消毒劲对鸡IBDV的杀灭效果

消毒劲对鸡ＩＢＤＶ杀灭效果的试验结果表明,鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）与１％消毒劲作用,３０分钟后接种鸡只,鸡只临床未见异常,法氏囊组织切片也未病变;感作时间少于３０分钟接种鸡只,法氏囊组织均出现病变,部分鸡只出现明显临床症状。发病鸡舍用１％消毒劲消毒后,证实ＩＢＤＶ对健康鸡无感染性。     

鸡新城疫病毒V4株一些特性的研究

对鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｖ４株的毒价、血凝（ＨＡ）稳定性和致病指数进行了研究，结果显示ＮＤＶＶ４株的毒价（ＥＩＤ）为１０－８．３～１０－１０．１／０．１ｍＬ，２５℃存放２８ｄ、３７℃存放１２ｄ及反复冻融７次ＨＡ滴度不变，其１日龄雏鸡脑内接种、６周龄鸡静脉接种发病指数和鸡胚平均致死时间分别为：ＩＣＰＩ＝０．００，ＩＶＰＩ＝０．００，ＭＤＴ＞１５０ｈ     

鸡传染性法氏囊病地方流行毒株的分离与制苗种毒的 …

从河北省昌黎县不同鸡场发生的法氏囊病鸡群中，分离到ＪＤ１，ＪＤ２，ＪＤ３，ＪＤ４，ＪＤ５共５株ＩＢＤ病毒毒株，通过初步分离与试验，并对其作了致病性，鸡胚适应性和免疫保护性等项试验。结果表明：所分离的５株均为ＩＢＤＶ，且可使易感鸡１００％发病，致死病在０－４０％。     

鸡新城疫病毒V4株一些特性的研究

对鸡新城疫病毒Ｖ４株的毒价，血凝稳定性和致病指数进行了研究，结果显示ＮＤＶ Ｖ４株的毒价（ＥＩＤ）为１０＾－￣１０＾１０．１／０．１ｍＬ，２５存放２８ｄ，３７℃存放１２ｄ及反复冻融７次ＨＡ滴度不变，其１日龄雏鸡脑内接种，６周龄鸡静脉接种发病指数和鸡胚平均致死时间分别为：ＩＣＰＩ＝０．００，ＩＶＰＩ＝０．００，ＭＤＴ〉１５０ｈ。     

亲和层析法提纯鸡马立克病毒gB基因重组产物

应用针对鸡马立克病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｂ（ｇＢ）抗原单克隆抗体ＩＡＮ８６制备亲和层析柱，从感染重组杆状病毒（ｇＢ－ＡｃＮＰＶ）的昆虫细胞中提纯鸡ＭＤＶｇＢ基因重组产物，获得较好效果。提纯的蛋白质在ＳＤＳ－ｐＡＧＥ中出现的５条条带中有４条在免疫印迹试验中出现，其分子量为１００，６０，４９，４０ｋｄ占蛋白总量的５４．７％。试验证明用单克隆抗体亲和层析法提纯ＭＤＶｇＢ基因重组产物是一个行之有效的方法。     

