利用氨基酸分析仪对酱油中皮革水解蛋白标志物羟脯氨酸的鉴定

[目的]建立一种利用氨基酸分析仪分析鉴定酱油中皮革水解蛋白标志物羟脯氨酸的方法.[方法]选用4-羟基-α-吡咯甲酸为参考物质,利用氨基酸自动分析仪法和紫外分光光度计法对酱油中L-羟脯氨酸的含量进行测定,比较这2种检测方法测定羟脯氨酸的优劣点.[结果]紫外分光光度法在羟脯氨酸的质量浓度为1～6 mg/L与吸光度之间线性关系良好(R2=0.9980),RSD为0.91％,分别添加0.5、2.0、6.0 mg/L羟脯氨酸标准溶液的加标回收率为90.0％～93.8％.氨基酸分析仪法在羟脯氨酸质量浓度为0.5～30.0 mg/L与峰面积之间线性关系良好(R2=0.9993),RSD为0.75％,分别添加0.5、10.0、20.0 mg/L羟脯氨酸标准溶液的加标回收率为96.8％～99.7％.[结论]氨基酸分析仪法自动化程度好,重现性和准确度较好,适用于酱油中是否添加动物皮革水解蛋白的鉴定和检测,为食品安全监管提供可靠的技术支持.     

“皮革奶”检测方法研究进展

在乳及乳制品中添加皮革水解蛋白,对乳品的生产和消费产生很大负面影响.对乳制品中添加皮革水解蛋白的各种不同检测分析方法进行了系统分析,以期为今后食品安全与检测提供参考.     

紫外分光光度法测定恩诺沙星纳米乳含量方法的建立

建立紫外分光光度法测定恩诺沙星纳米乳药物含量的方法.恩诺沙星溶液在2.0～7.5μg/mL检测浓度范围内线性关系良好,标准曲线方程为Y=0.1058X+0.0074(r=0.9997),最低检测限浓度为0.025 μg/mL;精密度试验的RSD为1.02％;平均回收率为99.67(±1.70)％,RSD为1.71％;吸光度值在36 h内无显著变化;重复性试验的RSD为0.75％.利用建立的方法,测得恩诺沙星纳米乳中恩诺沙星的含量为115.50 g/L.结果表明,该方法的精密度、回收率、稳定性和重复性均符合要求,可作为恩诺沙星纳米乳中间产品生产过程中的质量控制方法.     

Taqman三重实时PCR快速检测原料乳中致泻性大肠埃希氏菌

建立可对原料乳中致泻性大肠埃希氏菌(包括肠致病性大肠埃希氏菌、肠侵袭性大肠埃希氏菌和肠产毒性大肠埃希氏菌)同时进行快速检测的Taqman三重实时PCR方法。以致病菌中常见的eae、ipaH和lt基因为目的片段,选择3种特异性引物和Taqman探针进行三重实时PCR扩增,研究反应的特异性、检测限和重复性,并用所建立的方法对38份原料乳进行检测。结果表明,扩增曲线形态良好,对原料乳中其他常见致病菌无交叉反应,对含致病菌为1 cfu.mL-1的乳样经2 h增菌处理后检测结果呈阳性,对原料乳样重复性检测的CV值均小于5%。完成全部检测过程只需大约6 h。该方法快速准确,可应用于原料乳中致泻性大肠埃希氏菌的快速检测和污染调查。     

胶体金免疫层析技术在检测乳制品中三聚氰胺的应用

【目的】基于竞争抑制免疫层析原理,建立一种快速检测乳制品中三聚氰胺的方法。【方法】在胶体金免疫层析(GICA)技术的基础上,以胶体金为标记物,建立乳制品中三聚氰胺(MA)快速检测方法、研发GICA检测试纸;验证该方法的灵敏度、重复性和特异性。【结果】所研发的GICA试纸测定乳制品中MA的检出限为40～160μg/kg,重现性好;选用11种干扰物对GICA试剂进行特异性实验,仅发现尿素、缩二脲对GICA试纸检测液态奶时存在干扰,其他9种无干扰;使用GICA、HPLC、GC-MS同时检测阴性或添加MA质量分数2.00 mg/kg的阳性乳样品,检测结果一致。【结论】GICA试纸适用于乳制品中MA的快速检测。     

