方法]通过正交试验,以水为溶剂,以龙胆苦苷和獐牙菜苷含量为指标,考察温度、料液比及提取次数对秦艽中龙胆苦苷和獐牙菜苷提取率的影响,利用静态吸附法筛选出适合的大孔吸附树脂。[结果]秦艽中环烯萜苷的提取以水作溶剂,温度68℃,料液比1∶12,提取次数5次为最佳提取条件,D-101树脂为最佳提取树脂。[结论]最佳提取条件稳定,适合于秦艽中环烯醚萜苷的提取,D-101树脂适合分离秦艽中环烯醚萜苷类化合物。     

中药秦艽基原植物的DNA分子鉴定

[目的]分析秦艽基原植物间不同DNA序列的差异,为秦艽药材DNA条形码的筛选和基原鉴定提供分子证据。[方法]采用PCR扩增纯化后直接测序的方法,测定大叶秦艽G.macrophylla pall.、麻花秦艽G.straminea Maxim.、粗茎秦艽G.crassicaulis Duth-ieex Burk.、小秦艽G.dahurica Fisch、黄管秦艽G.officinalis H.Smith5种植物的核糖体DNAITS、叶绿体DNA psbA-trnH核苷酸序列,并作序列同源性分析。[结果]cpDNA psbA-trnH序列长度变异范围为316-318bp,有7种不同的单倍型,单倍型间有7个变异位点,序列的GC含量为21.2%。最大简约树的聚类结果与单倍型反映的结果一致。nrDNA ITS序列长度变异范围为624～625bp。有5种不同的单倍型、单倍型间有12个变异位点,序列的GC含量为59.3%。最大简约树的聚类结果表明,小秦艽与麻花艽聚为一支,大叶秦艽与黄管秦艽聚为一支,粗茎秦艽位于聚类图的最基部。[结论]nrDNAITS序列较适合作秦艽基原植物的DNA分子鉴定。     

不同提取方法对秦艽中龙胆苦苷提取率的影响

[目的]建立RP-HPLC法研究不同提取方法对秦艽中龙胆苦苷提取率的影响,为秦艽药材的合理开发利用提供理论依据。[方法]采用C18色谱柱（4．6mm×250mm,5μm）,以甲醇：0．3％H3PO4=30：70（V/V）为流动相,流速：1．0ml／min,柱温：30℃,检测波长：270nm。[结果]龙胆苦苷在0．9—2．1μg范围内呈良好的线性关系,r=0．9991,平均回收率为97．6％,RSD值为1．02％。[结论]动态热回流提取法的提取效率最高。