RT-PCR和Digoxigenin标记的核酸探针检测鸡传染性支气管炎病毒试验研究

用２对已发表的引物和１对自行设计的引物对同一ＩＢＶＨ１２０株进行ＲＴ－ＰＣＲ，分别获得了Ｓ１基因上与引物设计相一致的１７２０ｂｐ，２２８ｂｐ，６０２ｂｐ，的扩增片段。用自行设计的引物对７个毒株（Ｈ１２０，Ｈ５２，Ｍ４１，Ｃｏｎｎ，Ｇｒａｙ，Ｔ，Ｈｏｌｔｅ）和５个分离株（宜毒，上毒，云毒，ＨＫ，１１８）的含毒尿囊液或纯化病毒进行ＲＴ－ＰＣＲ。结果除Ｈｏｌｔｅ株，２个分离株（宜毒，云毒）外，其余均被成功地扩增出６０２ｂｐ的片段。将ＩＢＶＨ１２０株０６ｋｂＰＣＲ产物用Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记为探针，分别与上述各ＩＢＶ毒株的核酸及其扩增产物进行核酸杂交，均呈现阳性反应，而该探针不与ＩＢＤＶ和ＮＤＶ的ＤＮＡ，ＥＤＳ－７６病毒的ＤＮＡ及正常鸡胚尿囊液抽提物反应。ＲＴ－ＰＣＲ和核酸杂交技术提供了直接从尿囊液中快速检测出病毒，作为诊断ＩＢＶ的新方法。     

MDV感染鸡羽毛根病毒抗原和DNA的动态检测

１０羽１４日龄鸡分别以马立克氏病毒（ＭＤＶ）ＢＪ－１株接毒，采集羽毛根作为ＭＤＶ琼扩抗原和ＭＤＶＤＮＡｄｏｔ－ｂｌｏｔ杂交的动态检测样品。接毒后第１０ｄ至第８周的检测结果显示，鸡羽毛根ＭＤＶ琼扩抗原及ＭＤＶＤＮＡ可分别在接毒后第１４ｄ（３７．５％，３／８）和第１２ｄ（３３．３％，３／９）检出；接毒后第１７ｄ至第５周，鸡羽毛根ＭＤＶ琼扩抗原的阳性检出率均大于８０％；第６，７和８周时，则分别降至６６．７％（４／６），５０％（３／６）和４０％（２／５）。而ＭＤＶＤＮＡ的检测，除１只鸡直到第４周才呈阳性外，其余在接毒后第１４ｄ至第８周中均保持１００％的阳性检出率。     

生物素标记IBDV─RNA探针的制备及其对IBDV─RNA检测的初步研究

以传染性法氏囊病毒强毒株接种９日龄鸡胚尿囊腔，待鸡胚死亡后，收集其尿囊液，提取病毒。纯化的病毒ＲＮＡ在３％琼脂糖凝胶电泳上呈现出２９０ｂｐ和３４００ｂｐ的两条带。收集这两条带，以病毒全基因组制备生物素标记的探针。此探针有良好的特异性。它不与其它３种禽类病毒（ＮＤＶ，ＩＢＶ，ＩＬＶ）的核酸抽提物发生交叉反应。此试验是快速、敏感、可重复的。其敏感度达０．５ｐｇ。     

生物素标记IBDV─RNA探针的制备及其对IBDV─RNA检测的初步研究

以传染性法氏囊病毒强毒株接种９日龄鸡胚尿囊腔，待鸡胚死亡后，收集其尿囊液，提取病毒。纯化的病毒ＲＮＡ在３％琼脂糖凝胶电泳上呈现出２９０ｂｐ和３４００ｂｐ的两条带。收集这两条带，以病毒全基因组制备生物素标记的探针。此探针有良好的特异性。它不与其它３种禽类病毒（ＮＤＶ，ＩＢＶ，ＩＬＶ）的核酸抽提物发生交叉反应。此试验是快速、敏感、可重复的。其敏感度达０．５ｐｇ。     

用ELISA检测传染性囊病病毒诱导的细胞凋亡

用５株传染性囊病病毒（ＩＢＤＶ）分别感染鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）,于感染后不同时间收集接毒组与对照组的细胞进行检测,试验结果显示,接毒组与对照组细胞的ＤＮＡ在琼脂糖凝胶电泳谱上均呈现梯状条带,用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测各组细胞中降解ＤＮＡ量,发现感染ＩＢＤＶ７ｈ后,接毒组细胞降解ＤＮＡ量比对照组明显增加,且各接毒组间降解ＤＮＡ量有一定的差异,试验结果表明：各株ＩＢＤＶ均诱导ＣＥＦ发生细胞     

