犬、猪转移因子对犬淋巴细胞体外转化增殖影响的比较研究

无菌采取犬抗凝血，分离淋巴细胞并制备成不同浓度。应用正交试验，探讨不同浓度淋巴细胞、植物血凝素P（PHA-P）、犊牛血清（FCS）对淋巴细胞增殖的影响。在此基础上，研究不同浓度犬、猪转移因子（transfer factor, TF）对犬淋巴细胞增殖的影响，增殖的结果用MTT法测定。结果表明，当犬淋巴细胞浓度为5×106个/ml，PHA-P为12.5μg/ml，FCS为 10%时，淋巴细胞增殖效果最佳。在最佳培养条件下，犬、猪TF浓度在0.195~25mg/ml时，对淋巴细胞转化增殖均有促进作用，但犬、猪TF单独或与PHA-P共同作用时对淋巴细胞增殖的最佳刺激浓度均为1.56mg/ml，且犬、猪TF单独作用于淋巴细胞的效应明显优于与PHA-P的协同作用。结果证实，同源或异源TF对犬淋巴细胞增殖有良好的刺激效果，同时研究结果为异源TF在临床上应用于犬病毒性疾病的防治提供了实验依据。     

犬淋巴细胞转化增殖试验最佳条件的确定

本试验选择杂种牧羊犬作为实验犬,用MTT法检探讨了不同浓度犊牛血清（FCS）、淋巴细胞、植物血凝素P（PHA-P）和刀豆蛋白A（ConA）对犬淋巴细胞增殖的影响。确定了犊牛血清含量为10%,淋巴细胞浓度为5×106个/mL,用丝裂原PHA-P 刺激的最佳浓度为12.5ug/mL时,MTT法测定能够刺激犬淋巴细胞转化增殖,但t检验分析表明其促进淋巴细胞增殖的效果并不显著;当其它条件不变,所用的丝裂原为Con A时,它在浓度为0.5～2.5μg/mL范围内均可以显著刺激T细胞的增殖（P<0.05）,且在浓度为2.5μg/mL时刺激效果最佳     

牦牛转移因子对藏绵羊外周血淋巴细胞转化功能的影响

为研究牦牛转移因子(transfer factor,TF)对藏绵羊外周血淋巴细胞增殖的作用,试验采用MTT法探索不同浓度淋巴细胞、犊牛血清(FCS)、刀豆蛋白A(Concanavalin A,ConA)对淋巴细胞增殖的影响。在最佳条件下,探讨牦牛TF对藏绵羊外周血淋巴细胞增殖的影响。结果表明,当藏绵羊淋巴细胞浓度为5.4×10⁶个/mL,犊牛血清含量为8%,ConA为1 μg/mL时,刺激效果最佳,且TF单独或协同丝裂原时,对淋巴细胞都有促进增殖的效果,且最佳浓度为1.5 mg/mL。体内注射TF后,各剂量组在注射第3天时,淋巴细胞再次受到TF单独或协同ConA刺激时,其增殖效果与细胞组单独增殖效果比较,差异不显著(P>0.05),至第5~7天时,其增殖效果明显高于细胞组,差异显著(P<0.05)。注射2 mL剂量组转化增殖效果优于1 mL和3 mL剂量组,差异显著(P<0.05)。说明牦牛TF能够有效增强机体免疫力,是一种很好的免疫增强剂。     

牦牛脾脏转移因子对小鼠淋巴细胞转化增殖的影响

为了研制一种能够增强动物抗病力的生物活性免疫制剂。采用冻融-透析法提取牦牛脾脏中非特异性转移因子(nTF),并用MTT法检测牦牛TF对小鼠淋巴细胞转化增殖的影响。结果表明：（淋巴细胞+ 刀豆蛋白 +TF）对小鼠脾淋巴细胞的转化增殖效果优于（淋巴细胞+ TF）组和（淋巴细胞+脂多糖+TF）组,差异显著(P<0.05);注射TF组对小鼠脾淋巴细胞的转化增殖的效果优于注射生理盐水对照组 (P<0.05)。牦牛脾脏转移因子对小鼠脾淋巴细胞增殖有促进作用,协同刀豆蛋白(ConA)或脂多糖(LPS)对淋巴细胞增殖的效果有增强趋势。     

