水果型番木瓜外植体灭菌方法研究

以水果型番木瓜成龄株顶芽和侧芽为外植体,研究不同灭菌剂组合和灭菌时间、抗生素组合对外植体的灭菌效果。结果表明,3种灭菌剂组合对外植体的灭菌效果优于两种灭菌剂组合;3种灭菌剂组合中以采用0．1％KMnO4浸泡10min→5％NaClO浸泡10min→0．1％HgCl2浸泡8min的灭菌效果最好,外植体成活率最高,为47．27％。经不同抗生素组合灭菌,外植体平均污染率和成活率分别为28．57％～45．16％、54．84％～71．43％,灭菌效果明显优于对照,说明抗生素组合可以有效降低水果型番木瓜外植体的内源菌污染,提高其成活率,其中以MS＋6-BA1．5rag／L＋庆大霉素80mg／L＋头孢噻肟钠500mg／L的效果最好,利于获得番木瓜无性系。此外,以幼苗顶芽作为外植体进行灭菌培养的效果优于侧芽,利于促进外植体的萌动生长和形成丛生芽。     

长春花愈伤组织诱导研究

以长春花幼嫩顶芽与茎段为外植体，研究了不同灭菌剂及处理时间对外植体的灭菌效果及外植体材料对愈伤组织诱导的影响。结果表明，长春花顶芽为外植体，用75%酒精灭菌30 s+0.1%升汞灭菌300 s效果较好，此条件下外植体污染率为5.5%、褐变率为9.3%。愈伤组织诱导培养基以MS＋3.0 mg/L 6-BA ＋2.0 mg/L 2，4-D效果较好，诱导率可达86.6%。以长春花顶芽为外植体时产生愈伤组织的时间较旱，出愈率为92.6%，愈伤组织团块大、致密，表面有小疣突，预期有较好的不定芽分化能力。     

不同消毒剂对忍冬外植体的灭菌效果

以广西百色忍冬品种红腺忍冬带腋芽茎段为外植体建立无菌体系,通过不同的灭菌剂进行不同时间和浓度梯度的对比,并采用2种灭菌剂混合使用对外植体进行灭菌处理,得出最佳灭菌组合,即为先用75％乙醇灭菌45 s,然后用0.15％ HgCl2灭菌8min.     

省沽油组培过程中外植体灭菌技术的研究

[目的]寻求省沽油组织培养中适宜的外植体灭菌方法。[方法]研究了70%乙醇、0.1%HgCl2、0.1%HgCl2+70%乙醇组合在不同灭菌时间内对外植体生长的影响。[结果]适宜的外植体灭菌技术:茎尖用1%HgCl2+70%乙醇处理时间分别为5 min+50 s,成活率100%;茎段用1%HgCl2处理时间为15 m,成活率95%;幼叶用1%HgCl2处理时间为12 min,成活率85%。[结论]1%HgCl2+70%乙醇、1%HgCl2是省沽油外植体的有效灭菌剂。     

文冠果腋芽诱导关键影响因素与培养体系优化

以文冠果幼嫩茎段作为外植体,通过对灭菌剂种类及灭菌时间、外植体采集时间、基本培养基类型、BA浓度、糖源种类和浓度等文冠果腋芽诱导的可能影响因素进行了试验研究,建立了文冠果茎段外植体高效腋芽诱导技术体系。结果表明:(1)用于外植体表面灭菌的最佳灭菌剂为0.1%HgCl2,最佳灭菌时间为4min;(2)外植体的最佳采集时间为4~5月,此阶段采集的外植体易于灭菌,成活率高;(3)腋芽诱导的最佳基本培养基为MS培养基;(4)当MS培养基中添加1.0mg·L-1 BA和0.2mg·L-1 NAA时,腋芽诱导率最高,达92.25%;(5)腋芽诱导的最佳糖源为蔗糖,最佳浓度为30g·L-1;(6)光照培养比暗培养更有利于文冠果的腋芽诱导及生长。     

