药用苔藓植物银叶真藓和泥炭藓组织培养基配方研究

该实验用银叶真藓和泥炭藓为外植体,以不同体积质量分数的Knop培养基、微量元素、酒石酸铵和糖类为因子,采用正交试验设计的方法,研究影响两种苔藓植物配子托和银叶真藓原丝体生长的主要因子.研究结果显示:①在以上4种因子中,糖类是影响两种苔藓植物生长的主要因子,葡萄糖或蔗糖的体积质量分数在接近5g/L时最有利于两种苔藓植物生长;②银叶真藓原丝体液体培养,采用未经稀释的knop培养基效果最好,而在固体培养基上培养银叶真藓和泥炭藓配子托,采用稀释2倍的Knop培养基效果最好;③酒石酸铵对泥炭藓配子托生长的影响程度仅次于糖类,是比较重要的因子.     

植物生长调节剂不同浓度配比对金发藓原丝体发育的影响

以金发藓（Polytrichum commune Hedw.）为供试藓种,MS液体培养基为培养基质,在培养基质中分别添加两种植物生长调节物质6-BA和2,4-D的9种浓度配比,以不添加植物生长调节剂的MS培养基为对照,探索植物生长调节剂对金发藓原丝体各项生长指标的影响机理。在金发藓原丝体发育阶段,6-BA浓度为0.5 mg/L和2,4-D浓度为1.0 mg/L的处理时,对原丝体主枝的生长发育效果最好,且对原丝体分枝的抑制作用最小,因此金发藓原丝体发育的最佳培养基为：MS（液）＋0.5 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L 2,4-D＋1%蔗糖。     

Pb2＋／Cr3＋污染对银叶真藓、小扭口藓叶绿素含量的影响

[目的]研究 Pb2＋/Cr3＋浓度对银叶真藓和小扭口藓叶绿素含量的影响。[方法]以银叶真藓与小扭口藓为材料,用不同浓度的硝酸铅溶液或氯化铬溶液进行培养,研究它们在重金属铅、铬单一胁迫下光合色素含量的变化。[结果]同一 Pb2＋浓度,除了在100 mg/L浓度外,其他浓度对于小扭口藓的影响均大于银叶真藓;在同一 Cr3＋浓度,除了在10 mg/L这一浓度外,对于银叶真藓的影响均大于小扭口藓。不同浓度的 Pb2＋、 Cr3＋处理均导致银叶真藓及小扭口藓的总叶绿素含量较其空白对照组降低。小扭口藓对于 Pb2＋污染的耐受力不及银叶真藓,而对于 Cr3＋污染较银叶真藓大。[结论]基于对作为苔藓植物监测材料在量上及多毛分枝物点上的常规要求,可以选用小扭口藓作为郑州市区大气重金属污染监测指示物种。     

金边北海道黄杨再生体系的建立及其快繁初探

[目的]探索金边北海道黄杨再生体系建立的方法和条件。[方法]以MS为基本培养基,配置不同种类和不同浓度激素的培养基,对金边北海道黄杨幼嫩叶片和腋芽进行不定芽诱导培养、增殖培养和生根培养。[结果]MS可作为金边北海道黄杨再生体系的基本培养基。6-BA配合NAA有利于叶片、腋芽愈伤组织和不定芽的诱导,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L培养基效果最佳,腋芽诱导率高达66.67%。较高浓度的6-BA配合较低浓度的NAA有利于丛生芽的增殖,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L培养基增殖效果较理想,增殖率高达328.57%。MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖3%或1/4MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖2%可获得最佳生根效果。[结论]该体系的建立为金边北海道黄杨种苗快速繁殖提供参考依据。     

