鸡病毒性关节炎弱毒疫苗的研制

将鸡病毒性关节炎病毒鸡胚毒Ｊ－１株适应于鸡胚细胞和Ｖｅｒｏ细胞，经连续传代，通过４０．５℃、３７℃的交替升降培养温度培养，筛选出１株毒力较弱的克隆株，该克隆株蚀斑大小为２．７－３．１ｍｍ，以１０＾５．７２５ＴＣＩＤ５０注射于１日龄敏感雏鸡的足掌皮下和以１０４．７２５－１０＾６．７２５ＴＣＩＤ５０注射于１日龄 敏感雏鸡胸部肌肉内，对雏鸡无致病性，该克隆株在敏感雏鸡内连传３代，无毒力返强现象。这一结果     

鸡传染性法氏囊病Vero细胞弱毒疫苗免疫效果的研究

鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）Ｖｅｒｏ细胞弱毒疫苗（ＶＣＶ９０１）病毒滴度为１０￣（７．３）～１０￣（８．３）ＴＣＩＤ＿（５０）／０．０５ｍｌ．疫苗经皮下、肌内、点眼－滴鼻和口服途径免疫接种雏鸡，均表现出良好的免疫原性。皮下接种１４日龄雏鸡，免疫后８、１４和２１天攻毒，保护数分别为２／６、６／６５／６，如在３５日龄再加强免疫一次，于二免后７０天和１１５天攻毒．其保护数分别为６／６和５／６．疫苗的最小免疫剂量为１０￣５ＴＣＩＤ＿（５０）／只，用１０、５０和１００培免疫剂量免疫雏鸡，临床表现均安全，不影响雏鸡增重．经易感雏鸡连传５代，疫苗毒力不返强．温苗在－２０℃～－２５℃至少保存一年，在０℃可保存一周，疫苗对鸡无致瘤性．     

乙型脑炎病毒HW_1克隆纯化株的鉴定及外源性污染的检定

应用病毒蚀斑技术，将乙型脑炎病毒（ＪＥＶ）ＨＷ１株在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）单层培养上连续挑斑纯化３次，对纯化后的克隆株进行血清学、免疫生物学鉴定及外源性污染检定。毒株对ＢＨＫ－２１细胞感染滴度≥１０６．１５ＴＣＩＤ５０；对８～９ｇ小鼠脑内感染的毒力≥１０７．１０ＬＤ５０／０．０４ｍＬ；与ＪＥＶＰ３株阳性参考血清的中和指数≥２０００；克隆株对猪有较好的免疫原性，无外源性污染。     

乙型脑炎病毒HW1克隆纯化株的鉴定及外源性污染的鉴定

应用病毒蚀斑技术，将乙型脑炎病毒ＨＷ１株在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）单层培养上连续挑斑纯化３次，对纯化后的克隆株进行血清学，免疫生物学鉴定及外源性污染检定。毒株对ＢＨＤ－２１细胞感染滴度≥１０＾６．１５ＴＣＩＤ５０；对８－９ｇ小鼠脑内感染的毒力≥１０＾７．１０ＬＤ５０／０．０４ｍＬ；与ＪＥＶＰ３株阳性参考血清的中和指数≥２０００；克隆株对猪有较好的的性，无外源性污染。     

鸡传染性法氏囊病Vero细胞弱毒疫苗免疫效果的研究

鸡传染性法氏囊病Ｖｅｒｏ细胞弱毒疫苗病毒滴度为１０＾７．３－１０＾８．３ＴＣＩＤ５０／０．０５ｍｌ。疫苗经皮下，肌肉，点眼－滴鼻和口服途径免疫接种雏鸡，均表现出良好的免疫原性。皮下接种１４日龄雏鸡，免疫后８，１４和２１天攻毒，保护数分别为２／６，６／６和５／６，如在３５日龄再加强免疫一次，于二免后７０天和１１５天攻毒，其保护数分别为６／６和５／６。疫苗的最小免疫剂量为１０＾５ＴＣＩＤ５０／只，用１     

