雏鸡感染毒害艾美耳球虫后免疫器官T细胞亚群的动态变化

采用ABC法检测了毒害艾美耳球虫（Eimeria necatrix）初次、二次感染雏鸡后，其免疫器官T细胞亚群的动态变化。结果发现：雏鸡初次感染E．necatrix后，其胸腺和脾脏的CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞于感染后4～21d不同程度高于未感染的对照雏鸡，14～16d达峰值，随后缓慢下降。其中CD4^＋T细胞较CD8^＋T细胞增殖辐度大，持续时间也较长。Enecatrix二次感染雏鸡后，上述免疫器官的CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞数量在感染后2～7d呈下降趋势，随后回升，至10～14d明显高于对照和初次感染雏鸡。其中CD8^＋T细胞在二次感染后降幅较小，回升更迅速，增殖幅度也较大。表明鸡CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞在抵抗E．necatrix感染的不同时期发挥不同的作用。     

外周血中CD4+、CD8+T、CD4+CD25+Treg在绵羊接种布鲁氏菌M5-90弱毒疫苗后的动态变化

为研究绵羊接种布鲁氏菌弱毒M5-90株后外周血中CD4+、CD8+T、CD4+CD25+Treg细胞的动态变化规律,本研究选择11只健康绵羊,每10 d免疫一次,共免疫3次,分别在免疫前、免疫后10d、20 d、30 d利用流式细胞术检测外周血中CD4+、CD8+T、CD4+CD25+Treg淋巴细胞亚群.在免疫后的第20 d,CD4+T、CD8+T细胞百分含量达到最高水平(P＜0.05)后均缓慢下降;在第10d,CD4+CD25+Treg细胞缓慢升高,至20 d、30 d均显著升高(p＜0.05);在布鲁氏菌M5-90疫苗免疫应答过程中CD4+CD25+Treg细胞参与了机体的免疫反应调控,对CD4+T、CD8+T淋巴细胞的比例进行调节,并且维持CD4+/CD8+比值稳定,起到平衡Th1/Th2细胞间反应的作用.     

米糠多糖对雏鸡T细胞免疫功能的影响

为探讨米糠多糖（RBS）对不同免疫状态雏鸡免疫功能的影响,本试验采用流式细胞技术检测了健康雏鸡、环磷酰胺（CTX）处理雏鸡和人工感染IBDV雏鸡等三种免疫状态雏鸡在服用米糠多糖（剂量150mg／kg·d））和不服用米糠多糖情况下,外周血CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群数量的动态变化。结果显示,口服米糠多糖能够提高健康雏鸡外周血中CD4^＋T淋巴细胞比率,对CD81淋巴细胞作用不明显;米糠多糖对CTX和IBDV引起试验雏鸡外周血中CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群减少具有一定的抑制作用。     

中药"球康"对E.tenella感染鸡肠道CD4+和CD8+T细胞的影响

本试验采用免疫组化方法检测球虫感染鸡肠道组织中CD4^＋、CD8^＋T细胞数量,探讨中药“球康”抗球虫的作用机理。试验共设不感染不给药组、不感染给“球康”组（2％拌料）、感染给“球康”组和感染不给药组共4组。感染球虫后第2、4、5、7和9天,每组随机捕杀4只鸡,采取盲肠中段进行检测。结果,雏鸡感染球虫后,盲肠组织中CD4^＋、CD8^＋T细胞数量显著高于不感染组,感染给中药“球康”组鸡CD4＋T细胞数量在第2,4,5和9天均高于感染不给药组,在第4天和第5天差异显著（P＜0．05）;CD8＋T细胞数量在第2,5,7和9天高于感染不给药组,第5天差异显著（P＜0．05）,第7天达到最高峰。说明中药“球康”通过增加球虫感染鸡肠道黏膜CD4^＋、CD8^＋T细胞数量,提高细胞免疫水平,以增强机体对球虫的抑杀作用。     

