“环丙-林可霉素长效注射液”毒理学试验研究

为评价新制剂环丙-林可霉素长效注射液的安全性,本研究采用急性毒性试验、溶血性试验、局部刺激性试验和亚慢性毒性试验对兽药新制剂环丙-林可霉素长效注射液安全性进行评价。结果表明:环丙-林可霉素长效注射液小鼠肌肉注射LD_(50)为4.81 mg/kg,LD_(50)的95%可信限为4.50～5.53 mg/kg;该注射液在4 h内不产生溶血现象;肌肉注射部位及周围组织均未见充血、水肿、出血和坏死;肌肉注射部位充血范围0.5 cm×1 cm;以相当于临床用量2倍的剂量涂抹皮肤,停药后1、24、48、72 h观察均未见明显异常变化;对肝脏和肾脏组织学观察表明,治疗剂量和中剂量组肝脏和肾脏组织结构清晰,而高剂量组肾小球内有大量出血,肾间质出现坏死,肝细胞排列紊乱,肝细胞肿胀融合,肝血窦间有大量出血。综上,环丙-林可霉素长效注射液按照治疗剂量在本试验条件下是安全的。     

加米霉素注射液特殊安全性试验研究

通过豚鼠、大白兔的皮肤致敏、皮肤刺激、肌肉刺激、红细胞溶血试验,考察加米霉素注射液的安全性。试验用新西兰大白兔8只进行皮肤刺激,染毒剂量为加米霉素注射液0.5 mL/只(规格:150 mg/mL);用白化豚鼠进行皮肤致敏试验,按0.5 mL/kg剂量,以豚鼠背部左侧皮肤进行染毒;用新西兰大白兔24只,进行肌肉刺激试验,在右侧股四头肌注入6、12、30 mg/kg bw,左侧股四头肌注入同样体积的灭菌0.9%氯化钠溶液作对照;用新西兰大白兔2只,进行红细胞溶血试验,采用体外试管法进行,采心脏血50 mL,制成血细胞悬液,加入受试药物原液温育3 h。结果显示,皮肤刺激试验:受试物加米霉素注射液各个时间点的刺激反应积分均值为0;皮肤致敏试验:受试药物组和阴性对照组豚鼠的皮肤过敏反应率为0;肌肉刺激试验:给予受试物各个时间点的刺激反应积分均值为0;红细胞溶血试验:受试药物及阴性对照在3 h内红细胞全部下沉,上清液体均为澄明,溶液中未见棕红色或红棕色絮状沉淀。试验表明加米霉素注射剂无皮肤刺激性、不出现过敏反应、无肌肉刺激性、无溶血和凝聚作用,临床上可以肌肉注射使用。     

咪唑苯脲注射液特殊安全性试验研究

通过豚鼠、新西兰大白兔的皮肤致敏、皮肤刺激、肌肉刺激、红细胞溶血试验,考察咪唑苯脲注射液的安全性。试验用新西兰大白兔6只进行皮肤刺激,染毒剂量为咪唑苯脲注射液0.5 mL/只(规格:1211.5 mg/mL);用白化豚鼠进行皮肤致敏试验,按0.5 mL/kg剂量,以豚鼠背部左侧皮肤进行染毒;用新西兰大白兔8只,进行肌肉刺激试验,在右侧股四头肌注入0.1、0.2、0.5 mL/kg bw,左侧股四头肌注入同样体积的灭菌0.9%氯化钠溶液作对照;用新西兰大白兔2只,进行红细胞溶血试验,采用体外试管法进行,采心脏血50 mL,制成红细胞悬液,加入受试药物原液温育3 h。结果显示,皮肤刺激试验:受试物咪唑苯脲注射液各个时间点的刺激反应积分均值为0;皮肤致敏试验:受试药物组和阴性对照组豚鼠的皮肤过敏反应率为0;肌肉刺激试验:给予受试物各个时间点的刺激反应积分均值为0;红细胞溶血试验:受试药物及阴性对照在3 h内红细胞全部下沉,上清液体均为澄明,溶液中未见棕红色或红棕色絮状沉淀。试验表明,咪唑苯脲注射剂无皮肤刺激性、不出现过敏反应、无肌肉刺激性、无溶血和凝聚作用,临床上可以肌肉注射使用。     

