猪HUMMLC2B基因第一内含子多态与胴体性状的相关性研究

快肌肌浆球蛋白轻链2（fast skeletal myosin light chain 2,HUMMLC2B或MYLPF）是一种钙结合蛋白,参与多种生命活动,是近几年研究较多的一种肌浆球蛋白。本研究采用PCR-RFLP技术,分析了HUMMLC2B基因第1内含子中的MspⅠ酶切多态（T613C）在7个品种猪中的多态性分布及其与胴体性状和肉质性状间的相关,结果表明：在检测的猪群中除长白猪中A等位基因与B等位基因频率的比例为1：2外,其余的均为B等位基因占绝对优势,且A等位基因纯合个体只在长白猪中检测到。在6个群体中,基因型效应与眼肌宽度、眼肌面积 肌内脂肪和肌内水分等差异极显著（P<0.01）,与瘦肉率和皮率等性状差异显著（P<0.05）。最后对该基因在各组织中的表达情况进行了研究;该位点是否用作为改良猪胴体、肉质性状的标记位点并在标记辅助选择中加以应用还有待进一步的研究。     

猪UMMLC2B基因第一内含子单核苷酸多态与胴体、肉质性状的相关分析

快肌肌浆球蛋白轻链2（fast skeletal myosin light chain 2,HUMMLC2B 或 MYLPF）是一种钙结合蛋白,参与多种生命活动。实验获得克隆猪HUMMLC2B基因（GenBank登录号：DQ533994）,并采用PCR．RFLP技术,分析了HUMMLC2B基因第1内含子中的MspⅠ酶切多态（T613C）在7个品种猪中的多态性分布;分析了多态性与36头长白猪、5个群体104头猪以及长自和5个群体之和的140头猪胴体性状和肉质性状间的相关,结果表明,在检测的猪群中除长白猪中A等位基因与B等位基因频率的比例为1：2外,其余的均为B等位基因占绝对优势,且A等位基因纯合个体只在长白猪中检测到。在不同组合的相关性分析中,基因型效应与瘦肉率、眼肌高度、眼肌面积肌内脂肪和肌内水分等差异极显著（P〈0．01）或显著（P〈0．05）。HUMMLC2B基因在12个猪器官或组织中均表达,在心脏和骨骼肌中表达量最高。     

ZP3基因的变异及其对猪产仔数和乳头数的影响

猪的透明带基因主要可以分为ZP1、ZP2、ZP3和ZP4 4种硫酸化的糖蛋白，在精卵识别和结合的过程中具有重要的作用：一是与精子专一性地结合，二是在与精子结合后诱导精子的顶体反应，从而影响猪的受精率和产仔数。猪ZP3已经被定位在3pter-p15（李天晴等，2000），由421个氨基酸组成。当前对于ZP3基因的研究主要集中在人、鼠类等动物，研究表明ZP3基因点突变将导致人的繁殖障碍（Bruch et al．．1996；Acevedo and Smith，2005）。目前尚未见有关猪SNP位点与繁殖性状关系研究报道。本实验采用PCR-SSCP技术结合直接测序方法，对猪ZP3基因的第7个外显子和第6个内含子的部分序列进行了SNP多态检测，发现一个新的SNP位点，并初步分析了不同基因型与猪的有效乳头数、总产仔数、总产活仔数、头胎产活仔数、经产活仔数等繁殖性状的相关性。     

ADSL、GARS-AIRS-GART基因多态位点和聚合基因型对白耳鸡肌苷酸（IMP）含量的效应分析

采用PCR-SSCP方法检测白耳鸡ADSL基因外显子2和GARS-AIRS-GART基因5’侧翼区多态性,分析多态位点不同基因型及聚合基因型与90日龄胸肌肌苷酸（IMP）含量的关联,并比较分析了不同聚合基因型个体的生产性能。结果表明：ADSL基因外显2和GARS-AIRS-GART基因5,侧翼区的多态位点C3484T、C-179T与IMP含量显著相关（P<0.05）,TT为两种有利单基因型,其对IMP含量的加性效应分别为0.1710 mg/g和0.128 mg/g,显性效应分别为-0.025 mg/g和0.031 mg/g 。两种有利单基因型聚合个体TTTT的IMP含量显著高于其他基因型聚合个体（除TTCC型）,且在聚合基因型中两种有利单基因型TT对IMP含量的影响均达到显著水平（P<0.05）,但两者间的互作效应并不显著（P>0.05）。TTTT聚合基因型个体的90日龄平均体重、72周龄产蛋性能仍保持相对稳定。     