维吾尔药材刺山柑组织快繁无菌系建立的初步研究

[目的]建立的刺山柑组织快繁无菌系.[方法]根据不同部位、不同采集时间等,确定刺山柑外植体的采集时间、部位、灭菌剂和灭菌时间.[结果]建立刺山柑的无菌体系时,选择晴天去采集外植体为好;带芽的茎段污染率高,腋芽的污染率低,选用腋芽作为外植体;操作台外的最佳消毒方法是饱和的洗洁精清洗后用自来水冲洗20 min;操作台内消毒对比10;次氯酸钠、2;双氧水、2;溴水、0.1;升汞,0.1;升汞灭菌效果好,而最佳操作台内最佳灭菌体系为75;酒精消毒10 s,以灭菌去离子水冲洗2次,后于0.1;升汞中浸泡9 min,以灭菌去离子水冲洗5次.[结论]对外植体的采集时间晴天相对雨天污染率低,腋芽出芽率高,酒精和升汞双灭菌效果最佳.     

野鸭椿组织培养的初步研究

以野鸭椿（Euscaphis japonica）茎段、叶片和根为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA进行愈伤组织诱导试验。通过对比试验,研究了不同外植体、灭菌剂及灭菌时间、激素对野鸭椿组织培养的影响。结果表明：对外植体灭菌用0.2%的升汞溶液,灭菌8min效果最好。以6-BA1.5mg/L＋NAA1.5mg/L的激素组合最有利于野鸭椿茎段愈伤组织的诱导,其诱导率最高,可达100%。     

野鸭椿组织培养的初步研究

以野鸭椿(Euscaphis japonica)茎段、叶片和根为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA进行愈伤组织诱导试验.通过对比试验,研究了不同外植体、灭菌剂及灭菌时间、激素对野鸭椿组织培养的影响.结果表明:对外植体灭菌用0.2%的升汞溶液,灭菌8 min效果最好.以6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.5mg/L的激素组合最有利于野鸭椿茎段愈伤组织的诱导,其诱导率最高,可达100%.     

甜叶菊叶片灭菌方法的研究

为筛选出适宜甜叶菊叶片灭菌的条件,以甜叶菊叶片为外植体,通过统计污染率、枯死率和愈伤组织诱导率来评价灭菌效果,研究不同灭菌剂、灭菌时间对灭菌效果的影响。结果表明:单一灭菌剂的灭菌效果不好,以0.1%HgCl2灭菌5min的愈伤组织诱导率较高,为44.5%;75%酒精与其它灭菌剂组合的灭菌效果好于单一灭菌剂,以75%酒精与0.1%HgCl2组合最好,污染率和枯死率较低,愈伤组织诱导率较高,适宜甜叶菊叶片灭菌的组合为75%酒精4s+0.1%HgCl24min,愈伤组织诱导率达86.7%。     

云南龙竹种子外植体适宜灭菌时间筛选试验

以云南龙竹的成熟种子为试验材料,采用75%酒精配合0.01%升汞作消毒灭菌剂,并设置0.01%升汞的不同消毒灭菌时间处理的对比。结果表明:在用75%酒精处理15 s后,再用0.01%升汞消毒灭菌处理,其适宜的消毒灭菌处理时间为3 h。在此消毒灭菌时间处理情况下,龙竹种子外植体的污染率已较低,为16.7%;而发芽率仍较高,可达到72.0%。     

