三黄连合剂预防罗非鱼链球菌病的临床应用效果

为进一步探讨三黄连合剂对罗非鱼无乳链球菌病的预防效果,试验将健康无感染的罗非鱼900条随机分为3组,每组300条,分别为不处理对照组(不给药对照)、受试药物组(在饲料中添加三黄连合剂40mL/kg饲料,连用7d)及对照药物组(在饲料中添加三黄散0.5g/kg体重,连用7d),用药后第7d随机抽取30条罗非鱼检测各项指标,并于第8d同居感染无乳链球菌,观察7d,以感染临床症状评价结合药物保护率综合评价三黄连合剂的预防效果。结果显示,连续给药7d后,各组之间罗非鱼生长性能、血液常规和血液生化指标等均无统计学差异(p0.05),且未见明显毒副反应。依据建立的同居感染罗非鱼无乳链球菌病模型,结合临床症状评分及保护率统计,发现三黄连合剂对罗非鱼无乳链球菌感染具有较好的预防效果。本试验表明,三黄连合剂(40mL/kg),拌饵投喂罗非鱼,连用7d,安全性好,且对罗非鱼无乳链球菌病具有一定预防作用。     

不同剂量三黄连散对罗非鱼感染无乳链球菌防治效果的试验研究

试验旨在从临床症状、疗效评价、死亡率和保护率等方面探索三黄连散对罗非鱼感染无乳链球菌预防效果的量效关系并据此进行剂量筛选。将210尾罗非鱼随机分为7组（即1.67 g/kg剂量组、3.30 g/kg剂量组、6.60 g/kg剂量组、13.20 g/kg剂量组、26.40 g/kg剂量组、无乳链球菌感染对照组和空白对照组）,每组30尾鱼。各剂量试验组饲喂含不同剂量三黄连散的饲料,无乳链球菌感染对照组和空白对照组投喂基础饲料,并于第8天,各剂量试验组和感染组腹腔注射浓度为5.40×107CFU/mL的无乳链球菌菌液,空白对照组腹腔注射灭菌生理盐水。结果表明：攻毒后12 h,感染对照组和剂量组都出现了明显的临床症状并伴随急性死亡。感染对照组的临床症状始终保持较高分值,不同剂量药物组评分均低于感染对照组,13.20 g/kg剂量组和26.40 g/kg剂量组评分呈现出平稳且下降的趋势。无乳链球菌感染对照组的罗非鱼死亡率为73.33%,1.67 g/kg剂量组、3.30 g/kg剂量组和6.60 g/kg剂量组死亡率与感染对照组比较差异不显著（P>0.05）;而13.20 g/kg和26....     

鱼腥草散预防罗非鱼链球菌病临床效果的初步研究

为探究鱼腥草散对罗非鱼链球菌病的预防作用。本试验选取罗非鱼540尾,随机分为6组,每组90尾。其中第1组为空白对照组,投喂基础饲料,第2组、第3组、第4组、第5组和第6组为试验组,分别在日粮中添加5 g/kg、10 g/kg、20 g/kg、30 g/kg、40 g/kg鱼腥草散进行投喂,连续喂养35天后,进行生长指标、血液生理生化指标、免疫指标和抗氧化指标的测定;第36天进行攻毒试验,从第1组中随机挑选60尾罗非鱼分为空白对照组30尾和感染对照组30尾,分别从第2组、第3组、第4组、第5组和第6组随机挑取30尾罗非鱼做为药物1组、药物2组、药物3组、药物4组和药物5组,除空白对照组腹腔注射0.2 mL生理盐水外,感染对照组和5个药物组罗非鱼腹腔注射菌液0.2 mL浓度为1.51×10⁸CFU/mL的无乳链球菌菌液,连续观察7天。结果：与空白对照组相比,饲料中添加鱼腥草散能够显著(P<0.05)提高罗非鱼增重率、特定生长率、肝脏指数及血清中酸性磷酸酶、溶菌酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性;与感染对照组相比,药物5组的攻毒保护率最高。本研究结果发现...     