生长调节剂对柳杉苗越冬生长生理变化的影响

[目的]研究不同浓度的萘乙酸（NAA）和6-苄氨基嘌呤（6-BA）对-年实生柳杉幼苗越冬的生长生理状况的影响,为越冬柳杉苗缩短育苗周期,提高出圃率及春季造林成活率提供参考。[方法]分别采用50、100、150mg／L的NAA和6-BA对柳杉实生苗秋冬季生长生理进行调控,测定其生长生理指标的变化,研究NAA和6-BA对柳杉幼苗抗冷性的影响。[结果16-BAl50n·g／L能更有效促进柳杉苗生物量的积累,有利于苗木长高,NAA150mg／L对于根系生长的促进作用明显;NAA和6-BA能不同程度提高柳杉幼苗秋冬抗性,表现为稳定光合色素及促进其生成,同时调控渗透调节物积累。NAA100mg／L处理下柳杉叶片叶绿素种类含量最高,可溶性蛋白质、游离脯氨酸含量积累均在其浓度为100mg／L时出现最高值;6-BA对柳杉的生理作用没有明显影响。[结论]NAA100～150mg／L对越冬柳杉苗生长生理最有利,6-BA150mg／L对柳杉苗生长有-定促进作用。NAA壮苗表现优于6-BA。生产上可采用叶面喷施法选择浓度在100-150mg／L的NAA,以适当浓度的6-BA为辅,为越冬柳杉优良苗管护生产和提高造林成活率打下基础。     

不同培养基对紫薇试管苗的诱导·增殖·生根的影响

[目的]提高紫薇的繁殖速度,建立紫薇的快速繁殖体系。[方法]以紫薇种子为外植体,在MS基本培养基中添加不同浓度的6-BA、NAA、KT,研究不同培养基对紫薇试管苗的诱导、增殖和生根的影响。[结果]含有一定浓度激素的培养基中的种子的发芽率明显高于不含任何激素的培养基,紫薇试管苗的诱导培养基为：MS＋6-BA1.0mg/L＋NAA0.01mg/L。随着6-BA、KT、NAA浓度的变化,茎段的出芽率、芽平均长度及生长情况都有较明显的变化,适宜增殖培养基是MS＋6-BA2.0mg/L＋KT1.0mg/L＋NAA0.01～0.05mg/L。适宜生根培养基为：MS＋NAA0.5mg/L,试管苗生长健壮,根系粗壮,生根数较多。[结论]6-BA、KT、NAA等激素的浓度对紫薇丛生芽的形成和生根有较大的影响。     

猫须草组织培养研究

[目的]研究猫须草离体培养的最佳激素配比和最佳培养基。[方法]以猫须草幼嫩茎段为外植体,以MS为基本培养基,比较不同浓度和不同种类的生长激素对茎段腋芽萌发、愈伤组织增殖及丛生芽生根的影响。[结果]6-BA可促进腋芽萌发,分化丛生芽。随着6-BA浓度的增加,萌发腋芽的数量反而减少,当6-BA的浓度大于2.5 mg/L时,茎段便不再长出腋芽,而是在其顶端出现愈伤组织。在一定浓度范围内,随着2,4-D浓度的增加,愈伤组织的生长就越旺盛,当2,4-D浓度为2.0 mg/L时,愈伤组织增殖效果最好。NAA浓度为1.0 mg/L时诱导茎段生根效果最好,生根率达到100%。[结论]适宜的诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1mg/L,适宜继代增殖培养基为MS+2,4-D2.0 mg/L,茎段生根的适宜培养基为MS+NAA1.0 mg/L。     

不同培养基对紫薇试管苗的诱导·增殖·生根的影响

[目的]提高紫薇的繁殖速度,建立紫薇的快速繁殖体系。[方法]以紫薇种子为外植体,在MS基本培养基中添加不同浓度的6-BA、NAA、KT,研究不同培养基对紫薇试管苗的诱导、增殖和生根的影响。[结果]含有一定浓度激素的培养基中的种子的发芽率明显高于不含任何激素的培养基,紫薇试管苗的诱导培养基为:MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.01mg/L。随着6-BA、KT、NAA浓度的变化,茎段的出芽率、芽平均长度及生长情况都有较明显的变化,适宜增殖培养基是MS+6-BA2.0mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.01~0.05mg/L。适宜生根培养基为:MS+NAA0.5mg/L,试管苗生长健壮,根系粗壮,生根数较多。[结论]6-BA、KT、NAA等激素的浓度对紫薇丛生芽的形成和生根有较大的影响。     

兴仁金线莲丛生芽诱导增殖研究

[目的]筛选兴仁金线莲丛生芽的诱导和增殖的最佳培养基。[方法]用野生兴仁金线莲植株茎段作外植体,以MS为基本培养基,并添加不同浓度的6-BA和NAA,诱导丛生芽,筛选最佳培养基配方。[结果]MS是兴仁金线莲快繁最佳基本培养基;2.0～3.0 mg/L的6-BA有利于丛生芽的诱导;1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA有利于芽的生长;最佳蔗糖浓度为25 g/L。[结论]MS+2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+25 g/L蔗糖为丛生芽增殖的最佳培养基配方。     