紫锥菊、黄芪对感染IBDV雏鸡胸腺、小肠中CD4~＋、CD8~＋ T淋巴细胞动态分布的影响

将14日龄雏鸡随机分为3组,A组灌服1 mL的紫锥菊、黄芪合剂,B、C组灌服生理盐水,连续灌服7 d。21日龄时A、B组雏鸡接种传染性法氏囊病病毒（IBDV）,用免疫组化法观察雏鸡胸腺、小肠中CD4＋、CD8＋T淋巴细胞动态分布的变化。结果表明,用药组和攻毒对照组相比较,CD4＋T淋巴细胞差异显著（P〈0.05）,但是CD8＋T淋巴细胞差异不显著（P〉0.05）,与空白对照组相比CD4＋淋巴细胞显著增多。胸腺、小肠中24日龄时CD4＋、CD8＋T细胞数量较其他日龄差异显著（P〈0.05）。总试验期胸腺中CD4＋、CD8＋含量是所测总数的60%。表明紫锥菊、黄芪对机体免疫有显著增强作用,以胸腺中CD4＋、CD8＋含量多于小肠,能显著降低IBDV对机体造成的损伤。     

柔嫩艾美尔球虫（E．tenella）感染鸡IsG生成细胞及血清IgG变化

为了探明鸡球虫保护性免疫机制，通过人工复制的鸡球虫病鸡，利用免疫组化技术和斑点酶联免疫吸附试验（Dot-ELISA），分别检测了柔嫩艾美耳球虫（E．tenella）初次感染雏鸡后，盲肠局部和免疫器官中IgG生成细胞数的动态变化，循环血液中特异性IgG水平的动态变化；雏鸡母源抗体的动态变化和不同抗体水平雏鸡的抗球虫能力。结果表明：（1）攻毒后雏鸡盲肠粘膜、脾脏、法氏囊、盲肠扁桃体中的IgG生成细胞早于第2～3d（d）开始增殖，在第9～12d达到峰值，随后即开始下降，盲肠扁桃体中的IgG生成细胞数在第22d仍高于对照组。（2）雏鸡感染E．tenella后第6d即可在循环血液中检测到特异性IgG，于第18d达到峰值，第30d降至感染后第7d时的水平。（3）特异性母源抗体IgG水平高的雏鸡，抗球虫水平高。雏鸡母源抗体IgG水平随日龄增长逐渐下降，同时雏鸡的抗球虫水平也随之降低，母源抗体IgG水平与抗球虫能力有明显的正相关性。     

H5N1亚型禽流感病毒感染SPF雏鸡免疫器官变化

为了探讨H5N1禽流感病毒(AIV)感染对SPF雏鸡免疫器官细胞免疫功能的影响。以7日龄SPF雏鸡为研究对象,应用组织化学技术结合病理学方法,通过T细胞数量、增殖功能、CD4~+和CD8~+亚型数量及其比值变化的检测,对H5N1亚型AIV感染SPF雏鸡后,免疫器官细胞免疫变化进行了较系统研究。结果发现,H5N1亚型AIV感染SPF雏鸡后3～7 d,其胸腺、脾脏、腔上囊无论是T细胞数量还是胸腺和脾脏T细胞对Con A的增殖功能,以及CD4~+和CD8~+T细胞数均显著低于对照雏鸡。病毒感染雏鸡后1～5 d,CD4~+/CD8~+T细胞比值也显著低于对照雏鸡;AIV感染雏鸡全部发病,呈现典型AIV感染症状,死亡率为40%。表明AIV感染所致雏鸡免疫器官细胞免疫功能低下,是AIV免疫致病机制的重要环节。     

中药复方连翘对感染法氏囊病毒雏鸡免疫功能的影响

160只7日龄健康岭南黄鸡随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组,每组40只,Ⅰ为正常对照组、Ⅱ为感染病毒组、Ⅲ为中药复方治疗组、Ⅳ为中药复方制剂组,Ⅱ、Ⅲ组均于8日龄感染传染性法氏囊病毒（IBDV）,Ⅲ、Ⅳ以20g·kg^-1单剂量灌服中药复方连翘汤。分别于试验后第7、14、21、28日龄采外周血及免疫器官法氏囊和脾脏,测定血细胞的吞噬能力、外周血T淋巴细胞的百分率和T淋巴细胞的转化率,流式细胞仪测定鸡外周血和脾T淋巴细胞亚群CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋T细胞的含量;放血致死称体质量、脾和法氏囊质量,计算免疫器官指数。在感染IBDV7d后取脾脏和法氏囊组织,制备组织样品进行组织学及透视电镜观察。结果表明：中药复方连翘制剂可使雏鸡外周血细胞的吞噬能力、T淋巴细胞的百分率和T淋巴细胞的转化率、法氏囊和脾脏的质量明显提高,对感染IBDV后免疫器官法氏囊和脾脏有明显的改善和恢复作用,提高外周血和脾淋巴细胞中CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋T细胞百分率,改变CD4^＋／CD8^＋比值促进对机体免疫系统的调控。感染病毒组的上述指标显著下降,中药复方连翘治疗组与感染病毒组相比能显著提高上述指标。     