8个猪种和野猪H-FABP基因分子标记与IMF含量的关系

利用PCR-RFLP（Hinf Ⅰ、HaeⅢ和MspⅠ）分子标记技术,检测了杜洛克猪、长白猪、大白猪、内江猪、荣昌猪、汉江黑猪、汉中白猪、八眉猪和野猪共计265头猪H-FABP基因5＇-上游区和第二内含子区的遗传变异,并利用最小二乘模型分析了H-FABP基因对猪肌内脂肪（IMF）含量的遗传效应.结果表明：（1）在Hinf Ⅰ-RFLP位点上,上述品种和野猪均存在多态性,其中大白猪、八眉猪、汉江黑猪、汉中白猪和野猪表现为低度多态（多态信息含量（PIC）小于0.25）,杜洛克、长白猪、内江猪和荣昌猪为中度多态（PIC介于0.25和0.5之间）;（2）除汉江黑猪（P＜0.05）和野猪（P＜0.01）外,其它猪种基因频率和基因型频率都处于Hardy-Weinderg平衡状态（P＞0.05）;而在HaeⅢ-RFLP和MspⅠ-RFLP位点上,仅内江猪、荣昌猪、汉江黑猪和八眉猪为单态;（3）9种基因型对IMF含量的影响,HH＞Hh＞hh,DD＜Dd＜dd,AA＜Aa＜aa,遗传效应值分别为：3.89、3.42、3.17、2.27、2.49、2.91、2.28、2.70和2.95,H-FABP基因可显著地提高猪IMF含量（P＜0.05）.结果提示：可通过提高“aa-dd-HH”基因型的频率来增加IMF含量,达到改善猪肉质的目的.     

猪MC4R基因Asp298Asn位点的多态性及其与商品猪背膘厚的关系

黑素皮质素受体4 ( melanocortin 4 receptor, MC4R) 是G 蛋白耦联受体( G protein coupled receptors,GPCRs) 超家族的一个成员, 在人和小鼠的体重、能量稳态和采食量的调控中发挥重要作用。本研究采用PCR-RFLP技术对MC4R的298位点错义突变（Asp298Asn）在莱芜猪、大莱二元杂交猪和商品猪中的多态性进行了检测,对该突变与商品猪背膘厚的关系进行了关联分析。结果表明,在33头莱芜猪中只检测到11基因型,而在大莱二元杂交猪和商品猪中11、12和22基因型均有分布,且等位基因1的频率均高于等位基因2;在该突变位点三个群体均处于Hardy-Weinberg平衡状态（P>0.05）。商品猪不同基因型个体背膘厚差异显著,22基因型个体的背膘厚显著高于12基因型（P <0.01）和11基因型（P <0.05）个体。因此,MC4R基因298位点的Asp298Asn错义突变与商品猪的背膘厚有关,可以作为以西方猪种为杂交亲本的商品猪背膘厚的分子标记。     

梅山猪等5个群体中钙蛋白酶抑制蛋白基因的多态性及其与肉质和背膘厚的关系

钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin，CAST)是钙蛋白酶系统的内源性抑制剂，并且已被确定能影响宰后肉的嫩度。采用PCR-RFLP技术，分析了CAST基因在5个实验群体110头猪中的多态性分布及其与肉质性状和背膘厚间的相关。结果表明, CAST基因存在4个多态位点，且在5个群体中的分布存在极显著差异。在A、B位点上，基因型效应仅对肌肉嫩度有显著影响(P <0.05)，而基因效应中基因的加性效应显著(P<0.05)，显性效应不显著；在C位点上，基因型效应对所有性状的影响都未达到显著水平(P >0.05)。在D位点上，基因型效应只对背膘厚有显著影响(P<0.05)，而基因效应中，基因的显性效应极显著(P<0.01)，加性效应不显著。因此, 可以把CAST基因作为影响猪肉质性状和屠体性状的候选基因。     

五指山猪不同组织中肌细胞生成素基因Myf4及生肌调节因子Myf6的表达

本文通过运用Real-time PCR技术,检测肌细胞生成素基因Myf4和生肌调节因子Myf6在出生后的第30天、第210天、第360天（出生到体成熟）的五指山猪肌肉组织中的表达变化,以及Myf4、Myf6在体成熟五指山猪肌肉、心、肝、脾、肺、肾、胃、小肠组织中mRNA相对表达情况。结果表明：Myf4及Myf6基因在五指山猪出生后在肌肉组织中的mRNA表达水平随着五指山猪的生长年龄生长而显著增长（p〈0.05）;Myf4及Myf6基因在成年五指山猪以上8种组织中均有表达,其中在肌肉组织中相对表达量最高。本研究结果将为五指山猪肌肉生长发育及矮小性状形成机理提供参考。     

