方正智绘Mirage GIS在资源调查上的二次开发

论述了方正智绘Mirage GIS在森林资源调查中的二次开发,详细介绍了方正智绘MirageGIS进行二次开发的对象模型,方法,并在Visual Basic开发环境下进行具体实例的开发应用。     

牛IFN-γ基因的原核表达及其产物卵黄抗体的制备

γ-干扰素(IFN-γ)主要是由活化的T细胞和NK细胞产生,具有广谱抗病毒、抑制细胞增殖和免疫调节等多种生物学活性的细胞因子,它对动物机体的免疫应答、疾病的发生发展具有十分重要的作用.     

免疫单扩散法检测牛初乳IgG含量方法改良及牛初乳样品的检测

采用改良后的琼脂免疫单扩散法检测本地荷斯坦奶牛产后7d的初乳样品中IgG含量。结果表明，母牛产犊后7d内。乳汁中IgG含量变化很大，变动范围为118．59～0．86mg／mL。每次挤乳IgG含量下降都很快，特别是前三次挤乳，每次IgG浓度下降率近50％；到第8次，已经降到10mg／mL以下。所以生产乳制品应以前7次挤出的初乳为原料最佳，若笼统地以3d、5d或7d内初乳为原料，产品中IgG含量不仅低，而且每批次差异很大。     

牛IgG轻链的分离纯化及其多克隆抗血清的制备

实验应用凝胶过滤和盐析等方法直接从牛初乳中分离纯化IgG,并应用化学方法断裂回收IgG轻链。分离纯化获得分子量约27.66 ku的IgG轻链蛋白溶液,蛋白质含量为0.105 mg.L-1,浓缩后免疫家兔,获得抗轻链抗血清,效价>11∶6,免疫双扩散和免疫电泳均为特异性条带,表明得到了纯化的IgG轻链及其特异性抗血清。     

面向不确定数据的农产品追溯方法

针对现有追溯模型无法对可追溯单元的混合过程进行定量表示的缺陷,将不确定数据引入到追溯系统中,搭建了不确定数据追溯模型,提出了一个新的面向不确定数据追溯的查询方法,利用不确定数据的基本表示和查询方法,解决了多源追溯问题.基于模型,实现了追溯模型中的简单查询、节点评价和单节点异常推断功能.并且给出了多节点异常的求解方法.     

IFN-γ真核质粒对口蹄疫病毒生长激素环多肽免疫小鼠的佐剂效应

随着合成抗原和重组抗原的日渐增多,发展合适的佐剂以确保疫苗的最大活性及对接种者的保护作用成为科研工作者的重要任务.目前,细胞因子作为疫苗佐剂已成为免疫佐剂研究的热点和新方向.     

牛IFN-α基因高效表达及纯化的研究

基于对RNA二级结构的预测和密码子偏性计算,通过计算机辅助软件进行牛IFN-α基因优化,经人工合成优化后的基因与pWL表达载体连接后诱导表达,并对表达条件进行优化。SDS-PAGE分析表明,其产物分子量约为17ku,最优表达条件下蛋白表达量占菌体总蛋白的33％,表达产物以包涵体形式存在。经过包涵体溶解、初步复性后利用CM Sepharose Fast Flow离子交换层析柱作为蛋白质复性系统,采用梯度法进行牛α-干扰素包涵体蛋白质的纯化复性。结果表明,梯度离子交换层析法能有效地复性牛α-干扰素包涵体,复性后的重组牛α-干扰素的纯度达95％,通过离子交换层析柱纯化和复性后,重组牛α-干扰素在MDBK/VSV细胞系上的抗病毒活性为5．56×10^6 u／mg。     

鹅细小病毒VP1与VP3非重叠序列的克隆与原核表达

根据鹅细小病毒GPVH1株基因组核苷酸序列设计了一对引物，对其结构蛋白VP1与VP3非重叠核苷酸序列进行PCR扩增，并克隆到表达性载体pGEX-6p-1，经酶切鉴定筛选出阳性克隆，并转化到大肠杆菌BL21(ED3)plysS进行原核表达，并用SDS—PAGE鉴定，结果表明融合蛋白在表达性细菌BL21中重获得了高效表达。     

猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段克隆序列分析及原核表达

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白可诱导中和抗体，是主要保护性抗原，N端抗原位点B和C在猪呼吸道冠状病毒(PRCV)中缺失。体外扩增TGEVS基因B、C抗原位点357bp片段(TS)。核苷酸序列与氨基酸同源性分析表明该片段较为保守。将TS克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中，转化大肠杆菌中。经IPTG诱导后，SDS—PAGE分析目的蛋白与谷胱苷肽硫转移酶(GST，大小约为26ku)融合后大小约为40ku，目的蛋白分子量约为13．2ku，优化表达条件后表达量达37．9％。     

一株Asia 1型口蹄疫病毒的全基因组序列测定及比较分析

参考GenBank上已发表的口蹄疫病毒（FMDV）全长基因组序列,设计了覆盖基因组全长的数对引物,通过RT-PCR方法对1株Asia1型（简称As01）FMDV进行分段克隆及序列测定,将测序结果利用软件进行拼接。结果表明,该毒株的FMDV基因组[不合poly（C）]全长8180nt,其中编码区为6987nt,5’和3’非编码区（UTR）分别为1078nt和95nt,3＇UTR之后为20nt的poly（A）尾巴。将As01株与其他FMDV参考毒株利用分子生物学软件进行多序列比对分析表明,As01株与Asia 1／Jiangsu／China／2005、Asia 1／Isr 1／3／63、ZB／CHA／58等Asia 1型FMDV遗传进化关系较为密切,而与O型和A型FMDV遗传关系较远。