DCPV－白僵菌－杀灭菊酯复合杀虫剂林间防治试验

本文通过对马尾松毛虫质型多角体病毒（ＤＣＰＶ）、白僵菌、２０％杀灭菊酯三种药剂混合使用的林间正交试验，从中筛选出最佳配比的复合杀虫剂，供生产上推广应用．林间试验结果表明，最佳组合为ＡａＢａＣａ，即ＤＣＰＶ（ＣＰＢ２×１０７个／ｍＬ），白僵菌（１０亿个／ｇ）和２０％杀灭菊酯（１：２万倍液），防治效果达９５．３％，比单一应用ＤＣＰＶ（Ａａ）、白僵菌（Ｂａ）、２０％杀灭菊醌（Ｃａ）分别增效１３．５％，２３．０％和３３．９％．     

DCPV－白僵菌－杀灭菊酯复合杀虫剂林间防治试验

本文通过对马尾松毛虫质型多角体病毒（ＤＣＰＶ）、白僵菌、２０％杀灭菊酯三种药剂混合使用的林间正交试验，从中筛选出最佳配比的复合杀虫剂，供生产上推广应用．林间试验结果表明，最佳组合为ＡａＢａＣａ，即ＤＣＰＶ（ＣＰＢ２×１０７个／ｍＬ），白僵菌（１０亿个／ｇ）和２０％杀灭菊酯（１：２万倍液），防治效果达９５．３％，比单一应用ＤＣＰＶ（Ａａ）、白僵菌（Ｂａ）、２０％杀灭菊醌（Ｃａ）分别增效１３．５％，２３．０％和３３．９％．     

鸡传染性支气管炎二价灭活苗的研制

从上海、江苏、大连等地的患病鸡群中分离到８株病毒，经鉴定确认为鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）。从中挑选出２株具代表性毒株（Ｃ９００１、ＤＬＺ９１１１）研制出二价油佐剂灭活苗。结果表明，１∶１００稀释的二价油佐剂灭活苗最小免疫剂量０．５ｍｌ／只，一次免疫对支气管炎型ＩＢ的保护率可达６６．６７％，对肾型ＩＢ的保护率可达８３．３３％。０．２ｍｌ的二价苗免疫１５日龄的雏鸡，１５ｄ后攻毒，对肾型ＩＢ的保护率达１００％，而肾型和支气管炎型单价苗的免疫保护率分别为９０％和８０％。通过实验室的免疫试验和临床应用，证明安全高效。     

斑点免疫金检测鸡传染性支气管炎病毒的研究

通过胶体金标记提纯后的兔抗ＩＢＶＩｇＧ，建立了一种以微孔滤膜为固相载体，以红色胶体金为标记物，检测鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）的斑点免疫金测定法（ＤＩＧＦＡ）。ＤＩＧＦＡ对ＩＢＶ的最小检出量为２０．３×１０￣（－８）ｇ，在１０份自然病例样品中检出８份。鸡胚培养法以育传３～５代，出现侏儒胚者为阳性，从上述样品中检出６份。对接种ＩＢＶ的鸡胚尿囊液，ＤＩＧＦＡ法检出率为１００％。实验结果表明，ＤＩＧＦＡ法对鸡传染性支气管炎的早期诊断具有简便、灵敏、快速、特异性强和重复性好等优点。     

鸡抗病促生长剂的试验研究

采用ＤＮＡ重组技术和蚀斑技术获得融合基因的重组病毒，制备了鸡生长抑制因子（ＳＳ）免疫原，与鸡传染性ＩＢＤ、ＮＤ免疫原共同高免健康产蛋鸡，使其卵黄中产生高效价的抗鸡ＳＳ、ＩＢＤ、ＮＤ抗体，利用含高效价的卵黄制成鸡抗病促生长剂。实验结果表明，该制剂对人工感染的ＩＢＤ鸡治愈率为９７．５％，预防保护率９８．４％；对流行区自然感染的ＩＢＤ鸡治愈率９６％，预防保护率９７％。对健康肉仔鸡应用，可使其育成出栏时间提前３天，每只平均比对照增重１３５．７ｇ；饲料转化率提高８．３７％。     