非洲菊快速繁殖技术研究

以非洲菊种子为材料，进行非洲菊组培快繁技术体系研究。试验结果表明：在试验区间内，采用MS培养基分别添加不同浓度的NAA与BA复合处理均能提高芽的增殖率，其中BA对增殖的作用显著，最佳增殖培养基：MS＋NAA0．5mg／L＋BA2．0mg／L。NAA和IBA单独处理或生长素复合处理均能使非洲菊生根，其中以IBA处理生根效果最好，最佳生根培养基：MS＋IBA2．0mg／L。     

黑提葡萄组培快繁过程中初代培养基的筛选

本实验以黑提葡萄新生枝条的带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,探讨不同浓度的IBA、6-BA对组培芽生根及增殖的影响,探索适宜黑提葡萄苗的培养条件,对激素不同浓度的培养效果进行对比,以筛选出最佳的培养基配方。实验结果表明,在MS培养基中加入0.5 mg/L IBA、0.2 mg/L 6-BA时,初代培养的生根效果最佳;在MS培养基中加入0.2 mg/L IBA、0.5 mg/L 6-BA时,初代培养的增殖效果最佳。     

绿原酸对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响

为分析绿原酸(CHA)对小鼠脾脏淋巴细胞增殖、分泌功能的影响。无菌操作分离小鼠脾脏,制备脾脏淋巴细胞并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入诱导剂刀豆蛋白(ConA)和脂多糖(LPS)以及0、40、80、160 μg/mL不同浓度的CHA,经过不同时间培养后,采用MTT法检测T和B淋巴细胞的增殖,ELISA和Griess法分别检测淋巴细胞分泌TNF-α和NO的水平。结果表明：低浓度和中浓度CHA提高ConA/LPS诱导的T、B淋巴细胞增殖和存活,而高浓度CHA明显抑制其细胞增殖转化;CHA促进小鼠脾脏T、B淋巴细胞分泌NO;CHA对T淋巴细胞分泌TNF-α影响不大,中浓度CHA可显著促进脾脏B淋巴细胞分泌TNF-α,高浓度反而抑制其分泌;CHA促进环磷酰胺处理的小鼠脾脏T和B淋巴细胞体外增殖,但对其NO分泌量影响不明显。结果提示CHA可能通过影响淋巴细胞增殖和细胞因子分泌而表现免疫调节作用。     

桃叶卫矛茎段愈伤组织诱导及不定芽再生体系的建立

为完善及优化桃叶卫矛组培繁殖再生体系,解决以腋芽萌发为再生途径进行组培增殖时增殖系数小的问题,以桃叶卫矛幼嫩茎段为材料,分别用20%的次氯酸钠和0.10%的升汞进行消毒处理,处理时间分别为8、10、12 min获取其消毒最佳方案;以桃叶卫矛茎段为材料,通过调节6-BA和NAA浓度,诱导桃叶卫矛茎段产生愈伤组织;以桃叶卫矛愈伤组织为材料,采用6-BA和NAA正交试验诱导产生不定芽;以桃叶卫矛不定芽为材料,调节6-BA和NAA浓度,提高继代增殖系数;以桃叶卫矛继代增殖苗为材料,调节IBA和NAA浓度,获取桃叶卫矛生根苗。研究结果表明：（1）桃叶卫矛幼嫩茎段消毒最佳方案为20%的次氯酸钠处理12 min,污染率2%;（2）茎段愈伤组织诱导最佳培养基为1.0 mg/L 6-BA+ 0.10 mg/L NAA,诱导率80.00%;（3）不定芽诱导最佳培养基为0.5 mg/L 6-BA+ 0.10 mg/L NAA,诱导率91.11%;（4）继代增殖最佳培养基为MS+ 1.0 mg/L 6-BA+ 0.10 mg/L NAA,增殖系数6;（5）生根培养最佳培养基为1/2MS+ IBA 0.3 mg/L,生根条数平均为5条。本研究利用桃叶卫矛无芽茎段诱导出愈伤组织,并将继代增殖系数提高至6,且完成了桃叶卫矛组培再生体系的优化。     