五指山猪GH、IGFBP3基因SNPs检测及与生长性状的关联分析

以五指山猪为试验材料,采用PCR-SSCP和测序相结合技术,对GH基因和IGFBP3基因进行多态性检测,并分析其与生长性状（体质量,体高,体长和胸围）的相关性。结果表明,GH基因第2外显子存在一处G→A转换,属沉默突变,该位点与生长性状关联分析显示,BB基因型的体重显著高于AA基因型和AB基因型;IGFBP3基因第2外显子存在一处G→C颠换,属沉默突变,该位点与生长性状关联分析显示,AA基因型的体高显著高于BB基因型;IGFBP3基因第4内含子存在一处碱基C缺失,该位点与生长性状关联分析显示,AA基因型体重显著高于AB基因型和BB基因型。研究将为五指山猪生长发育规律、系统选育及矮小机制等方面研究提供了遗传学依据。     

五指山猪近交家系Ⅰ系F19～F21群体微卫星位点等位基因遗传变化

探索五指山猪近交系Ⅰ系F19～F21等位基因的遗传学规律。本研究以五指山小型猪(Susscrofa)近交系Ⅰ系53个个体为研究对象,利用14对多态性微卫星位点,通过估算其基因杂合度(H)、多态信息含量(PIC)和等位基因数(N)等参数,检测近交系Ⅰ系微卫星纯合度及等位基因遗传变化。具有多态性的14个微卫星基因座上共检测到28个等位基因,其中F19、F20和F21群体检测分别到28、26和24个等位基因,平均每个位点分别仅有2.00、1.86和1.70个等位基因;3个世代总群体平均PIC为0.24,H为0.31,均低于F18代;其中有5个基因座在第19代已经达到完全纯合。Sw1377在第21代也全部纯合。但少数基因一直表现出高度杂合状态,如Sw902、S0036和Sw874。推测这些基因可能与五指山小型猪维持其某种性状相关。本研究结果为大型动物近交系培育提供了依据。     

Feasibility of using retinol-binding protein from capillary blood specimens to estimate serum retinol concentrations and the prevalence of vitamin A deficiency in low-resource settings

Vitamin A deficiency (VAD) is a significant public health problem in many countries. While cost-effective interventions are available to control VAD, reliable information is needed to the track progress of control programmes. However, assessment of VAD is uncommon because current approaches are expensive and not feasible in low-resource settings. The present study explores the utility of retinol-binding protein (RBP), analysed by enzyme-linked immunosorbent assay from capillary blood, as an alternative measure of serum retinol concentrations in populations. The study collected matched panels of venous and capillary blood from pre-school children in Chiang Mai, Thailand. Of a total sample of 195 children, there were no differences between RBP from venous blood, RBP from capillary blood or retinol from capillary blood relative to retinol from venous blood. Receiver-operating characteristic curve analysis suggested a cut-off of RBP < 0.825 micromol l(-1) had optimal screening proficiency relative to retinol <0.70 micromol l(-1). For the purpose of population assessment, all three parameters performed well in screening for VAD relative to retinol from venous blood. There were no differences in the estimates of VAD between children stratified by inflammation status. Lower RBP concentrations were found in children in the early convalescent stage of infection than in children with no infection or in the late convalescent stage. This study provided evidence of the biological comparability between retinol and RBP estimated from venous blood and capillary blood. This is a critical observation as it provides empirical evidence that RBP from capillary blood is a surrogate measure of serum retinol concentrations.     

慢病毒介导shRNA干扰颗粒体蛋白前体(GRN)促进猪前体脂肪细胞分化

为研究颗粒体蛋白前体(granulin,GRN)在脂肪细胞发育过程中的作用,本实验构建了GRN短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒干扰载体,包装并感染猪前体脂肪细胞,采用油红O染色、油红O提取比色法检测猪前体脂肪细胞分化情况,采用Real-time PCR法检测成脂关键基因mRNA的表达变化情况。结果显示,GRN慢病毒干扰载体病毒滴度在5×107TU/mL以上,病毒感染前体脂肪细胞后显著降低了GRN的表达,shRNA2干扰效率最高,达到76%,沉默GRN后能够促进猪前体脂肪细胞分化;脂肪细胞分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、固醇调节原件结合蛋白(SREBP-1c)、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(ap2)和脂蛋白酯酶(LPL)基因mRNA表达量均升高。结果表明,降低GRN基因表达促进了猪前体脂肪细胞分化,揭示GRN在猪前体脂肪细胞分化过程中可能起到抑制作用。     

