大红火龙果花粉离体萌发条件的优化及其活力测定方法筛选

为大红火龙果人工授粉及其丰产栽培、杂交育种及果实品质改良提供参考,采用单因素试验,研究不同培养基组分对花粉萌发的影响,并运用离体萌发法测定花粉萌发率;比较TTC染色法、醋酸洋红染色法、亚历山大红染色法和I_2-KI染色法测定大红火龙果的花粉活力,筛选准确测定大红火龙果花粉活力的最佳方法。结果表明:大红火龙果花粉离体萌发最佳培养基组分为Ca(NO_3)_2·4H_2O 0.3g/L+MgSO_4·7H_2O 1.2g/L+KNO_3 0.1g/L+15%蔗糖+700mg/L硼酸+1%琼脂,pH为6.7,此条件下花粉萌发率高,为(43.9±6.27)%,且利于花粉管伸长。醋酸洋红法测定的大红火龙果花粉活力为(37.67±4.18)%,与离体萌发法测定的萌发率无显著差异,为花粉活力的最佳测定方法。     

大花三色堇花粉生活力测定及贮藏方法

为解决大花三色堇杂交育种过程中的时空障碍,提高育种效率,以纯黄大花三色堇品种EYO花粉为试材,采用离体萌发法、碘 碘化钾染色法、醋酸洋红染色法和TTC（氯化三苯基四氮唑）染色法对新鲜花粉生活力进行测定,并研究不同贮藏条件对花粉萌发的影响。结果表明：培养基中添加蔗糖和硼酸对花粉的萌发有促进作用,且二者之间具有互作效应,当培养基中添加200 g/L蔗糖 +150 mg/L硼酸,萌发率较高,达35.04%。与离体萌发法相比较,碘 碘化钾染色法、醋酸洋红染色法测定的花粉活力值偏高,分别为50.80%、71.41%,TTC染色法不能使大花三色堇花粉着色。花粉在不同贮藏条件下,生活力变化存在显著差异,常温贮藏3 d后花粉活力降为零,而4 ℃、-80 ℃不干燥贮藏26 d后花粉仍有活力,萌发率分别为6.26%和10.31%。     

柱花草花粉活力的测定方法

利用6种常用花粉活力测定方法对柱花草花粉活力进行测定,并筛选出各方法的最佳配方。结果表明:以离体萌发法为最佳,最适培养基:10%蔗糖、10%PEG-6000(聚乙二醇)、0.01%H3BO3、0.03%CaCl2.2H2O、0.01%KNO3,pH 6.5,柱花草花粉在该培养基上30℃条件下培养10 min,萌发率可达84.03%。0.5%I2+1.5%KI的碘-碘化钾染色效果好,色差明显,较离体萌发法测定值偏高,但差异不显著,可选作简单快速测定法;FDA(荧光素二醋酸脂)染色法、醋酸洋红染色法、无机酸法、TTC(2,3,5-氯代三苯基四氮唑)法均不适合柱花草花粉活力的检测。     

肋柱花花粉萌发及其活力测定方法比较

[目的]通过对肋柱花花粉不同培养条件和测定方法进行研究,筛选出适宜花粉萌发的条件,找出简单快速测定肋柱花花粉活力方法。[方法]采用离体萌发法对不同浓度蔗糖、硼酸及培养温度下花粉萌发率进行研究,并通过醋酸洋红染色法、TTC染色法及I_2-KI染色法对花粉活力进行测定。[结果]肋柱花花粉在蔗糖浓度为15%、硼酸浓度为100 mg/L、温度为25℃培养下,花粉萌发率达最大值,超过此条件萌发率下降。与醋酸洋红法和TTC法相比,I_2-KI染色法的测定结果与离体培养萌发法结果相近。[结论]适宜肋柱花花粉萌发的培养条件为15%蔗糖+100 mg/L硼酸,温度为25℃;I_2-KI染色法可作为肋柱花花粉活力快速测定的最佳方法。     

魔芋花粉生活力检测方法的比较研究

采用I2-KI染色法、醋酸洋红染色法、过氧化物酶染色法、TTC染色法、无机酸法检测魔芋花粉的生活力,同时以培养基萌发法测定花粉萌发率,并以此为对照研究各方法的测定结果与培养基萌发法测定结果的相关性.结果表明:I2-KI染色法、醋酸洋红染色法、过氧化物酶染色法测定结果极显著高于培养基萌发法,不适于魔芋花粉活力的测定;TTC染色法测定结果极显著高于培养基萌发法,但与培养基萌发法极显著相关,适用于魔芋花粉活力的快速检测;无机酸法测定结果与培养基萌发法差异不显著,且与培养基萌发法极显著相关,适于魔芋花粉活力的准确测定.     

