正交试验优化栀子中藏红花素提取工艺

为了优化栀子中藏红花素的提取工艺,以藏红花素的提取率为指标,采用单因素试验考查乙醇体积分数、料液比、超声时间和超声温度对栀子中藏红花素提取率的影响,正交试验优化藏红花素提取工艺。结果表明,正交试验优化的提取工艺为乙醇体积分数60%,料液比1∶50,超声时间40 min,超声温度60℃,栀子中藏红花素的提取率为64.25%。     

响应面法优化栀子中栀子苷的纯化工艺

采用正丁醇有机溶剂萃取法分离栀子中的栀子苷,考查萃取时间、萃取温度、栀子苷质量浓度、相比和pH值对栀子苷萃取率的影响。在单因素试验的基础上选取试验因素和水平,根据中心组合试验设计采用三因素三水平响应面分析方法,拟合试验因素与响应值的多元二次方程,对各个因素的显著性及交互作用进行分析,运用Design Expert 8.0.6优化试验条件。得到最佳工艺参数为萃取时间30 min,萃取温度45℃,栀子苷质量浓度3.0 mg/m L,相比为0.5∶1,pH值7.0,栀子苷萃取率为30.27%。     

分相萃取法纯化朝鲜蓟中洋蓟素的工艺研究

以朝鲜蓟提取物为原料、乙酸乙酯为萃取剂,考查萃取时间、分相时间、提取物质量浓度、相比、萃取温度、pH值等因素对萃取率的影响,并通过正交试验优化洋蓟素的最佳萃取参数。结果表明,朝鲜蓟中洋蓟素的最佳萃取参数为萃取时间30 min,分相时间80 min,提取物质量浓度10.0 g/L,相比1.25∶1,萃取温度35℃,pH值4.0,此时洋蓟素萃取率达到67.37%。     

柚籽中类柠檬苦素的初提工艺研究

以脱脂柚籽为原料,乙醇为提取剂,以乙醇体积分数、提取温度、料液比为考查因素,提取得到的类柠檬苦素含量为指标进行了单因素试验和正交试验。结果表明,料液比对柚籽中类柠檬苦素提取率影响最大因素,然后依次为提取温度和乙醇体积分数;最佳提取工艺条件为乙醇体积分数70%,提取温度70℃,料液比1∶45。     

乙醇提取北方地区早园竹中总黄酮的工艺研究

研究了不同浓度乙醇提取北方地区早园竹叶中黄酮的工艺。通过单因素试验确定了影响总黄酮得率的主要因素及其最佳水平范围。通过正交实验确定了最佳萃取条件。结果表明,使用老生竹叶,物料比为1∶15,体积分数为60%的乙醇,在80℃,时间为150 min萃取2次,可以使总黄酮得率达到2.1%。     

柚核中柠檬苦素纯化工艺的研究

以乙醇为提取溶剂,采用超声波辅助提取柚核中柠檬苦素,通过正交试验对提取工艺进行优化,并采用大孔吸附树脂纯化柠檬苦素。最佳提取条件为:料液比1∶10,超声时间30min,乙醇体积分数70%,超声提取2次。4020型大孔树脂分离纯化提取液的最佳工艺条件为:吸附流速1mL/min,体积分数70%的乙醇洗脱,解吸流速0.7mL/min,纯化后得到柠檬苦素的质量分数达83.77%。该工艺分离纯化效果好,成本低。     

啤酒花CO_2萃余物中总黄酮的提取纯化工艺研究

研究了啤酒花CO2萃余物中总黄酮的提取纯化工艺。采用单因素试验确定乙醇体积分数、提取时间、提取温度和料液比对提取效果的影响;通过正交试验,得到最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数为60%,料液比为1∶30,温度为70℃,提取时间为90 min,在该提取条件下总黄酮质量分数为62.7 mg/g;经饱和的水正丁醇溶液萃取,可得到纯度为20.3%的黄酮提取物;经聚酰胺树脂分离纯化,可得到总黄酮纯度为62.2%的提取物。     

