中国江、浙地区栽培大麦遗传资源的RAPD研究

采用随机扩增多态性（RAPD）标记，探讨了我国部分栽培大麦品种的遗传背景。结果表明：200个随机引物中，有30个引物扩增出的产物具有多态性，30个引物共扩增出223条谱带，其中130条谱带具有多态性，每个引物可扩增出2~9条多态性谱带，平均4.19条。67个大麦品种平均表型多样性值0.369，裸麦的表型多样性高于皮麦的表型多样性     

罗田迟熟板栗品种ISSR遗传分析

为研究罗田迟熟板栗品种种质资源遗传信息,采用ISSR分子标记技术,对‘桂花香’、‘九月寒’等8个板栗品种分类鉴定及亲缘关系进行分析。(1)ISSR-PCR反应体系及引物筛选。选择了条带的数量多和清晰度高的反应体系,应用‘九月寒3号’筛选前期设计的21条ISSR引物,淘汰扩增效果差、带型不易辨认的引物,最终选定7条引物用于迟熟板栗品系的分析;选取的7条ISSR引物总共扩增出140条清晰、重复性较好条带,其中,多态性条带有106条,多态性条带比率达75.7%。(2)应用NTSYS 2.10e软件进行UPGMA法聚类分析,在相似系数0.45处将8个板栗品种大致分为2类。结果显示,‘羊毛栗’、‘桂花香2号’与其他板栗品种在遗传上有较大差异。     

利用SSR引物通用性分析杨柳科树种遗传多样性

利用SSR引物的种间通用性,本研究分别从杨属和柳属中各随机筛选出10对SSR引物,对17个杨树品种和20个柳树品种的遗传关系进行了分析。结果表明,18对引物在杨树品种有扩增,共扩增出155条多态性谱带,多态性比率为93.4%,平均每对引物扩增出8.6条谱带;16对引物对在柳树品种有扩增,共扩增出120条多态性谱带,多态性比率为91.6%,平均每对引物扩增出7.5条谱带。筛选出了14对杨柳树通用引物,14对通用引物可以将37个供试材料分成两大类,一类为杨树树种,一类为柳树树种,与传统的植物学分类相符。     

西瓜二倍体及同源多倍体SRAP多态性分析

本文采用SRAP分子标记对不同倍性西瓜的多态性进行了分析.用25对引物组合对西瓜不同倍性材料中扩增,其中18对引物组合共获得676条谱带,平均每对引物组合产生37.6条谱带.其中多态性谱带共12条,5条为2×特有带,4条为3×特有带,3条为4×特有带.结果表明不同倍性西瓜之间SRAP多态性较低.     

9份湖南本土牡丹资源的形态学和ISSR分子标记分析

本研究利用形态学指标和ISSR分子标记对9份湖南本土牡丹资源进行亲缘关系分析,根据9份湖南本土牡丹资源的22个主要性状的形态学聚类分析,Q型聚类分析的结果表明:9份湖南本土牡丹资源分成两大类:第一大类为‘凤优4号’、‘凤丹白’、‘凤丹粉’、‘杨山牡丹’、‘宝庆红’、‘凤优2号’;第二大类为‘凤优1号’、‘凤优3号’、‘凤优5号’;ISSR分子标记分析的结果表明:用13条引物共进行扩增出223条谱带,其中多态性条带213条,多态性比例95.2%,通过NTSYS2.1进行聚类分析,在遗传相似性系数为0.54时,9份湖南本土牡丹资源可分为两大类,第1大类包括‘宝庆红’和‘凤优5号’;第2大类包括‘杨山牡丹’、‘凤丹白’、‘凤丹粉’、‘凤优1号’、‘凤优2号’、‘凤优3号’和‘凤优4号’。ISSR分子标记的遗传聚类分析结果与形态学的遗传聚类分析结果有一定的差异。综合以上,可为湖南本土牡丹种质资源开发利用和耐湿热的新品种育种奠定基础。     

