分子遗传标记在家禽育种中的应用

分子遗传标记是近年来现代遗传学发展最快的领域之一，本文就ＲＦＬＰ、ＲＡＰＤ、ＶＮＴＲ和ｍｔＤＮＡ等分子遗传标记的研究概况及其在家禽育种上的应用作一简述。     

五个畜种和一个鱼种的多位点DNA指纹,RAPD-标记的研究和线粒体DNA(mtDNA)的限制性分析

五个畜种和一个鱼种的多位点ＤＮＡ指纹，ＲＡＰＤ－标记的研究和线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）的限制性分析（博士论文摘要）陈宏导师：Ｐｒｏｆ．Ｄｒ．Ｆ．Ｌｅｉｂｅｎｇｕｔｈ利用３种分子方法，（１）多位点ＤＮＡ指纹通过地高新（ｄｉｇｏｘｉｇｉｎａｔｅ）标...     

AFLP和SSR技术简介及比较

近 1 0多年来 ,随着分子生物学技术的迅速发展 ,ＤＮＡ分子标记的研究和应用十分活跃。目前应用最普遍的ＤＮＡ分子标记还是ＡＦＬＰ、ＲＦＬＰ、ＲＡＰＤ、ＳＳＲ等标记技术。这些技术在品种鉴别、目的基因定位、遗传图谱构建、ＤＮＡ指纹分析等研究中得到广泛的应用。它们不仅推动了生物学的发展 ,而且使相关学科得到飞跃发展。因此分子标记技术有重要的使用价值和广阔的应用前景。本文主要介绍ＡＦＬＰ和ＳＳＲ标记技术。1　微卫星 (Ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ)技术1 .1　微卫星技术的生物基础一般而言 ,在生物的整个基因组中并不是每…     

RAPD技术及其在动物育种中的应用

ＲＡＰＤ技术的兴起,使ＤＮＡ指纹技术的应用走向了一个新的发展阶段。此技术已成功应用到群体遗传关系分析、跟踪选育进展,基因定位等领域。本文系统论述了ＲＡＰＤ的技术原理、特点及近年来国内的研究概况,并探讨了这一新的分子遗传标记在动物育种中的应用及其发展前景。     

DNA指纹的研究及其在畜禽遗传育种上的应用

ＤＮＡ指纹的研究及其在畜禽遗传育种上的应用刘丑生，魏绍征利用遗传标记，可以用来反映动物群体或个体的遗传特征。自５０年代以来，许多学者从血型、血液蛋白质（包括同工酶）多态型，ＤＮＡ限制性内切酶酶切片段长度多态型（ＲＦＬＰ）等方面进行了深入研究。尽管ＤＮ...     

鸡的DNA指纹应用研究

鸡的ＤＮＡ指纹应用研究王金玉，龚允陈，陈国宏（扬州大学农学院２２５００１）陈宽维（江苏省家禽研究所２２５００３）鸡的ＤＮＡ指纹技术研究始于１９８８年，Ｒｙｓｋｏｖ等人证明用Ｍ１３噬菌体作为探针与ＢｓｐＲⅠ酶切的鸡ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，可产生...     

绿色荧光蛋白基因真核表达载体的构建与表达检测

拟构建绿色荧光蛋白（ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ, ＧＦＰ）基因的真核表达载体 ｐｃＤＮＡ_３ＧＦＰ,并观察其在 ＭＤＣＫ细胞（大肾细胞系）中的表达。以Ｎｏｔ　Ⅰ切取ＧＦＰ后插入真核表达载体ｐｃＤＮＡ_3,以ＢａｍＨⅠ鉴定方向,以ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥＴＭ将ｐｃＤＮＡ３ＧＦＰ转染至培养的ＭＤＣ Ｋ,经Ｇ４１８筛选ｐｃＤＮＡ３ＧＦＰ阳性克隆,荧光显微镜下观察。结果证实成功构建了含ＧＦＰ ｃＤＮＡ的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３ＧＦＰ,并成功转染ＭＤＣＫ,在荧光显微镜下阳性克隆细胞呈绿色。 ＧＦＰ基因可在 ＭＤＣＫ细胞中成功表达,并发出绿色荧光,是一良好的报告基因和筛选标记。     

鸡DNA指纹技术的发展与现状

鸡ＤＮＡ指纹技术的发展与现状王金玉，龚允陈，陈国宏扬州大学农学院（２２５００１）陈宽维江苏省家禽研究所（２２５０００）ＤＮＡ指纹技术是在分子生物学技术基础上发展起来的。１９７５年Ｓｏｕｔｈｅｒｎ提出了ＤＮＡ转移技术，结合特定的已标记基因片断（称为探针...     

