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1.
转基因抗虫棉的培育 总被引:92,自引:5,他引:87
采用花粉管通道途径,将合成的Bt杀虫蛋白基因导入棉花优良品种泗棉3号和中棉所12,获得了转基因植株。组织化学分析表明,GUS标记基因已在R#-1代植株中表达。根据对GUS阳性转基因植株的PCR分析,证明Bt杀虫蛋白基因出现在R#-1代植株中,并通过自交传递至R#-2代。经抗虫性鉴定,获得了5株对棉铃虫有高度毒杀作用的R#-1代转基因抗虫植株S545、S591、S636、S1001(泗棉3号+Bt/GUS)和Zh1109(中棉所12+Bt/GUS),对棉铃虫幼虫的致死率分别达到91.6%、93.8%、92.3%、85.7%和75.0%。通过自交和选育,获得了R#-5代转基因抗虫棉,并进行了抗虫性和转基因的跟踪鉴定,表明通过基因工程方法获得了抗棉铃虫的棉花新种质。 相似文献
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刘山莉 《东北农业大学学报》1997,28(1):84-89
试验研究了寒地粳稻(DS2#)成熟胚为受体的JQ700型基因枪转化,寒地粳稻(DS3#)下胚轴愈伤悬浮细胞与细胞团为受体的农杆菌LBA4404共培养转化,以及寒地粳稻(DS2GG#)未受精胚囊为受体的花粉管通道等转化途径的初步尝试。结果首先在基因枪转化途径上得到突破——成功地将NPTⅡ基因、GUS基因及抗虫基因(B.t)的DNA片段导入寒地粳稻(DS2#)成熟胚。以GUS基因组织化学法检测外源基因的表达,结果转化水稻细胞的短暂表达为阳性。经过一系列组织培养过程,诱导获得了绿色转基因水稻植株,取其叶片进行外源基因的稳定遗传与表达检测,结果GUS基因组织化学检测亦为阳性,Olympus倒置显微镜镜检结果——转基因水稻(DS2#)植株叶片的叶脉等维管组织中GUS基因表达更强烈。本文只是对转化途径进行研究,关于B.t基因的整合与表达的检测工作正在进行中 相似文献
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人工合成Bt基因对棉花的遗传转化 总被引:3,自引:2,他引:1
采用子房注射法,将构建在植物高效表达载体上的全序人工合成的Bt杀虫基因GFMCryIA转入棉花品种(系)“中棉所19”、“华农916”、“541”和“3517”中,获得对棉铃虫幼虫致死率在80%以上的植株29株。用PCR法检测,结果表明,这些株株均呈阳性。在这29株阳性植株中,对棉铃虫致裂纹经为100%,且自身只有轻微伤害的植株有26株。这说明Bt基因经改造,增加其提高转录与翻译能力的表达调控元件 相似文献
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用基因枪法将具有抗潮霉素基因(hpt) 的质粒DNA( 质粒PSBG102) 导入到水稻品种延农黑1 号的愈伤组织中,获得了抗潮霉素的愈伤组织,对抗性愈伤组织进行再分化处理,获得了再分化水稻植株,经PCR 鉴定和瑟慎(southern) 杂交,确认再分化植株全部是转基因植株,这些转基因植株含有1 ~13 个拷贝的hpt 基因. 相似文献
6.
农杆菌介导的水稻高效遗传转化体系的建立 总被引:19,自引:0,他引:19
曹孟良 《湖南农业大学学报(自然科学版)》1999,25(5):349-356
选用5个水稻品种(02428,武育粳2号,台北309,Millin和明恢63),通过农杆菌介导的转化方法,从前4个水稻品种中获得了来自309个独立抗性愈伤的的635棵再生植株,包括422株PSAG12-IPT转基因植株和212株PSAG12_GUS转基因植株,经组织化学检测和PCR分析,获得的422株PSAG12-IPT转基因樾株和212株PSAG12-GS转基因植株,经组织化学芳觳夂停校茫曳治觯 相似文献
7.
苹果叶片再生的改进及转抗虫基因植株的获得 总被引:7,自引:0,他引:7
用分别含有全部改造和垢Bt基因植物表达载体PB48,7和PB48.6的土壤农杆菌转化苹果优良品种(红富士、早生富士、辽伏)的叶片外植体,经过对MS培养基成分调整,在N量保持不变的条件下以(NH4)2SO4取代NH4NO3,使得转化后再生频率大增,现已获得232株转化再生植株,这些植株可以在含50mg.L^-1的卡那霉素培养基上生长,选出部分植株作PCR检测,表明Bt基因已被导入这些苹果品种中。 相似文献
8.
转CMV—CP基因番茄后代的田间抗病性 总被引:1,自引:0,他引:1
以土壤农杆菌为介导,用叶盘法转化获得的转CMV-CP基因(黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因)番茄工程植株,通过连续选择和自交,得到R1、R2、R3、R4和R5代的转化番茄植株。1993-1994年采用人工接种和田间自然发病两种方式鉴定转化植株对CMV病毒的田间抗性。结果表明,转基因番茄植株对CMV侵染有高度抗性。人工接种R1、R2、R3、R4代转化植株的防病效果达50-73%。有50%以上的转基因植株始终 相似文献
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卷叶虫在B.t棉上摄食选择性原因初析 总被引:1,自引:1,他引:0
在正常供水或水分胁迫下,B.t棉(G.hirsntumL)和非B.t棉(泗棉3号,对照)的混合株簇内卷叶虫的摄食行为有明显的选择性。卷叶虫卷食非B.t棉而未侵食B.t棉。经叶片组织学嵐鄄欤渖闶承形难≡裥钥赡苡耄拢裘藓头牵拢裘抟镀橹峁共钜煊泄亍 相似文献
11.