澳洲坚果种质资源的SRAP分析及指纹图谱构建

为了分析澳洲坚果种质资源的遗传多样性及其亲缘关系,加速澳洲坚果种质的遗传改良和新品种选育,本研究以45份澳洲坚果为材料,利用相关序列扩增多态性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)分子标记对其基因组扩增并进行遗传多样性分析。结果表明24对引物组合中能筛选出多态性较好的引物10对,利用这10对引物在45份澳洲坚果中共扩增出63条谱带,其中多态性条带47条,多态性比率74.60%。45份澳洲坚果种质资源的遗传相似系数范围为0.5873?0.9683,均值0.7778。UPGMA聚类分析表明:在遗传相似系数为0.785处可将45份澳洲坚果种质资源划分为6个类群,其中,‘黔澳1号’和‘黔澳3号’之间的遗传相似系数最大,高达0.9683,说明这两种坚果资源遗传背景相似,‘兴澳1号’和‘黔引36’号间的遗传相似系数最小,仅为0.5873,说明二者亲缘关系较远。本研究表明了SRAP技术适用于澳洲坚果种质资源的遗传多样性分析且45份澳洲坚果间的遗传变异较为丰富,为澳洲坚果种质资源的挖掘、遗传改良和进一步的分子辅助育种提供了科学依据。     

应用ISSR分子标记绘制红麻种质资源DNA指纹图谱

以6份红麻种质资源为材料, 对UBC807~UBC80等80个ISSR引物进行筛选, 筛选出多态性好的ISSR引物20个。利用这20个ISSR引物扩增来自国内外84份红麻种质资源, 共获得230条谱带, 平均每个引物扩增出11.5条谱带, 其中多态性谱带185条, 多态性条带比率为80.43%, 表明供试的红麻种质资源遗传多样性较丰富。以供试84份红麻种质资源的ISSR扩增谱带为基础, 建立了供试材料扩增条带指纹数据库的Excel文件。根据指纹图谱唯一性原则, 采用自行开发的DNA指纹数据分析软件, 再从20个多态性好的ISSR引物中遴选出UBC 813、UBC 825、UBC 836、UBC 888和UBC 889引物, 绘制出82个红麻种质资源的DNA指纹图谱, 为红麻种质资源分子身份证的构建奠定了基础。     

西洋梨二倍体及其人工诱导同源四倍体遗传差异的SSR分析

以西洋梨‘丰产’二倍体及其10个同源四倍体株系为材料,通过微卫星(SSR)分子标记技术对西洋梨二倍体与同源四倍体之间的遗传差异性进行了研究。应用10对SSR引物对11份材料进行扩增,共扩增出23条谱带,其中有8条呈多态性,多态性比例为34.78%;10对引物中有3对引物为多态性引物。聚类分析显示,不同同源四倍体株系与二倍体的遗传差异大小亦不同;在10个同源四倍体株系中有3个株系扩增的条带与二倍体完全相同,7个同源四倍体株系与二倍体相比产生了差异性条带。研究结果表明,西洋梨二倍体与其同源四倍体之间以及10个同源四倍体株系之间在DNA水平上表现出了一定的多态性。本研究能够为进一步进行西洋梨多倍体的育种实践提供理论指导。     

‘寒富’ב岳帅’苹果杂交后代遗传多样性的SSR分析

本研究通过SSR标记,分析‘寒富’ב岳帅’杂交后代的遗传多样性。研究结果显示:20条SSR引物共扩增出54条带,其中多态性条带49条,多态性比率为90.7%,供试样品的基因多样性(H)和Shannon信息指数(I)分别为0.52和0.83。研究结果表明通过杂交,‘寒富’ב岳帅’杂交组合发生了基因的分离和重组,产生了丰富的遗传变异,可为今后育种提供优异种质材料。     

食用羽衣甘蓝‘沪羽甘1号’品种选育及其亲本材料DNA指纹图谱构建

食用羽衣甘蓝新品种‘沪羽甘1号’是利用羽衣甘蓝胞质雄性不育系与高代自交系通过常规育种技术选育而成的F1代杂交种,2019年通过上海市农作物品种审定委员会认定。为进一步推广和保护该品种,以‘沃特斯’品种为对照,比较研究了‘沪羽甘1号’的特征特性,并利用ISSR分子标记技术构建了‘沪羽甘1号’亲本的DNA指纹图谱。与对照‘沃特斯’相比,‘沪羽甘1号’具有较高的营养价值,且具有早熟、抗黑腐病的特点。‘沪羽甘1号’蛋白质、VC、纤维素、水分和可溶性固形物的含量分别为20.7%、95.1 (100 mg/kg)、10.8%、76.1%和8.8%。从80个ISSR引物中筛选出8条核心引物在‘沪羽甘1号’父本‘HL2250-8’和母本‘CMS-015-319’中分别扩增出10和13条多态性条带,分别选择其中的5和7条谱带构建‘HL2250-8’和‘CMS-015-319’的DNA指纹图谱。该研究结果为‘沪羽甘1号’推广和品种保护提供了科学依据。     

