黑果枸杞花青素对H9c2大鼠心肌细胞抗氧化能力、炎性因子及能量代谢作用的影响北大核心

试验旨在探究青海柴达木黑果枸杞花青素(AC)对H9c2大鼠心肌细胞氧化应激损伤的影响,选用H9c2大鼠心肌细胞为研究对象,设立常氧组、常氧+AC组、低氧组和低氧+AC组,利用ELISA法检测各组细胞中过氧化物酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、血红素加氧酶-1(HO-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)以及能量代谢相关因子Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶的变化。结果显示,与常氧组相比,常氧+AC组大鼠心肌细胞MDA、TNF-α、IL-6的含量均显著降低(P<0.05),CAT、HO-1、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶活性显著升高(P<0.05),GSH-Px、SOD活性和IL-10含量均极显著升高(P<0.01);低氧组大鼠心肌细胞GSH-Px、HO-1、Na^(+)-K^(+)-ATP酶活性显著降低(P<0.05),CAT、SOD、Ca^(2+)-ATP酶活性和IL-10含量均极显著降低(P<0.01),MDA、TNF-α、IL-6含量均极显著升高(P<0.01)。与低氧组相比,低氧+AC组大鼠心肌细胞MDA、TNF-α、IL-6含量均极显著降低(P<0.01),CAT、GSH-Px、SOD、HO-1、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶活性和IL-10含量均极显著升高(P<0.01)。研究表明,AC能够通过减轻H9c2大鼠心肌细胞氧化应激损伤,增强低氧下心肌细胞的能量代谢,抑制低氧诱导的炎症发生,进而缓解H9c2大鼠心肌细胞的低氧损伤。     

铜缺乏对乳牛细胞色素氧化酶组化特征的影响

为探讨铜缺乏对乳牛心、肝、肾细胞色素氧化酶（CCO）组化特征（分布特点及活性）的影响，本试验选择铜缺乏症高发区自然发病的乳犊牛6头，剖杀后采集心、肝、肾作冰冻切片及酶组织化染色，以6头同年生健康乳犊牛为对照。结果表明，铜缺乏病牛组织中CCO的活性显著低于对照组（P＜0．05）。发病乳牛组织中CCO酶颗粒的分布也发生特征性的变化，表明铜酶活性的改变是导致乳牛铜缺乏症病理过程的重要原因。     

铜缺乏奶牛神经递质酶的组化特征

为探讨铜缺乏对奶牛大脑、小脑及脊髓乙酰胆碱酯酶（ACHEase)组化特征（分布特点及活性）的影响，本实验选择铜缺乏症高发区自然发病的奶犊牛6头，剖杀后采集大脑、小脑、脊髓作冰冻切片及酶组化染色，以6头同年生健康奶犊牛为对照。实验结果表明，发病奶牛大脑、小脑及脊髓中ACHEase计数值均显著低于对照组奶牛（P＜0．05）；除大脑外，铜缺额奶牛脊髓上小脑中ACHEase的扫描值也显著低于对照组（P＜0．05）；发病奶牛脊髓小脑中ACHEase的扫描值也低于对照组（P＜0．05）；发病奶牛组织中ACHEase酶颗粒的分布也发生特征性的变化。结论：神经递质酶活性的改变是导致奶牛铜缺乏症病理过程的重要原因。     

铜缺乏对奶甲状腺功能的影响

为阐明铜缺乏奶牛甲状腺激素的变化特征及补铜对奶牛甲状腺功能的影响，本实验选择缺铜地区全血铜低于NRC下限（0.8mg/kg)但无明显摇摆症状的犊牛25头作为亚临床铜缺乏组；并对其中15头进行补铜试验（饲料中添加硫酸酮100mg/kg干重），以15头临床健康奶牛作为对照组，分别于40天及80天采集血样并检测T3、T4及TSH；同时测试了有明显摇摆症状的6头发病奶牛及健康奶牛的肝脏中T4－5’脱碘酶的活性。结果表明：铜缺乏奶牛血清T3显著低于亚临床及健康对照组；发病组及亚临床组奶牛血清T4含量显著高于对照组；对照组奶牛血清TSH含量显著高于发病组及亚临床组；发病奶牛肝脏中的T4－5’脱碘酶活性也显著低于健康奶牛；试验组奶牛在补铜后40天血清T3含量显著上升；在补铜后80天，亚临床组奶牛血清T4含量显著下降，TSH含量显著高于补铜前。结论：铜缺乏能够影响奶牛甲状腺激素的调节及代谢过程。     

