中性蛋白酶制备酪蛋白抗菌肽的研究

为了替代抗生素的广泛使用,防止病原菌耐药性大大提高,开发酪蛋白抗菌肽新型抗菌剂。本研究利用中性蛋白酶水解酪蛋白,以中性蛋白酶浓度、酶解时间、酶解温度、pH值为影响因子,在单因素试验结果的基础上,应用Centure-composite Design中心组合方法进行四因素三水平的实验设计,以酪蛋白水解液抑菌圈直径为响应值,运用响应面法对水解条件进行进一步的优化。结果表明：酶解温度、酶浓度、酶解时间、pH对酪蛋白水解液抑菌圈直径影响显著;酪蛋白抗菌肽制备的最佳工艺为：水解温度为50℃,酶浓度为3.73%,pH 7.9,酶解时间为130 min。回归方程预测酪蛋白水解液抑菌圈直径理论值可达到21.93 mm,3次验证实验的平均抑菌圈直径为21.91 mm,与理论最大值接近,可见该模型能较好地预测酪蛋白抗菌肽制备的最佳条件。     

复合酶法制备玉米活性肽及其功能特性的研究

采用碱性蛋白酶和胃蛋白酶制备玉米活性肽,以水解度为指标,分别对酶解温度、酶解时间、加酶量及pH值4个因素进行单因素试验及正交试验分析,确定双酶水解的最佳酶解条件。结果表明,碱性蛋白酶水解最佳条件为酶解温度60℃,酶解时间为1.5 h,加酶量为0.128 g,pH值为11,水解度为13.63%;胃蛋白酶水解最佳条件为酶解温度60℃,酶解时间为1.5 h,加酶量为0.008 g,pH值为2.1,水解度为22.12%;双酶水解后水解度可达29.88%;玉米肽对自由基清除率达25.62%。     

蜂蛹蛋白的酶解工艺研究

以蜜蜂蜂蛹为原料,研究蜂蛹蛋白质酶解工艺,并对所得结果进行分析。结果表明,胰蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为:酶解温度为60℃,酶用量为1.5%,酶解时间1.5 h,pH值为8.0,料水比为1∶8,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为1.526 mg/mL;中性蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为:酶解温度为45℃,酶用量为2.0%,酶解时间为1 h,pH值为7.5,料水比为1∶6,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为2.068 mg/mL;最优水解酶是中性蛋白酶;双酶水解蜂蛹蛋白质的最适条件为:总酶量为2.0%,酶量比为1∶2,酶解温度50℃,酶解时间为2 h,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为1.889 mg/mL。双酶同时水解的效果不及中性蛋白酶。     

响应面法优化牛乳蛋白的水解工艺研究

为降低牛乳蛋白中的致敏蛋白含量,制备婴儿配方乳。利用蛋白酶水解牛乳蛋白,在筛选出最佳酶解用酶的基础上,以胰蛋白酶浓度、酶解时间、酶解温度为影响因子,在单因素试验结果的基础上,应用Centure-Composite Design中心组合方法进行三因素三水平的实验设计,以牛乳蛋白水解度为响应值,运用响应面法对水解条件进行进一步优化。结果表明：酶浓度、酶解时间对牛乳蛋白水解度影响显著;牛乳蛋白质水解的最佳工艺为：以胰蛋白酶为水解用酶,水解温度为54.65℃,酶添加量为0.79%,酶解时间为47.01 min。回归方程预测牛乳蛋白水解度理论值可达到20.78%,3次验证实验的平均水解度20.74%,与预测值相对误差为0.2%。说明利用响应面实验设计研究出胰蛋白酶水解牛乳蛋白最佳工艺,为婴儿配方乳的生产奠定了基础。     

玉米抗氧化肽制备及其对血管紧张素转化酶的抑制作用

以玉米蛋白粉为原料,采用微波预处理协同碱性蛋白酶水解制备抗氧化肽,并研究其对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制效果。通过单因素试验,确定出最佳的微波预处理条件为:微波功率400 W、微波时间2.0 min,通过中心组合设计及响应面分析确定了最佳水解条件为:碱性蛋白酶添加量9 000 U/g、酶解时间2.5 h、酶解温度45℃、酶解p H 8.9,在此条件下,玉米蛋白粉平均水解度为14.13%,同时得到的玉米抗氧化肽对ACE有一定的抑制作用,其半抑制浓度(IC50)为4.99 mg/m L。     