垂丝紫荆花粉贮藏及生活力研究

为进行紫荆杂交育种和开发利用,以垂丝紫荆花粉为试材,利用离体培养法、3种染色法(醋酸洋红、TTC和碘-碘化钾染色)对花粉生活力进行测定,并分析不同贮藏温度和时间对花粉萌发的影响。结果显示,培养基中添加蔗糖和硼酸对花粉的萌发有促进作用,垂丝紫荆花粉萌发的适宜培养基为120g/L蔗糖+40mg/L硼酸,花粉萌发率达86.23%;醋酸洋红染色法适宜快速测定垂丝紫荆花粉生活力;垂丝紫荆花粉最佳的贮藏温度为-196℃,经济的贮藏方法为-20℃。     

红花酢浆草花粉萌发及贮藏特性的研究

以红花酢浆草花粉为试材,利用离体培养法、碘-碘化钾染色法、醋酸洋红染色法和TTC(氯化三苯基四氮唑)染色法对花粉生活力进行测定,探讨扫描电镜下花粉形态结构与花粉萌发之间的关系,并研究不同贮藏条件对花粉萌发的影响。结果表明:花粉培养基中添加不同质量浓度的蔗糖和硼酸对花粉的萌发有促进作用,红花酢浆草花粉萌发的最适培养基为:150g/L蔗糖+0.04g/L硼酸,萌发率达31.45%。花粉萌发率与饱满花粉占花粉总数的百分率一致。花粉生活力随贮藏时间的延长而下降,不同的贮藏条件对其有显著的影响,最佳贮藏温度为-80℃。花粉在-80℃耐贮藏力长达30d,贮藏28d后花粉萌发率仍达到1.30%。     

芍药花粉活力测定方法的研究

鉴定花粉活力是杂交育种的重要环节,本试验研究了芍药花粉离体萌发的条件,并利用8个芍药品种,建立了新鲜花粉活力快速测定方法.试验表明,芍药花粉离体萌发的适宜条件为50mg/L硼酸、100g/L蔗糖、pH值7.0～7.5、25℃下培养6h,在此条件下可获得较高的萌发率.与TTC法和醋酸洋红法相比,I2-KI染色法的测定结果与离体培养萌发法的测定结果相近,并相关性显著,I2-K(I染色法适于芍药新鲜花粉活力较快捷、简便、准确的测定.     

新疆早实核桃花粉离体培养基的筛选

以早实核桃"新温179"花粉为试材,采用正交设计优选花粉离体萌发培养基成分不同浓度条件及最适温度和PH值,结合蓝墨水染色法、I-KI染色法、TTC活力测定法、醋酸洋红染色法4种染色法预测花粉生活力,为早实核桃遗传改良中间材料夯实研究基础。结果表明:5个因素影响核桃花粉萌发率的主次关系依次为:蔗糖硼酸温度氯化钙PH值,核桃花粉离体培养基主要成分最佳组合为蔗糖20%+硼酸0.05%+氯化钙0.002%,最适温度为30℃,最适PH值为6.5。     

君子兰花粉生活力测定及贮藏方法筛选

以大花君子兰品种胜利为试材,利用单因子试验比较了固体培养基中蔗糖、硼、钙、镁、钾及琼脂质量浓度对花粉萌发的影响,在此基础上进行正交试验。结果表明,适宜的花粉培养基为蔗糖100 g/L+H3BO3150 mg/L+CaCl2100 mg/L+琼脂4 g/L,新鲜花粉萌发率最高达91.4%。用醋酸洋红染色法和I-KI染色法测定君子兰花粉生活力分别为88.1%和89.4%,比培养基法(78.7%)略高。不同贮藏方法对君子兰花粉生活力影响差异较大,最佳贮藏方法为-20℃冷冻干燥贮藏,贮藏120 d后花粉生活力为24.4%。     