IBV地方分离株致病原性和血清学分型的比较

将６株分离自国内不同地方的ＩＢＶ流行株分别感梁ＳＰＦ鸡，对气管和肾桩进行系统病理观察，发现６株ＩＢＶ在至于致病原性和组织嗜性上存在显著差异，其中ＱＤ可引起严重的呼吸道损伤，并伴有相对较轻的肾脏损伤，其余５株对肾脏损伤较为严重地呼吸道损伤相对温和。用气管环组织培养交叉中和实验（ＳＮ）和ＳＡＳ软件对６株分离毒进行血清学分型研究，结果显示ＱＤ株属于Ｍ型，ＺＺ、ＧＺ属于Ｔ型，而ＴＪ、ＤＬ和ＹＣ株是不同于Ｍ     

斑点ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒及抗体

采用鼠抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）高免血请作第１抗体，利用酶标羊抗鼠ＩｇＧ作第２抗体，建立间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ程序检测ＩＢＶ抗原；利用鸡抗ＩＢＶ血清阻断试验检测ＩＢＶ抗体。试验表明，本程序检测ＩＢＶ抗原及其抗体具有高度过感性和特异性。最低抗原检出量达１０￣（－８）ｇ数量级，阳性检出率９８％，阳性阻断率１００％。     

鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的研制与鉴定

用经蔗糖密度梯度离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ，Ｍ４１）作为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过常规淋巴细胞杂交瘤技术产生杂交瘤细胞，经ＥＬＩＳＡ筛选，获得了４株能分泌特异性抗ＩＢＶ单克隆抗体的细胞系，分别命名为４ＡＣ１、４ＡＦ１、６ＤＨ８及２ＤＨ１０。４株单抗的亚类都属于ＩｇＧ２ｂ，在Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ试验中，４ＡＦ１、６ＤＨ８２株单抗特异性地识别ＩＢＶ的核衣壳蛋白（Ｎ）；经ＥＬＩＳＡ测定，各株单抗４０ｈ培养上清效价达１０－２～１０－４，第７天腹水效价达１０－５～１０－６，４ＡＦ１、６ＤＨ８与所试７个ＩＢＶ标准株及２个ＩＢＶ分离株都发生反应     

感染法氏囊病毒雏鸡新城疫2次免疫后免疫器官组织的免疫学变化

研究了１日龄感染法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）雏鸡新城疫（ＮＤ）２次免疫及强毒攻击后免疫器官组织中浆细胞、酯酶阳性Ｔ细胞（ＴＡＮＡＥ＋）、巨噬细胞（ＭΦ）和淋巴细胞数量的动态变化，结果表明，１ＢＤＶ感染鸡中枢及外周免疫器官以及呼吸道、消化道局部免疫组织对ＮＤ苗的２次免疫应答具有明显的增强作用，并提示ＢＤＶ所致的免疫抑制不是不可逆的，但不能完全恢复到正常免疫应答水平。     

鸡毒支原体人工发病封闭模型的建立

在透明塑料隔离器中,分别制造３０－１００ｍｇ／Ｌ的氨环境,观察其对ＳＰＦ“来杭鸡”的应激反应,结果氨浓度在８５ｍｇ／Ｌ以上时,鸡群发生严重伤害,而氨浓度在５０ｍｇ／Ｌ以下时则缺乏明显应激。氨环境作应激因素,对３０日龄无特一病原ＳＰＦ鸡以鸡毒支原体强毒侏作人工发病,１２天后检查气囊病变,发病率为７５％（３／４）,以鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）,鸡传支病毒（ＩＢＶ）弱毒诱导,人工感染发病率为５０％（２／４）