三黄连散对靶动物(罗非鱼)的安全性试验

研究旨在评价三黄连散对罗非鱼的安全性,选择150尾健康的罗非鱼,随机分为5组,分别为对照组和1、3、5、10倍推荐剂量组,每组3个重复,每个重复10尾鱼.试验期14 d.三黄连散拌料连续给药7 d,分别于第8 d和第15 d检查各组器官指数、血液生理指标、血液生化指标和肝脾组织病理学的变化.结果显示,各组的器官指数均无...     

三黄连散对罗非鱼人工感染无乳链球菌的保护作用

试验选用高剂量(26.40 g/kg)、中剂量(13.20 g/kg)和低剂量(6.60 g/kg)的三黄连散饲喂人工感染无乳链球菌的罗非鱼,观察并记录其临床症状和死亡率,旨在明确三黄连散对罗非鱼人工感染无乳链球菌的预防作用。结果显示,高剂量和中剂量的三黄连散保护率分别为77.77%和55.55%,且与市售三黄散相比,效果较稳定。研究表明,三黄连散对罗非鱼无乳链球菌的预防作用较好。     

三黄连散的亚慢性毒性试验研究

探讨大鼠长期口服三黄连散的亚慢性毒性作用。将80只大鼠随机分为空白对照组、三黄连散低(2.5 g/kg·BW)、中(5.0 g/kg·BW)和高剂量组(10.0 g/kg·BW),每组20只,雌雄各半,采用混饲给药的方式连续给药30 d,每日观察临床表现,记录体重和饲料消耗量,停药后继续观察7 d。分别于给药后30 d和停药后7 d进行血液常规指标、血液生化指标和脏器解剖学、病理学检查。结果显示,给药期间和停药后,各试验组大鼠未出现中毒和死亡情况,临床症状、解剖学检查等均无异常变化,脏器指数、组织病理学检查结果均无异常;血液常规指标、血液生化指标结果表明该药物无毒副作用,仅见高剂量组大鼠的体重和饲料消耗量显著低于空白对照组(P0.05)。结果表明,三黄连散给大鼠连续饲喂30 d未见明显毒性反应。     

添加山豆根多糖对吉富罗非鱼生长性能及生理生化指标的影响

在前期研究基础上,选取最佳药物剂量2 g/kg的山豆根多糖(Sophora subprosrate polysaccharide,SSP)添加到罗非鱼饲料中,验证该剂量山豆根多糖对罗非鱼的生长性能及生理生化指标的作用效果。将罗非鱼分为山豆根多糖组(在饲料中添加2 g/kg的山豆根多糖)、黄芪多糖对照组(在饲料中添加20 mg/kg的黄芪多糖)和空白对照组(投喂罗非鱼基础饲料)。每组3个生物学重复,每个重复100尾罗非鱼,连续养殖30 d后,对各试验组罗非鱼的生长性能、血液生理生化指标及血清和肝脏的抗氧化指标进行测定。结果显示,山豆根多糖组罗非鱼的增重率和特定生长率极显著高于空白对照组(P0.01);山豆根多糖组罗非鱼血液中淋巴细胞比率(LYMPH)极显著高于空白对照组(P0.01),且和黄芪多糖对照组相比差异不显著(P0.05);山豆根多糖组罗非鱼血清中白蛋白(ALB)和碱性磷酸酶(ALP)水平显著低于其他试验组(P0.05),且其谷丙转氨酶(ALT)水平与空白对照组相比差异不显著(P0.05);与空白对照组相比,山豆根多糖组极显著提高了罗非鱼血清和肝脏中过氧化物酶(POD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)的活性(P0.01)。试验说明,2 g/kg的山豆根多糖添加到饲料中投喂30 d,能有效促进罗非鱼的生长,并通过增加淋巴细胞比例、提高过氧化物酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性来增强机体免疫功能。     

三黄连合剂对罗非鱼人工感染无乳链球菌的预防作用

为了研究三黄连合剂对罗非鱼无乳链球菌病的预防作用,通过给罗非鱼投喂添加含中药复方提取物"三黄连合剂"的饲料,观察中药复方提取物对人工感染无乳链球菌罗非鱼保护作用,并以氟苯尼考作为抗生素药物对照。结果表明,给药组罗非鱼攻毒后死亡率明显小于感染不给药对照组。30 m L/kg、60 m L/kg、120 m L/kg"三黄连合剂"添加组、0.05 g/kg氟苯尼考添加组的罗非鱼死亡率分别为低于对照组的25(p0.05)、25(p0.05)、33.33(p0.01)和45.83(p0.01)个百分点;保护率分别为26.08%、34.78%、47.82%和26.08%。其中以120m L/kg添加剂量保护效果较好,30 m L/kg"三黄连合剂"保护效果与0.05 g/kg氟苯尼考相当。本试验结果说明,三黄连合剂对罗非鱼无乳链球菌病具有较好的预防效果。     