离体筛选茄子抗羟脯氨酸突变体的初步研究

利用体细胞无性系变异筛选茄子的抗羟脯氨酸突变体,通过建立一套茄子离体培养技术,用浓度为8mmol·L-1的羟脯氨酸(L-Hyp)作为筛选压力进行离体筛选,获得了茄子抗羟脯氨酸的愈伤组织,并再生培养成抗性植株.经耐冷性生理生化指标测定,抗性愈伤组织的脯氨酸含量与可溶性糖含量显著地高于对照,而丙二醛含量和电导百分率却显著低于对照,从而具有更好的耐冷性.再生植株的幼苗叶片脯氨酸含量显著高于对照,而电导百分率却显著低于对照,表现出更强的耐冷性.     

生鲜乳中动物水解蛋白L-羟脯氨酸氨基酸分析仪检测法与紫外分光光度法检测法的对比分析

本文应用氨基酸自动分析仪和紫外分光光度计检测生鲜乳中L-羟脯氨酸含量,分析了两种方法的适用性。结果显示,用氨基酸分析仪检测生鲜乳中的羟脯氨酸浓度在0.5～2μg/mL范围内,线性相关系数为0.9999;用紫外分光光度计检测生鲜乳中的羟脯氨酸浓度在0.5～2μg/mL范围内,线性相关系数为0.9992。考虑到分析检测过程中试剂要求和仪器设备需要,分光光度计更适合基层大量检测和实验室仪器配置不高的情况下使用,氨基酸分析仪适合精密和研究检测使用。     

乳制品中乳铁蛋白的测定

采用高效液相色谱法建立了乳制品中乳铁蛋白测定的分析方法。试样中的乳铁蛋白经磷酸盐缓冲液提取,提取液经肝素亲和柱净化后,采用反相高效液相色谱柱分离,以二极管阵列检测器于280 nm处检测,采用外标法定量。结果表明:乳铁蛋白在10.0~1 000.0 ug/mL范围内线性良好,添加回收率为75%~110%,相对标准偏差(RSD)小于20%。该方法具有灵敏度高、准确度高、重现性好的特点,适合检测机构或乳品企业日常样品中乳铁蛋白的检测。     

电感耦合等离子体质谱法测定乳制品中铅·砷·镉·铬

[目的]测定乳制品中铅、砷、镉、铬的含量.[方法]将乳制品样品进行微波消解,并建立检测乳制品中4种污染物元素铅、砷、镉、铬含量的方法.[结果]4种元素在各自线性范围内线性系数R ＞0.999,加标回收率在95％ ～ 101％,重复性试验的相对标准偏差RSD≤5.0％.[结论]该方法高效、灵敏、可靠,适合大批量样品中铅、砷、镉、铬的同时检测.     

石墨消解—电感耦合等离子体质谱法快速测定猪粪中的重金属元素

通过建立石墨消解—电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法测定了猪粪中铜、锌、铁、锰、铝等重金属元素。采用盐酸和硝酸的体积比1∶6，加入消解液6 mL，消解60 min，消解温度设定为120℃，对猪粪样品进行石墨消解后，消解液经稀释后用电感耦合等离子体质谱仪测定，在线内标法定量。结果表明：测定样品中5种元素的线性良好，低、中、高3个浓度的加标回收率范围为79.5%～105.0%，相对标准偏差小于10%，检出限和定量限均符合标准；大批量样品的实际检测结果与传统湿法消解的结果相似，重复性和再现性均符合要求。因此，该检测方法具有简单、快速、灵敏度高、定量准确等优点，可用于猪粪中铜、锌、铁、锰、铝等元素的定量检测。     