红叶李离体茎段培养与微体快繁的研究

[目的]为红叶李的商品化生产、遗传转化和品种定向改良奠定基础。[方法]以红叶李茎段为外植体,在MS、1/2MS基本培养基中添加不同浓度的6-BA和NAA,研究不同激素浓度对红叶李增殖和生根的影响,建立红叶李的离体繁殖体系。[结果]适量浓度的6-BA和NAA组合比单独使用6-BA诱导率高,处理⑤(6-BA、NAA的浓度分别为1.0、0.2mg/L)的诱导率达75.0%,且腋芽生长良好。处理⑥(6-BA、NAA的浓度分别为2.0、0.2mg/L)的增殖系数为7.67,芽苗高度大于2cm的芽数为4.76。适合红叶李生根的最佳IBA浓度为0.5mg/L,生根率达98.3%。试管苗移栽成活率达85%以上。[结论]红叶李离体培养的最佳启动培养基为MS+6-6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L,最佳增殖培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L。     

仙茅地下茎段组织培养研究

[目的]为仙茅的快速繁殖提供借鉴和依据。[方法]以仙茅无菌地下茎段为外植体,在蔗糖浓度为20 g/L,琼脂用量为6.5 g/L,pH值为5.8,温度为25℃的光照条件下,设3组培养基（A愈伤组织诱导培养基MS＋6-BA 0-1.0 mg/L＋NAA 0-1.0 mg/L,B丛生芽诱导培养基MS＋6-BA 0.5-1.5 mg/L＋NAA 0.2-0.8 mg/L,C生根培养基MS＋IAA 0-0.5 mg/L）进行组培试验。[结果]最适合仙茅的愈伤组织诱导培养基为MS＋6-BA 0.2-1.0 mg/L＋NAA 0.1-0.6 mg/L;丛生芽分化培养基为MS＋6-BA 0.8-1.5 mg/L＋NAA0.2-0.5 mg/L;生根培养基为MS＋IAA 0.1-0.3 mg/L。仙茅的愈伤组织诱导率为88%-93%,丛生芽诱导率为93%-96%,生根诱导率为92%-96%。[结论]该研究为仙茅地下茎段的组织培养提供了试验参考和理论依据。     

蚊净香草的离体快繁工艺

[目的]研究蚊净香草试管繁殖的诱导、分化、继代、生根、移栽等过程,筛选优良试管苗。[方法]以蚊净香草的侧芽、展开幼叶为外植体,以MS为基本培养基,加不同浓度的6-BA、IAA,进行外植体的启动培养。[结果]侧芽适宜的诱导培养基为6-BA 0.2 mg/L+IAA 0.1 mg/L;叶片和叶柄的最佳诱导分化培养基为6-BA 0.5~1.0 mg/L+IAA 0.25~0.50 mg/L;快速繁殖培养基以6-BA 0.2 mg/L+IAA 0.1 mg/L最好;生根培养基以1/2MS+NAA0.2 mg/L效果较好;适宜的移栽基质为草炭∶蛭石∶珍珠岩=3∶2∶1。[结论]移栽时用保护性杀菌剂多菌灵等防止杂菌的滋生,可以有效提高移栽成活率。     

欧美杨热杨1号离体叶片快繁体系的研究

[目的]研究欧美杨热杨1号离体叶片快繁技术。[方法]以欧美杨热杨1号为材料,研究了不同植物生长调节剂组合诱导愈伤组织、芽及根的效果。[结果]在附加25种不同植物生长调节剂组合的培养基中,添加6-BA 0.5 mg/L和NAA 0.05 mg/L的MS培养基愈伤组织的诱导率最高,达到100%。36种诱导芽再生培养基中,最佳的诱导芽培养基是MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L+IBA 0.1mg/L,出芽率达到100%,且芽质量较高。6-BA和NAA及IBA过高过低都不利出芽。培养基中IBA和NAA两者混合使用时有利于根的形成,诱导生根的最佳培养基是1/2MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 0.15 mg/L,生根的小苗被移植在温室条件下生长良好。[结论]以欧美杨热杨1号叶片为外植体,建立了高效植株再生体系。     