影响野生毛葡萄种子灭菌效果和发芽率的相关因子研究

以广西柳城县的野生毛葡萄种子作为外植体材料,研究单一灭菌剂、两种灭菌剂组合以及三种灭菌剂组合对种子灭菌效果及种子发芽率的影响,并比较常温无菌水(20℃)、无菌温水(40℃)和添加GA3(0.5mg/L,40℃)的预处理对种子发芽率的影响。试验结果表明:单一灭菌剂0.1%升汞的适宜灭菌时间为16min;两种灭菌剂组合的75%酒精适宜处理时间为30s;三种灭菌剂组合处理灭菌的效果优于两种灭菌剂组合和单一灭菌剂处理,以75%酒精30s+0.1%升汞16min+15%次氯酸钠5min为最佳灭菌组合,野生毛葡萄种子的污染率为16.67%,发芽率为61.67%。三种不同处理中,以GA3(0.5mg/L,40℃)处理的效果最佳,野生毛葡萄种子的发芽率为73.33%。     

绿豆种子组织培养的几种灭菌方法

组织培养的关键是对外植体灭菌，目前效果最佳的灭菌剂氯化汞属于剧毒试剂，对环境及人体均有危害。为探究更加安全有效的灭菌方式，本研究以绿豆为试验材料，以75%乙醇+30%次氯酸钠联合灭菌、4%过碳酸钠、氯气3种灭菌处理方式搭配灭菌时间共8组处理，统计其萌发及污染情况，并在7 d时统计长势相关数据。另外，每组在接种3 d时制备外植体转接至分化培养基，观察统计污染及丛生芽状况，根据数据分析结果选出最优灭菌剂及灭菌时间。结果表明，75%乙醇30 s+30%次氯酸钠30 min处理下其污染率为4%,丛生芽分化率为82%,生长速率与生长状况良好。因此，该方法最适合于绿豆组织培养的种子灭菌，有利于愈伤组织的诱导。     

木薯组织培养外植体选择和灭菌研究

以木薯品种华南205为材料,研究外植体类型与不同灭菌方法对其组织培养的影响。试验结果表明:9—10月份室外取材灭菌效果最理想,Hg Cl2灭菌处理7—8月份取的外植体的时间需控制在10 min内,而灭菌处理9—10月份取的外植体的时间需控制在5 min。此外,室内水培木薯茎段和室外茎段的中部均可作为组织培养的良好材料。     

黄连木组织培养研究初报

[目的]探寻黄连木的组织培养繁殖技术,为进一步开展品种改良奠定基础。[方法]以2年生嫁接苗茎段为外植体,通过诱导腋芽进行启动培养试验。分别研究不同灭菌剂与灭菌时间、不同抑制剂以及不同光照条件等对黄连木组培效果的影响。[结果]试验初步得出,用0．1％升汞灭菌黄连木外植体较合适的时间为8～12min,半木质化茎是最合适的诱导腋芽的茎段;对于抑制褐变方面,使用聚乙烯吡咯烷酮（PVP）相对较好些;而在培养初期,光照强度对腋芽的诱导情况影响不大。[结论]黄连木组织培养过程中极易出现褐变现象,而且污染率也很高,生产中应注意采取适当的技术措施避免该现象。     

不同处理对欧月初代培养的影响

以欧月茎段为材料，分别对欧月初代培养的最佳灭菌时间和最适灭菌试剂进行研究。结果表明，欧月外植体用0.1%氯化汞分别处理5、10、15 min后通过统计数据所得最佳灭菌时间为15 min，萌芽率接近100%、污染率降至6.67%。欧月外植体用6%次氯酸钠分别处理15、20、25 min后通过统计数据所得最佳灭菌时间为25 min，萌芽率接近90%、污染率为13.33%。     

玉竹组织培养外植体灭菌研究

以邵东玉竹芽为外植体,研究经不同杀菌剂,不同杀菌剂组合、不同处理时间对其灭菌的效果。筛选出适合玉竹组织培养的外植体灭菌体系,为加快玉竹种苗快繁提供科学依据。结果表明：升汞对玉竹外植体上的病原菌有较好的杀灭和抑制作用,所以含有升汞的灭菌组合效果更佳。当2种杀菌剂复合使用时比单一杀菌剂的灭菌效果好。初次灭菌处理用10%次氯酸钠浸泡15min,二次灭菌用0.1%升汞浸泡15min效果最佳,玉竹组培苗污染率为1.67%,成活率为96.67%。另外,在灭菌处理后用超声波清洗仪清洗15min可有效加强除菌效果。初次灭菌处理用0.2%多菌灵浸泡15min,二次灭菌用10%次氯酸钠浸泡15min,再用超声波处理15min,污染降为3.67%,成活率为95.00%,可作为不使用升汞灭菌的替代方案。外植体浸泡杀菌剂的时间在10～15min为宜。     

