鹅细小病毒的分子生物学研究进展

鹅细小病毒(GPV)病是危害养鹅业的主要传染病之一。文章根据国内外对鹅细小病毒的分类地位、分子生物学特性、基因组的结构特点、非结构蛋白与结构蛋白的功能以及分子生物学诊断与防治等方面的研究作一综述,以期为鹅细小病毒及小鹅瘟的防控提供参考。     

鹅细小病毒分子生物学研究进展

本文根据国内外鹅细小病毒的研究结果，对国小病毒在分类学地位，基因组结构，基因组的转录和调节，基因编码蛋白，与番鸭细小病毒的关系等方面进行综述，为鹅细小病毒的进一步研究提供参考。     

鹅细小病毒感染雏鹅的主要组织相容性复合体变异性研究

为了探究MHC基因的多态性与抗病性之间的相互关联作用。采用GPVYZ感染雏鹅,经Triton X-100分级分离MHC,将Sephadex G-200凝胶柱在Bio Gel P-100凝胶柱色谱工作站上串联,分步聚集纯化鹅肝脏MHC,SDS-PAGE分析鉴定。结果显示,初级分离的MHC主带区为30~90 ku、35 ku、20 ku,纯化的鹅肝脏MHC的特征蛋白带是30 ku,33 ku,40 ku,42 ku低分子量蛋白,与MHC类分子重链/α和轻链/β一致,提示重链与轻链折叠形成多态性MHC类分子,可作为致病研究的候选标记基因。YZ0明显缺失84 ku、61 ku蛋白主带,YZ组明显缺失45 ku蛋白峰p2和42 ku蛋白峰p1特征带,新增加34 ku峰p2和38 ku蛋白峰p1带;提示GPV感染与鹅肝脏MHC基因表达蛋白发生相互作用,45 ku、34 ku MHC是GPV的敏感蛋白,42 ku、38 ku蛋白带也与GPV的感染密切相关,MHC重链基因是GPV的易感基因。     

鹅细小病毒非结构蛋白和结构蛋白的二级结构及B细胞抗原表位预测

利用DNAStar软件包中的Editseq将GPV H1株非结构蛋白和结构蛋白核苷酸序列翻译成氨基酸序列,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,分别预测结构蛋白和非结构蛋白的二级结构及B细胞抗原表位。结果表明,GPVH1株非结构蛋白和结构蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,其中非结构蛋白的NS2和结构蛋白的VP3含有较多的潜在的B细胞优势抗原表位。     

7株鹅细小病毒的克隆序列分析与分子特性

参照GenBank中收录的鹅细小病毒(GPV)B株基因序列设计并合成了扩增GPV分离株的3对引物,利用PCR技术扩增7株小鹅瘟病毒的非结构蛋白基因和结构蛋白基因.然后将其克隆到pMD18-T载体上,筛选重组质粒并进行了序列测定及分析,测序结果表明,GPV分离株非结构蛋白基因由1 884个核苷酸组成,编码627个氨基酸;结构蛋白由2 199个核苷酸组成,编码732个氨基酸.拼接非结构蛋白和结构蛋白的全序列,不同毒株的同源性分别为94.3%~99.2%和92.6%~98.5%.表明目前国内的鹅细小病毒的同源性比较高,但是强弱毒株也存在一定的差别.     

鹅细小病毒非结构蛋白和结构蛋白B细胞线性抗原表位的鉴定

鹅细小病毒是小鹅瘟的病原体,其基因组含有2个主要开放阅读框（ORF）,分别编码非结构蛋白（NS）和结构蛋白（VP）。为了对这2种蛋白进行抗原表位作图,设计了34个覆盖非结构蛋白NS和结构蛋白VP的50-60个氨基酸残基的重叠短肽,并进行了融合表达。用攻毒10周龄鹅血清对这34个融合蛋白进行蛋白质印迹分析,结果鉴定出NS蛋白线性抗原表位位于C末端的453-627氨基酸区域;VP蛋白线性抗原表位位于35—198、423—491、531—595、616—669和678—732氨基酸区域。     

鹅ATP5E基因cDNA克隆及生物信息学分析

线粒体ATP酶合成体ε亚基(ATP synthase,H+transporting,mitochondrial F1 complex,epsilon,ATP5E)是ATP合成酶催化中心的最小亚基,在能量代谢过程中具有重要作用。本研究利用RT-PCR和RACE技术获得鹅ATP5E序列,并结合生物信息学方法对鹅ATP5E的序列进行深入分析。结果表明:克隆获得鹅ATP5E基因序列全长为347 bp,包括156 bp的编码区序列,编码51个氨基酸。同源性分析发现,鹅ATP5E核苷酸序列与推测氨基酸序列与原鸡的同源性最高,分别达到87.74%和89.58%,而与其他物种之间的一致性差异稍大。氨基酸序列分析发现该基因编码蛋白理论分子量为水溶性蛋白,相对分子量为5.79 ku,理论等电点为10.01,无信号肽序列和跨膜区,预测含有4个磷酸化位点,二级结构以α螺旋为主,预测ATP5E蛋白主要在能量代谢和脂肪酸代谢过程中有着关键作用。以上研究为进一步探讨ATP5E基因在鹅肝脂肪变性过程中的功能研究奠定了信息基础。     

