利用RAPD技术快速鉴定番茄杂种和纯度

从两个番茄杂种Ｌ４０２，Ｌ４０４及它们的亲本共６份材料的叶片叶提取ＤＮＡ，使用国产ＰＣＲ仪，建立了适合番茄ＲＡＰＤ分析的ＰＣＲ条件，进一步在１００个随机引物中找到５个可用物鉴定这两个杂种纯度的引物，其中ＯＰＫ１４引物可同时用来鉴定两个杂种，利用该法鉴定杂种纯度不仅简单，迅速，可靠，而且因ＤＮＡ的用量少，不影响被检植株的后期生长。     

利用RAPD技术快速鉴定番茄杂种纯度

从两个番茄杂种Ｌ４０２、Ｌ４０４及它们的亲本共６份材料的叶片中提取ＤＮＡ,使用国产ＰＣＲ仪,建立了适合番茄ＲＡＰＤ分析的ＰＣＲ条件,进一步在１００个随机引物中找到了５个可用于鉴定这两个杂种纯度的引物,其中ＯＰＫ１４引物可同时用来鉴定两个杂种。利用该法鉴定杂种纯度不仅简单、迅速、可靠,而且因ＤＮＡ的用量少,不影响被检植株的后期生长。     

苹果RAPD分析体系的建立

对富士苹果（Ｍａｌｕｓ　ｐｕｍｉｌａ　Ｍｉｌｌ．ｃｖ．Ｆｕｊｉ）ＲＡＰＤ（Ｒａｎｄｏｍ　Ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ　ＤＮＡ）分析体系的优化研究表明，ＲＡＰＤ反应体系中，ＤＮＡ、Ｔａｑ酶、引物和Ｍｇ２＋４种主要成分的最适用量分别为：２０ｎｇ、１．０ Ｕ、０．２ｕｍｏｌ·Ｌ－１和３．０ｕｍｏｌ·Ｌ－１。采用该优化体系，以 ＯＰＪ０３为引物，构建了我国及世界范围内苹果生产中重要的２８个品种的ＲＡＰＤ指纹图谱，分析了其遗传多样性，区分了供试的２８个苹果品种中的１５个，区分率达５３．６％。讨论了ＲＡＰＤ鉴定苹果品种的应用及其主要影响因素。     

几个Mang果品种的RAPD分析

应用１０个十聚体机引物，美国红Ｍａｎｇ，桂香Ｍａｎｇ株系的基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析，筛选出Ｓ２７３、Ｓ２８１和Ｓ２８６３个随机引物，适用于Ｍａｎｇ果基因组ＤＮＡ的ＲＡＰＤ扩增，结果表明迟熟红苹Ｍａｎｇ，美国红Ｍａｇｎ和桂香Ｍａｎｇ三者在ＤＮＡ序上存在差异性。     

利用RAPD方法鉴定两个春甘蓝品种的纯度

利 用 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ （ 随机 扩增多 态性 Ｄ Ｎ Ａ） 方 法， 通过 对１００ 个 随机 引物 的 筛选 获得 能 区分中甘１１ 号及其 亲本和８３９８ 及其 亲本的引 物 Ｏ Ｐ Ｒ１５ ，并 得到 单株 验证。 结果 表明 ，利 用 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ 方法对中甘１１ 号和８３９８ 这 两个早熟 春甘蓝一 代杂种 进行快速 、准确的 纯度鉴定 是可行 的。     

中国枣种质资源的RAPD分析

利用ＲＡＰＤ技术对枣６４个品种及类型的遗传变异进行了研究。从１２０个１０ｂｐ随机引物中筛选出４０个多态性引物用于正式扩增，共扩增出４９２条ＤＮＡ带，其中多态性ＤＮＡ带２９３条，占５９．５５％，平均每个引物扩增的ＤＮＡ带的数目为１２．３１条。有１３个品种及类型扩增出了１个以上的特有ＲＡＰＤ标记，据此可以进行品种鉴定或早期性状预选。利用ＤＮＡ扩增结果进行聚类分析，把供试的６４个品种及类型分为８类，并对     

RAPD技术在木耳属杂交种及原生质体融合子鉴定分析中的应用

本研究以ＲＡＰＤ（ＲａｎｄｏｍｌｙＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙ－ｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ）技术为主，比较分析食用菌木耳属（Ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａ）种内杂交种．种间原生质体融合子与其亲本菌株的ＰＣＲ（ＰｏｌｙｍｅｒｓｅＣｈａｉｈＲｅａｃｔｉｏｎ）扩增的ＤＮＡ片段之间差异，并辅以其它手段，如核相及核数目观察，同功酶鉴别，以期建立完整有效的检测技术系列，确证其杂交种融合子的真实性及可靠性。在ＲＡＰＤ分析中，用于测试的１０种随机引物仅有４种引物与供试菌株的ＤＮＡ模板具有较好的结合能力，其中１种引物可用于检测杂交种及其亲本，另外３种引物可用于检测融合子反亲本。检测结果显示：３个供试杂交种中有２个为真杂合子，１个为假杂合子；２个供试融合子均为非稳定杂合子。与常规方法鉴定结果比较基本相符。因此，ＲＡＰＤ技术提供了一种快速、简便、准确的杂交种及融合子的鉴别方法。     