内蒙古二狼山山羊遗传性甲状腺肿发病机的研究：Ⅱ甲状组组织TPO…

本研究应用甲状腺过氧化物酶愈创酶活性测定法及疫组化和电镜技术，对遗传性甲状腺肿纯合子病羊甲状腺组织中ＴＰＯ活性变化、ＴＰＯ的分布及改变进行了研究。结果表明，ＩＨＧ纯合子甲状腺组织中，ＴＰＯ活性明显低于正常对照；ＴＰＯ存在于滤泡上皮细胞的胞浆中，在形成小泡团及细胞聚焦以结节形式存在的增生上皮细胞浆中，ＴＰＯ呈强阳性反应；电镜细胞化学观察见ＴＰＯ主要定位于核被膜、粗面内质网膜和近细胞膜缘。     

氟对鸡红细胞膜ATPase活性的影响

为探讨氟对鸡红细胞膜ATPase活性及代谢的影响，选用250只1日龄蛋鸡，随机分为5组，每组约50只。第一组为对照组，二、三、四、五组在日粮中添加不同水平的氟化钠，使日粮中氟的含量分别为500，1000，1500，2000mg/kg，实验期为150d。测定血清中氟含量及红细胞膜ATPase活性，结果表明，成功地复制出了不同程度的鸡慢性氟中毒模型，氟中毒组鸡红细胞膜Na^2 ,K^ -ATPase,Mg^2 -ATPase,Ca^2 －ATPase活性均不同程度地降低，其中，Na^ ,K^ -ATPase,Mg^2 -ATPase活性与血清氟含量呈显著的负相关（P＜0．01）。说明氟能抑制ATPaser的活性，破坏红细胞膜ATPase的代谢。     

狐胆汁对蟾蜍离体心脏功能的影响

目的：研究狐胆汁对蟾蜍离体心脏的作用及对蟾蜍离体心脏细胞膜ATP酶活性的影响。方法：采用离体蛙心灌流法观察狐胆汁对离体蟾蜍心脏的收缩力、心率的影响,并通过定磷法检测狐胆汁对离体蟾蜍心肌细胞膜ATP酶活性的影响。结果：狐胆汁使蟾蜍离体心脏的收缩力加强,在0.3～4.0g/L浓度范围内,狐胆汁促进心肌收缩力的作用与剂量之间呈量效关系,最大效应可使心肌收缩力提高390%,心率减慢。随狐胆汁浓度提高,心肌细胞膜Ca^2＋-ATP酶活性提高,Na^＋K^＋-ATP酶、Mg^2＋-ATP酶、Ca^2＋Mg^2＋-ATP酶活性下降。结论：狐胆汁能提高蟾蜍离体心脏的功能,其作用机制有待进一步研究。     

PHS对快大型黄羽肉鸡线粒体NO代谢和Na+-K+-ATP酶活力的影响

采取分组对比的方法分别检测了对照组、PHS发病组（低温和日粮中添加1.5 mg/kg T3）、防治组（日粮中添加500 mg/kg Vc）快大型黄羽肉鸡肝组织、肠黏膜、心肌线粒体中的NO含量、NOS的活性和Na^＋-K^＋-ATP酶活力。结果显示,发生PHS的黄羽肉鸡,其肝脏、心肌和肠黏膜线粒体NO活力呈现先显著上升（至PHS处理后1、2周）后显著下降（3～5周）的变化趋势（P〈0.O5）。线粒体NOS活力和Na^＋-K^＋-ATP酶活力的变化趋势则与NO一致。提示：缺氧的早期,NOS活性升高从而使NO水平升高,NO水平升高舒张血管,缓解肺动脉高压,是机体的一种应激反应。随着缺氧时间的延续,机体NOS和NO合成相对不足,相应器官的功能受到损害,肺血管舒缩失衡出现肺动脉高压,进一步发生腹水。而Na^＋-K^＋-ATP酶活力的改变则使能量代谢发生障碍,ATP生成减少,引起了线粒体的损伤,进一步诱导了肉鸡PHS;日粮中添加500 mg/kg Vc对此过程具有明显的颉颃作用,对机体起到保护作用。     

