狂犬病灭活疫苗免疫佐剂的比较试验

本文利用反向遗传操作系统拯救出狂犬病病毒的携带双G基因的HEP-dG株,选用铝佐剂、蜂胶和油乳剂制成3种狂犬病灭活疫苗,进行小鼠免疫试验.试验表明,油乳剂和蜂胶佐剂狂犬病灭活疫苗免疫组效价较高.蜂胶狂犬病灭活疫苗二次免疫产生的抗体水平明显高于首免,油乳剂狂犬病灭活疫苗首免抗体水平与蜂胶狂犬病灭活疫苗二免产生的抗体水平相当.携带双G基因的HEP-dG株具有良好的免疫原性,油乳剂是作为该狂犬病毒株的最适佐剂.     

乳酸杆菌肽聚糖对鸡新城疫油苗和禽流感油苗的免疫增强作用的研究

该试验提取2株乳酸杆菌L．casei zhang和MC2-1的肽聚糖作为佐剂,按不同剂量添加到新城疫油乳剂灭活疫苗及禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗中。用此2种加佐剂的油乳剂灭活疫苗对鸡进行免疫,每组20只,分别于15日龄和28日龄进行新城疫组和禽流感组首免,再分别于首免后2周加强免疫,在二免后的第7天与第14天检测血清抗体HI水平。结果表明,与对照组相比试验各组抗体水平均达到显著或极显著水平,可提高抗体水平2^0.33-2^2.50。随着细菌肽聚糖量的增加,各试验组在提高抗体水平上也增加。2株乳酸杆菌肽聚糖对鸡接种新城疫油乳剂灭活疫苗和禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗具有免疫增强作用。     

鸭大肠杆菌病区域优势血清型疫苗研究报告（Ⅰ报）——疫苗的制备、安全性及免疫效果试验

用鉴定筛选的大肠杆菌接种适宜培养基,将培养物经甲醛溶液灭活后,分别制备氢氧化铝胶灭活疫苗、油乳剂灭活疫苗,经检验合格,用于安全和效力试验,比较两种佐剂制备的灭活疫苗的免疫效力。结果表明,氢氧化铝胶作为佐剂制备区域优势血清型疫苗来预防本地的鸭大肠杆菌病效果更好。     

鸽新城疫(ND)灭活疫苗安全性试验研究

用四批鸡胚尿囊液制备的ND油乳剂(Ⅰ号)灭活疫苗及鸡胚尿囊液、尿囊膜、羊膜、羊水混合制备的油乳剂(Ⅱ号)灭活疫苗和用鸡胚尿囊液制备的ND蜂胶佐剂(Ⅰ号)灭活疫苗及鸡胚尿囊液、尿囊膜、羊膜、羊水混合制备的蜂胶佐剂(Ⅱ号)灭活疫苗分别进行安全性试验观察,15d生长曲线表明,不影响鸽的生长,甚至有提高的趋势.     

禽四种细菌病多联菊粉及油乳剂灭活疫苗的研究

为探讨菊粉对四种常见禽细菌病灭活疫苗的佐剂效应,试验将禽多杀性巴氏杆菌、鸡白痢沙门氏菌、鸡志贺氏菌和鸡绿脓杆菌分别培养至浓度为2×10~(10)cfu/mL,按等比例混合后以终浓度为0.35%甲醛37℃灭活24 h,分别制备油乳剂和菊粉多联灭活疫苗,以动物试验检测其安全性和效力。结果表明:两种灭活疫苗均具有良好的安全性,免疫后抗体水平均呈现上升趋势,且菊粉疫苗组稍高于油乳剂疫苗组。攻毒试验结果显示两种疫苗均可为试验动物提供80%以上的保护率,且菊粉疫苗组略优于油乳剂疫苗组,说明菊粉具有较好的免疫佐剂效应。     