超声微波协同萃取红豆中总黄酮的工艺研究

确定超声微波协同萃取红豆中总黄酮的最佳提取工艺,测定红豆中总黄酮的含量。研究提取时间、微波功率、提取温度、乙醇体积分数、料液比等因素对总黄酮提取率的影响。在进行单因素试验之后,通过正交试验优化超声微波协同萃取红豆总黄酮类化合物的工艺条件。结果表明,对红豆中总黄酮提取的影响程度为乙醇体积分数料液比提取时间微波功率。超声微波协同法提取总黄酮的最佳工艺条件为提取时间30 min,微波功率400 W,提取温度45℃,乙醇体积分数60%,料液比1∶25;提取3次,总黄酮提取量为1.75 mg/g。     

刺葡萄籽油萃取及成分分析研究

以刺葡萄种籽为原料,采用普通超临界和超声波强化超临界萃取技术,对发酵、未发酵不同处理的刺葡萄种籽进行脂肪酸萃取,并用气相色谱—质谱联用仪对刺葡萄种籽油的化学成分进行了分析。结果表明,刺葡萄种籽油萃取的最佳工艺为萃取压力30 MPa,萃取温度35℃,分离温度55℃,分离压力12 MPa,在此条件下,普通超临界装置萃取的刺葡萄籽油萃取率高、油脂清亮且透明度好,优于超声波强化超临界装置。GC-MS分析显示,2种不同处理的刺葡萄籽油的成分都以脂肪酸为主,其中未发酵的刺葡萄籽油不饱和脂肪酸质量分数为87%,不饱和脂肪酸以亚油酸为主,质量分数为85.67%;发酵后的刺葡萄籽油不饱和脂肪酸质量分数为83%,不饱和脂肪酸以亚油酸为主,质量分数为82%,其油脂微浊,酸价较高,油质较不发酵的刺葡萄籽油脂低。     

用大孔吸附树脂对洋蓟茎叶中绿原酸及洋蓟素分离纯化的研究

筛选大孔树脂分离纯化朝鲜蓟茎叶中绿原酸及洋蓟素的最佳工艺,为后续研究及工业化大生产提供指导。以大孔树脂对绿原酸及洋蓟素的吸附率和解吸附率为指标筛选树脂种类,以上样速度、上样液中绿原酸与洋蓟素的质量浓度为指标,考察不同条件下AB-8大孔树脂对洋蓟茎叶提取液中绿原酸及洋蓟素分离纯化;以固体物中绿原酸及洋蓟素的质量浓度为指标,确立洗脱用乙醇的浓度及洗脱方式;采用HPLC法测定绿原酸及洋蓟素的含量。试验结果表明,选择AB-8大孔树脂,最佳纯化工艺为上样液绿原酸与洋蓟素的质量浓度分别为0.62,0.42 mg/mL,上样速度为1 BV/h;最佳洗脱方式是:用3倍柱体积的水洗涤除杂,再分别用2倍柱体积10%和75%的乙醇依次洗脱,最后用1倍柱体积的纯水冲洗,收集洗脱液与水洗液。HPLC法测定绿原酸及洋蓟素的质量分数分别为5.5%,4.6%。AB-8大孔树脂对洋蓟茎叶中绿原酸及洋蓟素分离纯化的综合性能较好,适合于工业化大生产,并符合市售产品要求。     

栀子优良品种快繁体系的建立

为了保存和尽快繁殖栀子优良种质,以品系优良的10年生栀子新萌枝条为试验材料,在添加不同植物激素的MS培养基上进行了栀子组培再生体系建立的试验研究,并探讨栀子组培苗的炼苗移栽技术。结果表明：适宜栀子外植体的启动培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L;增殖培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,增值系数可达4.6;较适宜的生根培养基为1/2MS+IBA 2.0 mg/L,生根率为87%;炼苗移栽基质使用草炭和蛭石,比例为1∶1时效果最好。     