铜缺乏奶牛琥珀酸脱氢酶的组化特征

为探讨铜缺乏对奶牛心脏、肝脏、肾脏琥珀酸脱氢酶 (SDHase)组化特征 (分布特点及活性 )的影响 ,本实验选择铜缺乏症高发区自然发病的奶犊牛 6头 ,剖杀后采集心、肝、肾作冰冻切片及酶组化染色 ,以 6头同年生健康奶犊牛为对照。实验结果表明 ,发病组奶牛心脏中 SDHase计数值显著高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,而肝脏、肾脏中SDHase计数值显著低于对照组 (P<0 .0 5 ) ;健康组奶牛心脏、肝脏、肾脏中 SDH活性扫描值均显著大于发病组(P<0 .0 5 )。发病奶牛组组织中 SDHase酶颗粒的分布也发生特征性的变化。结论 :氧化呼吸链关键酶活性的改变是导致奶牛铜缺乏症病理过程的重要原因     

细胞钙超载与鸡柔嫩艾美耳球虫病损伤关系

为探讨鸡柔嫩艾美耳球虫（E．tenella）宿主细胞损伤与钙超载的关系，采用组织定量检测、Von Kossa钙染色、焦锑酸钾电镜细胞化学技术对使用和未使用钙离子阻断剂的E．tenella感染鸡盲肠组织的细胞沉积钙、ATP酶、磷脂酶A2（PLA2）、游离脂肪酸和盲肠上皮细胞游离Ca^2＋的含量与分布进行了动态测定和分析。结果表明：（1）鸡患柔嫩艾美耳球虫病过程中，宿主细胞内钙和游离Ca^2＋明显增多（P〈0．01），并随盲肠损伤加重而增加；（2）在发病过程中盲肠组织Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶、总ATP酶活性均有不同程度的下降，在感染严重期显著低于不感染对照组（P〈0．01）；（3）钙超载盲肠组织的PLA2活性和游离脂肪酸含量明显升高（P〈0．01），表明钙超载是鸡柔嫩艾美耳球虫病的一个重要损伤机制；（4）硝苯地平可以阻止Ca^2＋内流，减少宿主细胞内游离Ca^2＋，减轻宿主细胞的损伤，在本病发生的早期盲肠损伤较轻时，对鸡有一定的保护力，但随着疾病的发展，其作用下降。     

不同发育期大通牦牛心肌、骨骼肌线粒体ATP酶活性的测定

对青海省大通牦牛1、30、180日龄及成年组心肌和骨骼肌线粒体Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性进行测定。结果显示,牦牛心肌、骨骼肌线粒体Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性在年龄组间差异均不显著(P>0.05)。表明大通牦牛在生长发育阶段心肌、骨骼肌线粒体ATP酶在物质运输、能量转换及信息传递等方面发挥着稳定的作用,且与年龄之间无明显的线性关系。     

鹿特异性复合麻醉剂对大鼠不同脑区ATP酶活性的影响

为研究鹿特异性复合麻醉剂麻醉与大鼠各脑区突触体ATP酶活性的关系,探讨其麻醉机理。将20只SD大鼠分为对照组和麻醉组,对照组大鼠腹腔注射30mL/kg生理盐水,试验组腹腔注射30mg/kg鹿特异性复合麻醉剂,采集大鼠各脑区,利用比色法测定脑区内Na＋-K＋-ATP、Ca2＋-AT P和Mg2＋-ATP酶活性。结果显示,药物作用后大鼠大脑皮层和脑干Na＋、K＋-ATP酶活性与对照组比较降低显著（P〈0.05或P〈0.01）,小脑、脑干和海马Ca2＋-ATP酶活性与对照组比较显著降低（P〈0.05或P〈0.01）,大脑Mg2＋-AT P酶活性低于对照组（P〈0.05或P〈0.01）。结果表明,麻醉引起大鼠大脑皮层、脑干中Na＋-K＋-ATP酶活性降低,大脑皮层中Mg2＋-ATP酶活性低,小脑、脑干和海马脑区中Ca2＋-ATP酶活性降低可能是鹿特异性复合麻醉剂麻醉作用的机理之一。     

敌百虫对大鼠肝细胞[Ca~(2+)]_i、ATP酶及GJIC的影响

通过给大鼠肝细胞培养液中加入敌百虫(染毒终质量浓度分别为0,2,10,50 mg/L),探讨敌百虫对肝细胞内钙离子([Ca2+]i)、Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性及间隙连接通讯(GJIC)的影响。结果显示,不同质量浓度敌百虫作用12 h,[Ca2+]i均极显著高于对照组(P0.01);随着染毒剂量的增加,Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性及GJIC均显著或极显著下降(P0.05或P0.01)。说明敌百虫对肝细胞有明显的毒性作用,GJIC的下调可能与Ca2+浓度的升高和Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性的下降有关。     

Effect of dietary cimaterol on Na(+)-K+ ATPase activity in rabbit tissues.