鹅细小病毒感染雏鹅血液的蛋白/酶活性及同工酶变异性研究

为了解鹅细小病毒(goose parvovirus,GPV)侵染的病理学致病机理,探究蛋白/酶的分子变异特征,本研究对GPV感染雏鹅血液中的蛋白质、保护酶、蛋白酶活性及其同工酶结构和功能等进行了生化—分子生物学分析.结果显示,GPV感染雏鹅的血液中(血浆和血细胞)蛋白酶活性和蛋白质含量、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)及酯酶(Est)活性分别是对照组的1.46和1.63、1.51和1.49、1.50和1.14、1.36和1.73、1.30和1.53倍.GPV感染雏鹅的血浆中,SOD同工酶增加了2条谱带(134和239);Est同工酶增加2条快区主带,减少了2条慢区谱带;酶蛋白减少1条慢区谱带(304);蛋白质新增加4条主带(131、86、43、33 ku).而血细胞新出现2条POD同工酶谱带(93和203),分别增加了1条(160)中区SOD同工酶谱带、1个快区Est同工酶谱带、2个慢区酶蛋白谱(223和330)和4个蛋白主带(144、104、58、53 ku).提示GPV感染应激与寄主基因表达的蛋白质、保护酶、蛋白酶及同工酶相互网络协作会引起酶的谱型、活性等生化特征变异,直接或间接调控代谢途径与病理生化性能,增强机体对入侵GPV的防御应激性能.因此,蛋白质、保护酶、蛋白酶及同工酶是GPV感染的应激靶标,可作为雏鹅易感GPV致病机制研究的有效标记.     

肉用生长鹅的营养需要研究

鹅的营养需要研究甚少，已有研究主要集中在能量、蛋白质及部分氨基酸如Ｍｅｔ、Ｌｙｓ和钙磷等矿物质，而维生素、微量元素需要几乎没有报道。１、能量与蛋白质需要１．１国内的有关研究：多是对补料配方中能量、蛋白的研究苏秀霞等（１９９７）对肉鹅日粮能量、蛋白质、...     

玉米蛋白多肽对豁眼鹅屠宰性能及脏器系数的影响

以昌图豁眼鹅为研究对象,在基础日粮中添加不同剂量玉米蛋白多肽,通过检测豁眼鹅的屠宰性能及脏器系数,为玉米蛋白多肽在畜禽饲料中的应用奠定理论基础.选择1日龄昌图豁眼鹅240只,公母各半,随机分为4组,对照组饲喂基础日粮,其他组分别在每千克基础日粮中添加100、300、500 mg的玉米蛋白多肽,并分别于30日龄和60日龄进行宰杀,检测屠宰性能及脏器系数.结果表明,屠宰性能方面,玉米蛋白多肽的添加可以增加豁眼鹅的半净膛率、全净膛率,且随着玉米蛋白多肽添加剂量的增加而增加,尤以中剂量组增加显著;脏器系数方面,玉米蛋白多肽的添加可以降低肝脏指数和胸腺指数;但玉米蛋白多肽对其他屠宰性能指标(活体重、胴体重)及脾脏指数和法氏囊指数的影响不明显.     

利用重组杆状病毒表达口蹄疫病毒基因研究进展

杆状病毒表达系统是一种新型、高表达的真核表达系统,广泛应用在新疫苗、诊断试剂和新型蛋白药物开发研究方面。不少研究人员报道了利用重组杆状病毒表达口蹄疫病毒基因生产结构蛋白和非结构蛋白,期望表达的蛋白质具有与真实病毒蛋白相似的生物学活性,能够应用于候选疫苗或诊断检测抗原。作者对近几年利用重组杆状病毒表达口蹄疫结构蛋白基因和非结构蛋白基因的研究进展进行了综述,并提出相关问题和困难供商讨。     

太湖鹅血清转铁蛋白类型的测定

<正> 引言 自Smithies[1]创立淀粉凝胶电泳法分离血清蛋白质之后,国外许多学者用此法对鸡血清蛋白和卵蛋白进行了广泛的研究[2,3],可是对鹅的蛋白质多态性却研究甚少[4],国内此方面的研究十分鲜见。我国是一个拥有丰富种质资源的国家,为了大力发展养鹅业和充分了解,合理利用太湖鹅品种资源,我们运用淀粉凝胶电泳法,对太湖鹅血清转铁蛋白类型进行了初步测定。 材料与方法 随机选取江苏省镇江市农科所太湖鹅育种群后裔72羽,用断颈采血法采用血样,分离血清后置-20℃冰箱中备测。     