梭梭种子组织培养表面灭菌方法研究

[目的]对梭梭组织培养的灭菌方法及外植体进行筛选,以期为其组织培养提供指导方法。[方法]以梭梭种子为试验材料,研究不同灭菌剂处理的灭菌效果和不同粒径种子对无菌苗成活率的影响。[结果]梭梭种子最佳灭菌方法为75%酒精5 min+0.1%升汞8min;以直径￠2.0 mm的种子外植体,组培能获得较高的无菌苗成活率,可达65%以上。[结论]该研究结果建立了适合梭梭种子组织培养的表面灭菌方法。     

鱼腥草组织培养中材料灭菌的研究

采用不同的灭菌措施,包括不同的灭菌剂、浓度,对鱼腥草的带芽茎段进行灭菌处理,研究其污染率和污染速率的变化,寻找建立无菌培养系最适宜的方法.结果表明:最适宜的灭菌措施为:外植体茎+70%酒精浸30s+0.1%升汞10-12min+青霉素+链霉素15min.     

降低软枣猕猴桃初代培养污染率的研究

[目的]筛选降低软枣猕猴桃外植体初代培养污染率和提升外植体诱导率的处理方法。[方法]采用半木质化的软枣猕猴桃新梢作为外植体,根据外植体灭菌时间和氨苄青霉素培养基浓度差异组合,分析降低软枣猕猴桃外植体初代培养污染率和提升外植体诱导率的因素,筛选出最适宜的处理方法。[结果]增加外植体75%乙醇灭菌时间至10 s可降低软枣猕猴桃初代培养污染率,培养基中氨苄青霉素浓度为100~150 mg/L时,软枣猕猴桃初代培养污染率随培养基中氨苄青霉素浓度的增加而降低。增加外植体灭菌时间和培养基中氨苄青霉素浓度均能增加软枣猕猴桃外植体诱导率。[结论]污染率低且诱导率高的处理方法为1/2MS+100 mg/L氨苄青霉素、1/2MS+150 mg/L氨苄青霉素、外植体75%乙醇灭菌10 s+0.1%升汞灭菌8 min和外植体75%乙醇灭菌10 s+0.1%升汞灭菌10 min。     

毛梾腋芽诱导关键因子研究与培养体系优化

[目的]建立毛梾茎段外植体高效腋芽诱导体系。[方法]以毛梾幼嫩茎段作为外植体,对灭菌剂及灭菌时间、采集时期、基本培养基、植物生长调节剂、pH值等腋芽诱导的影响因素进行研究。[结果](1)采用0.1% HgCl_2灭菌4~5min是最佳灭菌剂和灭菌时间;(2)4~5月是外植体较为理想的采集时期;1~3月是最佳采集时期,采用当年生枝条水培后的幼嫩茎段;(3)MS培养基是茎段腋芽诱导的最佳基本培养基;(4)MS培养基添加0.5~1.0 mg·L~(-1)BA、0.1mg·L~(-1) NAA与0.1mg·L~(-1) IBA时,腋芽诱导率最高,分别达85.5%和84.4%;(5)最佳pH值为5.8;(6)光照培养环境更有利于毛梾腋芽诱导及生长。[结论]水培后的幼嫩茎段外植体经0.1%HgCl2灭菌4~5min后,培养在MS添加0.5~1.0mg·L~(-1) BA、0.1mg·L~(-1) NAA与0.1mg·L~(-1) IBA,是毛梾腋芽诱导的最佳培养体系。