山东省禽病诊断与免疫重点实验室

山东省禽病诊断与免疫重点实验室由山东省农业科学院家禽科学研究所承担并向社会开放 ,该实验室有一批禽病理论和社会实践专家。以家禽病原学与流行病学调查、家禽主要传染病的诊断与免疫预防、无特定病原（ＳＰＦ）鸡群病原监测标准化和禽用生物制品的开发应用为研究方向 ,已取得“无特定病原（ＳＰＦ）鸡群建立与维持的研究”、“ＳＰＦ鸡新城疫油乳剂灭活苗应用技术”、“ＩＬＴＶ分离鉴定及其分子生物学诊断技术研究”、“ＳＰＦ鸡新城疫油乳剂灭活疫苗研究”、“ＮＤ -ＩＢ -ＥＤＳ三联油乳剂灭活疫苗研究”、“鸡传染性脑脊髓炎诊断与…     

分子遗传标记及其在动物育种中的应用（上）

分子遗传标记是近年来现代遗传学发展最快的领域之一。本文系统地论述了ＲＦＬＰ、ＲＡＰＤ、ＶＮＴＲ和ｍｔＤＮＡ等分子遗传标记的研究概况及其在动物育种中的应用，并针对目前的研究现状及存在的问题探讨了今后的研究趋向和发展前景。     

采用随机扩增多态性DNA技术（RAPD）在桑属植物系统学研究的应用初报

用ＲＡＰＤ技术研究了桑属９种材料基因组ＤＮＡ的多态性，获得了９种材料基因组ＤＮＡ的指纹图谱，并估算了遗传距离，绘出了系统树状图。探讨了桑属９个种的亲缘关系和进化分类。     

几种小麦族禾草及其杂交后代基因组DNA的RAPD研究

应用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术分析蒙古冰草、航道冰草及其种间杂种Ｆ、ＢＣ１代和加拿大披碱草、野大麦及其属间杂种Ｆ１代的基因组ＤＮＡ差异性。筛选出能检测咯亲本及杂交后代间遗传差宜引物；从ＤＮＡ分子水平验证出亲本加拿大坡碱草和野大麦两属间经亲本蒙古冰草、航道冰草二种间的亲缘关系远；杂种Ｆ１代的ＲＡＰＤ图谱有明显偏母本的倾向，随机扩增多态性ＤＮＡ技术可用于牧草远缘杂种鉴定及遗传育种研究。     

猪生长激素因子的研究进展

生长激素 (ｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅ ,ＧＨ)是一种由垂体前叶分泌的调节脊椎动物生长发育的重要多肽类激素。它能促进葡萄糖吸收 ,核酸和蛋白质合成 ,脂肪分解。ＧＨ的分泌是脉冲式的 ,主要受下丘脑释放因子(ＧＨＲＦ)和促生长激素抑制素 (ＳＳ)两种激素的调节。自Ｂａｉｒｄ( 1 952 )发现猪生长激素对猪生长有促进作用的4 0多年以来 ,该方面的研究工作进展很快。特别是随着ＰＣＲ技术的发展和分子生物学标记技术如限制性片段长度多态性 (ＲＦＬＰ)、ＤＮＡ指纹、小卫星ＤＮＡ、微卫星ＤＮＡ(ＭＳ)和随机扩增多态性ＤＮＡ(ＲＡＰＤ)的发…     

适于家蚕AFLP标记的酶切反应系统

ＡＦＬＰ作为一种新的分子标记技术，其成功的关键依赖于ＤＮＡ的酶解效果，本文使用ＰｓｔＩ、ＴａｑＩ两种限制性内切酶，选用不同的酶切方式与不同的反应离子的组合对家蚕ＢＣ１代基因组ＤＮＡ进行酶切、通过人工接头连接、二次扩增及ＰＡＧＥ电泳、银染检测，结果显示是两酶在２５ｍＭＴｒｉｓ－Ａｃｅｔａｔｅ（ＰＨ７．８）、１００ｍＭＫＡｃ、１０ｍＭＭＧＡｃ２、１ｍＭＤＴＴ反应系统中能得到多态性丰富、重复性好的ＤＮＡ指纹图谱。同时，表明寻求适宜的限制酶缓冲组分是十分重要的。     

