西瓜炭疽病人工接种鉴定的新方法

对具有不同抗性水平的３个西瓜品种进行了离体叶人工接种炭疽病抗性鉴定方法的研究。结果表明，离体叶与幼苗人工接种同样能够真实地反映西瓜品种固有的抗病性，且能节省菌液、劳力、试材和费用，并对环境条件更易控制，简便易行，可以广泛采用。该法用注射器悬滴接种，菌液浓度为１×１０＾６孢子／ｍＬ。接种叶片的叶龄为１５～２０ｄ，接种后３ｄ开始发病。第６ｄ调查统计病情指数。品种抗病性可以用平均病斑直径（ＡＤ），［ＡＤ     

西瓜炭疽病菌离体叶片接种鉴定技术

西瓜炭疽病是由瓜类炭疽病菌引起的一种真菌性病害,严重影响西瓜产量和品质。目前西瓜炭疽病抗性鉴定的方法主要是苗期喷雾法,本研究采用离体叶片接种鉴定的方法(点滴法)对12份西瓜种质材料进行炭疽病抗性鉴定。具体方法为配置好孢子浓度为1×10⁶的长岭西瓜炭疽病菌液,采取西瓜植株的第四片真叶置于铺好湿润吸水纸的塑料盒中,利用微量移液器将10 μL菌液点滴在叶面上,盖上透明塑料盖,置于温度为25 ℃,湿度为90%的光照培养箱中,保持黑暗48 h后给予正常的光照,5 d后调查发病情况。利用平均病斑直径及发病率进行鉴定评价,共获得长岭西瓜炭疽病菌免疫材料1份(PI368509)、抗病材料1份(PI278038)及中抗材料1份(Sun sweet)。与喷雾法接种鉴定相比,离体叶片接种鉴定具有不损伤植株、节省菌液、接种标准一致、不会产生病原菌扩散的优点。     

哈密瓜细菌性果斑病菌悬液浓度计测及离体叶接种方法的研究

本实验通过研究得出哈密瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp. Citrulli)菌悬液平板菌落计数浓度(CFU)与分光光度计测的混浊度(OD600)成直线关系,回归方程为y=4×10-10X 0.1128,相关系数R2=0.996。对供试的13个哈密瓜不同品种分别用离体叶人工接种和常规的苗期人工接种鉴定了其对果斑病的抗性。结果表明,离体叶人工接种同样可以反应哈密瓜品种的固有抗性。品种的抗病性采用病斑面积占叶面积的百分数(F)来衡量,计算公式:F=((N×d2)/(L×W))×100%其中N为病斑数,d为病斑直径,L为叶长,W为叶宽。与传统的抗性评价标准病情指数     

辣椒炭疽病抗性鉴定方法研究

比较了离体果实接种和苗期喷雾接种两种方法在辣椒炭疽病抗性鉴定中的效果。苗期喷雾接种,供试8个品种发病率在3.0%~28.4%、病情指数在0.8~12.5之间,品种之间差异不显著,无法区分抗、感病品种间的抗病性差异。而离体果实接种发病率在0%~92.5%,抗病品种发病轻,果实上无病斑或只形成一些小病斑,没有孢子产生;感病品种发病重,果实上形成典型的凹陷病斑,并产生大量的橙色孢子;抗、感病品种之间的发病程度差异显著。结果表明,离体果实接种法更适合用于辣椒炭疽病抗病性鉴定。     

菜心炭疽病苗期抗病性鉴定技术

试验采用人工喷雾接种方法,通过对接种体浓度、保湿时间和苗龄试验,摸索出了一套适合于菜心炭疽病苗期抗病性鉴定的方法,即在气温为２３￣３２℃范围内,用６×１０＾６￣１×１０＾７个／Ｌ的分生孢子悬浮液于３￣４片叶期接种,保湿２４￣４８ｈ,７ｄ后调查病情,可明显地区分出菜心品种对炭疽病的抗病性差异。     