1种快速检测乳及乳制品中皮革水解蛋白的方法

在乳及乳制品中添加皮革水解蛋白对乳及乳制品的生产和消费产生很大负面影响,引起社会各方关注,为保证乳及乳制品的质量安全,急需快速、简便的民用检测乳及乳制品中是否含有皮革水解蛋白。本研究建立了乳及乳制品中皮革水解蛋白检测方法,该方法中样品无需进行前处理,2 mL乳及乳制品中加入2 mL硫酸,100℃水浴6.5 min进行显色反应。结果表明,该方法对乳及乳制品中皮革水解蛋白最低检测限为0.25 mg/mL,满足简便、快速的定性分析要求。     

中华人民共和国农业行业标准

乳与乳制品中蛋白质的测定 双缩脲比色法 编者按: <乳与乳制品中蛋白质的测定双缩脲比色法>经专家审定通过,农业部审查批准,由农业部于2008年10月20日发布为中华人民共和国农业行业标准,并自发布之日起实施.本刊全文刊登如下,以飨广大读者.     

产后奶牛血、尿中羟脯氨酸、3-甲基组氨酸和3-MEHIS浓度的研究

用短程序分析法测定了 16头产后中国 -荷斯坦奶牛外周血浆和尿中羟脯氨酸 (HYPRO)和 3-甲基组氨酸 (3- MEHIS)的浓度 ,用以找出胶原蛋白和肌浆球蛋白的代谢与奶牛子宫复旧的关系。试验结果表明 ,产后 6 0～ 90 d奶牛 HYPRO和 3- MEHIS的平均浓度分别为 13.4 7±2 .38和 18.35± 2 .77nmol· m L-1(血中 ) ;138.93± 2 2 .99和 37.0 9± 3.90 nmol· m L-1(尿中 )。而产后第一天血、尿中 HYPRO的浓度分别为 2 8.4 6和 2 84 .30 nmol· m L-1;3- MEHIS的浓度分别为 30 .86和 6 5 .4 8nmol· m L-1。随产后时间延长 ,浓度逐渐下降 ,至产后 5 0 d时 (血中 3-MEHIS为 35 d) ,血、尿中两种氨基酸的浓度均降至正常水平 ,此时 HYPRO的浓度分别为 10 .92nmol· m L-1(血 )和 10 9.18nmol· m L-1(尿 ) ;而 3- MEHIS分别为 17.2 1nmol(血 )和 33.5 1nmol· m L-1(尿 )。血、尿中这两种氨基酸的浓度和复旧子宫角的直径有良好的相关性 ,相关系数分别为 r=0 .81和 r=0 .79     

2株猪源乳酸杆菌的抗逆性和生长特性分析

为分析猪源嗜淀粉乳杆菌L-102(Lactobacillus amylovoms)和约氏乳杆菌L-76(Lactobacillus johnso-nii)的抗逆性和生长特性,为乳酸菌进一步的体外研究提供理论依据.分别对L-102、L-76乳酸杆菌的耐酸碱、耐胆盐、耐胰蛋白酶、黏附性、抑菌性、产酸能力、生长能力及对小鼠致病性进行了测定和分析.结果 表明:乳酸杆菌L-102和L-76对pH 2～11的酸碱环境具有抵抗能力,可耐受生长介质中含0.1％～0.2％的胆盐和1％的胰蛋白酶;对IPEC-J2细胞有一定的黏附作用;能抑制大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的生长;L-102和L-76乳酸杆菌的产酸在pH 4.1～4.3;培养4h后进入生长对数期;经50℃和60℃高温作用5～15 min,其活菌数可达到107 CFU/mL;通过腹腔注射和灌胃小鼠发现,小鼠无死亡.表明嗜淀粉乳杆菌L-102和约氏乳杆菌L-76具有潜在的益生菌特性,有望发展成为用于养猪行业的饲用益生乳酸菌.     