三黄连散对罗非鱼无乳链球菌的体外抑菌效果观察

为开发三黄连散于水产养殖防治细菌性疾病的应用,通过常规检查和PCR技术对试验菌株进行罗非鱼无乳链球菌鉴定后,检测三黄连散对该菌的体外抑菌效果。结果试验菌株为罗非鱼无乳链球菌,血清型为Ia型、II型、dIts型。三黄连散对该菌的最小抑菌浓度(MIC)为15.625mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)为31.25mg/mL;1/2×MIC和1×MIC能抑制对数生长期的菌体分裂,2×MIC能抑制细菌进入对数生长期。本研究表明:三黄连散对罗非鱼无乳链球菌有良好的体外抑菌效果,可为其临床应用提供依据。     

EM对鲫鱼生长和血液生理指标的影响

将健康的当年鲫鱼400尾随机分为4组,每组两个重复,每个重复50尾,各组分别饲喂添加0%EM、2%EM、4%EM、6%EM的饵料,试验结束后,测定各组鱼的增重率和血液生理指标,分析在饲料中添加不同浓度的EM后对鲫鱼生长发育和血液生理指标的影响。试验结果显示,添加6%EM试验组鲫鱼的增重和血液生理指标效果最佳。     

贞苓增免散对罗非鱼的安全性评价

试验旨在确定贞苓增免散在临床推荐剂量下对罗非鱼的安全性，研究罗非鱼使用剂量安全范围并综合评价药物的疗效，为临床合理用药提供重要依据与指导。试验分别设置空白组（基础饲粮）、1倍剂量组（含贞苓增免散0.4%）、3倍剂量组（含贞苓增免散1.2%）、5倍剂量组（含贞苓增免散2.0%）和10倍剂量组（含贞苓增免散4.0%）共5个组。连续饲喂30 d，分别在第15和30天检测罗非鱼的临床体征、血液生理生化指标、器官指数，并进行组织病理学观察。结果表明，各剂量组罗非鱼活动、摄食、体色、排泄等均良好，与空白组罗非鱼没有明显区别。0~15 d，增重率和特定生长率在1倍剂量组均最高，且均显著或极显著高于空白组（P<0.05；P<0.01），但其随着贞苓增免散剂量增加而减少；15~30 d贞苓增免散各剂量组增重率均极显著高于空白组（P<0.01）。各剂量组罗非鱼的血液生理生化指标中部分指标与空白组相比有显著差异，但均在正常范围内。0~15 d时各剂量组和15~30 d时1倍剂量组的罗非鱼脾脏指数均显著高于空白组（P<0.05）。显微镜下观察各组罗非鱼肝脏和脾脏组织切片，均未发现药物引起的细胞毒性变化。以上结果说明贞苓增免散在10倍推荐剂量及以下连续饲喂罗非鱼30 d具有较好的安全性，将其作为饲料添加剂能提高罗非鱼生长性能、增强免疫力，对推动罗非鱼养殖快速高效发展具有重要意义。     

鱼类无乳链球菌病的研究进展

无乳链球菌是常见的人兽共患病原菌,常导致新生儿肺炎、脑膜炎、败血症及奶牛乳腺炎。近年来,在水生动物体内也频繁分离到该菌,尤其是自2007年以来,该菌每年都在中国广东、海南、福建、广西等罗非鱼主要养殖区暴发流行,严重威胁着罗非鱼养殖业的健康发展。作者综述了当前国内外对鱼类无乳链球菌病的病原学、流行病学、症状、病理变化、毒力因子（荚膜多糖、CAMP因子、表面免疫原性蛋白、α蛋白、C5a肽酶）和防控等方面的研究进展,以期为中国鱼类无乳链球菌病的防控提供参考。     