黄瓜霜霉病人工接种技术研究

通过1979至1983年的人工接种技术研究,已经显示离体叶培养保存菌源法是黄瓜霜霉病菌菌源保存的新方法。离体叶培养法是用病菌孢子囊悬液接种黄瓜离体叶,而后保湿培养。此法比目前国内外沿用的盆栽幼苗不断接种保存菌源法,病斑形成快,孢子囊产量大,保存期可延至1～2个月。基本解决了菌源保存和试材长期观察的问题。试验研究出利用离体叶定点接种和子叶注射接种,进行抗病性鉴定的方法,这两种方法的抗病性鉴定结果,品种间抗病性差异明显,不同品种的抗病性可分成高抗、抗病、中抗、感病和高感等五级,与自然情况下的抗病性反应基本相符。为黄瓜霜霉病抗病性育种苗期初筛提供了简便易行、快速和较可靠的方法。     

西瓜炭疽病苗期不同抗性鉴定方法的研究

以不同抗性西瓜品种为材料,进行西瓜炭疽病苗期不同抗性鉴定方法的研究。结果表明：适宜的西瓜炭疽病苗期人工鉴定接种孢子液浓度为1×106个/mL;适宜的接种炭疽病苗龄为二片真叶期;调查和鉴定幼苗抗病性的最适时期为接种后的7-10d。     

冬瓜和节瓜疫病的离体叶片接种方法研究

[目的]评估离体叶片接种法对冬瓜疫病抗性鉴定的可行性,建立一种快速高效的冬瓜疫病抗性鉴定方法,并筛选抗疫病的冬瓜和节瓜品种,为培育及利用抗病品种提供参考.[方法]以注射灌根接种法为对照,采用离体叶片接种法对9份冬瓜品种进行抗病性鉴定和比较,评估离体叶片接种法的可行性;并采用所建立的离体叶片接种法对23份冬瓜品种和18份节瓜品种进行抗病性鉴定,从中筛选抗、耐疫病的冬瓜和节瓜品种.[结果]离体叶片接种后,发病症状主要表现为叶片呈现暗绿色水渍状病斑,后期变成黑色病斑,有的会长出白色霉层.9份供试冬瓜品种中,铁柱168、B184和P33等7份冬瓜品种分别采用两种方法进行抗感性评价,反应类型结果完全一致.两种鉴定方法对冬瓜疫病的抗性鉴定结果一致性高达77.78%:注射灌根接种法发病率的平均值是54.6%,病情指数的平均值是29.6;离体叶片接种法发病率的平均值是60.2%,病情指数的平均值是31.5.对两种接种法的发病率和病情指数进行相关性分析,结果表明注射灌根接种法和离体叶片接种法的相关性达极显著水平(P<0.01),两种接种方法的发病率与病情指数相关系数分别为0.953和0.993.节瓜普遍比冬瓜更抗疫病,初步筛选出3份高抗冬瓜品种,分别是连环杂交大冬瓜、铁心999黑皮冬瓜和黑娃四号小冬瓜,病情指数分别为5.9、9.2和1.7;5份高抗节瓜品种,分别是佳庆338节瓜、玲珑节瓜、翠秀节瓜、新粤农8号和5号黑毛节瓜,病情指数分别为4.2、5.0、5.8、6.7和7.5.[结论]与注射灌根法相比,离体叶片接种法具有发病症状明显、操作方便、速度快、不伤害植物等优点,离体叶片接种法可作为冬瓜品种疫病抗病性鉴定的辅助手段,用离体叶片接种法筛选出3份高抗冬瓜品种和5份高抗节瓜品种可作为培育及利用抗病品种的资源.     

甜瓜蔓枯病离体接种方法初步研究

以感病品系"白皮脆"和抗源"PI 140471"的离体叶片为试验材料,初步研究甜瓜蔓枯病离体接种方法.离体接种后将叶片置于26±1℃、16 h光照/8 h黑暗及90;的相对湿度条件下培养,2 d后感病品系的离体叶片出现褐化病斑,发病率达60;左右,4 d后病斑开始扩大,离体叶片发病率为100;;抗病材料和对照则没有被浸染,未出现病斑.采用离体叶片和苗期活体两种接种方法,对10个厚皮甜瓜新品种进行蔓枯病抗性鉴定筛选,结果表明两种方法接种后的发病率和病情指数均呈正相关,病情指数的相关系数达0.44,两种方法的鉴定结果基本一致.因此,离体叶片接种方法可用于快速鉴定甜瓜蔓枯病抗病性.     