布舍瑞林注射液过敏性、溶血性及刺激性研究

本研究旨在通过过敏性、体外溶血性及肌肉刺激性评价布舍瑞林注射液的安全性。过敏性试验和溶血性试验中设立阴性和阳性对照，而刺激性试验中采用自身对照。试验过程中，对照系统均成立。Hartley豚鼠隔日腹腔连续3次注射给予布舍瑞林注射液(2μg/只),末次致敏后第14和21天分别静脉注射2倍致敏剂量供试品激发进行主动全身过敏试验，结果为阴性；同样的给药剂量，末次致敏后第10天，皮内注射给予对应的抗体血清，静脉注射激发后未见蓝斑，豚鼠被动皮肤过敏反应结果为阴性。采用2%红细胞悬液进行体外溶血性试验，温育15 min、30 min、45 min、1 h、2 h、3 h各观察1次，布舍瑞林注射液和阴性对照组所有试管未见溶血，终末未见红细胞凝集，而阳性对照组全部溶血。新西兰兔连续肌肉注射给予布舍瑞林注射液(0.5 mL/只),末次给药72 h后，病理组织学检查可见对新西兰兔股四头肌有刺激作用，恢复期结束未见刺激性反应，具有可逆性。研究结果表明，布舍瑞林注射液无过敏性和溶血性，对肌肉有刺激性但停药后可恢复，在应用过程中是安全的。     

催奶灵注射液的安全性试验

通过豚鼠的全身主动过敏性试验、家兔的血管和肌肉局部刺激性以及体外溶血性试验,对催奶灵注射液进行了安全性评价。结果表明：本品对豚鼠无明显过敏性反应,静脉和肌肉注射对家兔耳缘静脉和肌肉组织无明显局部刺激,对家兔红细胞无明显体外溶血,各项安全性均较好,可推荐临床使用。     

复方清开灵注射液的安全性研究

为了评价复方清开灵注射液的安全性,试验对小白鼠、豚鼠、大鼠和家兔分别进行了急性毒性试验、全身主动过敏性试验(ASA)、皮肤被动过敏性试验(PCA)、局部血管刺激性试验、肌肉刺激性试验和溶血性试验。结果表明:复方清开灵注射液对小白鼠无明显的急性毒性,对豚鼠无全身过敏性,对大鼠无明显的皮肤过敏性;对家兔耳缘静脉注射给药无明显局部刺激性,对家兔肌肉注射给药无明显肌肉刺激性,对家兔红细胞无体外溶血性。说明复方清开灵注射液安全、可靠,临床使用安全。     

双氯芬酸钠注射液的溶血性及主动全身过敏反应试验

为评价双氯芬酸钠注射液的溶血性及其对豚鼠主动全身过敏反应,采用体外试管法观察试验24 h内药物致溶血与红细胞凝集现象。豚鼠主动全身过敏反应试验通过3次腹腔注射致敏,于末次致敏后第14天及第21天,以2倍致敏剂量肌肉注射进行激发,观察各组动物的过敏反应症状,计算过敏反应发生率。溶血试验结果显示,4℃静置过夜,供试品低剂量组无溶血现象,其余各组均呈完全溶血现象。豚鼠主动全身过敏反应试验筛选出药物的致敏注射剂量为0.062 5 mL/kg·bw,阳性对照药可引起豚鼠发生过敏反应,发生率为33.3%。药物及药物溶剂均未引起豚鼠的过敏反应。表明双氯芬酸钠注射液不会引起豚鼠全身主动过敏反应,但其可导致红细胞溶解,不宜用作静脉注射。     

