复方中药禽康散对接种新城疫病毒鸡胚的保护效应

为了研究复方中药禽康散提取液对鸡新城疫病毒活性的影响,试验采用鸡胚法以不同浓度中药提取液与新城疫F48E9毒株悬液混合后各接种8枚鸡胚,观察各组鸡胚的存活情况。结果表明:中药浓度为1.0 g/mL、0.5 g/mL、0.25 g/mL时活胚率分别是87.5%、75.0%、50.0%,而不加中药组鸡胚96 h后全部死亡。说明复方中药禽康散具有抗新城疫F48E9毒株的作用,且随着中药浓度的增加抗病毒作用增强,呈现一定的量效关系。     

中药大黄抗新城疫病毒的试验研究

中药大黄具有抗菌、抗病毒、清热、滋阴凉血等作用。大黄的有效成分经乙醇提取，然后在鸡胚上研究其抗新城疫病毒的作用。结果表明，中药大黄提取液对新城疫F48E8毒株具有显著的抑制作用。     

复方中药“禽康散”对鸭瘟病毒感染鸭胚及成纤维细胞的保护效应

将不同浓度复方中药“禽康散”和鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)分别以不同方式接种到鸭胚尿囊膜后观察其对DPV感染的鸭胚保护率;用MTT法测定“禽康散”对鸭胚成纤维细胞(DEF)的安全质量浓度和增殖的影响,及安全质量浓度范围内的“禽康散”对DPV感染鸭胚成纤维细胞(DEF)能力的影响.结果显示,“禽康散”在10日龄鸭胚内对DPV具有显著的杀灭和阻断感染的作用.“禽康散”对DEF的最大安全质量浓度为2-4 g/mL,在2-4～2-8 g/mL质量浓度范围内对DEF有显著的增殖和抑制DPV感染DEF的能力,且与加药方式和药物质量浓度有一定关系.结果表明,一定质量浓度的“禽康散”对DEF具有增殖作用,并对DPV在鸭胚内和细胞水平上均有较好的杀灭和拮抗作用.     

广东鸽禽Ⅰ型副黏病毒基因Ⅶ型的分离鉴定

2007年在广东某发病鸽群中分离到一株鸽禽Ⅰ型副黏病毒（GM01）．经测定,其鸡胚平均死亡时间（MDT）为76h,鸡脑内接种致病指数（ICPI）为1．3,在鸡和鸡胚上为中等毒力病毒。应用RT—PCR对F基因片段进行扩增并测序,结果表明该F蛋白裂解位点处氨基酸序列为112R—R—Q—K—R—F 117,是典型的强毒株序列。用DNASTAR软件对GM01株F基因片段与国内外相关的NDV参考株进行比较,结果表明GM01株与Chicken／Gx／14／2005株的核苷酸和氨基酸相似性分别为98．6％和98．4％;与Pigeon-Gxp40毒株核苷酸和氨基酸相似性分别为98．5％和98．7％,在遗传进化树中位于同一个分支,同属于基因Ⅶ型;与国内代表性弱毒疫苗株LaSota毒株和NDV强毒株F48E9的核苷酸及氨基酸相似性分别为84．1％和86．5％及86．3％和88．0％。     

板蓝根和黄芪提取液与IBV感作后对鸡胚EE值和EE指数的影响

为研究板蓝根和黄芪复方提取液对鸡传染性支气管炎病毒（IBV）致鸡胚矮小化的影响,将IBV分别与不同浓度提取液感作后接种于9日龄鸡胚,孵育,分别测定接种病毒、药液和病毒与药液混合液后48h、72h、96h、120h、144h和168h鸡胚的体重与卵重的比值（EE值）和试验组EE值与空白对照组平均EE值的比值（EE指数）的变化。结果表明,浓度为1．00g／ml、0．50g／ml的板蓝根和黄芪提取液对IBV致鸡胚矮小化具有显著的抑制作用。     

新城疫野毒株与F48E9强毒株对不同抗体水平雏鸡的感染试验

应用新城疫野毒株与F48E9标准强毒株对母源抗体效价分别为8．50，6．00和4．00log2的雏鸡进行了攻毒试验。结果：新城疫野毒株的感染致死率依次为20％，100％和100％，F48E9标准强毒株的感染致死率依次为0，10％和100％，提示，在目前新城疫流行日益复杂的情况下，传统的高水平母源抗体已不能完全阻止新城疫强毒株的感染和发病。     

新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞中免疫相关细胞因子表达的检测

分别采用新城疫强毒株F48E9与新城疫弱毒株La Sota感染10日龄鸡胚制作的鸡胚成纤维细胞,感染后24 h提取鸡胚成纤维细胞的总RNA,通过RT-PCR技术结合凝胶成像系统扫描检测21种免疫相关细胞因子在鸡胚成纤维细胞中的表达量.实验结果表明,在鸡胚成纤维细胞中,无论是否感染新城疫病毒,IL-2、IL-3、IL-4、IL-21不能检测到其相应条带.通过统计学分析,IFN-β、IFN-γ、IL-9、IL-12-P35、IL-12-P40在病毒感染组与对照组间呈现出显著的差异,而强毒感染组与弱毒感染组的比较中,仅IFNγ、IL-9表现出显著差异.     