顶果木离体培养研究

[目的]研究顶果木离体培养最佳方法。[方法]以顶果木种子获得的无菌苗进行离体培养,通过诱导丛生芽的发生,获得再生植株。[结果]采用MS+6-BA 0.8～3.0 mg/L+NAA 0.2～0.5 mg/L培养基、改良MS+6-BA 0.2～1.2 mg/L+NAA 0.18～0.2 mg/L培养基均能保持无菌苗的生长,其中改良MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.18 mg/L培养基最适宜无菌苗生长,但培养40 d后,未见芽苗分化;将无菌苗转入改良MS+6-BA 0.5～1.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L培养基中培养,均能诱导芽的分化和增殖,培养20 d后,芽繁殖系数可达1.72～2.30,其中改良MS+6-BA 1.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L培养基芽繁殖系数达2.30,总体芽苗生长情况差异不明显。[结论]改良MS+6-BA 1.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L培养基为诱导顶果木最适培养基。     

湖北麦冬叶片快繁体系的建立

[目的]建立湖北麦冬叶片的快繁体系。[方法]以湖北麦冬幼嫩叶片为外殖体,以MS为基本培养基,向其中添加不同浓度的6-BA、NAA、GA后进行培养,探讨外源激素对其愈伤形成、不定芽分化、增殖与不定根形成的影响。[结果]采用MS+0.1～2.0 mg/L 6-BA+0.01～0.5 mg/L NAA培养基,愈伤诱导率在20%以上;采用MS+0.1～1.0 mg/L 6-BA+0.01～0.5 mg/LNAA+0.1～1.0 mg/L GA培养基,对芽的生长及增殖效果好,说明GA具有提高成苗率的作用;采用1/2MS+0.1～0.5 mg/L NAA或0.1 mg/L IBA或0.1～0.5mg/L IAA,20 d内生根率可达97%以上。在腐叶土∶珍珠岩=5∶3的基质中驯苗,成活率可达90%以上。[结论]优选出了湖北麦冬叶片的最佳快繁体系,为麦冬的开发利用提供了理论依据。     

应用正交设计建立三岛柴胡愈伤组织快速繁殖体系

[目的]建立三岛柴胡愈伤组织快速繁殖体系。[方法]采用正交优化设计的方法,以细胞平均增长量为参考指标,对三岛柴胡愈伤组织的基本培养基、初始pH值、6-BA、NAA及2,4-D的添加量进行筛选优化。[结果]5种因素对试验结果的影响均达到显著水平。基本培养基中,N6对试验影响最大;初始pH值为5.6有利于细胞的生长;3种激素中,2 mg/L 6-BA和0.5 mg/L NAA以组合的方式加入培养基中时,可获得了较高的细胞鲜重。通过对试验结果的分析比较,得出三岛柴胡愈伤组织细胞生长最有利的培养基配方为:N6+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L,pH为5.6;2,4-D对三岛柴胡愈伤组织的生长有一定的抑制作用。[结论]该研究结果为三岛柴胡愈伤组织的进一步扩大培养和悬浮体系的建立提供了试验数据和理论支持。     

地笋的组织培养和植株再生研究

[目的]得到长势一致的地笋幼苗。[方法]采用组织培养的方法进行快速繁殖。[结果]培养基MS＋KT 1.0 mg/L＋NAA 0.5mg/L适合愈伤组织的诱导;培养基3/4MS＋6-BA 1.5 mg/L＋NAA 1.0 mg/L适合芽的诱导;培养基1/2MS＋IAA 0.5 mg/L适合再生植株生根。田园土∶腐殖土∶细沙=5∶3∶2对组培苗的生长最有利。[结论]建立了地笋的快速繁殖方法。     

珍稀药用植物延龄草的体细胞胚诱导研究

[目的]探索延龄草的有效繁殖途径。[方法]以延龄草的未成熟种子为外植体,在MS培养基上添加不同的激素配比,在黑暗和光照条件下进行组织培养。[结果]光照条件下,MS+2.0 mg/L6-BA+1.0 mg/L NAA启动延龄草未成熟种子的频率最高,达100.0%;黑暗条件下,MS+2.0 mg/L6-BA+2.0 mg/LIAA启动延龄草的频率最高,达100.0%。光照有利于延龄草未成熟种子启动程度的增加。MS+1.0mg/L6-BA+0.5 mg/LNAA适合诱导延龄草未成熟种子胚性愈伤组织分化和胚状体的发生。显微观察发现诱导出来的延龄草胚状体多处于球形胚和球心胚阶段。[结论]适合延龄草未成熟种子启动的培养基是MS+2.0mg/L6-BA+1.0mg/LIAA。