烟酸黄藤素注射液安全性试验研究

为进一步临床试验并了解烟酸黄藤素注射液的安全性,对其进行了溶血性试验、肌肉刺激性试验和急性毒性试验（口服试验和腹腔注射试验）。结果表明,烟酸黄藤素注射液对兔红细胞不产生溶血和凝聚作用;肌肉注射,2只试验兔4块股四头肌刺激反应级之和为3,局部刺激反应轻微;口服、腹腔注射LD50分别为2866mg／kg、153mg／kg,黄藤素口服给药属低毒性药物,注射给药属中等毒性药物。     

加米霉素注射液的溶血性与肌肉刺激性试验研究

研究旨在通过红细胞溶血试验和肌肉刺激性试验评价加米霉素注射液的安全性.采集新西兰兔血制成血细胞悬液,加入不同浓度受试药液温育3 h考察加米霉素注射液的溶血性;选用健康新西兰兔18只随机分为低、中、高剂量组,分别在各剂量组动物左侧股四头肌分别注射0.25、0.50和1.00 mL的加米霉素注射液,另外一侧注射等体积0.9...     

自制黄芪多糖注射剂安全性检测

为检测自制黄芪多糖注射剂的安全性,试验采用异常毒性检查、热源检查、过敏反应检查及溶血和凝聚检查对黄芪多糖注射剂的安全性进行了研究.结果表明：5只小白鼠腹腔注射黄芪多糖注射剂0.5 ml/只,小白鼠未见毒性反应,异常毒性检查结果为阴性;豚鼠隔日腹腔注射黄芪多糖注射剂0.5 ml/只,未出现过敏反应;兔耳缘静脉注射黄芪多糖注射剂0.367 ml/kg,连续观察3h,一只家兔体温升高超出规定,需进一步研究;0.25 mg/ml黄芪多糖注射剂溶液对兔红细胞没有溶血和凝聚作用.通过以上试验证明自制的黄芪多糖注射剂可否用于静脉给药需进一步检测研究.     

昆明地区奶牛临床型乳房炎病原菌分离鉴定及药敏试验

对昆明地区多个奶牛场的奶牛临床型乳房炎病原菌进行分离、鉴定,从114份乳样中共分离出细菌13种305株,经培养特性、染色镜检、生化鉴定等,鉴定出金黄色葡萄球菌63株,占20.66%;表皮葡萄球菌26株,占8.52%;无乳链球菌53株,占17.38%;停乳链球菌23株,占7.54%;乳房链球菌19株,占6.23%;乳链球菌14株,占4.59%;粪链球菌15株,占4.92%;化脓链球菌14株,占4.59%;大肠杆菌48株,占15.74%;真菌12株,占3.93%。分别对分离菌株进行17种药物的敏感性试验,除真菌外,所有菌株对庆大霉素、新霉素、环丙沙星、诺氟沙星、林可霉素、乳肿康均高度敏感,对临床常用的青霉素、链霉素、鱼腥草等具有较强的耐药性。     

Effect of gentamicin on CD3+ T-lymphocyte proliferation for treatment of equine recurrent uveitis: An in vitro study

Objective

The objective of the study was to determine the effect of gentamicin on CD3+ T-lymphocyte proliferation and cell viability using an in vitro cell culture model as a means of investigating the mechanism of action of low-dose intravitreal gentamicin injection.

Animals Studied

Three adult horses with no evidence of ophthalmic or systemic disease.

Procedure

Peripheral blood lymphocytes were treated with gentamicin at concentrations 37.5 μg/mL, 112.5 μg/mL, 187 μg/mL, 375 μg/mL, or 750 μg/mL then stimulated to proliferate with concanavalin A (ConA). 4′,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) and carboxyfluoroscein succinimidyl ester (CSFE) were used as markers of cell viability and cell proliferation, respectively. Following 5-day culture, live cell counts and CSFE fluorescent intensity data were collected via automated cell count and flow cytometry. The experimental design was duplicated using preservative-free gentamicin and a proprietary brand formulation. Statistical analysis was performed using two-way ANOVA with Tukey's multiple comparison test.