鸡新城疫弱毒H88克隆株与LaSota株免疫生物学特性比较试验

本试验比较了鸡新城疫弱毒Ｈ８８克隆株与ＬａＳｏｔａ株免疫生物学特性，分别测定二者的最小致死量致死鸡胚的平均死亡时间（ＭＤＴ）为１０８和１０２小时，１日龄雏鸡脑内接种致病指数（ＩＣＰＩ）为０．３４和０．３９，鸡胚半数感染量（ＥＩＤ_５０）为９．２５和８．７５。     

对新城疫CS2株与4株疫苗毒株有关性能的比较

对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）中等毒力毒株ＣＳ２株、ＮＤⅠ系、Ｒｏｋｉｎ、Ｋｏｍｅｒｏｖ和低毒力ＬａＳｏｔａ株病毒的脑内致病指数（ＩＣＰＩ）、鸡胚的半数感染量（ＥＩＤ５０）等指标进行了测定,结果是ＩＣＰＩ分别为１．２７～１．５２、１．６６～１．７０、１．４６、１．４３和０．２９～０．５;ＥＩＤ５０分别为１０＾７．５、１０＾７．５≥１０＾８．５、１０＾＾７．９和≥１０＾８．５／０．１ｍｌ。用１０倍剂量的ＣＳ２株病毒注射１月龄和１．５月龄ＳＰＥ雏鸡,均安全无不良反应,测定ＣＳ２株病毒保存期,结果在－２０℃保存６年的鸡胚２代（Ｅ２）、鸡胚６代（Ｅ６）、鸡胚１０代（Ｅ１０）毒的ＥＩＤ５０均≥１０＾７．５／０．１ｍｌ。ＮＤＣＳ２株病毒的各项指标均在中等毒力范围内,对鸡胚的半数感染量仍保持原毒（Ⅰ系）的特性,ＩＣＰＩ比原毒有所下     

鸡马立克火鸡疱疹病毒（FC—126株）的标准化研究：I.Fc—126株的纯化…

用于预防鸡马立克氏病（ＭＤ）的火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）Ｆｃ－１２６株细胞培养低代毒经过一日龄ＳＰ雏鸡体连续回传五代，于最后一代回收病毒后，超声波裂解释病毒，接种在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）上，挑选蚀斑纯化的克隆株。经过三代克隆纯化后，最后挑选出２３个蚀斑克隆株，３个中蚀斑克隆株和５个小蚀斑克隆株。对部分克隆株和其原始ＨＶＴＦｃ－１２６株在细胞中增殖速度和免疫原性进行了比较，初步筛选出大斑克隆株（３３０     

鸡新城疫病毒HB92株生物学特性研究（II）：对热的稳定性及在鸡群中的…

将ＮＤＶＨＢ９２株分别置４℃，２０℃，３７℃条件下保存，每隔一周测定血凝价（ＨＡ）和对鸡胚的感染力（ＥＩＤ５０）结果为毒株为３７℃保存７ｄ，在２０℃至少保存３ｄ，其ＨＡ价和ＥＩＤ５０保持不变，４℃保存６０ｄ效价不变，同时说明了ＨＢ９２疫苗株血凝特性和感染力存在不一致性，该毒株经５６℃水浴处理６ｈ，血凝性和对鸡胚的感染力不变，用ＨＢ９２株对１７日龄雏鸡进行滴鼻，拌料及同居感染免疫，３周后ＮＤＨＩ抗体     

鹅副粘病毒毒力特性的研究

新城疫病毒毒力的判定标准是根据国际上规定的三项指标,即最小致死量致病鸡胚平均死亡时间（ＭＤＴ）、１日龄雏鸡脑内接种致病指数（ＩＣＰＩ）和６周龄非免疫雏鸡静脉接种致病指数（ＩＶＰＩ）＾「１」等加以评价。作者从实验室分离到的１１株鹅副粘病毒中选取了其中的３株,即ＨＧ９７Ｃ５、ＹＧ９７Ｆ１１、ＹＧ９８－２Ｃ４,按照新城疫病毒毒力判定的标准方法进行了一系列病性试验,结果３株鹅副粘病毒的ＭＤＴ分别为５６．７、５２．０、５３．２,ＩＣＰＩ分别为１．６４、１．６９、１．７０,ＩＶＰＩ分别为１．６２、２．６、２．６,表明这３株鹅副粘病毒均具有与新城疫病毒速发型相类似的毒力。同时,我们也应用鹅胚和鹅按照研究新城疫病毒毒力的方法进行了相应的毒力试验,结果,这３株鹅副粘病毒最小致死量致死１３日龄鹅胚的平均死亡时间分别为６８．８、６７     

猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗的安全性及效力试验

猪繁殖与呼吸综合征（ＰＲＲＳ）弱毒株能在Ｍａｒｃ－１４５细胞上正常增殖,经克隆纯化后测得其毒价为１０＾７．４１ＴＣＩＤ５０／ｍＬ。克隆株对乳鼠、低日龄乳猪和妊娠母猪具有很高的安全性;３日龄乳猪用１０＾－１、１０－１稀释的病毒液接种后,能抵御＾５．８ＴＣＩＤ５０／ｍＬ的ＰＲＲＳ强毒攻击;后备母猪在接种克隆株病毒后于妊娠８５ｄ用ＰＲＲＳ强毒攻击,结果不发生流产;妊娠母猪接种克降株病毒原液后,足月产时其     

鸡马立克火鸡疱疹病毒（Fc─126株）的标准化研究──Ⅰ．Fc─126株的纯化及其克隆株的筛选

用于预防鸡马立克氏病（ＭＤ）的火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）Ｆｃ─１２６株细胞培养低代毒，经过一日龄ＳＰＦ雏鸡体连续回传五代，于最后一代回收病毒后，超声波裂解释放病毒，接种在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）上，挑选蚀斑纯化的克隆株。经过三次克隆纯化后，最后挑选出２３个大蚀斑克隆株，３个中蚀斑克隆株和５个小蚀斑克隆株。对部分克隆株和其原始ＨＶＴＦｃ─１２６株在细胞中增殖速度和免疫原性进行了比较，初步筛选出大斑克隆株（３３０８０１）作为疫苗种毒的候选株。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒弱毒株的选育

从南京地区分离的肾病变型传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）经ＳＰＦ鸡胚连续传代至６５代时,对雏鸡无致病性,命名为ＩＢＶ－ＡＴ６５,感染鸡胚的ＥＩＫ５０为１０＾－７．６６/０．２mＬ,鸡胚于接种后５１h开始死亡,存活鸡胚表现为发育受阻、卷缩,肾脏有尿酸盐沉积,其尿囊液对１％鸡红细胞凝集反应为阴性。用ＡＴ６５原液０．２mＬ分别于气 管内接种１０日龄ＡＡ鸡（攻毒前经血凝抑制试验检测ＩＢＶ抗体为阴性）,以及攻毒后将     

犬瘟热疫苗弱毒的复壮与免疫试验

将一株犬瘟热疫苗株病毒通过Ｖｅｒｏ细胞２０代（ＣＤＶ／Ｒ－２０）后又通过敏感犬的腹腔巨噬细胞，获得一株免疫原性更高的弱毒株（ＣＤＶ／Ｒ－２０／８）。接种同样剂量１０４ＴＣＩＤ５０的ＣＤＶ／Ｒ－２０／８和ＣＤＶ／Ｒ－２０的犬，产生出血清中和（ＳＮ）抗体价的几何平均数分别为１：５４和１：２６。前者为后者的２倍多。接种１０５ＴＣＩＤ５０的ＣＤＶ／Ｒ－２０／８能完全保护犬（１０／１０）抵抗ＣＤＶ强毒的攻击，接种１０４ＴＣＩＤ５０的保护９／１０犬，而对照犬５只全部发病，其中４只死亡。犬体内ＳＮ价可持续一年之久。冻干培养物在４和－３０℃中可分别保存９个月和１２个月而效力不减。     