苹果叶片再生的改进及抗虫基因植株的获得 总被引:5,自引:0,他引:5
用分别含有全部改造和部分改造的Bt基因植物表达载体pB48.7和pB48.6的土壤农杆菌转化苹果优良品种(红富士、早生富士、辽伏)的叶片外植体,经过对MS培养基成分调整,在Nt保持不变的条件下以(NH4):SO4取代NH4NO3,使得转化后再生频率大增,现已获得232株转化再生植株,这些植株可以在合50mg·L-1的卡那霉素培养基上生长,选出部分植株作PCR检测,表明Bt基因已被导入这些苹果品种中。 相似文献
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13.
CaMV基因Ⅵ在拟南芥上的遗传转化及交叉保护 总被引:2,自引:2,他引:2
通过对CaMV CABB-BJI和Bari-1株系基因Ⅵ的克隆和转化,在根癌农杆菌菌种GV3101的介导下,利用真空渗入法获得了转化GABB-BJI和Bari-1基因Ⅵ的拟南芥转基因植株。分子检测表明,基因Ⅵ已整合进拟南芥基因组并有不同程度的表达。在转基因植株中,出现了类似病毒感染症状、多生长点及花粉生活力较低等个体的变异株。而多数传基因樾株(占转基因植株70.4%)为无症状的正常植株。对转化Ca 相似文献
14.
数量性状基因数目估计的程序设计 总被引:5,自引:0,他引:5
本文给出了估计控制数量性状基因数目的BASIC程序。本程序根据估计数量性状基因数目的Castle-wright方法(或称矩法)及其该法的若干扩展,利用双亲、F1,F2及回交世代(B1,B2)的资料,估计所研究性状双亲有差异的基因座位数在称有效因子数,并给出其估值的标准误;程序还有对资料进行加性显性模型适合性检验(ABC检验和合并ABC检验)的功能。″550RETURN560ES=D/S/8:SE=(4*A+V/S/S)*ES*:G=G+1570B$=″n(″+strn$(Ⅰ)″,″+Str$(g)+″).:GOsUB510:RETURN570B$=″n(″+STR$(Ⅰ)+″,″+STR$(G)+″).:GOSUB510:RETUM2.2程序说明2.2.1变量和数组N——世代数(在此等于6)A(3,N)一一合并ABC测验的系数矩阵X(N)——世代均值数组N(N)——世代样本容量数组V(N)——世代方差数组Z(N)一一世代均值的方差U(N)——世代方差的方差T2——t2统计量FT一一一t2统计量的近似自由度2.2.2数据输入(DATA语句)世代按P1,P2,F1,F2,B1,B2的顺序,每世代依次为样本容量, 相似文献
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番茄双抗TMV和CMV基因工程的研究 总被引:3,自引:1,他引:3
在TMV外壳蛋白(CP)基因的5′和3′端分别合成寡聚核苷酸引物P1和P2,并分别引入ClaI和BamHI位点,采用PCR技术扩增TMVCP基因,用ClaIBamHI消化后重组到pBlue scriptKS+中,并将该基因与CMVCP基因重组在同一个表达载体pE3上获得双价CP基因表达载体pETC2,转化番茄,获得再生植株。通过点杂交、PCR检测和Southern杂交,证实2、12和13号为转TMV和CMVCP基因的工程植株。工程植株在温室中表现正常,比对照植株表现出明显的抗性。 相似文献
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Bt棉抗虫性遗传研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以Bt棉R-1、R-2及常规品种鄂棉22、鄂抗棉3号为亲本配制了3个组合的F1、F2和测交后代,了各组合的抗虫性遗传。结果表明,R1与鄂棉22、R-2与鄂抗棉3号分别存在一对显性基因差异,R-1与R-2的Bt不等位。外源Bt抗虫基因导入棉花后能稳定遗传,但插入位点是随机的。 相似文献
18.
转TCS基因番茄无性系TP3与其自交后代R1的种子苗在农艺性状上的表现无差异,R1代植株X-glu检测和PCR扩增均呈阳性,同样对TMV和CMV表现出一定的抗病性,这说明转基因番茄无性系及其自交一代种子苗植株的TCS基因是稳定表达的稳定遗传的,因此,除了经过种子获得种苗以外,通过无性繁殖转基因番茄可以直接进行田间种植及种苗的工厂化生产。 相似文献
19.
通过对CaMVCABB-BJI和Bari-1株系基因Ⅵ的克隆和转化,在根癌农杆菌菌种GV3101的介导下,利用真空渗入法获得了转化CABB-BJI和Bari-1基因Ⅵ的拟南芥转基因植株。分子检测表明,基因Ⅵ已整合进拟南芥基因组并有不同程度的表达。在转基因植株中,出现了类似病毒感染症状、多生长点及花粉生活力较低等个体的变异株。而多数转基因植株(占转基因植株70.4%)为无症状的正常植株。对转化CaMVBari-1株系基因Ⅵ的9个无症状转基因株系接种CaMVCABB-BJI病毒抗性表明,9个转基因株系表现出了不同的抗性 相似文献