大蒜叶枯病抗性鉴定方法的筛选

为了建立大蒜叶枯病抗性鉴定的方法,根据田间调查结果选取对大蒜叶枯病不同抗性的3个品种G087、G064、G039作为鉴别品种,对病菌离体接种鉴定中不同孢子悬浮液浓度、病菌接种部位、接种后不同培养温度、不同株龄接种,以及活体接种方法进行了比较和筛选。结果表明:采用4～5叶期大蒜的离体叶片,叶面或叶背接种,接种病菌孢子悬浮液浓度106个/mL,接种后置于21℃温度条件下培养7 d,统计病情指数和品种抗性类型,鉴定结果与品种的抗病水平一致;离体接种鉴定比活体接种法更简便、快速;离体和活体鉴定结果均与品种田间抗病性一致,可作为大蒜品种资源叶枯病抗性鉴定技术。     

贵州新引进柑橘品种对炭疽病的抗性鉴定

为明确贵州新引进的14个柑橘品种对炭疽病的抗病能力,采用离体叶片法测定了其对柑橘炭疽病的抗病性。结果表明,14个参试柑橘品种在接种4d和5d后,抗病性存在差异。其中,天草在接种4d和5d后的病情指数分别为0和0.46,佛拉的病情指数分别为52.78、79.17,濑户佳的病情指数分别为1.85、2.78,若瓦的病情指数分别为4.63、9.26。2次的调查结果都说明天草的病情指数最小,抗病性最强,表现为免疫或高抗;佛拉的病情指数最大,抗病性最弱,表现为感病;濑户佳、若瓦均表现高抗。     

草莓属植物种质资源对炭疽病抗性的离体评价

【目的】 对草莓属植物12个草莓野生种24份材料、1个栽培种41个品种、种间杂交种6个品种共71份种质资源的炭疽病抗性进行评价,为草莓属植物种质资源的利用提供依据。【方法】 以从草莓上分离得到的果生炭疽菌（Colletotrichum fructicola）为接种病原,采用离体接种法将炭疽菌孢子悬浮液（1×10 ⁶个分生孢子/mL）均匀接种在草莓叶片的叶面、叶柄上。置于28℃条件下保湿培养4 d,然后分别对每个叶片的发病情况进行调查,统计叶面病斑数量、叶面最大病斑直径、叶柄最大病斑长度。运用IBM SPSS 15.0软件对不同供试材料的叶面病斑数量、叶面病斑直径、叶柄病斑长度进行相关性分析。根据叶柄病斑长度对每个叶片的病害严重程度进行分级,计算每份材料的病情指数,以接种炭疽菌后叶柄的病情指数为依据对供试材料的炭疽病抗性进行评价。以草莓种类为固定因素,供试材料为随机因素,采用SAS中的一般线性模型程序计算凤梨草莓（41份）、东北草莓（3份）、绿色草莓（4份）、黄毛草莓（3份）、种间杂交种（6份）的病情指数差异（P＜0.05）。【结果】 供试材料中没有对炭疽病完全免疫的材料,所有材料在接种果生炭疽菌4 d后均有不同程度的发病。对不同材料间的对比发现,感染炭疽病后草莓叶柄病斑长度与叶面病斑数量、叶片病斑直径均呈极显著正相关。以接种炭疽菌后的叶柄病斑长度为依据可以对供试材料的炭疽病抗性进行区分,供试材料中高抗17份、抗病20份、中抗21份、中感3份、感病6份、高感4份,炭疽病抗性水平为中抗及以上的材料占全部供试材料的81.7%。凤梨草莓中的‘3公主’‘森加森加拉’‘达赛莱克特’‘全明星’‘香野’‘威斯塔尔’和‘京藏香’,种间杂交种中的‘桃薰’对炭疽病的抗性水平为高抗。在草莓野生种中全部东北草莓、绿色草莓、东方草莓供试材料对炭疽病的抗性水平为高抗,东北草莓和绿色草莓的病情指数显著低于凤梨草莓。【结论】 对草莓属种质资源71份材料的炭疽病抗性进行了评价,从栽培草莓中筛选出‘3公主’‘森加森加拉’‘达赛莱克特’‘全明星’‘香野’‘威斯塔尔’‘京藏香’7个高抗品种。东北草莓和绿色草莓中存在高抗炭疽病的资源,其对炭疽病的整体抗性水平显著高于凤梨草莓,在种间杂交育种过程中可以作为炭疽病抗原来源。     