鸡副黏病毒YM毒株F基因的克隆及遗传进化关系研究

近年来,我国相继有新城疫强毒株出现的报道,为分析这些强毒株与疫苗株之间的遗传进化关系,研究新城疫的流行病学特点,文章以华中农业大学病毒室分离的YM毒株基因组RNA为模板,利用RT-PCR扩增F基因的cD-NA,将其连接入pMD18-T载体,经筛选证明已获得鸡副黏病毒YM毒株F基因的阳性克隆子。核苷酸序列和氨基酸序列分析表明,YM毒株属于NDV基因Ⅶ型强毒株;F蛋白氨基酸序列与中国标准强毒株F48E9 F蛋白氨基酸序列同源性为86％,与弱毒疫苗Lasota／46株氨基酸序列同源性仅为83％,证明为变异株,且其重要的抗原位点343位氨基酸由Leu→Pro,免疫原性发生了较大变化。从基因进化树也可见,其与中国标准强毒株F48E9,弱毒疫苗Lasota／46株的进化关系较远,这从分子角度解释了为什么高免的鸡仍然暴发新城疫。     

一株基因Ⅱ型新城疫病毒的检测及HN、F基因序列分析

为了掌握辽宁省新城疫病毒(NDV)的分布特点,试验采用新城疫荧光RT-PCR方法检测到1株新城疫病毒,通过接种鸡胚分离鉴定后将其命名为CK/YK1/2013,通过PCR扩增得到HN、F基因全长片段并测定了基因序列。结果表明:该毒株可以使接种鸡胚在38 h内死亡,具备强毒株的生物学特性。CK/YK1/2013的F基因在裂解位点的氨基酸序列为111GGRQGRL117,与弱毒株LaSota序列相同,与其他已知强毒株的裂解位点不同。CK/YK1/2013的HN、F基因与Ⅱ型LaSota毒株的同源性为99.6%,与F48E9及Ⅶ型的同源性分别为89.1%和83.0%,基因进化树分析表明该毒株属于Ⅱ型NDV。     

鸵鸟新城疫实验病理学研究

用鸡源新城疫(ND)强毒株F48E9和鸵鸟源新城疫强毒株O-XJ99-12,对不同免疫状态下2~4月龄鸵鸟进行动物试验。动物发病后经剖检、组织切片、病毒分离等方法证实:鸵鸟源和鸡源新域疫病毒(NDV)毒株,经静脉和黏膜感染非免疫鸵鸟,均可引起特征性的鸵鸟ND症状和病变,对鸡胚致病力强的NDV毒株,对非免疫鸵鸟的致病力也强;鸵鸟ND的免疫临界点,HI抗体效价最低为5log2。     

复方中草药灌注液治疗奶牛子宫内膜炎临床效果观察

目的 研究旨在通过试验观察中草药治疗奶牛子宫内膜炎疗效,以其为临床应用中草药治疗奶牛子宫内膜炎提供参考。方法 将60 头患子宫内膜炎奶牛,随机分成5 组,每组12 头,复方中草药高、中、低剂量组（分别子宫灌注150 mL/头、100 mL/头和50 mL/头）、土霉素组（子宫灌注50 mL/头）和对照组。结果 复方中草药中剂量组和高剂量组的总有效率为75.00%和83.33%,均高于土霉素组的总有效率66.67%;土霉素组在治疗结束后的平均发情天数缩短了14 d,所有复方中草药组的发情天数也缩短了11~19 d;3 个情期内土霉素组受胎率为50.00%,复方中草药组受胎率介于41.67%~66.67%之间。结论 复方中草药对奶牛子宫内膜炎的治疗效果优于土霉素,其中以高剂量组效果最佳。     

传染性喉气管炎新城疫鸡痘重组病毒免疫效力的研究

在表达鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白gB基因和新城疫病毒(NDV)F基因的重组鸡痘病毒(rF-PV-gB-F)安全性检验合格后,以5.0×101~5.0×104PFU不同含量按0.1mL/鸡的剂量免疫100只30日龄SPF鸡,30d后分组分别用ILTVWG株和NDVF48E9株强毒进行攻击。免疫鸡抗鸡痘病毒抗体都转为阳性,痘反应和接种剂量有关,重组疫苗的最小反应剂量为50PFU。重组疫苗可以诱发对新城疫和传染性喉气管炎的保护,0.1mL/鸡的接种量在500~5000PFU浓度范围内的免疫效果最好,对于ILTV攻击的发病保护率在70%以上,对NDV强毒攻击的抗死亡保护率可以达到80%,这为进一步考察疫苗的免疫效力试验以及进行田间试验奠定了基础。     