基于SRAP分子标记的11份柑橘种质材料遗传多样性分析

为分析11份柑橘种质材料的遗传多样性,本研究以7份沙糖橘种质以及4份其他柑橘种质为试验材料,利用SRAP分子标记进行分析,并用UPGMA法进行聚类。结果表明:160对引物组合筛选出20对引物组合扩增条带清晰,11份种质材料两两之间遗传相似系数在0.322 1~0.931 6之间。沙糖橘和金葵蜜橘间的遗传相似系数最大,为0.931 6;姑婆山野生元橘和宫川间的遗传相似系数最小,为0.322 1。聚类结果显示,在相似系数为0.861 9时,早熟沙糖橘、沙糖橘、金葵蜜橘、灯笼沙糖橘、八月橘聚为一组,在0.810 8时与红皮酸橘聚为一组,继而再与别的柑橘品种聚为一组。金葵蜜橘与沙糖橘间不同引物扩增的电泳条带存在特异性,证实了金葵蜜橘是沙糖橘的芽变品种。灯笼沙糖橘是沙糖橘变异新类型,二者间遗传相似系数为0.921 1,不同引物扩增结果存在特异性条带,证实了灯笼沙糖橘是沙糖橘的芽变新类型,可以登记为新品种;根据遗传相似系数、聚类分析、不同引物扩增产物的电泳结果推测沙糖蜜柑是沙糖橘和温州蜜柑的自然杂交后代,可以登记为新品种;姑婆山野生元橘与其它柑橘材料亲缘关系较远,也佐证了姑婆山野生元橘比道县野橘更为原始,是一个独特的、原始的宽皮柑橘类型;在7份沙糖橘材料及4份其它柑橘材料中,沙糖橘与红皮酸橘亲缘关系最近,二者在遗传相似系数0.822 5处聚为一类,由此推测沙糖橘有可能由红皮酸橘进化而来。目前关于沙糖橘遗传多样性方面的研究较少,本研究结果可为沙糖橘的遗传多样性以及不同沙糖橘品种的来源和亲缘关系研究提供理论依据。     

南丰蜜橘胚性愈伤组织诱导及其转化研究

摘要∶南丰蜜橘是原产于中国的古老柑橘品种,其果实皮薄而肉甜,深受消费者喜爱,当前南丰蜜橘的品质发生劣变,影响了其商品价值。为采用基因工程育种以改善南丰蜜橘品质,通过诱导其愈伤组织并以其为试材进行了转基因研究。南丰蜜橘自种子实生苗下胚轴处长产生出愈伤组织,挑选胚性愈伤组织进行增殖后,采用根癌农杆菌介导法进行开花相关基因AP1的转化。结果获得22团抗性愈伤组织,平均产出率为7.3团/皿,表明该品种有较高的转化率。抗性愈伤组织经PCR分析、Southern blot检测证实为转化子。本研究结果表明南丰蜜橘胚性愈伤组织是基因工程改良的良好受体,可用于其它基因的转化研究。     

铝胁迫对柑橘实生幼苗生长的影响

每天用含0、0.2、0.6、1.0和1.6 mmol/L AlCl3•6H2O的1/4 Hoagland营养液浇沙培茶枝柑(Citrus reticulata)、芦柑(C. reticulata)、福橘(C. reticulata)、四川红橘(C. reticulata)、文旦柚(C. grandis)、尤力克柠檬(C. limon)、雪柑(C. sinensis)、酸橙(C. aurantium) (来自湖北)、枸头橙(C. aurantium) (来自浙江)、红木黎檬(C. limonia)、枳壳(Poncirus trifoliata)和枳柚（P. trifoliata × C. grandis）等12个柑橘种类品种实生幼苗3个月。结果表明：雪柑、茶枝柑、芦柑、福橘、四川红橘、尤力克柠檬和枳的耐铝性较强,即使在最高铝（1.6 mmol/L）处理下,其根系、地上部和单株干重均与对照无显著差异;枸头橙、酸橙、红木黎檬和枳柚的耐铝性较差,在最高铝（1.6 mmol/L）处理时,其根系和/或地上部的生长均会受到不同程度的抑制;文旦柚耐铝性最差,最低铝浓度（0.2 mmol/L）处理时,其根系和单株生长量就显著下降。铝胁迫引起茶枝柑、福橘、四川红橘、酸橙和枳实生苗根冠比增加,但对芦柑、枸头橙、尤力克柠檬、红木黎檬、文旦柚和枳柚实生苗根冠比无显著影响;除最低铝处理时雪柑根冠比降低外,其它处理之间无显著差异。     

