磺胺对甲氧嘧啶全抗原的制备研究

采用戊二醛法，将半抗原磺胺对甲氧嘧啶（SMD）与载体牛血清白蛋白（BSA）偶联，制得碘胺对甲氧嘧啶全抗原SMD－BSA。其紫外扫描光谱和红外光谱表明偶联成功。通过改变半抗原SMD和偶联剂戊二醛的用量，制得多种结合比的全抗原，这为进一步制备抗SMD抗体提供了良好的免疫原。     

构建磺胺二甲氧嘧啶完全抗原的研究

采用重氮偶合法将磺胺二甲氧嘧啶(SDM)与载体牛血清白蛋白(BSA)偶联，构建SDM完全抗原，以紫外扫描光谱进行鉴定，并对重氮偶合法反应体系中SDM浓度，NaNO2浓度，及pH对SDM-BSA结合比的影响进行了观察。     

三种长效磺胺药在水牛体内的代谢动力学

<正> 磺胺—5,6—二甲氧嘧啶(SDM')为人用的周效磺胺。在奶山羊体内的代谢动力学已进行了研究。磺胺—5—甲氧嘧啶(SMD)和磺胺—6—甲氧嘧啶(SMM、DS—36)亦为人用长效磺胺。SMM在鸡体内的分布、在牛、猪的血中浓度、血浆蛋白结合率如乙酰化率、对马和奶山羊体内的代谢动力学已进行了研究。     

不同方法构建磺胺甲基嘧啶免疫抗原的比较研究

探索了磺胺甲基嘧啶(SM1)免疫抗原合成的有效途径,采用重氮偶合法和戊二醛法分别合成SM1免疫抗原,并对其光谱特征和SM1-BSA的结合比进行了比较.结果表明,在合成磺胺甲基嘧啶免疫抗原中采用重氮偶合法比戊二醛法的效果要好.     

三种抗生素对蔬菜种子芽与根伸长的生态毒性效应

采用水培法研究金霉素(Chlortetracycline,CTC)、诺氟沙星(Norfloxacin,NFLX)、磺胺对甲氧嘧啶(Sulfametoxydiazine,SMD)三种抗生素对黄瓜、油菜、小白菜三种蔬菜种子芽和根伸长的影响,比较分析了抗生素的生态毒性差异和相对敏感的蔬菜与指标。结果表明:(1)根长是更为敏感的生态毒性指标;(2)三种抗生素对黄瓜的生态毒性依次是金霉素磺胺对甲氧嘧啶诺氟沙星,对油菜和小白菜的生态毒性则分别是磺胺对甲氧嘧啶金霉素诺氟沙星和磺胺对甲氧嘧啶诺氟沙星金霉素;(3)三种蔬菜对于金霉素和磺胺对甲氧嘧啶胁迫的敏感性均为油菜小白菜黄瓜,而对于诺氟沙星胁迫的敏感性依次是小白菜黄瓜油菜。该结果为评价抗生素污染对生态环境和人体健康的潜在影响提供了理论依据。     

甲氧苄氨嘧啶人工抗原的合成及鉴定

用重氮化方法将甲氧苄氨嘧啶(TMP)偶联于载体蛋白BSA和OVA上,合成了免疫抗原BSA-TMP和包被抗原OVA-TMP,并用紫外扫描、SDS-PAGE和动物免疫试验进行了鉴定。结果表明,半抗原TMP和载体蛋白偶联成功。人工抗原BSA-TMP的成功合成,为TMP单克隆抗体制备及其快速检测试剂的研制奠定了基础。     

周效磺胺、磺胺甲氧嗪、磺胺5甲氧嘧啶和磺胺6甲氧嘧啶的血浓度研究 第一报 对猪、山羊和湖羊的血浓度研究

周效磺胺(Sulfadoxine,SDM′)、磺胺甲氧嗪(Sulfamethoxypyridiazine,SMP)、磺胺5甲氧嘧啶(Sulfamethoxydiazine,SMD)和磺胺6甲氧嘧嘧(Sulfamonomethoxine,SMM)在人医上均属新型长效磺胺药,但在畜禽体内,有效血浓度差异较大。国内除对马有实验资料外,还未见报导。本试验着重研究,上述四种磺胺药在猪、山羊、湖羊体内血浓度变化规律,给临床合理用药提供理论和实践依据。     