以PCR为基础的分子生物学方法及其在寄生虫学方面的应用

扼要介绍了以聚合酶链反应（ＰＣＲ）为基础的随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）ＰＣＲ连接的限制性酶切片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）扩增片段长度多态性（ＡＦＬＰ）等和ＤＮＡ序列分析在寄生虫学方面的应用及其优势和不足；叙述了检测寄生虫序列变异的几种新方法。     

新城疫病毒F48E9株HN基因的克隆与酶切分析

为深入探讨新城疫病毒（ＮＤＶ）的结构与功能的关系，扩增和克隆了Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ的ＨＮ基因。首先以提取的Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ基因组ＲＮＡ为模板逆转录合成第一链ｃＤＮＡ，然后用ＨＮ基因特异性引物作ＰＣＲ扩增ＨＮｃＤＮＡ，结果得到１条分子量约１．８ｋｂ的ＤＮＡ带，与ＮＤＶＨＮ基因的大小一致。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交进一步证实其为ＨＮ特异性ｃＤＮＡ。随后采用平端连接法将其克隆到ｐＳＶ·Ｓｐｏｒｔｌ质粒中，应用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ、ＳｃａⅠ、ＭｌｕⅠ、ＡｐａⅠ、ＰｓｔⅠ、和ＳｍａⅠ对ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮｃＤＮＡ重组质粒作单酶或双酶切，结果表明，ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮ基因较ＨｉｔｃｈｎｅｒＢ１株的ＨＮ基因缺少１个ＭｌｕⅠ位点（７０５ｂｐ左右），多１个ＰｓｔⅠ位点（８０２ｂｐ左右）。     

家禽DNA指纹标记及其在遗传育种上应用的研究进展

家禽ＤＮＡ指纹标记及其在遗传育种上应用的研究进展顾志良，周勤宣（江苏省家禽科学研究所２２５００３）１９８０年，Ｗｙｍａｎ和Ｗｈｉｔｅ，发现人类基因组ＤＮＡ中含有高变区（ＨＶＲｓ），并证明了这些高变区是一系列的可变数目申状重复序列（ＶＮＴＲｓ），即小卫...     

兔FDP间接血凝抑制法的建立

兔ＦＤＰ间接血凝抑制法的建立赵立红（张家口农业专科学校兽医系，河北宣化０７５１３１）乔健（北京农业大学兽医学院）在兔病毒性出血症弥漫性血管内凝血（ＤＩＣ）发生机理研究中，为准确测定兔血清中纤维蛋白（原）降解产物（ＦＤＰ），将人ＦＤＰ间接血凝抑制法加以...     

湿热地带家禽三个重要基因的开发利用

湿热地带家禽三个重要基因的开发利用Ｄ．Ｃ．Ｊｏｈａｒｉ和Ｄ．Ｐ．Ｓｉｎｇｈ印度中央家禽研究所最近，家禽育种研究已鉴定了几个重要的基因，利用它们提高鸡在热带气候和管理条件下的生产性能。这就是裸颈基因（Ｎａ）、翻毛基因（Ｆ）和伴性矮小基因（ｄｗ）。裸颈基...     

利用RAPD技术构建四倍体苜蓿遗传连锁图谱

 利用随机扩增ＤＮＡ 多态性分子遗传标记（ＲＡＰＤ）对Ｆ₂ 群体进行分析。Ｆ₂ 群体由Ｆ_１ 群体（高产紫花苜蓿×高抗黄花苜蓿得到Ｆ_１代）自交获得。应用ＭＡＰＭＡＫＥＲ／ＥＸＰ（３．０）与ＪｉｏｎＭａｐ４．０并结合ＭａｐＤｒａｗＶ２．１软件构建四倍体苜蓿的遗传连锁图谱。从１９２个随机引物中筛选出７２个引物,对９４个Ｆ_２ 个体及Ｆ_１ 双亲ＤＮＡ 样本进行了ＲＡＰＤ 扩增,共获得５１个ＲＡＰＤ 标记,构建了四倍体苜蓿分子遗传连锁框架图,其中包含８个连锁群,标记覆盖的基因组总长度约为１２６１．５ｃＭ,标记间平均距离为２４．７３ｃＭ。本图谱为构建饱和的四倍体苜蓿分子遗传图谱提供了框架结构,为进一步开展苜蓿分子遗传方面的研究奠定了基础。