Genetic relationships among grapevine varieties grown in different French and Spanish regions based on RAPD markers

The genetic relationships among 32 white grapevine varieties (Vitis vinifera L.) grown in different French and Spanish regions were surveyed by using RAPD markers. Two hundred and eight clear and unambiguous RAPD markers were amplified by using 33 primers previously selected. Genetic relationships were established by UPGMA cluster analysis and also by studying RAPD low frequency bands. Three groups of varieties were clearly defined. The stability of the genetic structuration was surveyed by Student t-test and the confidence for certain nodes of the dendrogram was confirmed by bootstrap method. Varieties were separated in clear geographical groups with Atlantic or Mediterranean influence. Some of them were classified according to a common cultivation area and ampelographic characters, suggesting a common origin. In addition, ‘Albariño’, ‘Caíño Blanco’ and ‘Loureiro Blanco’ from Galicia (Spain) and ‘Melon’, ‘Chardonnay’ and ‘Aligoté’ from Burgundy (France) were closely related varieties. Two new closely related couples were defined as ‘Godello’ and ‘Verdejo’, and ‘Malvar’ and ‘Malvasía’.     

湖南岳阳地区柑橘黄龙病PCR检测

为确诊近年在湖南岳阳部分柑橘产区发生的一种使柑橘叶片斑驳、果实变小及全株矮化,甚至枯死的传染性病害,摸清病源来源,采用多聚酶链式反应(PCR)技术对该地区出现的柑橘黄龙病疑似症状植株进行了检测。结果表明,岳阳华容县南山乡、华容胜峰乡、华容西湖乡从福建黄龙病疫区引进的琯溪蜜柚,PCR扩增带谱为563 bp,与阳性对照一致,存在柑橘黄龙病病菌;在岳阳麻糖春风同一果园中以宫本为基砧高接了琯溪蜜柚（福建引进）的植株,PCR扩增带谱为563 bp,与阳性对照一致。未高接换种宫本无扩增带谱,与阴性对照一致,无柑橘黄龙病病菌;由岳阳本地繁殖的苗木椪柑、脐橙、未高接宫本无扩增带谱,与阴性对照一致,无黄龙病危害。通过本研究可知,湖南岳阳地区存在柑橘黄龙病危害,并为首次发现,但病源主要来源福建黄龙病疫区调进的未脱毒琯溪蜜柚植株,目前传播方式主要是高接放种。     

柑橘果实发育成熟中果肉游离糖、 肌肌醇及钾含量的变化

以龟井（无籽）温州蜜柑和鄂柑1号（有籽）橘为试材，对果实发育成熟过程中果肉游离糖（果糖、葡萄糖和蔗糖）、肌肌醇及钾含量变化进行了测定。结果表明：(1)果实增大初期鄂柑1号果肉果糖和葡萄糖含量明显上升，蔗糖变化小，肌肌醇却趋下降，进入果实增大中后期，蔗糖含量显著上升，其它变化小；而龟井的果糖、葡萄糖和蔗糖均于果实增大初期和中期出现明显积累，肌肌醇除在增大中期出现一峰值外趋于平稳；采前果实发育期两品种总糖含量变化趋势均与各自的蔗糖较一致；(2)采后贮藏期内两品种果肉总糖和肌肌醇含量均趋于稳定，而二者的果糖、葡萄糖和蔗糖含量变化趋势却均趋相反；(3)两品种果肉钾含量均在果实增大期内出现明显上升并居相对较高水平。     