几个杧果品种的RAPD分析

应用１０个十聚体随机引物,对美国红杧、桂香杧和退熟红苹杧株系的基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析,筛选出Ｓ２７３、Ｓ２８１和Ｓ２８６３个随机引物,适用于杧果基因组ＤＮＡ的ＲＡＰＤ扩增,结果表明迟熟红苹杧、美国红杧和桂香杧三者在ＤＮＡ序列上存在差异性。     

厚皮甜瓜亲缘关系及纯度的RAPD标记

利用２０个随机引物对厚皮甜瓜８个亲本与４个杂交种进行ＲＡＰＤ分析。１０个引物的扩增ＤＮＡ谱带具有多态性，亲本具有各自的特异谱带，绝大部分Ｆ１的扩增带型是双亲的互补带。各试材的相似系数范围为６３．６％－９６．５％。遗传距离聚类分析图表明，Ｆ１易与双亲或其一聚在一起。上述结果说明，可以利用ＲＡＰＤ标记在ＤＮＡ水平上进行厚皮甜瓜的亲缘关系及纯度的鉴定。     

厚皮甜瓜亲缘关系及纯度的RAPD标记

利用２０个随机引物对厚皮甜瓜８个亲本与４个杂交种进行ＲＡＰＤ分析。１０个引物的扩增ＤＮＡ谱带具有多态性，亲本具有各自的特异谱带，绝大部分Ｆ１的扩增带型是双亲的互补带。各试材的相似系数范围为６３．６％－９６．５％。遗传距离聚类分析图表明，Ｆ１易与双亲或其一聚在一起。上述结果说明，可以利用ＲＡＰＤ标记在ＤＮＡ水平上进行厚皮甜瓜的亲缘关系及纯度的鉴定。     

苹果RAPD分析体系的建立

对富士苹果（Ｍａｌｕｓ Ｐｕｍｉｌａ Ｍｉｌｌ．ｃｖ．Ｆｕｊｉ）ＲＡＰＤ（Ｒａｎｄｏｍ Ａｍｐｌｉｆｉｅｄ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ＤＮＡ）分析体系的优化研究表明，ＲＡＰＤ反应体系中，ＤＮＡ、Ｔａｑ酶、引物和Ｍｇ＾２＋４种主要成分的最适用量分别为：２０ｎｇ、１．０Ｕ、０．２μｍｏｌ．Ｌ＾－１和３．０μｍｏｌ．Ｌ＾－１。采用该优化体系，以ＯＰＪ０３为引物，构建了我国及世界范围内苹果生产中重要的２８个     

番茄种子宇宙飞行后的过氧化物同工酶及RAPD分析

番茄种子经搭载返地卫星宇宙飞行３５５ｈ，回收后地面种植，选择３个同工酶有差异的宇宙飞行处理群体植株进行ＲＡＰＤ检测。结果表明：在５０个供试引物中，有１８个扩增出了ＤＮＡ带，共有１６６条，其大小在２００～２０００ｂｐ之间。与地面对照相比，宇宙飞行处理植株的ＤＮＡ在５个引物出现差异，其突变的程度分别为４．５％、１．３％和３．２％。     

RAPD技术在金针菇杂交育种中的应用

本文以金针菇不同亲本菌株及其杂交种为材料，用２０个随机引物进行了ＲＡＰＤ分析，结果表明，两个随机引和的扩增出特异的ＤＮＡ片段，经三次重复，均获得相同结果，且能明显地区别鉴定出真正的杂交种，因此，在杂交育种中，ＲＡＰＤ分析是一种简便、快速、有效地从杂交后代中区别鉴定出真正杂交种的方法。     

RAPD技术在杨梅属植物分类研究中的应用

对杨梅属植物的２４个材料进行了ＲＡＰＤ型带及聚类分析。结果表明：ＲＡＤ技术能将起源于北美中心的蜡杨梅与起源于中国的３个种明显区分开，起源于中国的３个种各自聚类，各材料之间都有不同的遗传距离，证明ＲＡＰＤ技术可作为种级水平的分类鉴定依据。对ＲＡＰＤ技术在杨梅属植物分类研究中的问题进行了探讨。     

马铃薯青枯病抗性的分子标记

对两个马铃薯二倍体分离世代群体ＥＤ和ＣＥ共１４０个基因型进行青枯病人工接种鉴定，并以此为作图群体，综合ＲＡＰＤ，ＳＳＲ，ＡＦＬＰ３种标记技术，利用ＢＳＡ分析方法对抗性基因进行分子标记筛选和定位。筛选与抗病感病性状相连锁的３个ＲＡＰＤ标记ＯＰＧ０５９４０、ＯＰＲ１１８０和ＯＰＯ１３７７０；筛选到一个ＳＳＲ标记ＳＴＭ００３２，被定位于染色体ＸⅡ上，检测到７个ＡＦＬＰ多态性带，初步认为其与抗病性相关，并     