乳酸杆菌DNA对鸡新城疫油苗和禽流感油苗免疫增强作用的研究

提取2株乳酸杆菌L.casei zhang和MG2-1的DNA作佐剂，按不同剂量添加到新城疫油乳剂灭活疫苗及禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗中。用上述2种加佐剂的油乳剂灭活疫苗对鸡进行免疲，每组20只，分别于15日龄和28日龄进行新城疫（ND）组和禽流感（AV）组首免，再分别于首免台2周加强免疫，在二免的第7天与第14天检测血清HI抗体水平。结果表明，与对照组相比，试验各组抗体水平达到显著或极显著水平，可提高抗体水平2^0.16～2^2.67。说明，2株乳酸杆菌DNA对新城疫油乳剂灭活疫苗和禽流感（H5）亚型油乳剂灭活疫苗具有免疫增强作用。     

猪生殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗的制备及安全性试验

用本中心分离鉴定的猪生殖与呼吸综合征(PRRS)强毒株接种Marc-145细胞，制备病毒抗原液，毒价不低于10^-7.0TCID50／0．1mL。经一定浓度的甲醛溶液灭活后与油佐剂乳化制成油乳剂灭活疫苗3批。经对该制品的安全性能测定，结果表明该品对初生仔猪、断奶仔猪及妊娠母猪3倍剂量注射，均未出现不良反应，安全性良好；对母猪的繁殖性能不产生影响。     

鸭病毒性肝炎防治的研究

目的：为防制鸭病毒性肝炎，减少雏鸭的死亡，研制出用于防制该病的油佐剂灭活疫苗。方法：用白油、司本-80、硬脂酸铝作为油相，吐温-80和收获的鸡胚尿囊液作为水相制出油包水型油佐剂灭活疫苗。结果：经试验该油佐剂灭活疫苗安全性可靠，接种后未见异常反应，免疫14d后保护率可达100％。结论：本试验中制得的疫苗具有粘度低、易于注射、乳化完全、稳定性好的优点，便于生产单位应用。     

禽流感(H9亚型)油乳剂灭活苗的研制

将H9亚型禽流感病毒尿囊液经甲醛灭活,以矿物油为佐剂制成灭活疫苗.疫苗物理性状良好,接种鸡无不良反应.接种疫苗后14、21、30、60天攻击同型禽流感病毒,接种鸡全部获得保护.现地试验取得了良好的免疫效果.证明制备的油乳剂灭活疫苗安全,免疫原性良好.     

不同白油佐剂制备的H_9N_2灭活疫苗在SPF鸡上的免疫效果初试验

为了比较不同厂家的注射用矿物白油佐剂的免疫效果,试验采用3个不同粘度的国外白油样品,按照《中华人民共和国兽药典》进行注射用白油质量检验、制备3批H_9N_2油乳剂灭活疫苗,分别以0.3ml/只剂量,胸部肌肉注射接种28日龄SPF鸡,接种后14、21、28、35、42d分别进行疫苗的药物残留吸收检查和血清抗体效价检测。结果表明:3种佐剂疫苗的安全性、稳定性均良好;应用WG40白油佐剂的灭活疫苗,免疫SPF鸡产生的H_9N_2禽流感HI抗体水平优于其它两种佐剂,免疫3周后检测到的H_9N_2禽流感抗体水平均合格,确定WG40为最佳白油佐剂。     

不同白油佐剂制备的H9N2灭活疫苗在SPF鸡上的免疫效果初试验

为了比较不同厂家的注射用矿物白油佐剂的免疫效果,试验采用3个不同黏度的国外白油样品,按照《中华人民共和国兽药典》进行注射用白油质量检验、制备3批H9N2油乳剂灭活疫苗,分别以0.3ml/只剂量,胸部肌肉注射接种28日龄SPF鸡,接种后14d、21d、28d、35d、42d分别进行疫苗的药物残留吸收检查和血清抗体效价检测。结果表明:3种佐剂疫苗的安全性、稳定性均良好;应用WG40白油佐剂的灭活疫苗,免疫SPF鸡产生的H9N2禽流感HI抗体水平优于其它两种佐剂,免疫3周后检测到的H9N2禽流感抗体水平均合格,WG40确定为最佳白油佐剂。     