环丙氨嗪人工抗原的合成与鉴定

本研究拟通过抗原合成、多克隆抗体制备等途径建立快速的环丙氨嗪酶联免疫检测方法.主要采用戊二醛桥连法,偶联半抗原环丙氨嗪和载体牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA),制备酶联检测的免疫抗原和包被抗原.经紫外光谱和气相-傅里叶-红外光谱鉴定,在紫外265 nm波长处得到环丙氨嗪-BSA吸收峰;在红外3 350～3 300 cm-1、1 660～1 500 cm-1和1 695～1 665 cm-1波长处分别得到环丙氨嗪-BSA和环丙氨嗪-OVA特征性偶联吸收峰,证实本试验人工合成的2对抗原均偶联成功.免疫抗原和包被抗原的偶联比分别达到25.9 ∶ 1、23.1 ∶ 1,为进一步制备抗血清和酶联检测方法的建立奠定了工作基础.     

磺胺间甲氧嘧啶全抗原的制备研究

采用重氮化法，将半抗原磺胺间甲氧嘧啶（SMM）与载体牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）偶联，制得磺胺间甲氧嘧啶全抗原SMM—BSA和SMM—OVA。通过其紫外扫描光谱、SDS—PAGE凝胶电泳试验，表明半抗原和载体成功偶联，免疫动物以后可以产生满意效价。这另进一步制备抗SMM抗体提供了良好的免疫原。     

小鼠血清抗磺胺二甲氧嘧啶抗体的研制

将磺胺二甲氧嘧啶(SDM)与载体牛甲状腺球蛋白(BTG)偶联,构建SDM完全抗原SDM-BTG。用SDM-BTG免疫小鼠,诱导小鼠产生血清抗SDM抗体。ELISA检测表明:SDM-BTG免疫小鼠所产生的多克隆抗体与SDM-BSA包被抗原的结合有较强的特异性和较高的亲和力。     

Synthesis and Identification of SG-BSA and SG-OVA

Hapten sulfaguanidine （SG） was coupled with carrier protein bovine serum albumin （BSA） to form a full antigen SG- BSA by diazotization and glutaraldehyde methods. Ovalbumin （OVA） was used as protein carrier to couple with Hapten SG by glutaraldehyde method. Then, the immunogen and the coating antigen were purified by dialysis and gel exclusion chromatography. The conjugated ratio of SG to BSA in artificial antigen was 5.3 （using diazotization method） and 6.5 （glutaraldehyde method）, and the conjugated ratio of SG to OVA in coating antigen was 2.3 （glutaraldehyde method） by UV-visible spectrophotometer. The coupling was successful according to the analysis of sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis （SDS-PAGE）. BALB/c mice were immunized with the antigen （SG-BSA）, and the titers of antiserum were tested to be 1 ： 6 400 and 1 ： 400 after three periods of immunities by indirect ELISA, which further identified the success of the synthesis of both immunogen SG-BSA and coating antigen SG-OVA.     

氯霉素全抗原的合成与鉴定

利用重氮化法合成氯霉素全抗原,将氯霉素的对位苯硝基构造成芳香氨基,并氧化使其与牛血清白蛋白偶联,构成氯霉素全抗原。此外,利用紫外光谱、红外光谱与酶联免疫等方法对合成的全抗原进行鉴定。结果表明,氯霉素全抗原合成成功,并免疫原性良好。其偶联比为1∶0.959,蛋白质浓度达2.799 mg/mL。     