Results

No statistically significant comparisons in CD3+ T-lymphocyte live cell counts and geometric mean fluorescent intensity of CSFE were identified between gentamicin concentrations or formulations.

Conclusions

Gentamicin had no effect on equine peripheral blood CD3+ T-lymphocyte cell viability and proliferation in concentrations ranging from “safe” to “retinotoxic” in relation to intravitreal injection volumes. Low-dose intravitreal gentamicin may not suppress the Th1- and Th17-mediated immune response.     

竹鼠巴氏杆菌病的诊治

2008年12月,广东某竹鼠养殖场暴发疾病,200多只竹鼠死亡近100只。经流行病学调查、临床症状、剖检变化、形态学观察、生化鉴定、动物试验和PCR试验,确诊为竹鼠巴氏杆菌病（Pasteurellosis）。药敏试验结果表明,分离株对青霉素、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、先锋Ⅵ等敏感,对卡那霉素、庆大霉素、林可霉素等耐药。使用敏感药物治疗后,疫情得到控制,为竹鼠巴氏杆菌病的防制提供了参考。     

Pharmacokinetic and pathological evaluation of gentamicin in cats given a small intravenous dose repeatedly for five days.

Gentamicin was administered to six cats at a dosage of 3 mg/kg of body weight intravenously every 8 h for five days. Peak and trough serum gentamicin concentrations were measured after each injection. Gentamicin elimination rate and serum half-life were calculated. Serum urea nitrogen, creatinine, biochemistry profile, electrolyte, glucose, total protein, and albumin concentrations were measured daily. Urinalyses were performed before and after the five-day experimental period. The mean +/- SD peak serum gentamicin concentration was 7.19 +/- 1.10 micrograms/mL, and the trough concentration was 0.59 +/- 0.09 microgram/mL. These concentrations are known to be effective against most gentamicin-sensitive bacteria. The mean +/- SD gentamicin elimination rate was 0.0065 +/- 0.0004 min-1. The harmonic mean +/- pseudo standard deviation serum half-life of gentamicin was 107.21 +/- 12.79 min. There were no significant increases (P greater than 0.05) in clinicopathological variables. Microscopic examination of renal sections did not disclose pathological lesions. Signs of vestibular impairment were not observed. A dosage of 3 mg gentamicin/kg given intravenously every 8 h for five days was determined to be safe and to produce therapeutic blood levels in cats.     

团头鲂肠道细菌的分离鉴定与药敏试验

从团头鲂(Megalobrama amblycepnala)肠道中分离纯化到4株细菌,菌株编号为MA1～4,通过细菌镜检及培养结果表明,均为革兰氏阴性直杆状菌,在LB培养基上生长;4株细菌氧化酶试验为阴性、过氧化氢酶试验为阳性、半固体动力阳性,不能利用棉子糖、山梨醇、木糖等多种糖类,产H2S、VP试验和葡萄糖酸盐利用试验为阴性;采用数值编码鉴定,MA1为鲶鱼爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri),MA2为摩氏摩根氏菌(Morganella morganii),MA3为嗜线虫致病杆菌(Xenorhab-dus nematophilua),MA4为弗氏志贺菌(Shigella flexneri)。进一步进行药敏试验分析显示,4株菌耐药率分别为52.2%、69.6%、95.7%、100%,均对阿奇霉素、红霉素、洁霉素、氯洁霉素、灭滴灵、头孢噻吩、先锋霉素Ⅳ、复方新诺明和甲氧咔啶具有耐药性;对利福平、氯霉素、头孢孟多、先锋必素、氧哌嗪青霉素、氨苄青霉素、庆大霉素、卡那霉素和四环素等药物敏感性不同。该研究结果对探明鱼类肠道菌群、养殖水体微生态和疾病防治具有重要参考价值。     

