奶水牛牛分枝杆菌的分离与鉴定

从患疑似结核病的广西奶水牛群中进行牛分枝杆菌的分离和鉴定。共收集了238份临床样品(鼻黏液及牛奶),病料经1.25 mol/mL NaOH溶液预处理后,接种罗氏培养基进行细菌分离。分离菌经进一步纯化后进行抗酸性染色并镜检,镜检后判为阳性的细菌再接种到鉴别培养基上进行鉴别培养,同时,应用PCR方法对镜检为阳性的细菌进行进一步的鉴别检验。结果收集的所有临床样品,经37℃培养后共获得细菌12株。这12株菌经抗酸性染色后镜检都为分枝杆菌阳性,进一步经鉴别培养基鉴定12株菌中有2株为牛分枝杆菌,其余均为非典型分枝杆菌。2株牛分枝杆菌经PCR方法鉴定得以确诊。     

琼脂凝胶免疫扩散试验盒检测绵羊副结核分枝杆菌抗体效果的评价

本研究旨在确定用于检测牛副结核分枝杆菌抗体的琼脂凝胶免疫扩散试验盒是否可用于检测绵羊的抗体。血清来源于用回肠粘膜涂片的抗酸染色，组织学检查或细菌学培养证实有副结核病的２７只绵羊，７只有副结核病症的绵羊，５５只分别来自于５群未感染的绵羊。血清用商品性试验和以前已证实的琼脂扩散试验检测。同时多次检测６年以上的１３只感染绵羊的血清以比较每种方法出现阳性的检测效果。两种方法的检测结果表明，５５只未感染绵羊的血清均为阴性，有副结核病症的３４只绵羊中的３２只为阳性，２只为阴性。从１３只未感染绵羊收集的５４个样本中有５０个结果一致。两次实验结果不一致的４个样分别是１号绵羊１０份样中的第４，８，９份，２号绵羊６份样中的第１份。所有的４个样，商品性试验产生弱阳性结果。但琼扩免疫试验产生阴性结果。由此可知，检测牛副结核分枝杆菌抗体的琼扩试验可以用于鉴别诊断绵羊的副结核病。     

牛副结核病的流行与防制

副结核病是由副结核分枝杆菌引起的主要发生于牛的慢性传染病,其特点是病牛出现顽固性下痢并逐渐消瘦,肠黏膜增厚并形成脑回样皱襞。副结核分枝杆菌为革兰氏阳性小杆菌,具有抗酸染色特性。本菌对热和消毒药的抵抗力与结核分枝杆菌相似。     

琼脂凝胶免疫扩散试验盒检测绵羊副结核分枝菌抗体效果的评价

本研究旨在确定用于检测牛副结核分枝杆菌抗体的琼脂凝胶免疫扩散试验盒是否有竽检测绵羊的抗体。血清来源于用回肠粘膜涂片的抗酸染色，组织学检查或国学培养证这有副结核病的２７只绵羊，７只有副结核病症的绵羊，５５只分别来自于５群未感染的绵羊。血清用商品性试验和以前已证实的琼脂扩散试验检测。同时多次检测６年以上的１３只感染绵羊的血清以比较每种方法出现阳性的检测效果。两种方法的检测结果表明，５５只未感染绵羊的血     

牛副结核病的流行与防制

<正>副结核病是由副结核分枝杆菌引起的主要发生于牛的慢性传染病,其特点是病牛出现顽固性下痢并逐渐消瘦,肠黏膜增厚并形成脑回样皱襞。副结核分枝杆菌为革兰氏阳性小杆菌,具有抗酸染色特性。本菌对热和消毒药的抵抗力与结核分枝杆菌相似。1流行特点本病主要引起牛发病,尤其是乳牛,犊牛易感性更强。羊、驼、马、驴、鹿等动物也可发病。病牛和带菌牛是主要传染源,病菌可经粪便、乳汁和尿等排出,主     

新疆奶牛副结核分枝杆菌的分离鉴定

为进一步确定新疆某规模化牛场疑似奶牛副结核病病原,本研究从PCR检测阳性牛粪便样本中共分离获得4株细菌,对其进行菌落形态观察、抗酸染色镜检以及16S r RNA、IS900特异性基因及亚型分型基因的扩增、序列测定与分析。结果显示,所分离的4株细菌为抗酸染色阳性菌,对其IS900基因及亚型分型基因检测均为阳性,它们的16S r RNA、IS900基因及亚型分型基因之间同源性为100%,与Gen Bank中登录的副结核分支杆菌序列同源性在99%以上,从而确定所分离的4株菌株均为Ⅱ型(牛型)副结核分枝杆菌。     