蜂蛹蛋白的酶解工艺研究

以蜜蜂蜂蛹为原料, 研究蜂蛹蛋白质酶解工艺, 并对所得结果进行分析。 试验结果表明, 胰蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为： 酶解温度为 60 ℃, 酶用量为 1.5%, 酶解时间 1.5 h, pH 值为 8.0, 料水比为 1∶8, 最适水解条件下, 水解液中的氨基氮含量为 1.526 mg/mL; 中性蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为： 酶解温度为 45 ℃, 酶用量为 2.0%, 酶解时间为 1 h, pH 值为 7.5, 料水比为 1∶6, 最适水解条件下, 水解液中的氨基氮含量为 2.068 mg/mL;最优水解酶是中性蛋白酶; 双酶水解蜂蛹蛋白质的最适条件为： 总酶量为 2.0％, 酶量比为 1∶2, 酶解温度 50 ℃,酶解时间为 2 h, 最适水解条件下, 水解液中的氨基氮含量为 1.889 mg/mL。 双酶同时水解的效果不及中性蛋白酶。     

制备乳清抗氧化肽的水解条件优化

采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶3种酶对乳清蛋白进行酶水解试验,研究了不同酶解产物、水解时间、水解温度和pH值下的乳清抗氧化肽的水解度和TBARS值,确定了制备乳清抗氧化肽的最佳水解参数。结果表明,乳清蛋白水解物具有抗氧化活性,最佳复配条件是碱性蛋白酶的水解时间5 h,最佳水解温度为65℃,pH值8.5;胰蛋白酶的水解时间1 h,最佳水解温度为45℃,pH值8.0。当水解度达到32.28%时,乳清肽具有较强的抗氧化能力。     

双孢蘑菇酶解液的制备及GC-MS分析

采用碱性蛋白酶、纤维素酶和碱性蛋白酶复合纤维素酶对新鲜双孢蘑菇子实体进行水解,设计L9(34)正交试验考查温度、pH值、酶添加量和时间对蛋白水解度的影响,制备蛋白水解度最高的酶解液,利用GC-MS对其中的挥发性物质进行分析。结果表明,纤维素酶最佳酶解参数为温度50℃,pH值5.0,酶添加量0.8%,时间120 min;碱性蛋白酶最佳酶解参数为温度40℃,pH值10.5,酶添加量0.9%,时间150 min。用碱性蛋白酶复合纤维素酶水解双孢菇后,水解度达20.80%,共有33种挥发性成分。     

文蛤肉酶法水解条件的优化及最适蛋白酶的选择

以文蛤肉为原料,探讨了胰蛋白酶的加酶量、水解时间、水解温度、pH值及液固比对文蛤肉水解液总氨基氮含量和水解得率的影响规律,确定文蛤肉酶解的最优条件为酶解温度50℃,加酶量4000U/g原料,pH值为（8．00±0．05）,水解时间5h,液固比3：1。再以文蛤肉水解液的水解度、水解得率及风味评分值为指标对该酶解优化条件下获得的产品与精制中性蛋白酶水解优化条件下获得的产品进行比较。结果表明,胰蛋白酶为酶法水解文蛤肉最适宜的蛋白酶,其酶解所得文蛤肉水解液的水解度、水解得率及风味评分值分别为42．44％、82．86％及205．92。     

酶法水解牦牛血制备蛋白多肽粉的技术研究

摘 要：[目的][方法]利用中性蛋白酶将牦牛血红蛋白水解,探讨各因素对中性蛋白酶水解牦牛血红蛋白的影响以及水解度的关系,并对酶解液进行了活性炭脱色效果的研究。通过单因素和正交试验（L16(45)）,[结果]确定了中性蛋白酶水解血红蛋白的适宜条件为 pH 7.0,温度 45℃,酶底物浓度比 4000 U/g 蛋白质液,底物浓度 5%,酶解时间 7 h。通过正交试验,确定酶解液的最佳脱色工艺条件为活性炭用量 4%,脱色温度 75℃,pH 5.0,脱色时间 60 min。     

酶对猪血蛋白水解度影响的研究

对4种蛋白酶水解能力的比较得出,水解能力最强的是碱性蛋白酶。通过单因素试验和正交试验,考察了各因素对猪血水解的综合影响。在碱性蛋白酶的最适温度和最适pH值下,对水解度影响最大的因素是底物质量分数,其次是酶质量浓度,最后是水解时间。利用直观分析可以得到水解猪血蛋白质的最佳工艺条件为:底物质量分数为4%,酶质量浓度为8000U/g,水解时间为8h,水解度大小为34.05%。     