禽流感（H9亚型）油乳剂灭活疫苗的研究

将H9亚型禽流感病毒尿囊液，经甲醛灭活，以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗，疫苗物理性状良好，接种鸡无不良反应，接种疫苗后14d，食流感病毒HIGMT（Log2)为7.7-7.8，21d为8.9-9.3，于接种疫苗后14、21、30、60d，攻击同型禽流感病毒，接种疫苗鸡全部获得保护，现地实验取得了良好地免疫效果。证明制备的油乳剂灭活疫苗安全，免疫原性良好。     

鸭黄病毒油乳剂灭活疫苗研制及免疫效果测定

通过对5株鸭黄病毒致病性试验和全基因组的生物信息学分析,从中筛选出对开产蛋鸭致病力较强和鸭胚传代稳定的WR株作为种毒株。按照研制灭活疫苗的常规方法制备了鸭黄病毒油乳剂灭活疫苗,菌检合格后经腿部免疫注射7日龄健康雏鸭（1mL／羽）和抗体阴性的健康开产麻鸭（3mL／只）进行疫苗安全性试验,表明所研制的油乳剂灭活疫苗安全、无毒副作用。以3组抗体阴性的健康开产麻鸭分别经胸部1次单剂量免疫接种疫苗不同批次的鸭黄病毒油乳剂灭活疫苗（1mL／只）,免疫后21天经另侧胸部肌注WR株鸭黄病毒1mL／只,攻毒后每天观察蛋鸭产蛋等情况,连续观察14天。结果3个免疫实验组蛋鸭和空白对照组蛋鸭平均产蛋率下降均无差异,且观察期内均未见发病、死亡,观察期满捕杀后均无肉眼可见病变。而未免疫攻毒组蛋鸭减蛋明显,4天内平均产蛋率下降为40．85％,比疫苗免疫组平均产蛋率低39．15％;第5天产蛋率为6．7％,比疫苗免疫组平均产蛋率低82．2％;第6天起停产。以上结果表明,所研制的鸭黄病毒油乳剂灭活疫苗安全性好,对鸭黄病毒强毒具有良好的免疫保护效果。     

猪伪狂犬病灭活疫苗(PRVSX-gE株)对怀孕母猪安全性及繁殖性能的影响

为了确定猪伪狂犬病灭活疫苗(PRVSX-gE株)对怀孕母猪的安全性及繁殖性能的影响,本研究选用3批疫苗对怀孕母猪进行一次单剂量接种、单剂量重复接种及一次超剂量接种的试验。结果显示,肌内注射猪伪狂犬病灭活疫苗(PRVSX-gE株)后,母猪接种部位及全身无不良反应,母猪健康,妊娠正常,无死胎和木乃伊胎,新生仔猪生长发育良好。试验表明,自主研制的猪伪狂犬病灭活疫苗(PRVSX-gE株)对怀孕母猪安全,对怀孕母猪繁殖性能无影响。     

羊源致病性柠檬酸杆菌4种佐剂灭活疫苗的免疫效果比较

为筛选羊源弗氏柠檬酸杆菌灭活菌体疫苗的合适佐剂,本研究以灭活羊源弗氏柠檬酸杆菌LK-1株为抗原分别制备其矿物油疫苗、铝胶疫苗、GEL疫苗和ISA201疫苗。将4种不同佐剂疫苗分别背部皮下免疫小鼠(0.2 mL/只)和颈部肌肉免疫羊(2 mL/只)进行疫苗安全性试验。用4种不同佐剂疫苗分别背部皮下免疫小鼠(0.2 mL/只)两次后使用3 LD50的LK-1株进行腹腔攻击;颈部肌肉免疫羊(2 mL/只)两次后使用2个致死剂量的LK-1株进行耳静脉攻击,比较4种不同佐剂疫苗对小鼠和羊的保护率并对小鼠和羊免疫血清进行微量凝集抗体检测。疫苗安全性试验结果显示,矿物油疫苗导致接种动物出现严重的精神沉郁、食欲减退、以及接种部位发生肿胀坏死和疫苗残留等不良反应;其它3种佐剂疫苗不良反应较轻微。动物免疫试验结果显示,4种佐剂疫苗对小鼠的攻毒保护率分别为85%、50%、80%、100%,对羊的保护率分别为100%、75%、0、100%。4种佐剂疫苗综合比较,ISA201疫苗使接种动物产生最轻微的副反应,而且能产生较高的抗体水平和最强的保护力。本研究为进一步开发羊柠檬酸杆菌病的灭活疫苗奠定基础。     