免疫琼脂扩散试验诊断亚临床型牛副结核的评价

在32个月期间对10个牛群的14个月以上小母牛及成年母牛同时进行粪便细菌学培养和免疫琼扩(AGID)试验,以确定AGID试验诊断亚临床型牛副结核的效果。 在139头牛的粪样中有109头分离到副结核分枝杆菌,同时有28.8%(40/139)为AGID阳性,而在上述109头中有36头为AGAD阳性(33%)。如将屠宰时的结果包括在内,则培养法诊断为感染的117头,其中55头(47%)曾为AGID阳性。AGID假阳性最高上限为2.1%。 据培养的菌落数,AGID阳性的亚临床型感染牛粪中排菌数多(P<0.0001),对感染牛进行重复的细菌培养和AGID试验,均缺乏一致的阳性重复。 48头在犊牛期经副结核分枝杆菌菌苗免疫过的成年牛,有3头为AGID阳性,从其中1头粪便分离到副结核分枝杆菌,这表明在犊牛期免疫过的牛,其AGID假阳性率是低的。 程安春 摘译自 Am J Vet Res,1989,50(4):525～530 汪铭书校     

鹿副结核病的诊断和防治

正鹿副结核病是由副结核分枝杆菌引起的一种慢性肠道传染病,以顽固性腹泻和进行性消瘦、肠黏膜增厚并形成皱褶、难以治愈且侵害4岁以下个体为典型特征。1病原体副结核分枝杆菌是一种短杆菌,无运动性,不形成荚膜和芽孢,在病料和培养基上常成丛排列。革兰氏染色阳性,具有抗酸染色的特性。在添加有抗酸菌死菌体或分枝杆菌生长素的培养基中才能生长。初代分离培养比较困难。本菌对外界环境和消毒药的抵抗     

牛结核病检测方法的研究

1微生物学诊断方法对于开放性牛结核病诊断，采取病牛的病灶、痰、尿、粪便、乳及其他分泌物样品，作抹片或集菌处理后抹片，用抗酸染色法染色镜检．以及分离培养和动物接种等细菌学检查的方法。涂片染色法所需材料、设备简单，操作方法简便，是较为普遍应用于发现和防治结核病传染源的重要诊断依据。细菌培养法是结核诊断的最佳标准。但是，由于此法检出的细菌只能说明有抗酸杆菌，     

国外牛羊副结核病的研究进展

羊牛副结核病是一种抗酸性菌——副结核分枝杆菌(Mycobacterium paratuberculosis)所引起的一种反刍动物的传染病,以慢性腹泻和渐进性消     

诊断牛副结核病的三种血清学试验与粪便培养结果比较

从已知感染副结核分枝杆菌的13群牛(192头)中采集的粪便和血液样品做了补体结合试验(CF)、琼脂凝胶免疫扩散试验(AGID)和酶标记免疫吸附测定(ELISA)三种副结核血清学诊断比较。从36头牛的粪便中分离出了副结核分枝杆菌,23头粪便培养阳性牛 CF 试验的滴度出现疑似或阳性,10头 AGID 试验阳性及     

新疆北疆某规模化牛场奶牛副结核病的检测与分析

为查明导致新疆北疆某规模化牛场奶牛腹泻、消瘦的主要病原菌,本研究采用微生物学与分子生物学方法对采集的患牛粪便进行检测与鉴定。结果显示:2份粪样抗酸染色阳性,IS900基因及亚型分型基因检测阳性,IS900基因与GenBank中多个副结核分枝杆菌序列同源性在99%以上,亚型分型基因与Ⅱ型同源性为99.81%,从而确定2份样本均被Ⅱ型(牛型)副结核分枝杆菌感染。     

绵羊副结核分枝杆菌的分离与分子分型

为了解绵羊副结核病的病原学特征,本研究对PCR检测阳性的绵羊肠系膜淋巴结样品开展细菌分离培养,对分离株进行形态观察,结果显示肠系膜淋巴结样品经培养后出现乳白色菌落;对分离菌株进行抗酸染色镜检后确定为抗酸染色阳性杆菌;PCR扩增该菌IS900基因与亚型分型片段,结果显示,IS900基因及亚型分型检测为Ⅱ型(牛型)副结核分枝杆菌(MAP);多位点短重复序列(MLSSR)和分枝杆菌散在分布重复单位-可变数目串联重复序列(MIRU-VNTR)分子分型结果显示,MLSSR和MIRU-VNTR分子分型数字代码分别为7+555555555和32632129。以上结果表明本研究分离的MAP是一种未曾报道的新基因型菌株,为首次在我国分离的绵羊源II型MAP。本研究为进一步开展绵羊MAP病原学和流行病学调查提供了参考资料。     

迟发型变态反应试验监测银川奶牛结核病的结果分析

2009年—2011年对宁夏银川地区1867头奶牛进行结核病检测,通过迟发型变态反应试验,检出阳性牛22头,阳性率1.17%,剖检后,对病料分别进行抗酸性染色,细菌培养及PCR检测,未发现结核分枝杆菌。     