QuEChERS法测定葡萄酒中乙烯菌核利方法研究

建立了QuEChERS测定葡萄酒中乙烯菌核利的方法.样品经乙腈提取,丙基乙二胺(Primary Secondary Amine,PSA)净化,冷冻离心分离,氮气吹干,最后采用气相色谱-串联质谱检测.结果表明:乙烯菌核利浓度在25～250 μg·L-1时与峰面积有良好的线性关系(R2 ＞0.9900),定量限(10 S/N)为1.3 μg·L-1;当添加量在25、50、250 μg· L-1时乙烯菌核利的平均回收率为87％～ 102％,相对标准偏差(Relative standard deviation,RSD)为3.1％～7.3％.因此,该方法定性定量结果准确,适合葡萄酒中乙烯菌核利残留的快速检测.     

乳及乳制品加工和检测中高新技术的应用进展

该文就中国乳及乳制品加工与检测的现状,结合国内外高新技术的发展情况,对高压微射流技术、现代生物技术、现代计算机技术等高新技术在乳及乳制品加工和检测中的应用进展作一综述.     

高效液相色谱法测定婴幼儿奶粉中三聚氰胺检出限的确定

通过已知结果的婴幼儿奶粉样品,按照GB/T22388-2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法中的液相色谱法对其进行分析测量,通过分析12份样品计算液相色谱法测定婴幼儿奶粉中三聚氰胺的方法检出限.结果表明,该方法的检出限为0.6 mg/kg.     

英国奶业发展现状及与中国的合作展望

英国是世界第十一大、在欧盟是仅次于德国和法国的第三大乳制品生产国.英国奶牛养殖以家庭牧场为主,2001—2018年,随着奶牛单产的不断提高,虽然存栏不断下降,但英国牛奶产量总体呈上升趋势.奶牛场所产生鲜乳绝大部分牛奶(99.0％)卖给加工商,其中私营乳企占64.9％,合作社占35.1％,被加工成液体奶、奶酪、奶粉、黄油、炼乳、奶油等.英国人均乳制品消费折合生鲜乳为210 kg/(人·a),其中除液体乳外,奶酪的消费量最大.英国乳制品贸易总体及对欧盟国家呈逆差,逆差额总体呈减小趋势,对非欧盟国家呈顺差,顺差额逐年增大.中国从英国进口的乳制品量不是太大,占总进口的比例最高的年份也不到1％,进口的乳制品中,以鲜奶、奶酪、婴幼儿配方乳粉为主.未来中国与英国之间应加强奶农办加工的合作交流,加强双方企业间的合作,开展中英两国奶业政策交流与对话.     

生乳中L-羟脯氨酸含量测定的不确定度评定

按照CNAS-CL10:2018《检测和校准实验室能力认可准则在化学检测领域的应用说明》要求,当不确定度与检测结果的有效性应用有关、客户指令中有要求、不确定度影响对规范限度的符合性时,检测结果应包括不确定度,因此实验室应对检测结果不确定度评定。文章对生乳中L-羟脯氨酸含量的测定方法进行不确定度的评定。     

鼠李糖乳杆菌发酵豆渣、黄浆水产L-乳酸工艺优化

为了提高发酵基质中LGG的活菌数及L-乳酸产率,以豆渣和黄浆水为培养基质,选用生长条件粗放、仅产L-乳酸的鼠李糖乳杆菌为发酵菌株,添加促生因子以提高L-乳酸产率.通过单因素试验设计,以L-乳酸含量为特征指标,筛选能够促进鼠李糖乳杆菌生长、提高L-乳酸含量的促生因子及豆渣与黄浆水的最佳比例.采用响应面设计优化鼠李糖乳杆菌发酵豆渣和黄浆水产L-乳酸工艺条件.结果表明,在豆渣与黄浆水以1∶4.80为基础培养基,添加0.06％烟酸、1％精氨酸和蛋氨酸(m精氨酸∶m蛋氨酸=2.21∶1)、6％葡萄糖和低聚果糖(m葡萄糖∶m低聚果糖=1.57∶1),接种量3％,pH6.2,37℃,发酵72 h的条件下L-乳酸含量为2.35％.