栀子(Gardenia jasminoides)GGPPS基因小亚基的克隆及表达分析

香叶基焦磷酸(geranyl pyrophosphate,GPP)是单萜的前体物质,而单萜是栀子内重要的活性成分。香叶基香叶基焦磷酸合酶(GGPPS)在萜类化合物、类胡萝卜素类化合物生物合成中处于关键位置,GGPPS主要分为香叶基香叶基焦磷酸合成酶大亚基(GGPPSlsu)和香叶基香叶基焦磷酸合成酶小亚基(GGPPSssu)。为了研究栀子GGPPS基因在栀子萜类生物合成中的作用,本研究成功从栀子品种‘林海一号’中提取RNA反转录合成cDNA,根据转录组测序拼接结果设计引物扩增得到栀子GGPPSssu的cDNA序列,分别命名为GjGGPPSssu1和GjGGPPSssu2,ORF区分别为1053 bp和915 bp。通过构建基因进化树,栀子GGPPSssu基因和其他植物的GGPPSssu基因聚为一类,属于香叶基香叶基焦磷酸合成酶小亚基基因。通过蛋白质序列比对表明GjGGPPSssu1有一个CxxxC(x为碱性氨基酸)的保守基元和一个FARM的保守基元,没有SARM保守基元,与SSUⅡ类基因相似;GjGGPPSssu2有两个CxxxC的保守基元,没有FARM保守基元和SARM保守基元,与SSUⅠ类基因相似。荧光定量PCR试验结果表明,GjGGPPSssu1在T4和T5时期有较高的表达水平,GjGGPPSssu2在栀子各生长时期的根部和果实中有较高水平的表达。推测GjGGPPSssu1基因与栀子黄色素合成相关,GjGGPPSssu2基因与单萜合成相关。本研究初步解析了栀子GGPPS基因的功能,为提高栀子药用品质提供了理论依据。     

4种茜草科植物硬枝和嫩枝水插繁殖研究

摘要：以四种茜草科园林植物大花栀子、小栀子、六月雪和玉叶金花的硬枝和嫩枝为材料进行了水插繁殖研究,结果表明：（1）六月雪易生根,生根率达96%;小栀子较易生根,生根率为76%;大花栀子和玉叶金花较难生根,生根率仅为46%和37%。（2）六月雪生根时间短而集中,小栀子生根时间较长并较集中,而大花栀子和玉叶金花生根时间长且不集中。（3）同一植物硬枝和嫩枝水插的生根率不同程度存在差异。（4）四种植物硬枝插穗的生根数量均高于嫩枝的生根数量,且多数硬枝插穗的平均根长也高于嫩枝插穗的平均根长。     

培养基中无机盐浓度及培养方式对栀子组培苗增殖生长的影响

以栀子(Gardenia jasminoides Ellis)组培苗作为试验材料,研究培养基中无机盐浓度及培养方式对栀子组培苗增殖的影响,为栀子的大规模生产和快速繁殖提供理论依据。试验结果表明：MS培养基适合栀子的增殖培养;栀子增殖培养时总氮浓度以60 mmol/L为宜;NO3^-/NH4⁺为40/20有利于栀子不定苗的增殖;反应器间歇浸没培养为最适宜的培养方式。     