禽传染性支气管炎脂质体、壳聚糖/DNA疫苗免疫效果比较研究

将制备的禽传染性支气管炎脂质体／DNA疫苗和壳聚糖／DNA疫苗，分别以肌肉注射（i．m）和滴鼻、点眼（i．n）两种途径免疫健康雏鸡，以裸DNA疫苗为对照，采用流式细胞仪（FACS）及间接ELISA分别对免疫鸡外周血中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数及特异性IBV血清抗体IgG的动态变化进行检测，并于免疫后35d进行攻毒，结果显示：（1）CD4^＋T淋巴细胞数，所有试验组在免疫后1～3周左右均高于对照组（P〈0．01或P〈0．05），各试验组间，脂质体／DNA疫苗肌肉注射途径在免疫后10d后高于壳聚糖／DNA疫苗，但仅在第15天差异显著（P〈0．05），而滴鼻、点眼途径则相反；（2）所有试验组CD8^＋T淋巴细胞数仅在免疫后第15天与对照组差异显著（P〈0．05），各试验组间无显著差异；（3）所有组间特异性IBV血清抗体IgG动态变化差异不显著；攻毒后脂质体／DNA疫苗肌肉注射组无鸡只死亡，其他试验组有4％或8％死亡率，均显著低于对照组（12％）。由此可见，脂质体和壳聚糖均为DNA疫苗良好的佐剂或载体，且脂质体／DNA疫苗肌肉注射的免疫效果优于壳聚糖／DNA疫苗。     

米糠多糖对免疫抑制鸡外周血CD4~+和CD8~+ T淋巴细胞亚群的调节作用

为探讨米糠多糖对免疫抑制鸡免疫功能的调节作用,采用流式细胞技术检测了环磷酰胺和传染性法氏囊病毒诱导免疫抑制鸡在服用米糠多糖(剂量为150 mg/kg)和不服用米糠多糖情况下,外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群数量的动态变化。结果显示,米糠多糖能够抑制环磷酰胺和传染性法氏囊病毒处理鸡外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞数量的降低;提高健康雏鸡外周血中CD4+T淋巴细胞比率,对CD8+T淋巴细胞作用不明显。     

雏鸡感染柔嫩艾美尔球虫局部黏膜免疫细胞的动态变化

本试验采用免疫组化法检测柔嫩艾美尔球虫感染雏鸡后盲肠黏膜sIgA+细胞和T细胞亚群的动态变化。结果发现:sIgA+细胞和CD4+T细胞数量在感染球虫后第2天就明显升高,第5天达到高峰,随后逐渐下降。而CD8+T细胞在感染球虫后第4天,才显著增加,感染后第7天达到高峰。表明雏鸡感染球虫后,机体能迅速启动黏膜免疫应答,不同的免疫细胞在抵抗柔嫩艾美尔球虫感染不同阶段发挥不同的作用。     

药物对球虫感染鸡血液及生化指标的影响

1日龄艾维因肉鸡分为 4个组 ,即中药组、马杜霉素组、感染不给药组和不感染不给药组 ,每组 2 0只。中药组从 1日龄开始即投喂含 0 .1%中草药复方制剂 (由绞股蓝皂甙、去油鸦胆子仁等组成 )的饲料 ;马杜霉素组从 12日龄起投喂含马杜霉素 5 mg/ kg的饲料。前 3组于 14日龄感染鸡柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊。卵囊攻击前及攻击后 4、7d分别采血 ,测定血液红细胞数、血钾、血钠、血磷、血清白蛋白和血清总蛋白含量。结果表明 ,卵囊攻击后 4、7d,感染不给药组的红细胞数显著低于其他各组 (P<0 .0 5 ) ,卵囊攻击后 7d,血钾浓度显著高于其他各组 (P<0 .0 5 ) ,血清白蛋白和血清总蛋白显著低于其他各组 (P<0 .0 5 ) ;卵囊攻击后 7d,中药组血液红细胞数显著低于不感染不给药组 (P<0 .0 5 ) ,但显著高于感染不给药组 (P<0 .0 5 ) ;马杜霉素组的各项测定指标与不感染不给药组相比无显著差异 (P>0 .0 5 ) ;卵囊攻击后 ,各组间的血磷和血糖值无显著差异 (P>0 .0 5 )。结果提示 ,药物能抵抗球虫感染 ,血液各项指标得以保持相对恒定。     