Cimaterol, a catecholamine analog that acts as a beta-adrenergic agonist, has been shown to have a growth promoting effect in rabbits. Catecholamines are also known to stimulate ion transport in many tissues. The objective of this study was to determine the effect of dietary cimaterol on rabbit tissue Na(+)-K+ ATPase activity. Twelve New Zealand White rabbits, fed either control diet or cimaterol-supplemented diet, were killed at the end of a 35-d feeding trial. Heart, kidney, and liver were weighed, and total ATPase and Na(+)-K+ ATPase activities of these tissues were determined. Cimaterol did not affect liver and kidney weights, but heart weight was significantly increased. Cimaterol increased both total and Na(+)-K+ ATPase activities in heart and kidney but had no effect in liver. These data indicate that increased dietary energy intake and body energy expenditure in cimaterol-fed animals can be attributed, in part, to elevated Na(+)-K+ ATPase activities in heart and kidney.     

磷对奶牛红细胞膜Na^＋,K^＋—ATPase活性影响的观察

观察了土壤、牧草低磷情况下，可影响奶牛血清磷含量。血清磷含量可影响红细胞膜结构与功能。血清磷含量减少会导致Ｎａ＾＋，Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性降低，进而影响Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性和Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性。     

Electrolyte composition of mink (Mustela vison) erythrocytes and active cation transporters of the cell membrane

Red blood cells from mink (Mustela vison) were characterized with respect to their electrolyte content and their cell membranes with respect to enzymatic activity for cation transport. The intra- and extracellular concentrations of Na+, K+, Cl-, Ca2+ and Mg2+ were determined in erythrocytes and plasma, respectively. Plasma and red cell water content was determined, and molal electrolyte concentrations were calculated. Red cells from male adult mink appeared to be of the low-K+, high-Na+ type as seen in other carnivorous species. The intracellular K+ concentration is slightly higher than the extracellular one and the plasma-to-cell chemical gradient for Na+ is weak, though even the molal concentrations may differ significantly. Consistent with the high intracellular Na+ and low K+ concentrations, a very low or no ouabain-sensitive Na+, K(+)-ATPase activity and no K(+)-activated pNPPase activity were found in the plasma membrane fraction from red cells. The Cl- and Mg2+ concentrations expressed per liter cell water were significantly higher in red cells than in plasma whereas the opposite was the case with Ca2+. The distribution of Cl- thus does not seem compatible with an inside-negative membrane potential in mink erythrocytes. In spite of a steep calcium gradient across the red cell membrane, neither a calmodulin-activated Ca(2+)-ATPase activity nor an ATP-activated Ca(2+)-pNPPase activity were detectable in the plasma membrane fraction. The origin of a supposed primary Ca2+ gradient for sustaining of osmotic balance thus seems uncertain.     

荷斯坦牛血红细胞Na~+-K~+-ATP酶活力与其耐热性的相关性研究

[目的]为探讨Na+-K+-ATP酶在荷斯坦牛热应激过程中的作用.[方法]本研究比较测定了329头荷斯坦牛在非热应激期和热应激期的体温、红细胞K+和红细胞Na+-K+-ATP酶活力的变化.[结果]显示,试验牛群红细胞Na+-K+-ATP酶活力呈正态分布;不同胎次、产犊季节、泌乳期、场次牛Na+-K+-ATP酶活力差异不显著(P>0.05);不同性别牛Na+-K+-ATP酶活力差异极显著(P<0.01).在热应激期,同一泌乳期牛红细胞Na+-K+-ATP酶活力与产奶量下降率成负相关;荷斯坦牛的体温明显升高,产奶量明显下降,红细胞K+无显著变化,红细胞Na+-K+-ATP酶活力明显下降,与非热应激期相比只有红细胞K+差异不显著(P>0.05),其余都差异极显著(P<0.01);红细胞Na+-K+-ATP酶与体温成负相关,与产奶量成正相关,与红细胞K+的相关性不显著.[结论]在热应激期,荷斯坦牛红细胞Na+-K+-ATP酶活力与耐热性成正相关,红细胞Na+-K+-ATP酶活力高的荷斯坦牛,耐热性好.     