复方中药对感染NIB鸡红细胞免疫功能的影响

为了探明由熟地等组成的复方中药对人工感染NIB雏鸡红细胞免疫功能的影响规律,将雏鸡随机分为5组（空白对照组,攻毒对照组,复方中药低剂量、中剂量、高剂量治疗组）,分别于给药后3、6、9、14、19 d采集血样,测定RBC-CR1花环率与RBC-IC花环率。结果显示,该复方中药可以使人工感染NIB雏鸡RBC-CR1花环率显著回升,并恢复到正常水平;同时使人工感染NIB雏鸡RBC-IC花环率显著升高,然后再恢复到正常水平。该复方中药的作用呈现剂量效应。该复方中药可以提高人工感染NIB雏鸡红细胞的免疫功能。     

复方中草药添加剂对热应激下奶牛生产性能、生理和生化指标的影响研究

试验按产奶量、胎次、泌乳时间和体况评分相近的原则选取40头健康荷斯坦奶牛,随机分为对照组、试验Ⅰ组（中草药）、试验Ⅱ组（中草药＋缓冲剂）、试验Ⅲ组（中草药＋益生菌）和试验Ⅳ组（中草药＋γ-氨基丁酸）,测定热应激期生产性能、生理和血液生化指标的变化,探讨复方中草药添加剂对奶牛热应激的影响及其机理。试验结果显示：（1）平均产奶量,Ⅳ组〉Ⅲ组〉Ⅰ组〉Ⅱ组〉对照组,其中Ⅳ组和Ⅲ组分别比对照组提高1．28kg／d和1．25kg／d（P〈0．05）;（2）各组间乳成分无明显变化;（3）生理指标方面,试验各组直肠温度和呼吸频率均略低于对照组（P〉0．05）;（4）试验各组三碘甲腺原氨酸（T3）浓度均高于对照组,其中试验Ⅱ组比对照组高37．33％（P〈0．05）;甲状腺素（T4）浓度,除试验Ⅲ组有所降低外,Ⅱ组和Ⅰ组均比对照组高（P〉0．05）;试验组皮质醇（Cot）、促肾上腺皮质激素（ACTH）和白细胞介素-2（IL-2）均略低于对照组;血清中肌酸激酶（CK）、碱性磷酸酶（ALP）和谷草转氨酶（AST）含量均低于对照组,其中试验Ⅲ组AST含量比对照组低21．34％（P〈0．05）;谷丙转氨酶（ALT）含量均高于对照组。由此可见,复方中草药添加剂具有缓解奶牛热应激症状、改善机体代谢、调节内分泌和免疫水平的作用;就提高生产性能而言,以中草药＋益生菌和中草药＋γ-氨基丁酸两组配方的效果最佳。     

复方中药“禽康散”对人工感染新城疫病毒肉鸡血清免疫球蛋白及新城疫抗体效价的影响

10日龄的健康艾维茵肉仔鸡250只,随机分为5组。21日龄时除阴性对照组（Ⅳ组）外均用新城疫病毒（Newcastle disease,virus,NDV）强毒株攻毒,各治疗组（Ⅰ～Ⅲ组）在22～25日龄饲料中分别添加0．5％、1.0％、2．0％的复方中药“禽康散”,第Ⅳ、Ⅴ组（阳性对照组）不用药。在攻毒前1d和攻毒后1、3（用药后2d）、7（停药后2d）、15（停药后10d）d观察血清免疫球蛋白及新城疫抗体效价的变化。结果显示：Ⅴ、Ⅱ组血清IgG在攻毒15d（停药10d）时与Ⅲ、Ⅳ、V组差异极显著（P〈O．01）;Ⅰ～Ⅲ组血清IgA浓度在攻毒后3、7d均明显高于第V组（P〈0．05或0．01）,以1％治疗组效果最佳;各组之间血清中IgM含量无显著差异（P〉0．05）。Ⅴ～Ⅲ组新城疫抗体效价在攻毒7d后各阶段均高于阳性对照组（P〈0．05或0．01）,以第Ⅲ组最佳。结果表明,日粮添加1．0％～2．0％质量分数的“禽康散”能明显增加血清中IgG、IgA含量和新城疫抗体效价,从而提高机体体液免疫功能,达到提高机体抗NDV的能力。     