33份“红橘”种质资源的ISSR分析

为分析"红橘"种质资源,利用ISSR分子标记对33份"红橘"种质资源进行遗传多样性分析,利用NTsys 2.10e构建UPGMA树状图,从27条引物中筛选出14条,对33份"红橘"种质资源的DNA进行PCR扩增,得到148条谱带。其中多态性条带120条,多态位点百分率80.53%。33份"红橘"种质资源的遗传相似系数在0.570~0.970之间。以遗传相似系数0.780为阈值,将33份"红橘"种质资源划分为7个组(A,B,C,D,E,F,G)。该研究结果表明33份种质资源遗传差异较大,ISSR能较好地将它们区分开,有助于福橘果实品质改良和福建省红橘种质资源的发展。     

红叶李与安哥诺李及其杂交子代的RAPD分析

利用随机扩增多态性DNA分子标记（RAPD）技术对红叶李与安哥诺李及其杂交子代中的10株植株进行遗传多样性分析。从100个随机引物中筛选出15个引物,然后对所有子代进行分析。利用PopGene3.2软件分析所得图谱的多态位点数、多态位点百分率、Shannon信息指数(I)、Nei's基因多样性指数(H)、遗传距离和遗传一致度。用DPSv2.0软件依据所得到的遗传距离,按照非加权平均距离法（UPGMA）构建树状图。结果表明：15个随机引物共扩增出多态条带89个,总的多态位点百分率为93.54%,平均Shannon信息指数为0.4298,平均Nei's基因多样性指数为0.3574,说明杂交后代具有较丰富的遗传多样性。从树状图可以看出杂交子代的遗传变异较丰富,其中1号植株与母本亲缘关系最近,最有可能稳定遗传母本的红叶性状。     

Genetic diversity and phylogenetic relationships among accessions of hop, Humulus lupulus, as determined by amplified fragment length polymorphism fingerprinting compared with pedigree data

DNA fingerprinting using amplified fragment length polymorphisms (AFLPs) was successfully employed to detect genetic relationships and variability among 90 hop cultivars and breeding lines comprising a collection of the world's hop germplasm. Seven AFLP primer combinations produced a total of 347 fragments of which 151 (43.5%)) were polymorphic. One‐hundred and thirty informative, highly reproducible DNA polymorphisms were used to estimate the genetic similarity (GS) which varied between 1.0 (e.g. ‘Saazer’ vs. ‘Tettnanger’) and 1.17 (‘Columbus’ vs. ‘Tettnanger’, ‘Spalter’ and ‘Saazer’). UPGMA (unweighted pair‐group method with arithmetic averages) clustering revealed two main clusters, reflecting the two main sources of origin and the two main breeding objectives: one cluster of mainly European origin representing the aroma pool and a second cluster associating accessions with European germplasm infiltrated by wild American genes with less aroma quality, but a higher bittering potential. Each main branch was composed of four or three subclusters with subgroups, respectively. Assignment of almost all genotypes in the dendrogram was consistent with the pedigree data as far as they are known. Consequently, AFLPs are shown to be suitable for assessing the genetic variability in hop germplasm and are useful for describing the genetic relationships among cultivars and accessions, which allows phylogenetic questions to be addressed.     

葡萄种质资源亲缘关系的SSR分析

对供试材料进行亲缘关系分析,为葡萄分类、种质鉴定和育种提供重要依据。利用SSR标记对新疆44个相对适宜制干葡萄品种（系）材料进行了遗传多样性分析。从52对SSR引物中筛选出8对用于葡萄的SSR扩增,共扩增出190条带,均为多态性条带,多态性百分率为100%。多态性信息含量指数(PIC)变幅为0.6868~0.9640,平均为0.9084。根据SSR扩增结果,Jaccard相似性系数分析表明44份葡萄材料的遗传相似系数的变异范围为0.63~0.92,平均遗传相似系数为0.775。UPGMA聚类分析表明,在遗传相似系数0.654处,可将44份供试材料分为5个类群：第1类包括‘奥迪亚无核’、‘赫什无核’等22份葡萄;第2类包括‘无核白鸡心’、‘葡萄园皇后’等7份葡萄;第3类包括‘美丽无核’、‘艾麦纳’等5份葡萄;第4类包括‘黎明无核’、‘红脸无核’等6份葡萄;第5类包括‘白香蕉’、‘波尔莱特’等4份葡萄。SSR标记能比较准确地检测基因型之间的遗传背景与遗传关系,其中亲缘关系较远的不同类群间及亚类间的种质资源可作为杂交育种的亲本。