禽流感细胞灭活疫苗(H9亚型,F株)安全性研究

将实验室试制的禽流感细胞灭活疫苗(H9亚型,F株) (批号:201201、201202)通过颈部皮下注射的方式单剂量、单剂量重复、超剂量接种10日龄SPF鸡进行安全性试验.免疫后连续监测15天,每周称重,用t检验分析对照组和免疫组体重之间的差异显著性.试验结果表明,免疫接种组和空白对照组体重差异不显著,所制备的禽流感细胞灭活疫苗(H9亚型,F株)不影响鸡的生长性能,安全性良好.     

猪圆环病毒2型灭活疫苗佐剂选择

用水包油佐剂Merckinade SDA 25、HS1010和双向佐剂Montanide ISA 206三种不同佐剂分别制成猪圆环病毒2型灭活疫苗，对三种疫苗的稳定性、黏度、免疫仔猪后的安全性及效力进行了比较。试验结果表明，以3 000 r/min离心15 min，三种疫苗均无水析出；三种疫苗的黏度均低于200 cP；三种疫苗按2.0 mL/头的剂量接种21日龄健康易感猪，试验猪体温、采食、饮水、精神状况均正常，均无不良临床反应，剖检后各脏器均无病理变化；加强免疫后21d，各组试验猪采血，检测猪圆环病毒2型抗体效价，结果表明，佐剂MontanideISA206相较MerckinadeSDA25可诱导更高水平抗体效价。攻毒试验结果表明免疫组可以得到100%的保护。根据以上试验结果，确定猪圆环病毒2型灭活疫苗使用Montanide ISA 206。     

小鹅瘟蜂胶灭活疫苗的研究

以蜂胶为佐剂制备小鹅瘟蜂胶佐剂灭活苗,将病毒液灭活后按一定比例加入蜂胶佐剂制备疫苗,并进行疫苗安全性、免疫持续期、效力对比、保存期及区域应用试验,结果表明小鹅瘟蜂胶灭活疫苗安全性好,第5天即产生抗体且抗体持续时间长（90d）,免疫效果远好于油乳剂灭活苗,推广试验也取得了令人满意的结果。     

不同免疫佐剂对猪PCV2灭活疫苗效果的影响

分别用ISA11R、ISA35和ISA28三种水包油型佐剂制备PCV2灭活疫苗样品,并依次小鼠腹腔注射进行免疫效果比较。临床观察、血清抗体检测及免疫攻毒保护试验结果表明:相比矿物油佐剂ISA11R以及矿物油与非矿物油混合佐剂ISA28而言,非矿物油佐剂ISA35制备的疫苗免疫安全性好,免疫保护率高,可作为PCV2灭活疫苗理想的候选佐剂。     

基于家兔模型的纳米蜂胶黄酮对PPV灭活疫苗免疫应答的研究

为了观察纳米蜂胶黄酮对猪细小病毒(PPV)灭活疫苗免疫应答的影响,试验以家兔为模型动物,并以油乳剂为对照,将30只家兔随机均分为3组,第1~2组分别背部皮下注射0.5 m L纳米蜂胶黄酮和油乳剂猪细小病毒灭活疫苗,第3组为对照组注射0.5 m L生理盐水,检测血清抗体效价并观察对体液免疫的影响,测定淋巴细胞增殖及白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)和γ干扰素(IFN-γ)含量并评价对细胞免疫的影响。结果表明:纳米蜂胶黄酮、油乳剂均能提高家兔对PPV灭活疫苗的免疫应答能力,油乳剂提高抗体的效果好于纳米蜂胶黄酮,纳米蜂胶黄酮促进T淋巴细胞增殖和提高细胞因子含量的效果优于油乳剂。说明纳米蜂胶黄酮能增强猪细小病毒灭活疫苗的免疫效果,是一种效果良好的疫苗佐剂。