响应面法优化徐香猕猴桃开放式增殖培养基

为了降低徐香猕猴桃工厂化生产的成本,提高经济效益,探究徐香猕猴桃开放式培养的最适抑菌剂浓度及培养基配方。以现有的无菌材料,采用单因素试验确定增殖培养基因素的添加范围,并利用响应面法进行优化分析。结果表明,徐香猕猴桃开放式组培增殖培养的最优培养基是：MS+3g/L琼脂+20g/L蔗糖+0.1g/L代森锰锌+0.2mg/LNAA+1.5mg/L6-BA,此时增殖系数为6.539,成活率为93.33%。为徐香猕猴桃开放式培养增殖培养工厂化生产提供参考。     

‘白雪公主’草莓茎尖组培快繁体系研究

以草莓品种‘白雪公主’茎尖为外植体,以MS为基础培养基,对培养前暗处理、不定芽诱导、增殖培养、生根培养等组培快繁环节进行研究,并建立了其组织培养快速繁殖体系。结果表明：暗处理3 d能够促进茎尖萌发,提高萌发速度;MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖25 g/L为适宜的诱导培养基,诱导率达82 %以上;MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖25 g/L为适宜的增殖培养基,增殖系数为8.00;1/2 MS+蔗糖20 g/L作为生根培养基为适宜的生根培养基,培养5 d后生根率达100 %,平均生根数为10条,平均根长为5.00 cm。     

绶草的组织培养与快速繁殖研究

以野生花卉植物绶草的肉质根、幼叶、花序轴为外植体,建立组织培养快繁体系.试验结果显示:绶草组织培养较理想的外植体材料为花序轴,诱导率达到83%:最适诱导培养基为MS+3.0%蔗糖+0.75%琼脂+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L;最适增殖培养基为MS+3.0%蔗糖+0.75%琼脂+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+椰汁100g/L;最适生根培养基为1/2 MS+2.0%蔗糖+0.5%琼脂+IBA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+活性炭0.5 g/L.     

兰州百合鳞片组织培养研究

以兰州百合的内层鳞片为外殖体,以MS为基本培养基并添加不同配比生长调节剂,进行组织培养研究。结果表明,以MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基对初代培养形成不定芽最佳,低温有助于外殖体分化;不定芽增殖最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;1/2 MS+0.2 mg/L NAA+蔗糖60 g/L适宜苗的生根培养,生根率达100%,且结鳞茎率达73.4%。     

单花橐吾愈伤组织诱导及分化培养条件研究

分别以单花橐吾无菌苗的子叶、真叶、叶柄、根为外植体,进行组织培养的初步研究.结果表明:单花橐吾愈伤组织诱导的最佳外植体是叶柄,最佳诱导培养基配方是MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖35g/L(})琼脂8.6g/L,出愈率可达99.5％,诱导效果较好;在MS+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8.6g/L中进行增殖培养可诱导出大量不定芽,成苗率可高达98.7％,每块愈伤组织平均可产生7.8个不定芽,且不定芽生长健壮;在1/2MS+NAA 0.5mg/L+ IBA 0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8.6g/L中进行生根培养,生根率可达99.7％,根白色粗壮,有细绒毛,苗生长健壮.     

红皮红肉火龙果组培快繁技术的研究

为建立火龙果的组培快繁体系,以红皮红肉火龙果(Hylocereu polyrhizus) 的幼嫩茎段为外植体进行组培快繁研究,结果表明,最适的外植体消毒的方法为75% 酒精消毒20 s,2%次氯酸钠5min, 0.1% 升汞10 min,污染率为11.11% ,成活率达73.33%。MS+6-BA 3.0 mg/L + NAA 0.2mg/L为诱导不定芽效果最好的培养基,诱导率83.33%。添加6-BA6.0 mg/L 和NAA0.1 mg/L有利于芽的增殖和分化,增殖系数可达5.9。研究发现最佳的壮苗培养基为MS+6-BA2.0 mg/L +NAA0.1 mg/,虽然繁殖系数不高,但其不定芽生长粗壮。最适宜的生根培养基为：MS+IBA 0.6 mg/L+NAA0.2 mg/L。,生根率达到 100% ,平均生根数6.83条每株。     

狐狸尾兰原球茎快速繁殖问题研究

[目的]为狐狸尾兰的组培快繁提供依据。[方法]以狐狸尾兰种子作外植体,研究了不同诱导培养基、增殖培养基、生根培养基在狐狸尾兰组培快繁中的效果。[结果]诱导类原球茎体以MS附加6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L的激素配比较好,分化时间短。增殖培养基为MS+6-BA0-3.0mg/L+NAA0-0.2mg/L,以MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L效果最好,平均增殖系数为3-8,把生长健壮并具有2-3片真叶的单个小芽,转接到生根培养基1/2MS+NAA1.0mg/L上,经60d培养,即可获得生长健壮的完整植株。狐狸尾兰试管苗的移栽基质以粗椰糠∶河沙=1∶1的比例混合较好,湿度80%-90%,移栽成活率达90%以上。[结论]狐狸尾兰种子在温度(25±2)℃,光照强度1500-2000lx,光照时间12h/d的条件下,最适诱导培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L;最适增殖培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L,生根培养基为1/2MS+NAA1.0mg/L。     