霍山石斛试管丛生芽增殖影响因素的探讨

为了更好地保护霍山石斛野生资源,变野生为家种。本试验以霍山石斛试管丛生芽为试验材料,采用3因素3水平L9（33）正交设计方案,考察BA、NAA、KT不同激素及浓度对霍山石斛试管丛生芽继代增殖的影响。试验结果表明：植物激素BA、NAA、KT对霍山石斛试管丛生芽的增殖均有一定影响,其中NAA及KT的影响更为明显,并通过SAS软件统计分析确定三种植物激素的最佳浓度配比分别为：BA 1.5 mg/L,NAA 1.0 mg/L,KT 1.0 mg/L,即霍山石斛试管丛生芽继代增殖的最佳培养基配方为：MS+BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+食糖30.0 g/L+琼脂 8.0 g/L。     

金毛狗脊原叶体增殖和孢子体转化条件的优化

为探究不同浓度的无机盐、蔗糖、KT、NAA和6-BA等对金毛狗脊原叶体增殖和孢子体转化的影响，采用正交设计实验方法，设置5因素4水平正交试验，筛选金毛狗脊原叶体增殖和孢子体转化的最佳培养基。结果表明，原叶体增殖最佳培养基为1/2MS+2%蔗糖+0.1 mg/L NAA+0.3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT。孢子体转化最佳培养基为1/4MS+1%蔗糖+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA。     

影响甜樱桃离体小叶片再生的关键因子研究

适当提高蔗糖浓度能明显改善甜樱桃试管苗的状态，在F14培养基蔗糖浓度由原来2%增加到6%，增殖倍数由1~2增加到25~30，叶片由黄绿无光变为浓绿油亮，保持天数由原来的15d增加到70d。经过4步骤程序培养可以获得小叶片再生，即：①将普通继代试管苗接入F14（附加6-BA0.5mg/L+IBA0.05mg/L+GA30.2mg/L+蔗糖6%+琼脂7.0g/L，pH5.8）继代培养30d，获得小叶型高分化试管苗。②剪取并且横切2~3刀后将小叶片，先在0.1%VC无菌水中浸泡1到30min，然后接入MS或F14或WPM（附加6-BA2mg/L+2，4-D2mg/L+蔗糖4%+琼脂7.0g/L，pH5.8）进行光照培养3~4d，获得剪切口组织脱分化的小叶片。③转接1/2大量元素的WPM培养基（附加6-BA2mg/L+IAA2mg/L+蔗糖4%+琼脂7.0g/L，pH5.8）及在环境控制（15h/24h日光周期变化,光照2000lux，温度20℃；黑暗，温度15℃）下培养20~30d，得到诱导出红色愈伤组织（含有花色苷）的小叶片。④转接F14培养基（附加6-BA0.5mg/L+IBA0.05mg/L+GA32mg/L+蔗糖6%+琼脂7.0g/L，pH5.8）培养20d后得到由红色愈伤组织中萌发出不定芽，同时颜色变淡。小叶片再生不定芽率可达91%。     

不同分子量壳聚糖对番茄生长发育的影响

以番茄合作“908”为试材,研究了不同分子量壳聚糖对番茄种子萌发、生长发育、产量及品质的影响。结果表明：①壳聚糖浸种,CTS7和CTS3分别在0.625mg/ml 和1.25 mg/ml的浓度下,发芽率、发芽指数和活力指数三项指标达最大值;大分子量的CTS7效果最差,中间分子量CTS3和CTS5效果最好。②壳聚糖处理,对番茄幼苗的株高和鲜重影响显著,但对根长和根鲜重影响达不到显著水平的差异。CTS7浓度为1.25 mg/ml时对番茄生长的促进效果最明显,CTS3在2.5 mg/ml时对番茄生长的促进效果最明显。③1.25 mg/ml浓度的CTS5对番茄增产效果最显著,并使番茄中可溶性固形物、Vc含量及总蛋白含量增加,总酸度降低。     

烯效唑处理对高粱植株抗逆能力的影响

为了明确新型植物生长调节剂烯效唑对提高高粱植物抗逆能力的影响,本研究采用浸种、喷施两种处理及在高粱生长不同时期喷施不同浓度的烯效唑药剂,测定对高粱体内SOD、POD、CAT、MDA等酶活性的变化,探索烯效唑的生物活性。研究结果表明,无论是浸种还是喷施,SOD、POD和CAT 3种酶的含量均随着浓度的升高而升高,浸种在浓度40 mg/L时效果最佳,喷施在浓度125 mg/L时效果最佳。MDA含量随着浓度的增加先减低后升高,浸种处理在浓度40 mg/L时出现最低值,喷施处理在浓度125mg/L时出现最低值。说明烯效唑处理在一定程度上可防止或减缓细胞膜脂质过氧化,增强抗逆性。     