敌百虫对体外培养大鼠大脑皮质神经细胞凋亡的影响

为探讨敌百虫对大鼠大脑皮质神经细胞的毒性作用及机理,本研究在建立体外培养新生24h内SD大鼠大脑皮质神经细胞模型的基础上,在细胞培养液中添加0、5、20、80mg/L敌百虫染毒,在染毒后的不同时间测定细胞凋亡率、线粒体膜电位、细胞内[Ca2＋]i、ROS含量和ATP酶的变化。结果显示：①染毒12h,细胞凋亡率明显增加;②染毒12h,各染毒组线粒体膜电位逐渐降低,其中80mg/L组与对照组存在极显著差异（P〈0.01）;③染毒0.5h,各染毒组细胞内[Ca2＋]i显著高于对照组（P〈0.01）;染毒12h,各染毒组细胞内[Ca2＋]i呈下降趋势,但仍显著或极显著高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）;④染毒12h和24h,细胞内ROS水平显著或极显著高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）;⑤染毒12h,细胞Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-Mg2＋-ATPase活性逐渐降低,20、80mg/L组与对照组有极显著差异（P〈0.01）;上述指标的变化呈显著的剂量-效应关系。结果表明,低质量浓度敌百虫暴露可致大鼠大脑皮质神经细胞凋亡率和细胞内ROS含量升高,线粒体膜电位下降,细胞内钙离子超载且ATPase活性降低,提示细胞凋亡在敌百虫所致的大脑皮质神经细胞损伤过程中发挥主导作用。     

β-CM5对离体大鼠小肠葡萄糖吸收的影响

为了探讨β-酪啡肽-5(β-CM5)对大鼠小肠葡萄糖吸收的影响,利用翻转的离体小肠模型,通过测定60 min内β-CM5不同浓度组肠囊内葡萄糖含量及葡萄糖的转运率;测定离体肠道黏膜α-葡萄糖苷酶、Na+-K+-ATP酶活力,分析大鼠小肠钠依赖性葡萄糖共转运载体(SGLT-1)及葡萄糖转运载体2(GLUT-2)mRNA表达水平,揭示β-CM5对葡萄糖吸收影响及机制。结果:不同浓度β-CM5肠囊内葡萄糖的转运量及转运率均显著低于对照组;β-CM5组小肠黏膜中α-葡萄糖苷酶和Na+-K+-ATP酶活力显著低于对照组;β-CM5组小肠黏膜中SGLT-1、GLUT-2 mRNA表达量与对照组相比均显著性下调。结果表明:β-CM5可以通过抑制葡萄糖吸收的相关酶活性,下调葡萄糖转运载体mRNA的表达,从而抑制肠道葡萄糖的吸收,提示β-CM5可能具有降糖作用。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇与玉米赤霉烯酮联合暴露对体外培养鸡脾脏淋巴细胞内环境稳态的影响

本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)与玉米赤霉烯酮与(ZEA)联合暴露对体外培养鸡脾脏淋巴细胞内环境稳态的影响。分别以0.012 50μg/mL DON+0.006 25μg/mL ZEA、0.050μg/mL DON+0.025μg/mL ZEA、0.2μg/mL DON+0.1μg/mL ZEA、0.8μg/mL DON+0.4μg/mL ZEA对体外培养鸡脾脏淋巴细胞进行联合暴露培养,48 h后测定细胞膜ATP酶(Ca~(2+)-ATP酶、Na~+/K~+-ATP酶)活性以及细胞内pH、Ca~(2+)水平和钙调蛋白(CaM)的mRNA表达水平。同时设不添加毒素的空白对照组。结果表明:添加毒素的各试验组间,细胞内Ca~(2+)水平、CaM mRNA表达水平随毒素浓度的升高而增加,且添加毒素的各试验组均显著或极显著高于空白对照组(P0.05或P0.01)。细胞内pH以及细胞膜Ca~(2+)-ATP酶与Na~+/K~+-ATP酶活性均随毒素浓度的升高而降低,且添加毒素的各试验组均显著或极显著低于空白对照组(P0.05或P0.01)。由此得出,DON、ZEA联合暴露导致体外培养鸡脾脏淋巴细胞内酸化、离子平衡失调等一系列细胞内环境稳态失衡,且呈剂量依赖性。