栀子不同部位中栀子苷和西红花苷Ⅰ的提取工艺和含量测定

为优选栀子提取工艺,测定栀子不同部位中栀子苷和西红花苷Ⅰ含量,利用正交实验,采用超声、回流、微波3种提取方法对栀子不同部位栀子苷和西红花苷Ⅰ的提取工艺,同时建立两者的HPLC同步测定方法。结果表明,微波法的提取效果较好。果皮最佳提取工艺为提取温度为80℃,时间为25 min,料液比为1:15,乙醇浓度为95%;果仁最佳提取工艺为提取时间为30 min,料液比为1:20,温度为80℃,乙醇浓度为75%。采用Waters WATO54275-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,流速为1 mL/min,进行梯度洗脱,栀子苷和西红花苷Ⅰ检测波长分别为238、440 nm。HPLC测定结果表明,‘林海1号’栀子果皮中栀子苷、西红花苷Ⅰ最高含量分别为13.53、3.3 mg/g;果仁中栀子苷、西红花苷Ⅰ最高含量分别为44.64、7.72 mg/g。上述结果为栀子种质评价和不同部位的开发利用提供科学参考和依据。     

超声波辅助法提取金莲花中黄酮工艺研究

以超声波辅助法对大兴安岭金莲花中总黄酮的最佳提取工艺条件进行研究。以温度、料液比、乙醇体积分数、超声时间为提取影响因素,通过正交试验优化提取工艺。结果表明,各因素对总黄酮提取的影响次序为:料液比>超声时间>温度>乙醇体积分数,超声波辅助法的最佳工艺提取条件为:提取温度为50℃,料液比1:55,乙醇体积分数75%,超声时间40 min,总黄酮的提取率达4.659%。     

宁夏枸杞中蛋白质的提取与鉴定

采用盐溶法提取宁夏枸杞中蛋白质,用饱和(NH4)2 SO4溶液进行分级盐析、透析、浓缩后用SDS-PAGE分析,测定不同提取液中主要蛋白质的分子量.结果表明:用pH为6.0的PB缓冲液提取,用饱和度为80％的(NH4)2SO4盐析时,枸杞蛋白的提取效果最好;经SDS-PAGE电泳后,初步鉴定出7种主要蛋白质,其中分子量为63 096 Da、51 286 Da、33 884Da的蛋白质提取范围较大.     

超声辅助响应面法优化种植佛手中橙皮苷和柚皮苷提取工艺的研究

为了优化提取万州种植佛手中橙皮苷和柚皮苷的工艺条件,采用响应面法优化超声辅助进行研究。在超声提取时间、乙醇体积、超声提取温度、液固比单因素试验基础上,研究了超声条件下影响万州种植佛手中橙皮苷和柚皮苷含量的几个因素,采用Box-Behnken试验设计和响应面分析法考察前述4个条件对万州种植佛手中橙皮苷和新橙皮苷含量的影响,采用RP-HPLC法测定万州种植佛手中橙皮苷和柚皮苷的含量。结果表明,最佳超声辅助提取工艺为超声提取时间26 min、乙醇体积分数82%、超声提取温度62℃、佛手与乙醇的质量比1:22 (g/mL),万州种植佛手中橙皮苷和柚皮苷含量分别为0.072%±0.315%和0.082%±0.753%,与预测值相符。本研究对万州种植佛手超声辅助提取的工艺可靠性高,有效成分提取率高,适合于工业化生产推广。     

正交试验法优化生姜中姜辣素的提取工艺研究

乙醇作为提取剂,以姜辣素得率为指标,选择乙醇体积分数、微波功率、微波时间、料液比4个因素进行正交试验,得最佳工艺条件为:乙醇体积分数80%,微波时间120 s,微波功率300 W,料液比1∶14,在微波温度55℃下生姜姜辣素提取率可达1.710 8%。     

何首乌中二苯乙烯苷的超声提取工艺研究

何首乌中的二苯乙烯苷成分具有明显的抗衰老、降低胆固醇和保肝作用。利用超声波技术提取制首乌中的二苯乙烯苷,可提高二苯乙烯苷成分的提取效率。通过单因素和正交试验,探讨工艺条件对超声提取二苯乙烯苷的影响。结果表明,超声波提取二苯乙烯苷的较佳工艺条件为:制首乌粉末粒度80目、提取溶剂为体积分数90%的乙醇、料液比为(质量∶体积)1∶60、提取时间为7min。