副结核分枝杆菌MAP0862蛋白的表达及在间接ELISA中的初步应用

本研究的目的是探索副结核分枝杆菌特异性蛋白MAP0862在牛副结核病血清学诊断中的作用,建立牛副结核病特异性ELISA诊断方法。将通过原核表达获得的副结核特异性蛋白MAP0862纯化并定量后作为包被抗原,经过一系列条件优化后初步建立了牛副结核病间接ELISA诊断方法。使用牛副结核阳性血清、牛布病阳性血清、牛结核阳性血清、卡介苗免疫牛血清、牛大肠杆菌阳性血清以及健康阴性牛血清对该方法的验证表明其具有良好的特异性。使用该方法对300份临床血清进行检测,结果表明该方法与IDEXX副结核检测试剂盒的符合率为94.3%。基于副结核特异性蛋白质MAP0862建立的间接ELISA诊断方法能有效检测牛副结核病。     

牛结核病PCR诊断试剂盒的检测试验

应用自制牛结核病PCR诊断试剂盒对贵州省某奶牛场共计150份血样、奶样标本中结核分枝杆菌进行检测,结果显示:PCR试剂盒对111份奶样标本进行检测,8份为阳性,阳性检出率7.2%;PCR试剂盒对39份血样标本的检测,12份为阳性,阳性检出率为30.76%。本试验共计检测贵阳附近某奶牛场1 200头份奶牛,先采用PPD检测牛结核病阳性牛和可疑牛,再用PCR法进行检测,PCR检出阳性牛共计20头份,阳性检出率为1.67%;PPD检出阳性牛24头份,检出率为2%。总之,PCR试剂盒在检测牛结核病不同标本中显示出快速、特异等优点,这为今后牛结核病的检测工作提供了一条新途径。     

在应用酶联免疫吸附试验诊断牛副结核病时消除假阳性反应的方法

建立了检测牛血清中副结核分枝杆菌的特异抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA),在试验过程中探索出一种可以避免在 ELISA 检测副结核分枝杆菌原生质抗原的抗体时,经常遇到的假阳性反应的方法。被检血清来源于副结核分枝杆菌、牛型结核分枝杆菌。堪萨斯分枝杆菌或星形诺卡氏菌感染的牛,经细菌学检查为阴性而副结核补体结合反应阳性及用假结核分枝杆菌感染的羊。预先使用草分枝杆菌吸收后的试验血清,基本上可以消除掉假阳性反应。凡经过这种方法处理的血清,不会影响副结核病牛的 ELISA 抗体水平。试验结果表明预先用草分枝杆菌吸收的血清,可以消除在 ELISA 诊断牛副结核病     

切实掌握奶牛副结核病诊疗技术与方法

牛副结核病又称牛副结核性肠炎、约翰氏病。由副结核分枝杆菌引起,临床上多呈隐性感染,是以持续性顽固性腹泻和渐进性消瘦、泌乳性能降低等为主征的慢性消化道传染病。1病原本病病原菌为副结核分枝杆菌,属革兰氏阳性一短粗杆菌。长0.5～1.5μL,宽0.2～0.5μL。不形成芽孢,无荚膜,无鞭毛。具有抗酸性染色特性,呈红色。在粪便或病料中成团或成丛排列。本菌分离培养生长缓慢。对外界不良环境的抵抗力比结核杆菌要强,在阴冷、潮湿条件下,可长期存活,如在粪土中可存活11个月,在污水中也能存活9个月。对热和常用消毒液敏感,80℃时,1～5m in死亡,…     

结核分枝杆菌疫源追踪的基因检测分析

目的探讨牛源性人结核疫源追踪的基因分析方法。方法采用复方PCR结核杆菌快速鉴定技术,针对特征性分枝杆菌标志基因(MTP40基因、α抗原基因和IS6110),对结核病人和患牛的标本,进行检测。结果患者标本结核分枝杆菌阳性;患牛标本牛分枝杆菌和结核分枝杆菌分别阳性。结论结核病奶牛不仅是人类牛型结核的可能来源,也可能成为人类人型结核的潜在来源。     

羊的结核病、伪结核病和副结核病

1羊结核病 结核病是由结核分支杆菌引起人、畜、禽共患的慢性传染病。本病的病原是分枝杆菌属的3个种,即结核分枝杆菌、牛分枝杆菌和禽分枝杆菌。牛和禽分枝杆菌可感染绵羊,结核分枝杆菌可引起山羊发病。分枝杆菌为革兰氏染色附性菌,一般染色不易着染,常用抗酸染色观察本菌的形态。常用消毒药均可将其杀死,对青霉素、磺胺类药物等均不敏感。