双酶法水解米糠蛋白工艺优化的研究

以米糠为原料,经脱脂后,采用碱性蛋白酶和中性蛋白酶双酶法水解米糠蛋白。在单因素试验的基础上,通过正交试验研究温度、pH、米糠质量分数、两种酶的比例及水解时间比对米糠蛋白水解度的影响。结果表明,影响米糠蛋白水解度的因素主次顺序为:米糠质量分数温度时间比pH酶比;优化的双酶法水解米糠蛋白的工艺条件为:温度45℃,米糠质量分数3%,碱性蛋白酶处理时pH为9.5、中性蛋白酶处理时pH为6.5,时间比3︰1(即碱性蛋白酶4.5 h,中性蛋白酶1.5 h),加酶总量3%时的酶比(碱性蛋白酶︰中性蛋白酶)2︰1。在此工艺条件下,米糠蛋白的水解度达到56.28%。     

响应面法优化燕窝不溶性蛋白酶解工艺的研究

研究旨在应用酶解技术将燕窝中不溶性蛋白转换为水溶性多肽，使分子量降低，有利于人体消化吸收，以期为燕窝新产品的开发奠定基础。以水解度和肽得率为指标，筛选出碱性蛋白酶对燕窝中不溶性蛋白进行酶解。通过单因素实验研究酶解时间、酶加量、底物浓度对燕窝多肽得率的影响，并利用响应曲面法对燕窝不溶性蛋白酶解工艺进行优化。结果表明：酶解的最佳工艺为：底物浓度为2.5%，酶加量为4%，酶解时间为3.6h，得到的肽得率为33.59%。通过实验对该模型进行验证：得到肽得率为33.38%，相对误差为0.56%，说明该模型能较好地反映出燕窝不溶性蛋白酶解情况。此外，通过凝胶电泳实验证明燕窝不溶性蛋白通过碱性蛋白酶酶解，分子量有效降低。该实验获得了燕窝多肽，为后续产品进一步深入开发和应用提供一定理论基础。     

酶解鹰嘴豆蛋白制备ACE抑制肽的研究

ACE抑制肽对血压调节起重要作用,对抑制ACE活性发挥着重要作用。为开发降血压多肽,以鹰嘴豆分离蛋白为原料,在碱性蛋白酶作用下水解,选择温度、pH值、酶与底物浓度比和水解时间4个因素,以ACE抑制率为评价指标,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken响应面分析法优化酶解鹰嘴豆分离蛋白制备ACE抑制肽的条件。结果表明,最优水解条件为:温度50℃,pH值8.0,酶底比4%,水解时间4.0 h,在此条件下,ACE抑制率可以达到58.84%,验证试验ACE抑制率为(59.01±0.58)%,与理论值相符合。     

乳酪蛋白肽的固定化酶法制备工艺研究

以壳聚糖为载体,戊二醛溶液为交联剂,制备固定化木瓜蛋白酶。试验分析了壳聚糖浓度、给酶量、交联时间及戊二醛浓度对木瓜蛋白酶固定化效果的影响,并初步探讨了固定化木瓜蛋白酶水解制备乳酪蛋白肽的工艺。     

碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白质工艺的研究

经5种蛋白酶比较试验的筛选,采用碱性蛋白酶进行水解蚕蛹蛋白的研究。在单因素试验的基础上,以水解度为考察指标,通过正交试验优化水解工艺条件,研究温度、底物浓度、时间、加酶量和pH值对蚕蛹蛋白质水解效果的影响。结果表明,碱性蛋白酶水解蚕蛹蛋白质的最优工艺条件为:处理温度55℃,底物浓度3%,时间6 h,加酶量3%,pH 9.5,蚕蛹蛋白的水解度可达22.91%左右。     

文蛤蛋白酶解条件的优化及酶解产物体外抗氧化活性的分析

为了制备抗氧化活性多肽,利用风味蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶复合的方式水解文蛤蛋白,在单因素实验结果的基础上,选取液料比、酶解温度和酶解pH为影响因子,应用Box-Benhnken中心组合设计原理进行三因素三水平实验设计,以文蛤蛋白的水解度(DH%)为响应值,运用响应面(RSM)法对双酶复合水解条件进行优化,并分析了酶解产物的体外抗氧化活性。结果表明：双酶复合酶解的最优酶解条件为水解时间4 h,酶添加量3%,双酶复合比（风味蛋白酶:木瓜蛋白酶）2:1,液固比3.25:1,温度51℃,pH 6.9,在此条件下文蛤蛋白水解度为36.11%,酶解产物清除DPPH和?OH自由基的IC50值分别为2.61、3.47 mg/mL,表现出较强的体外抗氧化活性,因此,可以利用优化后的酶解条件水解文蛤蛋白制备抗氧化多肽。