PAL活性与嫁接西瓜枯萎病抗性传递的相关性

本文测定了两个西瓜品种早佳(8424)和春光及其与两个砧木品种的嫁接苗经病原菌处理后，苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性在植株不同部位的动态变化过程。结果表明：PAL活性表达呈周期性变化；PAL表达具有组织特异性，叶片部是PAL活性高效表达的部4A；PAL活性与枯萎病抗性呈正相关；嫁接显著降低了西瓜枯萎病的发病率和病情指数，增强了接穗的抗病性。嫁接苗抗性增幅的大小与接穗的适应性及砧木的抗病性有关，是两者相互作用的结果；PAL活性的强弱还与植物体感病与否有关，发病植株的PAL活性高于未发病植株，同时探讨了西瓜抗病性在嫁接体中的传递。     

非洲西瓜种质资源的抗病性鉴定及其POD同工酶分析

对引自Botswana西瓜种质资源的抗病性鉴定结果表明,在5×10⁵孢子/ml及浸根5min的压力下,MK₂、M₂对2号小种表现免疫,MK₂、W₃及Lovrin×W₃对0号小种表现免疫;田间调查表明,对炭疽病的抗性普遍较强(T₁和MK除外),对病毒病的抗性和耐性普遍强于对照,尤其MK₂对枯萎病和炭疽病表现免疫,对病毒病表现高抗;大部分资源的叶片和根系中拥有比对照丰富的分子量较大的POD同工酶,种子球蛋白组分比对照丰富.     

菜豆荚和叶对炭疽病(Colletotrichum lindemuthianum)的抗性及其相关性的研究

本文研究了24个菜豆品种和材料的荚和叶对炭疽病的抗性。结果表明,5个品种荚部表现免疫,其中3个品种叶片表现高抗。荚和叶的抗病性具有相关性(r=0.6796)。离体荚喷雾接种法适宜于荚部抗病性鉴定。     

可可种质抗黑果病离体鉴定方法研究

利用可可离体叶片和离体果实鉴定可可种质对黑果病抗性的方法。结果表明:接种方法、接种物浓度、叶龄或果龄等因素影响离体叶片、果实黑果病发生程度;离体叶片接种鉴定方法最适条件是采用针刺法接种、接种物浓度3×107个/m L、叶龄50~60 d;离体果实接种鉴定方法最适条件为采用滴接法、接种物浓度为3×105个/m L、果龄2~3个月。采用离体叶片接种和离体果实接种方法均能鉴定出可可种质对黑果病抗性的差异,鉴定结果与田间成株期的抗病性表现基本一致。     

白菜黑斑病抗性鉴定及QTL定位

【目的】鉴定白菜类作物黑斑病抗性,同时进行白菜黑斑病抗病QTL定位研究,为白菜抗黑斑病品种改良提供理论依据。【方法】以喷雾法接种芸薹生链格孢（Alternaria brassicicola）分生孢子液于30 d苗龄的白菜离体叶片或植株,黑暗保湿处理后统计病情指数,比较在接种后不同接种部位和不同保湿天数抗性的差异。以优化后的方法鉴定白菜品种的黑斑病抗性,利用白菜重组自交系（RILs）群体进行黑斑病抗性QTL定位。【结果】优化了白菜黑斑病抗性鉴定方法,并利用该方法鉴定了70份白菜类作物品种的黑斑病抗性,筛选出14份抗黑斑病材料。同时利用白菜RILs群体,定位出两个黑斑病抗性QTL位点,分别位于A05 和A06染色体上。【结论】利用离体叶法对白菜接种芸薹生链格孢,并黑暗保湿处理5 d后进行病情调查可以有效鉴定不同白菜材料对黑斑病的抗性差异,且最大程度区分材料间的抗性水平。白菜类作物中缺少对黑斑病的高抗材料。利用白菜RILs群体,在白菜A05与A06号染色体上各定位出一个黑斑病抗性QTL位点。