Fortification of maize meal improved the nutritional status of 1-3-year-old African children

OBJECTIVE: To evaluate the effectiveness of a vitamin-fortified maize meal to improve the nutritional status of 1-3-year-old malnourished African children. DESIGN: A randomised parallel intervention study was used in which 21 experimental children and their families received maize meal fortified with vitamin A, thiamine, riboflavin and pyridoxine, while 23 control children and their families received unfortified maize meal. The maize meal was provided for 12 months to replace the maize meal habitually consumed by these households. METHODS: Sixty undernourished African children with height-for-age or weight-for-age below the 5th percentile of the National Center for Health Statistics' criteria and aged 1-3 years were randomly assigned to an experimental or control group. Baseline measurements included demographic, socio-economic and dietary data, as well as height, weight, haemoglobin, haematocrit, serum retinol and retinol-binding protein (RBP). Anthropometric, blood and serum variables were measured again after 12 months of intervention. Complete baseline measurements were available for 44 children and end data for only 36. Changes in these variables from baseline to end within and between groups were assessed for significance with paired t-tests, t-tests and analysis of variances using the SPSS program, controlling for expected weight gain in this age group over 12 months. Relationships between changes in variables were examined by calculating correlation coefficients. RESULTS: The children in the experimental group had a significantly (P < or = 0.05) higher increase in body weight than control children (4.6 kg vs. 2.0 kg) and both groups had significant (P < or = 0.05) but similar increases in height. The children in the experimental group showed non-significant increases in haemoglobin and serum retinol, while the control children had a significant (P = 0.007) decrease in RBP. The change in serum retinol showed a significant correlation with baseline retinol (P = 0.014), RBP (P = 0.007) and weight (P = 0.029), as well as with changes in haemoglobin (P = 0.029). CONCLUSION: Despite a small sample size, this study showed positive effects of a vitamin-fortified maize meal on weight gain and some variables of vitamin A status in 1-3-year-old African children. The study confirmed the relationship between vitamin A and iron status. The results suggest that fortification of maize meal would be an effective strategy to address micronutrient deficiencies in small children in South Africa.     

CAST基因型与营养水平互作对猪胴体性状的影响研究

钙蛋白酶抑制蛋白CAST (Calpastatin)对肌内蛋白降解、肌细胞生长速度以及屠宰后钙蛋白酶的活性具有重要的影响,研究CAST基因多态性的遗传效应及其与营养水平的互作影响对猪胴体品质的控制具有重要的作用。本试验使用杜洛克和大围子2个纯种猪群,杜洛克×（长白×大白）和大白×大围子2个杂种猪群,利用HinfⅠ, MspⅠ和RsaⅠ3种内切酶研究了CAST基因的RFLP及其与营养水平互作对猪胴体性状的影响。结果表明,HinfⅠ、MspⅠ和RsaⅠ3种内切酶在4个猪群均获得RFLP,酶切位点分别存在一对等位基因A与B, C与D及E与F。AA型×高营养水平互作显著降低熟肉率和滴水损失,但与中水平互作却显著提高滴水损失（P<0.05）。AB型×高营养水平互作显著降低胴体长和眼肌面积,提高肌肉的滴水损失;但AB型×中营养水平互作则显著降低屠宰率、背膘厚和熟肉率,并提高腿臀比例和瘦肉率（P<0.05）。CD型×高水平互作对所有性状的互作效应显著,CC型×中营养水平组提高滴水损失（P<0.05）。EF型×高营养水平互作能对多个性状产生达到或超过群体均数的10%的效应（P<0.05）,EE型×中营养水平互作显著增加背膘厚。     