重组牛粒细胞集落刺激因子的纯化鉴定及对小鼠的安全性评价

[目的]评价重组牛粒细胞集落刺激因子（recombinant bovine granulocyte colony stimulating factor,rbG-CSF）的安全性,为后期rbG-CSF临床应用价值的研究打下基础。[方法]采用rbG-CSF重组大肠杆菌,经过发酵、纯化后获得rbG-CSF;利用SDS-PAGE法对[目的]蛋白进行鉴定;应用BCA法测定目的蛋白浓度。急性毒性试验使用健康昆明小鼠112只,分为8组,雌雄各半,将8组小鼠分为肌肉注射组和腹腔注射组,肌肉注射组和腹腔注射组分别设有1个对照组和3个剂量组,3个剂量组注射rbG-CSF的剂量分别是150、75、37.5 μg/只,对照组注射生理盐水,给药后每隔3 d进行1次称重,持续观察14 d,给药后14 d对各组小鼠进行剖检,取肝、脾、肾、生殖器官进行脏器系数测定和病理切片观察。慢性毒性试验使用健康昆明小鼠160只,分组与急性毒性试验相同,注射rbG-CSF的剂量分别是15、10、5 μg/只,每周注射1次,每周注射的第6天进行1次称重,持续注射12周,第12周给药后7 d对小鼠进行剖检,处理方法同急性毒性试验。[结果]rbG-CSF纯化成功,经SDS-PAGE法鉴定[目的]蛋白大小为21.5 kDa,与设计大小一致;测得[目的]蛋白浓度为302.19 μg /mL,可满足后期安全性试验所需浓度要求;急性毒性试验和慢性毒性试验中,小鼠的体重和脏器指数经SPSS 20.0单因素方差分析,剂量组与对照组相比均无显著差别;剖检各器官未出现明显病变;HE染色切片观察,各剂量组与对照组不存在显著变化。[结论]该试验建立的纯化鉴定rbG-CSF的方法可行,rbG-CSF在试验浓度下对小鼠并未造成器质性的伤害。     

仔猪大肠杆菌病病原分离鉴定及自家苗的制备

试验以腹泻仔猪肠道为试验材料,对其肠道内容物进行细菌学检查及分离,对从肠道内容物分离得到的优势菌进行形态特征、生化特性和16S r DNA分子鉴定,判定为大肠杆菌。此菌株对供试的小白鼠有致病性,测其LD50为1.26×107 CFU/只。菌株对供试的氧氟沙星等敏感;对庆大霉素等中度敏感;对林可霉素等耐药。推断此菌株是导致仔猪腹泻致死的主要病原菌。利用病死猪肠道制作自家苗,给产前母猪注射,其后代仔猪腹泻率大幅降低。研究弄清了四川某猪场仔猪腹泻的原因,减少了猪场的经济损失,也为仔猪大肠杆菌病的预防和治疗提供了一定参考,为临床早期合理用药提供一定借鉴。     

致仔猪水肿病大肠杆菌的分离鉴定及对小鼠的毒力研究

从发病仔猪脏器中分离到一株细菌,进行了初步鉴定。结果表明,该菌为致猪水肿病大肠杆菌,在血平板上呈β溶血,经PCR鉴定该菌株具有产毒素基因,对小鼠毒力强,能致其发病死亡,血清型为O141,是临床多发血清型菌株。将细菌培养物和裂解毒素分别经皮下和尾静脉两种途径接种于体重为16~18 g昆明系小鼠,小鼠腹腔注射细菌培养物后12~48 h死亡,不表现神经症状,剖检水肿病病变特征不典型;小鼠于尾静脉注射裂解毒素后4~48 h,出现典型的眼睑水肿和后躯瘫痪等神经症状,直至死亡。该菌株致小鼠死亡的最小毒素剂量为0.2 mL/只。研究结果表明,小鼠可作为诊断仔猪水肿病模型,也进一步证明试验菌株为致猪水肿病菌株,可作为制备疫苗菌株。