无刺1号刺梨快繁体系的建立

通过对无刺1号刺梨在初代培养、继代培养、生根培养过程中不同植物生长调节剂的筛选,建立高效茎段快繁体系。以无刺1号当年生茎段为材料,利用不同植物生长调节剂对茎段进行腋芽诱导、增殖及生根,并进行炼苗移栽。结果表明：无刺1号茎段组培的最佳时期是4-5月,最佳消毒方案是30 s 75%酒精+10 min 0.1% 升汞;适合无刺1号初代培养的培养基为MS+ 2.5 mg?L-1 6-BA+ 0.1 mg?L-1 NAA,萌芽率达90.63%;增殖培养基为MS+ 1.5 mg?L-1 6-BA+0.1 mg?L-1 NAA,增殖系数为3.94;在1/2MS+ 0.3 mg?L-1 IBA+ 20 g?L-1 蔗糖+ 0.5 g?L-1 活性炭的培养基上,无刺1号的生根率为87.30%,驯化移栽成活率达87.74%。     

草地早熟禾午夜2号植株再生研究

以草地早熟禾(Poa pratensis L.)品种午夜2号成熟种子为外植体,进行植株再生研究,建立高频再生体系,为草地早熟禾进行原生质体培养和细胞融合奠定基础。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D(1mg/L)+6-BA(0.1 mg/L)+3%蔗糖+0.7%琼脂,其诱导率为52.3%;最佳继代培养基为MS+2,4-D(1mg/L)+6-BA(0.3mg/L)+3%蔗糖+0.7%琼脂;最佳分化培养基为MS+NAA(0.5 mg/L)+6-BA(1 mg/L)+3%蔗糖+0.6%琼脂、分化率为57.5%;生根培养基同分化培养基,供体材料经100d的培养后获得再生植株。     

披碱草×野大麦杂种F_1幼穗培养再生体系的建立

以披碱草×野大麦杂种F_1幼穗为外植体,诱导出胚性愈伤组织,建立了植株再生体系,对影响愈伤组织诱导、分化、生根的基本培养基、激素种类及质量浓度等进行筛选。结果表明:愈伤组织诱导以MS为基本培养基+3mg/L 2,4-D较好;外植体在MS+3mg/L 2,4-D+30g/L蔗糖+7g/L琼脂的诱导培养基上经过20d培养,小穗愈伤组织诱导率达28.3%;愈伤组织的分化培养基为MS+1mg/L 6-BA+1mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂,愈伤组织分化率达78%;生根培养基以1/2MS+0.5mg/L IBA+0.5mg/L NAA+蔗糖+7g/L琼脂为最佳,生根率可达86.7%,移栽后成活率可达100%。     

紫叶李组织培养及快繁体系的建立

试验以紫叶李春季萌生苗嫩枝为外植体,在腋芽诱导的基础上,建立“以芽尖诱导丛生芽”的组培快繁体系。腋芽诱导培养基为MS+6BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L与MS+6BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L;丛生芽增殖培养基为MS+BA1.0mg/L+IBA0.3mg/L;壮苗培养基为MS+6BA0.4mg/L+IBA0.1mg/L+GA30.2mg/L。最佳生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L+蔗糖20g/L。     

扁茎黄芪离体快繁及多倍体诱导

以扁茎黄芪的干燥成熟种子为外植体,研究其离体快繁技术,并在无菌繁殖条件下探索了秋水仙碱溶液不同浓度和时间处理对扁茎黄芪的诱变效应。快繁研究结果显示,扁茎黄芪的发芽培养基为MS,继代增殖最适培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L,平均增殖系数达到4.5,平均苗高达3.5cm;生根最适培养基为1/2MS+NAA0.05mg/L,生根数为4～6条,生根率达到100%。采用浸泡法将扁茎黄芪的茎尖在0.1%,0.3%和0.5%不同秋水仙碱溶液浓度下分别处理1,2,3和4d,并对诱导处理后获得的再生植株进行染色体鉴定,得出以0.3%秋水仙碱溶液浸泡3d为诱导多倍体的最佳处理组合,诱导率达40%。     