猪NDUFS7基因的染色体定位、克隆和表达谱分析

利用辐射杂种克隆板对猪NDUFS7( NADH dehydrogenase(ubiquinone)Fe-S protein7)基因进行了染色体定位,克隆了该基因的完整CDS序列,用相关软件进行了基因结构和功能的预测,并用半定量RT-PCR技术分析了NDUFS7基因在猪的11种组织以及在33、65和90d胚胎和成年猪骨骼肌中的相对表达水平。结果表明,将NDUFS7基因定位于猪的2号染色体2q21-q24,与标记SW395紧密连锁。该基因的CDS全长648bp,编码215个氨基酸,预测编码的产物具有一个高度保守且与能量生成有关的NouB结构域和3个激酶的磷酸化位点。同时,半定量RT-PCR结果显示,NDUFS7基因在猪的11种组织中均有表达,但表达量有差异;在65和90d胚胎骨骼肌中的表达量较高,而在33d胚胎和成年猪骨骼肌中的表达量相对较低。     

鹅HMGR基因内含子5的SNP及其与鹅重要经济性状的关联分析

本文屠宰测定了116只皖西白鹅胴体性状、羽绒性状和肉质性状，克隆了鹅3－羟基－3－甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMGR）基因内含子5，采用PCR-SSCP检测其SNP，并分析了SNP与鹅重要经济性状之间的关联性。结果显示，鹅HMGR基因内含子5长704bp，与鸡的同源性44.0%；PCR-SSCP检测发现，内含子5存在一对等位基因A和B，A和B的基因频率分别为0.7716和0.2284。分析SNP基因型与鹅重要经济性状的关联性，结果表明，AA型可以显著提高鹅的胸肌重和腺胃重（P<0.05），增加千朵重（P<0.01），和降低绒系水率（P<0.05）；AB型则具有显著降低胸肌纤维直径（P<0.01）和提高胸肌45pH的作用（P<0.05）。     

Rho相关蛋白激酶抑制剂Y-27632对猪诱导多能干细胞冻存和传代效率的影响

猪作为重要的疾病模型动物,目前猪诱导多能干细胞(iPS 细胞)已有建系,但是细胞的冻存和传代的效率较低,影响后续的实验研究。Rho 相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂 Y-27632 可提高人胚胎干细胞的解冻存活率,促进其克隆形成。本实验以猪(Sus scrofa)iPS 细胞为研究对象,通过在猪 iPS 细胞冻存和解冻过程中添加Y-27632,发现其可以减少猪 iPS 细胞在冻存和解冻复苏过程中的凋亡。在细胞的传代过程中,使用 Y-27632 可以促进猪 iPS 细胞的贴壁和克隆形成。虽然高浓度 Y-27632 会对猪 iPS 克隆的形态产生一定的影响,但并未影响细胞的碱性磷酸酶(AP)活性和多能性基因 Oct4、Sox2 和 Nanog 的表达水平。最后将转座子报告质粒 PB[Act-RFP]DS 导入猪 iPS 细胞中,经流式筛选后得到的带有红色荧光的细胞,并将其注射于猪孤雌胚胎中进行发育能力检测,发现 Y-27632 的处理能减少细胞在流式筛选和胚胎注射中的凋亡,促进其在胚胎内的嵌合发育。研究结果说明,ROCK 抑制剂 Y-27632 可以提高猪 iPS 细胞冻存和传代的效率,促进其在胚胎中的嵌合。该研究有助于猪 iPS 细胞及其他多能干细胞的保存,传代和筛选等相关研究。     

环境丰富度对肉猪生产性能及胴体性状的影响

舍饲圈栏环境对猪的生长发育和健康影响很大，为了解不同环境丰富度配置与肉猪生产性能和胴体性状之间的关系，利用铁链、玩具球以及拱槽3种福利性设施，设置8种不同的环境丰富度，对达兰配套系的320头70至150日龄的育成育肥猪进行了试验研究。结果表明：环境丰富度对育成育肥猪的生产性能和胴体品质有明显影响，其中同时设置铁链、玩具球、拱槽试验组的猪只生产性能和胴体品质最好，平均出栏重、平均日增重比对照组提高了5.49 kg(p＜0.05)，10.84%(p＜0.05)，料重比比对照低13.83%(p＜0.05)，各处理组的背膘厚、屠宰率、瘦肉率、眼肌面积、胴体长度和后腿比例也均以同时设置铁链、玩具球、拱槽试验组为最好。     

猪TLR4的定位和组织表达

通过辐射杂交板的方法将猪的Tool-like Receptor 4 (TLR4)定位在SSC1q2.9-q2.13,它与SW1957紧密连锁(15cR; LOD score 15.16)。用RT－PCR表明TLR4在猪的各种组织中广泛表达如睾丸、灰质、肌肉、白质、肾脏、心脏、小肠、胸腺、淋巴结、脾、肺和肝脏。在肺中的表达量最高。这些知识有助于我们对TLR4作为候选基因的认识。