致鸡产蛋下降禽病原的检测基因诊断芯片的研制及临床应用

本试验研究的目的是利用RT-PCR技术扩增出新城疫病毒(NDV)、低致病性禽流感病毒(AIV H9)、传染性支气管炎病毒(IBV)、减蛋综合征(EDS)、传染性喉气管炎病毒(ILT)、鸡毒支原体(MG)各一段保守序列,以纤维素酯膜作为生物芯片制作的基质,通过微量点样技术制作基因芯片(gene chip)。从可疑病料中提取组织核酸,通过掺入法bio-11-dUTP标记,对杂交信号的强弱检测来实现对生物样品的高效分析诊断。     

一种清洁水产品储运装置的设计与试验

研究设计一种清洁水产品储运装置,包括过滤装置、增氧装置以及冷却装置,采用微孔曝气增氧技术、半导体制冷技术及旋流离心技术,实现储运水体的清洁保质。对该装置进行了增氧效果、冷却效果及过滤效果试验,各功能效果较好,具有较好市场应用前景。     

鸵鸟新城疫实验病理学研究

用鸡源新城疫(ND)强毒株F48E9和鸵鸟源新城疫强毒株O-XJ99-12,对不同免疫状态下2~4月龄鸵鸟进行动物试验。动物发病后经剖检、组织切片、病毒分离等方法证实:鸵鸟源和鸡源新域疫病毒(NDV)毒株,经静脉和黏膜感染非免疫鸵鸟,均可引起特征性的鸵鸟ND症状和病变,对鸡胚致病力强的NDV毒株,对非免疫鸵鸟的致病力也强;鸵鸟ND的免疫临界点,HI抗体效价最低为5log2。     

六种禽病原检测的基因诊断芯片的研制及临床应用

利用RT-PCR或PCR技术扩增出新城疫病毒（newcastle disease virus）、低致病性禽流感病毒（avian influenza）、传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus）、减蛋综合征（egg drop syndrome）、传染性喉气管炎病毒（infectious laryngotracheitis）、鸡毒支原体（mycoplasma gallisepticum）基因的各一段保守序列,以纤维素膜作为生物芯片制作的基质,通过微量点样技术产生二维DNA探针阵列,即基因芯片（gene chip）。从可疑病料中提取病原核酸,通过RT-PCR掺入法标记bio-11-dUTP,将获得的标记PCR产物和基因芯片进行杂交,通过检测杂交信号的强弱来实现对生物样品的快速、高效检测及分析。芯片灵敏度高于RT-PCR和病毒分离,分别为RT-PCR和病毒分离的102倍和104倍,有忠实的特异性,动物实验结果符合率在95%以上。     

乌珠穆沁白山羊绒毛品质分析与研究

<正>乌珠穆沁白山羊主要分布在内蒙古自治区锡林郭勒盟东北部的乌珠穆沁草原上,现有总数50万只,年产原绒达300吨。 为了配合乌珠穆沁白山羊的选育提高,对中心产区东乌旗的乌珠穆沁白山羊的绒毛品质进行了分析研究。 材料及方法 (一)材料: 1989年5月中旬山羊集中抓绒期,从东乌旗10多个苏木的羊群中随机选取167只1～5岁的公母山羊采集了绒样,于7～8月份在内蒙古农牧学院畜牧系养羊实验室分育成公母羊、成年公母羊4组进行绒毛物理特性测定。     

猪流感病毒分型基因芯片的建立和初步应用

根据流感病毒血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）亚型基因序列间的差异性,分别设计H1、H3、H9、N1和N2的特异分型引物,并根据M基因设计A型流感病毒的通用引物。RT-PCR扩增猪流感病毒各亚型HA、NA和M基因的特异片段,克隆至pMD18-T构建重组质粒,制备探针。将各探针按一定的阵列点加到硝酸纤维素膜上,制成基因芯片。并对217份不同地区的样品进行检测。结果表明：该芯片可以同时检测待检样品中5种亚型A型流感病毒,并显示了较高的灵敏度和特异性,灵敏度比PCR高1个稀释度,比病毒分离高2个稀释度。该方法的建立为猪流感的检测及猪流感病毒各亚型在猪群中的流行病学调查提供了一种快速、灵敏和高通量的手段。     

鸡14种病毒病基因芯片的研究

应用PCR或RT—PCR方法分别获得鸡新城疫(ND)、禽流感(AI)、鸡传染性支气管炎(IB)、鸡传染性法氏囊病(IBD)、鸡传染性喉气管炎(ILT)、鸡马立克氏病(MD)、减蛋综合征(EDS-76)、禽网状内皮组织增生症(RE)、鸡脑脊髓炎(AE)、鸡传染性贫血症(CIA)、鸡病毒性关节炎(AVA)、包涵体肝炎(IBH)、禽白血病(AL)、鸡痘(FP)各一特异性片断，以这些片断为探针，采用接触式点样技术，制成低密度的DNA阵列芯片。自病料中提取核酸，通过生物标记技术，使样品核酸标记上生物素。当样品和预点在硝酸纤维素膜上的探针杂交后．通过显色技术，即可得出诊断结果。     

实时荧光PCR方法检测禽病毒病的研究

通用探针是实时荧光PCR探针类的一种,具有高度的特异性和灵敏度,可对样品进行准确的定量分析。本试验主要采用该方法对通用探针检测禽病毒病进行了研究,试验结果显示本方法的特异性、灵敏度和Taq Man探针相近,且具有操作简便、费用低廉等优点。     

实时荧光PCR方法检测禽病毒病的研究

通用探针是实时荧光PCR探针类的一种，具有高度的特异性和灵敏度，可对样品进行准确的定量分析。本试验主要采用该方法对通用探针检测禽病毒病进行了研究，试验结果显示本方法的特异性、灵敏度和Taq Man探针相近，且具有操作简便、费用低廉等优点。