木薯花粉活力测定及验证试验

以6个木薯品种为供试材料,分别采用碘-碘化钾(I2-KI)染色法、氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、醋酸洋红染色法、离体萌芽法对其花粉活力进行测定,以自然授粉法和人工杂交法对其进行验证。结果显示:I2-KI染色法、醋酸洋红染色法、氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、离体萌芽法测定花粉平均活力分别是96.8%、96.4%、1.8%、0～1.12%;人工杂交授粉率为0%～0.34%,自然授粉率则为38.2%～62.9%。验证试验表明:供试木薯花粉具有活力,CCT法和离体萌芽法,不能正确反映花粉活力状况,碘-碘化钾和醋酸洋红染色法能测出花粉活力,但能否则正确反映花粉活力,有待进一步验证。     

广玉兰花粉生活力测定及贮藏方法研究

采用离体培养法、醋酸洋红染色法、碘-碘化钾染色法、TTC(氯化三苯基四氮唑)染色法对广玉兰花粉进行生活力测定,并研究了不同贮藏条件对花粉萌发的影响.结果表明:培养基中添加不同浓度的蔗糖和硼酸对花粉的萌发有促进作用,广玉兰花粉萌发的最适培养基为2％蔗糖+0.001％硼酸,萌发率达90.65％.花粉最佳贮藏方法为-80℃不干燥,贮藏力为5d以上.     

5种通关藤花粉活力测定方法比较

【目的】研究通关藤花粉活力和提高其坐果率,并为其快速繁殖提供理论依据。【方法】采用TTC染色法、醋酸洋红染色法、I_2-KI染色法、过氧化物酶染色法和花粉离体萌发法测定通关藤花粉活力。【结果】TTC染色法、醋酸洋红染色法、过氧化物酶染色法和花粉离体萌发法测得的花粉活力均低于60%,其中花粉离体萌发法测得的花粉活力最低,只有0.02%,显著低于其他4种测定方法 (P0.05)。TTC染色法、醋酸洋红染色法和过氧化物酶染色法测得的花粉活力分别为51.44%、52.10%和39.02%,三者之间差异不显著(P0.05)。I2-KI染色法测得的花粉活力高达90.85%,显著高于其他4种测定方法 (P0.05)。【结论】最适合通关藤花粉活力的测定方法为I2-KI染色法,并且随着花龄增大花粉活力有所下降。     

青阳参花粉活力测定方法比较

[目的]提高青阳参的坐果率。[方法]用解剖针小心将花粉块取下,并在解剖镜下将花粉块的膜剥开使其花粉粒散开置于载玻片上,用碘-碘化钾染色法(I2-KI)、氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、醋酸洋红染色法和荧光素二醋酸酯(FDA)法对花粉生活力进行测定;花粉离体萌发法以整个花粉块为单位进行离体培养。[结果]:碘-碘化钾染色法(I2-KI)、氯化三苯四氮唑(TTC)染色法、醋酸洋红染色法、荧光素二醋酸酯(FDA)法的染色率均低于30.0%,而花粉离体萌发法测定的萌发率高达97.6%。[结论]花粉离体萌发法能对青阳参的花粉生活力进行有效的测定。     

榆叶梅花粉生活力及贮藏特性的研究

以榆叶梅花粉为试材,利用离体培养法、碘-碘化钾染色法、醋酸洋红染色法和TTC(氯化三苯基四氮唑)染色法对花粉生活力进行测定,并研究了不同贮藏条件对花粉萌发的影响。结果表明:培养基中添加不同浓度的蔗糖和硼酸对花粉的萌发有促进作用,榆叶梅花粉萌发的最适条件为在培养基中添加15%蔗糖+0.004%硼酸,萌发率达41.52%。花粉生活力随着贮藏时间的延长而下降,不同的贮藏条件对其有显著的影响,适当的低温可有效延长花粉贮藏时间。其中-80℃萌发率最高,为最佳贮藏方法。     