20种中草药复配物对犬源葡萄球菌体外抑制作用的研究

为探究复方中草药对犬源葡萄球菌的体外抑制作用效果,将30种单味中草药配伍后得到20种复配物并制成水提物,采用二倍稀释法测定中草药复配物对犬源葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC),利用琼脂扩散法测定中草药复配物对犬源葡萄球菌的抑菌圈直径。结果表明,编号为15和16的中草药复配物对犬源葡萄球菌体外抑菌效果最好,最低抑菌浓度均为31.25mg/mL,抑菌圈直径分别为31.0mm和38.0mm,犬源葡萄球菌对这2个复方均表现为极敏;其他复方中草药对犬源葡萄球菌也呈现出不同程度的抑菌活性。研究结果为兽医临床筛选高效低毒的复方中草药制剂提供了科学依据。     

新城疫病毒在鸡胚不同组织增殖的研究

不同新城疫病毒Ｆ４８Ｅ８、Ｎ－７９、ＬａＳｏｔａ和分离株Ｘ以１∶１００００稀释接种９日龄ＳＰＦ鸡胚,每胚０．２ｍｌ,结果发现,Ｆ４８Ｅ８和分离株Ｘ毒力较强,可在５０小时左右致死鸡胚,ＬａＳｏｔａ和Ｎ－７９较弱。Ｆ４８Ｅ８和Ｘ株接种鸡胚的肌肉、肝脏、脑和尿囊液均有大量病毒存在,而Ｎ－７９和ＬａＳｏｔａ只在尿囊液中有大量病毒存在,胚体病毒极少。     

猪源副黏病毒HX01株分离鉴定、全基因测序与遗传变异分析

从陕西省户县某猪场患流感样症状病死仔猪肺脏分离得到1株副黏病毒,命名为猪源副黏病毒（PPMV）HX01株,对分离毒株鉴定后进行部分生物学特性研究和全基因测序分析。参考PPMV JL-1株基因组序列设计10对引物,对PPMV HX01株分段扩增并测序,将测序成功的各序列依次拼接得到全基因序列并进行序列比对。该病毒MDT为91.2h,ICPI和IVPI为0,EID50为10-10.25/mL,表明该毒株属于新城疫弱毒株。序列分析结果表明,PPMV HX01株（全基因序列GenBank登录号：JF795531）与NDV参考毒株全基因核苷酸同源性83.3%～99.8%,该病毒与基因Ⅱ型我国传统弱毒疫苗株La Sota全基因水平和各个基因编码开放阅读框的同源性均在99.5%以上,而与基因Ⅸ型国家标准强毒株F48E9和目前流行的基因Ⅶ型毒株亲缘关系较远。     

中药微生态制剂对奶牛子宫内膜炎临床疗效和血液指标的影响

[目的]为了探讨中药微生态制剂对奶牛子宫内膜炎的临床疗效和血液指标的影响。[方法]将中药按组方称取,先用乙醇溶液浸泡,再加热回流提取其有效成分,浓缩至0.5 g/mL,加入葡糖糖煮沸,降温接种乳酸杆菌和红茶菌,制备中药微生态制剂。选取某奶牛场患有子宫内膜炎的泌乳奶牛,随机分成中药微生态治疗组、阳性对照组和阴性对照组,治疗后第7天用阴道镜检查,并同时颈静脉采血,测定用药前后血液中白细胞、中性粒细胞、单核细胞、血清钙、磷含量、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和乳酸脱氢酶（LDH）的影响。[结果]中药微生态制剂的治愈率 86.67%、有效率达93.33%;用药前患牛血液中白细胞、中性粒细胞与阴性对照组差异极显著（p﹤0.01）,ALT、AST和LDH与阴性对照组差异极显著（p﹤0.01）,单核细胞、血清钙和磷含量与阴性对照组差异显著（p﹤0.05）,用药后血液中各项指标与阴性对照组均差异不显著（p﹥0.05）。[结论]中药微生态制剂对奶牛子宫内膜炎有良好的治疗效果。     

复方中草药添加剂对奶牛生产性能的影响

目的 研究基础日粮中添加不同含量复方中草药添加剂对奶牛生产性能的影响。方法 本试验选取体重接近、胎次相同、体况良好的荷斯坦牛60 头,随机分为4 组,每组15 头,对照组饲喂基础日粮,试验I组、II组、III组在基础日粮中分别添加复方中草药添加剂200 g/d·头,250 g/d·头,300 g/d·头,试验期为30 d。结果 与对照组相比,日粮中添加250 g/d·头的复方中草药添加剂显著降低了牛奶中的乳脂率和体细胞数（P<0.05）,显著提高了奶牛的采食量、产奶量和牛奶中的乳蛋白率（P<0.05）。结论 日粮中添加250 g/d·头的复方中草药剂作为饲料添加剂,可以提高奶牛的生产性能及奶牛场的经济效益。