青蒿组方对球虫感染雏鸡血液中CD4^+和CD8^+T淋巴细胞的影响试验

为研究青蒿组方中药对鸡免疫力的影响,试验选取14日龄三黄鸡120只,平均分为4组:感染给药组(1组),感染不给药组(2组),不感染给药组(3组),不感染不给药组(4组).感染组人工接种柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊.接种后第4、7、10 d运用流式细胞仪测定各组鸡血液中CD4^+、CD8^+T淋巴细胞值及二者的比值.结果:1组CD4^+、CD8^+T淋巴细胞值及其比例在接种后第4、7、10 d均高于2组,差异显著(P<0.05);2组CD4^+、CD8^+T淋巴细胞平均比值低于其他3个组.结论:青蒿组方中药可促进鸡血液中CD4^+、CD8^+T淋巴细胞生成,进而增强机体的免疫功能.     

刺五加多糖对雏鸡脾脏中CD4+ 和CD8+T淋巴细胞定位分布的影响

为了研究刺五加多糖（ASPS）对雏鸡脾脏中CD4+和CD8+ T淋巴细胞定位分布的影响,从组织学角度评价ASPS对脾脏的免疫调节作用,试验将1日龄海兰褐公雏饲养至7日龄时选取150只,随机分为3组：空白对照组、ASPS低剂量组（ASPSL）和高剂量组（ASPSH）,每组50只,所有组每天注射1次,连续注射3天。免疫后的第7、14、21和28天分别取其脾脏制作冰冻切片,采用免疫组织化学方法检测CD4+和CD8+ T淋巴细胞的定位分布。结果显示,与空白对照组比较,免疫注射后21天和28天时ASPSL组和ASPSH组CD4+ T淋巴细胞的数量均显著增加（P<0.05）,而且ASPS能够促进红髓中CD4+ T淋巴细胞向动脉周围淋巴鞘迁移,从而使单个动脉周围淋巴鞘面积较对照组明显增加,而ASPS对脾脏中CD8+ T淋巴细胞的数量和分布无明显影响。由此可知,ASPS能够通过影响脾脏中CD4+ T淋巴细胞的定位分布发挥免疫调节作用,这对于进一步揭示ASPS的免疫调节机制具有重要意义。     

Immune response to Encephalitozoon cuniculi infection in laboratory mice.

The study was performed to determine the immune response to Encephalitozoon cuniculi infection in immunocompetent mice during 120 days of experiment. Mice infected with E. cuniculi had an increased number of CD4+ T cells up to Day 20 post infection (p.i.), but counts of CD8+ T lymphocytes were significantly lower up to Day 90 p.i. in peripheral blood. Blood monocytes were significantly increased on the Day 60 and Day 120 of infection. A lack of significant decrease of CD4+ T cells may be considered as an important event in the immune response to E. cuniculi infection in immunocompetent mice.     

AA肉鸡血液CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞的变化规律

采用流式细胞仪检测1、3、5、7、14、21、28、35、42、49日龄AA肉鸡血液中的CD3、CD4、CD8阳性T细胞比例。研究结果表明:1～5日龄T细胞逐渐进入血液参与细胞免疫,7、21日龄注射疫苗起免疫应答作用,28日龄后基本形成稳固的细胞免疫水平。     

Lymphocyte subpopulations in peripheral blood of lambs experimentally infected with Pasteurella haemolytica.

The lymphocyte subpopulations in peripheral blood obtained from eleven lambs experimentally infected with Pasteurella haemolytica were compared with those obtained from eight control lambs by flow cytometry, using a panel of monoclonal antibodies against specific lymphocyte epitopes. Experimental infection with P. haemolytica was characterized by a transient but significant reduction in SBU-T1+ (CD5+) T cells and SBU-T4+ (CD4+ or helper) T lymphocytes (P less than 0.05) and a significant rise in lymphocytes which did not express the LCA p220 epitope and the pan T cell surface marker (CD5-LCA p220-) ("null"). The reductions in CD5+ and CD4+ lymphocytes occurred 24 h after experimental infection, returning to preinoculation levels 5 days post inoculation (DPI). Five to 9 days after experimental infection, there was a significant increase in the number of lymphocytes, which expresses the pan T cell surface marker (CD5+) but which were CD4-CD8-. Lymphocyte transformation responses to the mitogen phytohaemagglutinin (PHA) were significantly reduced 24 h after experimental infection with P. haemolytica (P less than 0.05).