鸽新城疫病毒毒价的血凝价,ELD50和TCID50值相关性比较

本文比较了用血凝反应（ＨＡ）,在鸡胚成纤维细胞上的ＴＣＩＤ５０及用发育鸡胚做ＥＬＤ５０来测定鸽新城疫病毒（ＮＤＶ）毒价的相关性。结果表明,鸽ＮＤＶ毒价的ＴＣＩＤ５０和ＥＬＤ５０的值基本相同。ＨＡ滴度虽然与ＴＣＩＤ５０值有一定的相关性,但远不如ＴＣＩＤ５０准确。接种病毒后死亡鸡胚的新鲜尿囊液经冻融后,其中鸽ＮＤＶ的ＨＡ滴度和ＴＣＩＤ５０均逐渐下降。每经一次冻融,毒价几乎减少５０％。     

感染CIAV雏鸡免疫器官对ND疫苗的细胞免疫应答

对１日龄感染ＣＩＡＶ雏鸡接种ＮＤ疫苗后，其免疫器官组织Ｔ细胞数量的动态变化进行研究．结果，感染ＣＩＡＶ雏鸡ＮＤ疫苗免疫局，其胸腺和脾脏以及盲肠扁桃体和哈德尔腺的Ｔ细胞数量，于接种ＮＤ疫苗后较未感染ＣＩＡＶ免疫对照雏鸡明显减少，表明感染雏鸡的中枢和外周免疫器官及局部免疫组织对ＮＤ疫苗的细胞免疫应答功能明显降低．ＮＤ强毒攻击后，感染免疫鸡的免疫保护率明显低于未感染免疫对照鸡．     

鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的应用

通过中和试验证明，Ｂ３４腹水单克隆抗体中和ＩＢＤＶ ＣＡ株和中和效价高达１：４２００００。经１０倍稀释后，能等量中和含毒量为１０＾６．６２５ＴＣＩＤ５０／ｍｌ的ＩＢＤＶ ＣＡ株细胞毒。利用Ｂ３４腹水单克隆抗体建立了ＭＡｂ－ＡＣ－ＥＬＩＳＡ，可用于测定ＩＢＤＶ ＣＡ株细胞的病毒含量，与ＴＣＩＤ５０之间的相关系数为０．９４。     

鸡新城疫病毒V_4株的生物学特性研究

鸡新城疫病毒Ｖ４株对１日龄雏鸡安全；对１０日龄雏鸡一次饮水或滴鼻免疫．半年内，ＨＩ抗体平均效价为２５左右；以１００ＥＩＤ５０Ｆ系标准强毒（毒力为１０８．５ＥＩＤ５０／０．１ｍｌ）攻击，保护率１００％。并成功地培育了能在５６℃水浴中处理５小时而血凝效价稳定的耐高温毒株Ｖ４－９２．该毒株在２５℃至少保存５周，血凝效价不降。     

猪流行性腹泻弱毒株的培育

用ＰＥＤＶＣＶ７７７株强毒适应Ｖｅｒｏ细胞系并传至１４７代。以ＰＥＤＶ沪株做效检用强毒，传代毒８３代之后适应仔猪肾原代细胞，自９０年代起进行了５次克隆纯化，克隆是２次群斑（由５～７个单斑组成）的基础上，再进行３次单斑挑选（均是１ｍｍ以内小空斑）以８３－７斑５株继续传代并做系列试验，传代毒的毒价为１０＾７．０～１０＾７．５ＴＣＩＤ５０／０．３ｍｌ。免疫接种途径为后海穴位，克隆后５代（总代次１０４代）     

鸡新城疫病毒V4株的生物学特性研究

鸡新城疫病毒Ｖ４株对１日龄雏鸡安全；对１０日龄雏鸡一次饮水或滴鼻免疫，半年内，ＨＩ抗体平均效价为２＾５左右；以１００ＥＩＤ５０Ｆ系标准强毒（毒力为１０＾８．５ＥＩＤ５０／０．１ｍｌ）攻击，保护率１００％。并成功地培育了能在５６℃水浴中处理５小时而血凝效价稳定的耐高温毒株Ｖ４－９２，该毒株在２５℃至少保存５周，血凝效价不降。