Research Progress on Fish Streptococcus agalactiae Disease

Streptococcus agalactiae is common zoonotic bacteria,which cause neonatal pneumonia,meningitis,septicemia and mastitis in dairy cows.In recent years,it was also be isolated from aquatic animals frequently.Especially since 2007,diseases caused by the bacteria outbreak in Guangdong,Hainan,Fujian,Guangxi and other tilapia aquaculture areas and had a serious threat to the healthy development of tilapia aquaculture in china.In this paper, research progresses on fish Streptococcus agalactiae disease were reviewed.The etiology,epidemiology,symptoms,pathological changes,virulence factors (capsular polysaccharide,CAMP factor,Sip,protein alpha,C5a peptidase) and prevention and control were included in the review,which would provide references for the fish Streptococcus agalactiae disease prevention and control.     

青海地区奶牛无乳链球菌的分离与鉴定

无乳链球菌是导致奶牛乳房炎的常见病原菌之一,为了掌握青海地区无乳链球菌的流行情况及常用药物的敏感性,从而为本地区更好的预防与治疗奶牛乳房炎提供保障。本试验在青海地区16个奶牛场共采集258份乳房炎乳样,经革兰氏染色与绵羊鲜血琼脂培养基培养纯化,获得疑似链球菌137株;随后经玻片法血浆凝固酶试验、CAMP试验、生化试验与动物致病性试验对无乳链球菌进行鉴定,结果显示,137株链球菌中含有无乳链球菌42株,分离率为30.7%;经K-B纸片扩散法对无乳链球菌耐药性检测结果显示,该地区无乳链球菌主要对头孢类高度敏感,对氧氟沙星、磺胺类、氨苄青霉素与阿米卡星中度敏感。     

热应激条件下藿朴蒲苓散对育肥羔羊生长性能、消化性能和血清生化指标的影响

针对夏季绵羊遭受严重热应激现状,研究日粮中添加中草药组方(藿朴蒲苓散)对夏季育肥羔羊生长性能、消化性能、瘤胃发酵参数及血清生化指标的影响。选择200只体重相近、年龄一致的健康育肥公羔羊,随机分为4组,分别饲喂0%(对照组)、0.5%、1.0%和1.5%藿朴蒲苓散,试验期30 d,试验期间舍内温湿指数平均达79.11。试验末检测育肥羔羊生长性能、养分表观消化率、瘤胃发酵参数和血清生化指标。结果表明：1)饲喂0.5%藿朴蒲苓散的羊日增重显著高于对照组(P < 0.01);日饮水量和日采食量在不同组间未表现出显著性差异(P>0.05)。从生理指标分析,饲喂中草药的羊直肠温度和呼吸频率与对照组比较均未表现出显著性差异(P>0.05)。2)0.5%组的干物质(DM)、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、粗蛋白、钙和磷等养分表观消化率均显著高于对照组(P < 0.05),DM消化率较对照组提高7.20%(P < 0.01),而1.0%和1.5%组的消化率较对照组未表现出显著性差异(P>0.05)。3) 从血清生化指标上,3个给药组的生长激素均显著高于对照组(P < 0.05),0.5%组含量最高,较对照组提高16.90%;且0.5%组的甲状腺素含量显著高于其他组(P < 0.05)。4)从瘤胃发酵参数分析,3个给药组总挥发性脂肪酸含量、乙酸和丁酸含量均显著高于对照组(P < 0.05),分别是对照组的1.19~1.30倍、1.18~1.24倍和1.28~1.43倍。综上,本试验条件下,日粮中添加藿朴蒲苓散有助于缓解育肥羔羊的热应激,添加量以0.5%效果更佳。     

Streptococcus agalactiae and Streptococcus difficile 16S-23S intergenic rDNA: genetic homogeneity and species-specific PCR

Streptococcus difficile is a non-hemolytic Gram-positive bacterial coccus that causes septicemia and meningoencephalitis in farmed tilapia (Oreochromis sp.) and rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). Recent studies have demonstrated S. difficile to be a group B, type Ib streptococcus with a whole cell protein electrophoretic profile indistinguishable from S. agalactiae and a biochemical profile similar to that observed for other group B, type Ib streptococci isolated from fish and frogs. The aim of this study was to expand on these findings by comparative nucleic acid sequence analysis of the 16S-23S ribosomal DNA (rDNA) intergenic spacers of S. difficile and S. agalactiae. The 97.7% sequence homology identified in these studies supports the taxonomic relationship of these two organisms. The sequence data generated were also used to construct a pair of species-specific PCR primers for use in molecular detection and identification schemes.     