双孢蘑菇三种类型菌株的RAPD扩增研究

用７２个随机引物,对三种类型双孢蘑菇菌株２７９６（杂交型）,８２１１（优质型）,０１（高产型）等进行了ＲＡＰＤ扩增,发现２６个引物均产生三种不同的带型。用该２６个引物进一步作三种类型９株双孢蘑菇白色菌株的ＲＡＰＤ扩增,发现引物Ｕ１６,Ｕ２０,Ｂ１,Ｈ４,Ｈ５,Ｍ７能很好地区分三类菌株,尤以Ｕ２０和Ｈ５为佳,其产生的三种带型稳定整齐,差异带明显,为双孢蘑菇菌株特性的早期预测提供了ＤＮＡ水平的标记。     

大白菜和紫菜薹自交系染色体组DNA的RAPD分析

用８个随机引物（１０ｂｐ）对２个紫菜薹自交系的３个单株和４个大白菜自交系的４个单株的染色体组ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增，共有４０条带分离清晰、明亮，其中引条带在７个单株中表现出差异，可作为遗传标记（ＲＡＰＤ标记）。４个大白菜自交系之间的平均差异条带数为１２．３，２个紫菜薹自交系之间为９．５，大白菜与紫菜薹之间平均有１５．５条带的差异。用７个引物在９３Ｗ０５－７（紫菜薹）和９３Ｗ５８－５（大白菜）之间检测出对个ＲＡＰＤ标记。从同一自交系的不同单株抽提的染色体组ＤＮＡ扩增出较一致的ＤＮＡ谱带，而不同自交系间扩增出的ＤＮＡ谱带差异很大，这表明此方法也可以象ＲＦＬＰ一样，用于大白菜和紫菜薹的分子标记。     

黄瓜种质资源遗传亲缘关系的RAPD分析

利用ＲＡＰＤ技术对多个生态型的黄瓜材料的遗传亲缘关系进行了研究。从２００个１０碱基随机引物中筛选出２０个用于ＰＣＲ反应,３９．２％的扩增条带表现多态性;每个生态型品种都具有其特有的扩增（缺失）带以区别其他生态型品种;聚类分析将供试材料分为３大类群：华北类群、华南类群和欧洲温室类群。从分子水平验证了传统的黄瓜地域分类标准及黄瓜是遗传基础狭窄的蔬菜作物。对利用ＲＡＰＤ技术进行亲缘控制研究的可能性进行了探讨。     

PEG渗调引发处理对菜薹老化种子DNA损伤的修复作用

利用ＲＡＰＤ技术对菜薹人工老化种子ＤＮＡ的损伤及ＰＥＧ渗调引发处理的修复作用进行了研究。在６１种引物中，有６种在菜薹人工老化的种子上获得了基因组ＤＮＡ指纹图谱，平均每种引物扩增的总ＤＮＡ带数为２．１６，多态性ＤＮＡ带数为１．１７，有１１种引物在ＰＥＧ渗调引发的菜薹老化种子上获得了基因组ＤＮＡ指纹图谱，平均每种引物扩增的总ＤＮＡ带数为３．９１，多态性ＤＮＡ带数也是３．９１。人工老化对菜薹种子基因组Ｄ     

甘蓝显性雄性不育基因的延长随机引物扩增DNA(ERPAD)标记

获得了一个与甘蓝显性雄性不育基因连锁的延长随机引物扩增ＤＮＡ（ＥｘｔｅｎｄｅｄＲａｎｄｏｍＰｒｉｍｅｒＡｍｐｌｉｆｉｅｄＤＮＡ，ＥＲＰＡＤ）标记ＥＰＴ１１９００。ＥＰＴ１１９００是在与甘蓝显性雄性不育基因连锁的ＲＡＰＤ标记ＯＴ１１９００的基础上，通过逐步筛选３’端延长的随机引物的方法转化而成的稳定性和特异性都得到增强的新标记。这种标记的稳定性和特异性接近ＳＣＡＲ标记，但不需要克隆和测序。该方法首先根据ＯＰＴ１１的序列合成３’端添加Ａ、Ｔ、Ｃ、Ｇ４种碱基的４个引物，组成１０个引物对。以不育池为模板筛选出ＯＴ１１Ｃ＋ＯＴ１１Ｇ为唯一能够扩增长度与ＯＴ１１９００相同的一个片段的引物对。在此引物对基础上，又添加４种碱基得到８个新的引物，相互组合成１６个引物对。进一步以不育池为模板筛选出ＯＴ１１ＣＴ＋ＯＴ１１ＧＡ，在严格条件下，它可特异扩增长度与ＯＴ１１９００相同的一个片段ＥＰＴ１１９００。通过分离群体分析证实这一片段与ＯＴ１１９００处于同一位点。