蒙古冰草根尖高效组培再生体系的建立

以蒙古冰草根尖为外植体研究不同激素配比对蒙古冰草愈伤组织诱导及分化的影响,结果表明:蒙古冰草根尖最适愈伤诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L+蔗糖20.0g/L+琼脂7.0g/L,诱导率为73.33%;最适分化培养基为MS+KT 3.0mg/L+NAA 1.0mg/L+蔗糖20.0g/L+琼脂7.0g/L,分化率为70.00%;最适生根培养基为1/2 MS+NAA 0.1mg/L+蔗糖20.0g/L+琼脂7.0g/L,生根率为86.68%。首次建立了以蒙古冰草根尖为外植体的再生体系,再生过程仅70~80d,为蒙古冰草高效遗传转化体系的构建提供了参考。     

应用正交试验法优化‘新农1号’狗牙根再生体系

以‘新农1号’狗牙根(Cynodon dactylon(L.)Pers.)成熟颖果为材料,通过正交法探讨激素、外源添加物等对狗牙根愈伤诱导、继代及分化的影响,优化‘新农1号’狗牙根再生体系。结果表明:各因子对‘新农1号’狗牙根愈伤诱导的影响程度为2,4-D6-BA脯氨酸;优化诱导培养基为添加2,4-D(2.0 mg·L~(-1))+6-BA(0.01mg·L~(-1))+脯氨酸(200mg·L~(-1))的MS培养基,此时愈伤诱导率达69.5%;对继代增殖而言,各因子对胚性愈伤诱导率、愈伤增殖率、褐化率的影响程度不同,对胚性愈伤诱导率的影响程度为2,4-DABA6-BA,对愈伤增殖率的影响程度为6-BAABA2,4-D,对褐化率的影响程度为2,4-D6-BAABA。综合3个指标结果认为,‘新农1号’狗牙根愈伤继代的优化培养基为2,4-D(2.0mg·L~(-1))+6-BA(0.20 mg·L~(-1))+ABA(2.0 mg·L~(-1))的MS培养基,其胚性愈伤率和愈伤增殖率分别可达71.67%和61.67%,且褐化率较低;对分化而言,优化的分化培养基为MS+6-BA(1.0mg·L~(-1)),小植株形成强度可达49.44%。     

紫花苜蓿愈伤组织诱导及植株再生的研究

以中牧1号紫花苜蓿的胚轴、叶片、子叶和根为外植体,研究了不同浓度细胞分裂素对胚性愈伤组织诱导的影响,以及不同分化培养基、蔗糖浓度对胚状体分化的影响。结果表明:不同外植体间的愈伤组织诱导率差异较大,以胚轴的愈伤诱导效果最好,愈伤组织诱导率高达92.2%;改良SH+2,4-D2.0 mg/L+BA 0.5 mg/L为最佳胚性愈伤组织诱导培养基;MSO1培养基适于胚状体的分化,蔗糖浓度为25~30 g/L时胚状体诱导率最大可达30.4%;MSO培养基是最佳的成苗培养基。     

早开堇菜组织培养及植株再生体系的建立

以野生早开堇菜为材料,研究了不同外植体类型(子叶节、叶片、叶柄)和不同激素配比对其不定芽诱导、愈伤组织诱导和分化的影响,成功建立了早开堇菜组织培养植株再生体系。结果表明,1) 诱导子叶节和叶柄不定芽诱导的最适培养基为 MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,叶片不适合作为直接诱导不定芽的外植体。2) 3种外植体均能诱导愈伤组织,子叶节愈伤组织诱导的时间最短,其次为叶柄,叶片最晚。子叶节和叶柄愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D,诱导率分别为98.3%和96.7%;叶片愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+0.05 mg/L NAA,诱导率可达88.3%。3) 最适愈伤组织分化培养基为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,分化率为100%。4)不定芽增殖的最佳培养基为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.075 mg/L NAA,增殖率为4.68。 5)再生苗移植到添加1.0 mg/L 6-BA的1/2 MS培养基上,生根率92.3%。6)组培苗移栽到珍珠岩∶河沙∶腐殖质(1∶2∶2)的混合基质时,100%成活,且植株长势好。     

中华结缕草组织培养与植株再生

以中华结缕草成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织的发生进行植株再生。结果表明,中华结缕草成熟胚在MS基本培养基附加6~7 mg/L 2,4-D和0.05 mg/L 6-BA的出愈能力很强,但初生愈伤组织呈无定型棉絮状,不能再生成株。采用不同的糖类和固化剂以及一定比例的生长素与细胞分裂素的方法,对初生愈伤组织进行继代培养,诱导出致密颗粒状的、具有高度再生能力的胚性愈伤组织,此类胚性愈伤组织在最佳分化培养基MS 1.0mg/L NAA 1.0 mg/L KT 3.00 mg/L 6-BA上有较高再生频率,生根培养基采用1/2 MS。