茜素紫与牛血清白蛋白相互作用特征研究

在不同温度下,用荧光光谱、同步荧光光谱、三维荧光光谱和紫外可见吸收光谱法研究了茜素紫(Alizarin-Violet,ALV)与牛血清白蛋白(bovineserum albumin,BSA)相互作用特征。分别用Stern-Volmer方程、Lineweaver-Burk双倒数方程和热力学方程等处理试验数据,得到相互作用常数的平均值为1.078×105L/mol,相互作用的ΔHθ、ΔGθ和ΔSθ的平均值分别为-8.030kJ/mol、-29.19kJ/mol和69.80J/K,作用位置为2.38nm,作用位点数为1.173。证实了在试验浓度和温度范围内,ALV与BSA可相互作用形成具有一定结构的复合物,其荧光猝灭作用更符合静态猝灭作用特征,为研究ALV的生态环境效应、生物学效应和对蛋白质构象的影响以及ALV的染色机理等提供了重要信息。     

中性红与牛血清白蛋白相互作用特征研究

在模拟动物体生理器件和不同温度下，用荧光光谱、同步荧光光谱、三维荧光光谱和紫外可见吸收光谱法等研究了中性红（Neutral Red，NR）与牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）的相互作用，证实了NR有很强地箨灭BSA荧光强度的能力。分别用Stern-Volmer方程、Lineweaver-Burk双倒数方程和热力学方程等处理试验数据，得到在25～43℃度时相互作用的生成常数K。B（平均值为4．250×10^4kJ／mol）、热力学参数（△H^θ、△G^θ和AS^θ的平均值分别为-6．432kJ／mol、-21．38kJ／mol和-48．68J／K）和结合位点数（平均值为1．155）。     

丙烯酰胺人工抗原的合成及其多克隆抗体的制备

摘 要：利用偶联方法合成丙烯酰胺人工抗原,通过免疫方法获得抗丙烯酰胺多克隆抗体;应用戊二醛法将丙烯酰胺与牛血清白蛋白(BSA)进行偶联,并对这两种物质及其复合物进行紫外扫描,并用此复合物免疫兔子,利用间接酶联免疫吸附法测定抗体的效价;应用牛血清白蛋白与丙烯酰胺偶联人工抗体成功,抗体效价大于8100;应用人工抗原免疫成功制备抗丙烯酰胺多克隆抗体。     

三聚氰胺人工抗原合成与鉴定

采用戊二醛法与甲醛树脂法分别将三聚氰胺（Melamine,Mel）偶联到牛血清白蛋白（BSA）与鸡卵清蛋白上,合成免疫原三聚氰胺-牛血清白蛋白（Mel-BSA）与包被原三聚氰胺-鸡卵清蛋白（Mel-OVA）。通过快速凝胶液相层析（FPLC）纯化后,合成抗原进行紫外扫描、红外扫描和SDS-PAGE电泳鉴定。结果表明三聚氰胺已偶联到载体蛋白,为进一步制备三聚氰胺的特异性抗体与建立三聚氰胺免疫检测方法奠定了基础。     

伏马菌素B_1人工抗原的鉴定及抗体的制备

采用戊二醛(GA)一步法将半抗原伏马菌素B1(FB1)分别与鸡卵清蛋白(OVA)、牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备2种具有免疫原性的FB1人工抗原FB1-OVA和FB1-BSA。分别采用凝胶电泳法、紫外光谱法(UV)、红外光谱法(IR)、基质辅助激光分析电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)4种方法鉴定人工抗原偶联效果并测定偶联比。将FB1-BSA作为免疫抗原免疫BALB/c小鼠,FB1-OVA作为固相包被抗原,采用间接酶联免疫吸附法(i-ELISA)测定小鼠抗血清滴度。结果表明:4种方法均鉴定FB1人工抗原合成成功。凝胶电泳法测定FB1-OVA和FB1-BSA相对分子质量分别约为50 000和75 000。MALDI-TOF-MS测定FB1-OVA和FB1-BSA相对分子质量分别为48 009.212和74 355.301,并精确计算FB1-OVA和FB1-BSA偶联比分别为5∶1和10∶1。FB1-BSA免疫后小鼠的抗血清效价为1∶1.25×105,并具有较高灵敏度。