PrP蛋白与Shadoo蛋白研究进展

朊蛋白(PrP蛋白)在传染性海绵状脑病中具有重要作用,但其生物学功能至今没有明确。Shadoo蛋白是一种与朊蛋白在N端结构上极为相似的新蛋白,SPRN是Shadoo蛋白的结构基因。由于Shadoo蛋白与PrP蛋白具有相同的生物学性质,且它们在脑组织中重叠表达,因此也被认为是研究朊蛋白的关键因素。文章主要探讨PrP蛋白与Shadoo蛋白在基因结构、蛋白功能、朊病毒感染方面的关系。     

瘟病毒非结构蛋白结构与功能的研究进展

瘟病毒非结构蛋白结构和功能的研究与探寻瘟病毒病的控制方法密切相关。论文对瘟病毒非结构蛋白Npro、P7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A、NS5B等的结构特点,以及非结构蛋白在瘟病毒基因组复制、前体蛋白质加工和病毒粒子组装以及对细胞和宿主致病性等方面的作用进行了全面综述,并进一步分析了非结构蛋白在瘟病毒感染和疾病防控中的可能作用,可为瘟病毒新型疫苗和基因治疗等方面的研究提供参考。     

溆浦鹅莲花鹅豁莲鹅的蛋品质研究

溆浦鹅莲花鹅豁莲鹅的蛋品质研究林树茂，周先标，王立新（江西农业大学畜牧兽医学院南昌３３００４５）到目前为止，有关鹅蛋品质的研究还不多。随着养鹅业的不断发展，开展这方面的研究是必要的。因为蛋的品质好坏与其营养价值、孵化性能、雏鹅质量以及经济效益有密切关...     

太湖鹅与皖西白鹅胸肌IGF-I和MSTN的表达及其与屠宰性状相关性分析

本研究旨在探讨IGF-I、MSTN对鹅骨骼肌生长的影响。以太湖鹅和皖西白鹅为研究素材,采用多重荧光竞争性PCR和酶联免疫方法,测定鹅70日龄胸肌中IGF-I、MSTN的mRNA和蛋白表达情况,并与屠宰性能做相关性分析。结果证实,70日龄时太湖鹅体重、胸肌重极显著小于皖西白鹅,但是胸肌率没有差异,并且品种间在体重和胸肌重上存在性别差异;胸肌IGF-I和MSTN的mRNA、蛋白表达均无品种差异,并且在品种间也不存在性别差异;同一品种的公母鹅相比较,太湖鹅公鹅胸肌IGF-I mRNA表达显著高于母鹅;除了胸肌IGF-I的含量与MSTN的mRNA表达和蛋白含量呈显著正相关,胸肌IGF-I、MSTN的mRNA表达和蛋白含量相互之间均无显著相关性,鹅胸肌IGF-I mRNA表达量和胸肌率、胸肌重、体重呈显著负相关,皖西白鹅胸肌中MSTN的表达与体重呈强的负相关。结果提示,70日龄时鹅胸肌生长正负调节基因IGF-I与MSTN的表达无品种特异性,二者表达水平处于一个动态平衡之中,特别参与了70日龄皖西白鹅的生长调控。     

A型流感病毒NS1蛋白研究进展

随着对A型流感病毒研究的逐渐深入，人们已经从对A型流感病毒结构蛋白的研究转移到对非结构蛋白即NS1蛋白的研究上来，目前人们已对不同亚型NS1蛋白进行了更为详细的分类，同时对NS1蛋白功能也有了更深入的认识，如抑制宿主细胞蛋白合成、诱导细胞凋亡，以及拮抗干扰素的作用等。而且，在鉴别诊断自然感染流感病毒动物与人工免疫流感疫苗动物方面有着重要的应用价值。     

鹅细小病毒NS1基因的克隆及原核表达

本研究根据GenBank发表的GPVB株全基因核苷酸序列，设计了1对用以扩增GPV主要非结构蛋白NS1基因的引物。通过PCR技术，扩增出NS1完整基因片段1．9kb。将PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行序列测定及分析，结果表明：GPV H1株NS1基因全长1884bp，编码627个氨基酸，与国外已发表的B株核苷酸序列同源性为98．15％。同时将该目的基因正向插入到GST融合蛋白原核表达载体PGEX-6P-1的BamH1多克隆位点，构建了GPV NS1的原核表达载体，成功的表达了约97KD的NS1融合蛋白。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组结构及检测技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒是引起母猪繁殖障碍性疾病的主要病原体之一,本文对猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因组、编码结构蛋白、非结构蛋白、血清学诊断方法及分子生物学检测技术方面的研究进展予以综述,以期为进一步研究奠定基础.     

JEV分子生物学与新型疫苗研究进展

流行性乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV)是一种严惩危害人畜健康的虫媒病毒。本文对JEV的基因组结构、结构蛋白、非结构蛋白及其功能、重组活疫苗和核酸疫苗的研究现状以及与常规疫苗相比所具有的优缺点等方面进行了较为详尽的综述，并且提出JEV复制的确切机制及其蛋白尤其是非结构蛋白的结构与功能尚需深入研究，以期为坦步改良JE新型疫苗打下基础。