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通过比较4种不同的回收方法和C18硅胶4种不同的用量对回收的影响,提出了回收低浓度微量寡核苷酸的最佳方案:分别用1 mL乙腈、2 mL灭菌双蒸水和1 mL 10 mmol/L乙酸铵平衡装填10 mg硅胶的C18 Sep-Pak反相层析柱;再将寡核苷酸溶液通过C18柱;然后用1 mL 25 mmol/L碳酸氢铵洗脱C18柱,并以3000 r/m in离心2 m in;最后用1 mL 30%乙腈洗脱C18柱,将收集的溶液离心冻干后即得到纯化的寡核苷酸。该方法的回收率可达53.7%±3.0%。 相似文献
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大白菜和紫菜薹自交系染色体组DNA的RAPD分析 总被引:17,自引:1,他引:16
用8个随机引物(10bp)对2个紫菜薹自交系的3个单株和4个大白菜自交系的4个单株的染色体组DNA进行PCR扩增,共有40条带分离清晰、明亮,其中引条带在7个单株中表现出差异,可作为遗传标记(RAPD标记)。4个大白菜自交系之间的平均差异条带数为12.3,2个紫菜薹自交系之间为9.5,大白菜与紫菜薹之间平均有15.5条带的差异。用7个引物在93W05-7(紫菜薹)和93W58-5(大白菜)之间检测出对个RAPD标记。从同一自交系的不同单株抽提的染色体组DNA扩增出较一致的DNA谱带,而不同自交系间扩增出的DNA谱带差异很大,这表明此方法也可以象RFLP一样,用于大白菜和紫菜薹的分子标记。 相似文献
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南瓜属三个种过氧化物酶和酯酶同工酶分析 总被引:14,自引:1,他引:13
本文分析了南瓜属(Cucurbita)的三个主要栽培种:美洲南瓜(C.pepoL.)、中国南瓜((C.moschata D.)和印度南瓜(C.maxima D.)的子叶过氧化物酶和种子酯酶同工酶酶谱,过氧化物酶分离出17条酶带;酯酶共分离出20条酶带,分属五个酶区。每一栽培种的4个品种间酯酶同工酶谱带非常接近,而三个种表现出较高的种间特异性。Est-Ⅲ3是美洲南瓜的特异性酶带。Est-Ⅳ3在中国南瓜的品种内表现一致,并且有较高的活性,而高活性的Est-Ⅴ4酶带是印度南瓜的特色。从酶谱分析亲缘关系结果为:印度南瓜、美洲南瓜与中国南瓜的关系较近,而印度南瓜与美洲南瓜之间的关系较远,这与前人利用种间杂交和细胞学研究的结果相吻合。 相似文献
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甘蓝与大白菜一代杂种及双亲幼苗两种同工酶分析 总被引:5,自引:0,他引:5
本文研究了7个甘蓝和5个大白菜一代杂种及双亲幼苗的过氧化物酶和a- 淀粉酶同工酶,甘蓝过氧化物酶共分离出6条酶带,大白菜分离出7条酶带。A-淀粉酶由一个基因座位控制,甘蓝有3个等位基因(a,b,c),大白菜除有具酶活性的等位基因(a)外,还有一零等位基因(0)。 7个甘蓝品种均可用过氧化物酶同工酶鉴别主要由自交引起的假杂种;a-淀粉酶可用于庆丰、京丰1号、中甘8号和中甘 9号的鉴别。小杂 55、 56及75号大白菜用过氧化物酶可鉴别假杂种。文章认为主要由亲本自交引起的假杂种的鉴别比较容易,一个同工酶有效座位就可以较准确地估算品种纯度;不明来源的品种间的混杂的鉴别难度较大,一般要求同时检测多种同工酶。在分析可能引起混杂的原因后,有针对性地进行同工酶分析,品种纯度的检测效果会更佳。 相似文献
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用α—淀粉酶同工酶分析测定中椒6号种子的品种纯度 总被引:4,自引:0,他引:4
本文研究了微辣型辣椒中椒6号及其双亲幼苗的α-淀粉酶同工酶,发现母本具有一条快带,父本具有一条慢带,其杂种同时具有双亲的两条酶带,此中用来鉴别别真假杂种。对田间纯度鉴定和同工酶纯度鉴定结果进行相关分析,其相关系数在显著水平,表明两种不同的纯度分析方法所获结果基本一致。幼苗α-淀粉酶同工酶分析,方法简捷,可靠,完全可以用于中椒6号种子纯度的快速鉴定。 相似文献
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为探讨甲基磺酸乙酯(ethyl methane sulfonate,EMS)诱变在小麦品质育种中的价值,了解EMS诱变小麦籽粒品质变异状况,筛选优良的变异材料,对1667份西昌69的EMS诱变系M 6代籽粒的蛋白质含量、淀粉含量、面筋含量、容重、面团形成时间和稳定时间等多个籽粒性状进行了测定,初步分析了诱变系的品质变化,并通过SDS-PAGE电泳法及高效液相色谱技术分析了其籽粒高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)的组分和不溶性蛋白聚合体的含量。共筛选到101份HMW-GS变异诱变系,分别为亚基缺失、亚基增生、亚基置换和亚基缺失且置换4种变异类型。其中,有28份诱变系的蛋白质含量、面筋含量、形成时间、稳定时间等多个籽粒品质性状及不溶性蛋白聚合体含量优于亲本,且千粒重相对稳定,可以作为优质种质资源用于小麦品质育种。 相似文献
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大白菜超低含水量种子保存研究 总被引:7,自引:0,他引:7
5种含水量(5%~1%)的大白菜87-3种子,分别在4种温度下(-20℃、4℃、常温、40℃)贮藏3年,其生活力在常温贮藏与在-20℃、4℃下贮藏没有显著差异,40℃贮藏种子生活力明显下降,4℃及常温下超干贮藏3年对大白菜种子生活力没有影响。87-3在常温贮藏的最佳含水量约为3%~2%。 相似文献