罗非鱼无乳链球菌EsxA基因克隆与原核表达

Ⅶ型分泌系统(T7SS)是近年来发现的分泌系统,分泌两种胞外蛋白,EsxA基因编码的ESAT6蛋白和EsxB基因编码的CFP-10蛋白。分泌蛋白具有良好的免疫原性,促进细菌从巨噬细胞吞噬体逃逸、影响巨噬细胞凋亡及裂解细胞等生物学功能,与致病性密切相关。以罗非鱼源无乳链球菌为模板,克隆到294bp的EsxA基因,将目的序列克隆到pMD18-T载体,经测序,目的序列与无乳链球菌EsxA基因同源率在99%以上。EsxA基因克隆到pET32a载体中,重组载体在28℃、0.5mmol/L IPTG诱导条件下表达量最大,可溶性表达。将纯化的ESAT6蛋白免疫Balb/c鼠,成功制备ESAT6蛋白鼠多克隆抗体,经Western blot,ESAT6蛋白具有良好的反应原性。研究结果为进一步进行无乳链球菌ESAT6蛋白的免疫学功能研究奠定了基础。     

硫酸头孢喹肟子宫注入剂对泌乳期奶牛的安全性研究

为研究硫酸头孢喹肟子宫注入剂对泌乳期奶牛的安全性,试验选用24头泌乳期的健康中国荷斯坦奶牛,随机分为4组(每组6头),其中3个受试药物组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组)分别给奶牛子宫内注入不同剂量的硫酸头孢喹肟子宫注入剂,1个空白对照组(Ⅳ组),给奶牛子宫内注入一定剂量的灭菌生理盐水。给药2次,间隔72h。在给药第0天、末次给药日及停药第7天,观察记录试验奶牛的各项指标,包括体温(直肠温度)、脉搏、呼吸频率、血液生理和生化指标、精神状态等临床表现及日产奶量和乳汁体细胞数(SCC)等,并对其进行考查。结果表明,泌乳期奶牛按推荐方法使用受试药物硫酸头孢喹肟子宫注入剂较安全,临床可用于治疗泌乳期奶牛的子宫内膜炎。     

Safety Study on Cefquinome Sulfate Intrauterine Infusion for Lactating Cows

The aim of this experiment was to study the safety of cefquinome sulfate intrauterine infusion for lactating cows.24 healthy lactating Chinese Holstein cows were randomly divided into four groups(6 cows in each group).Cows in groups Ⅰ, Ⅱ and Ⅲ were respectively injected different doses of cefquinome sulfate intrauterine infusion in uterus, and cows in the blank control group(group Ⅳ) were injected the dose of sterilized saline water.The cows were injected with the tested drug in uterus for twice and the interval was 72 h.The indicators including body temperature(rectal temperature), pulse rate, respiratory rate, blood physiological and biochemical indexes, mental state, daily milk yield and somatic cell count(SCC) in milk were respectively observed and measured on the day of first administration, the day of final administration and the 7th day after final administration.The results showed that injecting lactating cows cefquinome sulfate intrauterine infusion to lactating cows as recommended dosage was safe.The drug could be used to treat endometritis of lactating cows in clinical practice.     

羧甲基葡聚糖注射剂药效学研究

试验旨在研究羧甲基葡聚糖（CMG）注射剂药效,从而为临床动物疾病防制提供试验依据。试验选取小鼠作为试验动物,进行急性毒性试验及体内抗金黄色葡萄球菌、无乳链球菌及大肠杆菌感染试验。另外,采用MTT方法测定了CMG对奶牛淋巴细胞转化率影响,并对CMG注射剂进行了奶牛临床初步应用试验。结果表明,小白鼠对CMG最大耐受量在240 mg/只以上,且在4 mg/只浓度下对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌及大肠杆菌感染的保护率分别为60%、62.5%、87.5%;CMG能明显提高奶牛淋巴细胞转化率,临床应用试验组比空白对照组隐性乳腺炎发病率下降26.8%。本试验结果表明,CMG注射液可作为潜在新型兽用免疫增强剂在动物临床应用。