中草药提取物对桃褐腐菌（Monilinia fructicola）抑制作用增效组合筛选

用菌丝生长速率法测定了虎杖、黄柏、厚朴、松萝等4种中草药提取物对桃褐腐菌的抑制作用，经线性回归计算50%抑制时的有效浓度（EC50）分别为133.8μg/ml、40.6μg/ml、90.6μg/ml、3.4μg/ml。根据EC50，用等效线法相加作用线的6等分点设置配比，共毒因子法判断增效标准。结果表明，各种配比的混配剂中黄柏+松萝为最佳增效作用组合，其中以8：1增效作用最显著。     

油梨愈伤组织诱导及分化研究

摘要：[目的]研究不同激素及外植体类型对‘哈斯’油梨（Persea Americana Mill.cv.Hass）愈伤组织诱导及分化的影响,筛选最佳诱导条件和外植体。[方法]通过间接器官发生途径。主要探讨（1）单一激素萘乙酸（1-Naphthylacetic acid,NAA）、2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-dichlorophenoxy acetic acid,2,4-D）;6-苄氨基腺嘌呤（6-Benzylaminopurine,6-BA）分别与2,4-D和NAA 结合时对‘哈斯’油梨叶片愈伤组织的诱导效应。（2）不同外植体（叶片、叶柄、茎尖、茎段）在相同条件下（基本培养基：MS+1 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+0.1NAA mg/L）的愈伤组织诱导效应。（3）单一激素 6-BA（或与NAA结合）对油梨愈伤组织芽分化的效应。[结果]结果表明：以MS为基本培养基,（1）添加1.0 mg/L 2,4-D/NAA,其诱导效果最佳,诱导率分别为45.3%和20.2%;但NAA诱导的愈伤质地较佳。（2）1 mg/L NAA与1.0 mg/L 6-BA结合,诱导效果较好,其诱导率最高可达84%。（3）诱导愈伤组织的最适外植体为茎段,其诱导率≥72.8%。叶柄次之,叶片和茎尖较差。[结论]综上,不同激素种类及其浓度和外植体类型对‘哈斯’油梨愈伤组织诱导影响显著。最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+7g/L琼脂。愈伤组织诱导最佳外植体为茎段,但诱导形成的愈伤组织难以分化出芽。     

甲维盐与杀螺胺乙醇胺盐对钉螺的联合毒力及田间效果测定

为了筛选防治钉螺的高效药剂,采用浸螺法测定了甲维盐与杀螺胺乙醇胺盐对钉螺的毒力,通过田间药效实验,评价了药剂组合对钉螺的田间效果。结果表明：甲维盐对钉螺显示了很好的室内毒力,LC50为0.039 mg/L,杀螺胺乙醇胺盐与甲维盐在1:20~20:1比例范围内对钉螺显示了很好的增效作用,CTC均大于120,其中以1:10增效作用最为显著,CTC为399.20, 24%杀螺胺乙醇胺盐.甲维盐乳油在0.5~2 ml/m2施药浓度下对钉螺显示了很好的田间防效,显著高于对照药剂70%杀螺胺乙醇胺盐可湿性粉剂和克蜗特。     

苎麻叶片组织培养再生植株的研究

摘要：以中苎一号叶片为外植体,研究了外植体消毒时间、培养基、生长调节物质对苎麻品种中苎一号叶片愈伤诱导、分化不定芽和生根的影响。其结果表明：先用75%酒精消毒10秒,再用0.1%升汞灭菌8分钟,同时滴入1-2滴1% HCL效果最好。中苎一号最佳叶片愈伤组织诱导基本培养基为1/2MS;最佳叶片愈伤组织诱导培养基组合为:1/2MS+0.05mg/L TDZ+0.01mg/L IAA+0.03mg/L 2,4-D;最佳愈伤分化培养基为: 1/2MS+0.5mg/L TDZ+0.02mg/L 2,4-D+0.03mg/L IAA;最佳生根培养基为:1/2MS+0.02mg/L TDZ+O.O5mg/L NAA+0.02mg/L IAA, 形成了较为完善的组织培养再生体系,再生率达到了26%以上