野罂粟和秃疮花花粉生活力的测定

为野罂粟和秃疮花的杂交育种研究提供参考依据,以野罂粟(Papaver nudicarule)花粉和秃疮花(Dicranostigma leptopodum)花粉为试验材料,采用离体萌发法测定2种花粉的生活力,从而研究不同浓度的蔗糖、硼酸、氯化钙培养液对野罂粟和秃疮花花粉萌发率的影响。结果表明:离体萌发法测定野罂粟花粉生活力的最佳观测时间为5h,最佳培养液组合为蔗糖80g/L+硼酸40mg/L+氯化钙40mg/L,该培养组合萌发率为33.7%;离体萌发法测定秃疮花花粉生活力的最佳观测时间为5h,最佳培养液组合为蔗糖70g/L+硼酸30mg/L+氯化钙30mg/L,该培养组合萌发率为33.1%。     

银杏花粉生活力测定及贮藏方法的优化

以银杏花粉为试验材料,研究了花粉在离体培养条件下,培养基中蔗糖、硼、钙对其萌发率的影响,优化了培养基配方;并比较了3种不同的染色法对银杏花粉生活力的测定效果。结果表明：培养5d是进行花粉萌发率测定的最佳时期,蔗糖对银杏花粉萌发至关重要,在培养基中添加3%蔗糖可有效提高花粉萌发率,达到50%左右;硼和钙对银杏花粉萌发有一定的促进作用,最佳培养基配方为蔗糖3%＋硼60mg/L＋钙100mg/L。TTC染色法测定的银杏花粉生活力与离体萌发法测定的结果可以相互代替和印证,是一种较为准确的测定银杏花粉生活力的染色法。4℃冰箱干燥保存利于保持银杏花粉生活力。     

荸荠花粉活力测定及贮藏寿命研究

为了解荸荠[Heleocharis dulcis(Burm.f.)Trin.ex Hensch.]花粉生活力和最佳体外萌发条件,分别采用I2-KI、TTC、MTT染色法和离体培养基萌发法对荸荠花粉活力进行了测定,并初步研究了荸荠花粉在常温(25℃)条件和低温(4℃)贮藏条件下活力变化的动态。结果表明,MTT染色法测定结果与离体萌发法最接近,最适宜荸荠花粉活力的快速检测;离体萌发法适宜培养基配方为1%蔗糖+50μg/m L硼酸;荸荠花粉在常温条件下50 min活力降至0.29%的低水平,在低温条件下5 h后完全失去活力。     

茵芋花粉培养效应的优化

为研究茵芋花粉的培养效应,采用蔗糖、硼酸、氯化钙三因素三水平培养基离体培养法,I2—KI、TTC、红墨水等染色法,以及生物荧光显微镜对花粉活力进行观察与检测,筛选有活力的花粉的最适培养基及活力测定方法.结果表明,新鲜茵芋花粉粒呈黄色,花粉离体后逐渐转变为黄褐色.I2—KI、TTC对花粉染色无效;红墨水染色法使有活力的花粉在蓝色滤光片下呈绿色或原色,能够快速有效地检测花粉活力.花粉于25℃的恒温下离体培养4 h开始萌发,至24 h萌发稳定.蔗糖、硼酸、氯化钙三因素三水平培养基离体培养对花粉萌发的互作效应极显著,最优培养基为:15 g·L~(-1)蔗糖+0.05 g·L~(-1)硼酸+0.02 g·L~(-1)氯化钙,萌发率为60.0%;次优培养基为:15 g·L~(-1)蔗糖+0.03 g·L~(-1)硼酸+0.02 g·L~(-1)氯化钙,萌发率为58.0%;第三培养基为:15 g·L~(-1)蔗糖+0.01 g·L~(-1)硼酸+0.01 g·L~(-1)氯化钙,萌发率为50.4%.影响茵芋花粉萌发的主因素为氯化钙,次因素为蔗糖,辅助因素为硼酸.     

除虫菊花粉形态与生活力研究

利用扫描电镜观测了除虫菊花粉和柱头形态,I-KI染色法、TTC染色法和离体萌发法测定了除虫菊花粉生活力.结果表明:除虫菊花粉粒呈圆球状,表面有刺状突起,而柱头表面分布有较多乳突细胞和柱状细胞.染色法不适于除虫菊花粉生活力检测,筛选出的除虫菊花粉最适离体萌发培养基是ME3+ 250 g/L PEG 4000+ 150 g/L蔗糖.观测的3个无性系N1/10/5、G2/10/2和E4的花粉萌发率分别为45.68％、32.31％和49.34％,且三者11:00～12:00的萌发率均显著高于15:00～16:00.